不同条件对枯草芽孢杆菌菌剂有效活菌数的影响

为了探究不同p H和温度条对枯草芽孢杆菌有效活菌数的影响,本试验共设置了3、5、7、9、11五个p H梯度和20℃、30℃、40℃、50℃、60℃五个温度梯度,并测定其有效活菌数。同时对枯草芽孢杆菌和巨大芽孢杆菌进行了拮抗实验。结果表明在p H为3~7时,本试验所使用的枯草芽孢杆菌其有效活菌数生长旺盛;当温度在20~40℃之间时,其有效活菌数存活率可达到90%以上,且本试验所使用的枯草芽孢杆菌会和巨大芽孢杆菌产生拮抗作用。     

3株芽孢杆菌及其混合发酵液对西瓜幼苗生长的影响

为探究芽孢杆菌发酵液对西瓜幼苗生长的影响,提高西瓜幼苗质量,以西瓜品种早佳(8424)为材料,研究不同浓度的3株芽孢杆菌(解淀粉芽孢杆菌sj1606,贝莱斯芽孢杆菌sj1616,枯草芽孢杆菌sj1701)及其混合发酵液对西瓜幼苗生长及生理特性的影响。结果表明,不同芽孢杆菌发酵液均能促进西瓜幼苗的生长发育,其中混合发酵液D4(250 mL·L^-1)处理的西瓜幼苗株高和鲜质量较对照(蒸馏水)分别提高了23.27%和21.89%,叶绿素含量相比对照提高了49.66%,解淀粉芽孢杆菌sj1606中A4(250 m L·L^-1)处理的过氧化氢酶活性最高,达到243.83 mg·g^-1·min^-1。通过隶属函数的综合指标分析得出,混合发酵液D4处理的西瓜幼苗生长优势最为明显。     

越橘叶斑病原菌的拮抗菌筛选及其发酵条件优化

从黑松林地土壤中分离得到一株对越橘叶斑病原菌Cylindrocladium colhounii有较强抑制作用的细菌B7。建立该细菌的生长曲线。采用菌丝生长抑制法,研究了该细菌对C.colhounii的拮抗作用,并通过正交试验优化了其发酵条件。结果表明,该菌体在培养了5h后即进入对数生长期;B7细菌的发酵液原液和无菌滤液均能抑制病原菌的生长,其中发酵液原液的103稀释液的抑菌效果仍与对照之间存在显著的差异;发酵条件优化试验中发现该细菌的无菌滤液最大抑菌率达100%,最佳发酵条件为葡萄糖0.5%、氯化铵0.1%、不加无机盐、pH5.4,温度28℃;结合形态学特征和16SrRNA的序列分析,将该菌株鉴定为枯草芽孢杆菌。     

葡萄根瘤蚜共生细菌分离与分子生物学鉴定

从严格密封温室的盆栽巨峰葡萄根系、寄生的葡萄根瘤蚜虫体和根际土壤中分离获得17个细菌菌株,并对其16S rDNA基因进行PCR扩增和序列分析。结果表明,17个细菌菌株16S rD-NA均扩增出1 500 bp左右的片断,通过与Genbank上已知同源性较高细菌的16S rDNA部分序列对比,初步确定了这17个细菌菌株分属于蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)、巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)、枯草芽孢杆菌(Bacillus substilis),其中蜡状芽孢杆菌(菌株C2、R2、L2、L3、L4)和巨大芽孢杆菌(菌株L1、L4、R1、R3、C1、B1、B2、J1、J2)集中于葡萄根系和葡萄根瘤蚜虫体,而枯草芽孢杆菌(菌株T1、T2)只在根际土壤中发现,说明蜡状芽孢杆菌和巨大芽孢杆菌为葡萄根系和葡萄根瘤蚜的共生细菌。     

苹果树腐烂病拮抗菌株的分离、筛选和鉴定

为筛选出对苹果树腐烂病有拮抗效果的生防菌,从内蒙古达茂草原采集土样,利用逐级稀释法分离菌株;以苹果树腐烂病病菌（Cytospora mali）QH2为供试病原菌,采用平板对峙、离体枝条法、抑菌谱,结合耐盐、耐紫外的稳定性测定筛选拮抗菌株,通过形态学、分子生物学和生理生化方法对拮抗菌株进行鉴定。结果表明,从6份土壤样品中分离纯化得到细菌288株、放线菌54株,经筛选得到DM5-29和DM3-18。DM5-29和DM3-18对C. mali QH2的皿内拮抗圈在1 cm以上,在金红和黄太平枝条上的防效分别在64%、77%以上,抑菌谱广,发酵液紫外照射120 min后仍对苹果树腐烂病具有一定的拮抗活性,可分别在5%NaCl与12%NaCl中生长,鉴定确定DM5-29为贝莱斯芽孢杆菌（Bacillus velezensis）,DM3-18为萎缩芽孢杆菌（Bacillus atrophaeus）,2个菌株对苹果树腐烂病均有良好的拮抗效果,抗逆性强、抑菌谱广,有应用潜力。     

微生物菌剂对拱棚连作辣椒生长、产量及品质的影响

为了研究单一微生物菌剂对拱棚连作辣椒的影响,采用随机区组法探讨了地菌净、荧光假单孢杆菌、巨大芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、荧光假单孢杆菌+巨大芽孢杆菌+枯草芽孢杆菌5种处理对拱棚辣椒生长、产量及品质的影响。结果表明:地菌净及枯草芽孢杆菌处理下辣椒株高、茎粗、冠幅度、果长、果粗、单株结果数、单果质量均高于其它3个处理及对照。枯草芽孢杆菌处理下辣椒小区产量、折合667m~2产量、折合667m~2产值均高于其它4个处理及对照,分别为202.3kg、5 767.4kg、8 074.4元,分别比地菌净、荧光假单孢杆菌、巨大芽孢杆菌、荧光假单孢杆菌+巨大芽孢杆菌+枯草芽孢杆菌处理及对照667m~2产量增幅9.1%、7.0%、4.5%、5.0%、10.7%;在辣椒采收盛期,荧光假单孢杆菌+巨大芽孢杆菌+枯草芽孢杆菌处理连作辣椒维生素C含量最高,为110.7mg·g~(-1);地菌净处理下辣椒维生素C含量次之,且连作辣椒可溶性糖含量最高,为19.58mg·g~(-1);地菌净处理下连作辣椒可溶性蛋白质含量最高,为1.81mg·g~(-1)。     

草莓病害拮抗细菌的筛选及其对草莓褐色叶斑病的防效

通过组织分离法和稀释分离法从草莓根、茎、叶和根际土壤中分离内生细菌183株及根际细菌55株，其中9株拮抗菌对草莓褐色叶斑病病原菌（Pilidium concavum）、灰葡萄孢菌（Botrytis cinerea）、尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum）、链格孢菌（Alternaria alternate）4种草莓病原菌具有广谱拮抗效果。结合病原菌形态学特征、生理生化特性和分子生物学鉴定结果，将拮抗菌株G3-23、J3-20、G3-29鉴定为贝莱斯芽孢杆菌（Bacillus velezensis）,J6-1、J1-4、G2-12、G3-k2和J1-11鉴定为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）,G3-20鉴定为耐盐芽孢杆菌（Bacillus halotolerans）,G3-17鉴定为蜡样芽孢杆菌（Bacillus cereus）。菌株G3-23能够分泌蛋白酶和纤维素酶，对由P. concavum引起的草莓褐色叶斑病具有良好的防治效果，并且该菌株能在离体草莓叶片上成功定殖，表现出较好的生防潜力。     

单一或组合生防菌对田间番茄植株生长和线虫的影响

以番茄为试材,采用宁夏诺德曼公司B1、B2、B3、B4、B5、B6单一枯草芽孢杆菌,以及商品枯草芽孢杆菌和淡紫拟青霉8种生防菌,系统的研究了单一生防菌和生防菌组合对番茄植株长势、根系干鲜重、土壤根结线虫数量、根结指数的影响。结果表明:单一菌中B2、B4、枯草芽孢杆菌处理的植株长势好,B2和枯草芽孢杆菌显著增加根系鲜重,B2显著增加根系干重,B4和B5显著降低缓苗期土壤根结线虫数量,且淡紫拟青霉降低拉秧期土壤线虫效果最显著;组合菌B2+B5、B2+B6、B2+B4、B4+B6、B4+枯草(枯草芽孢杆菌)促进了番茄植株长势,降低了土壤中线虫数量。单一菌B4、B2,组合菌B4+B6能显著促进作物生长和降低土壤线虫。     

枯草芽孢杆菌对苦瓜生长、产量和矿质元素吸收的影响

为了给枯草芽孢杆菌在苦瓜上的应用提供科学依据,研究了根施不同浓度枯草芽孢杆菌对苦瓜生长、光合特性、产量和养分吸收的影响。以‘桂农科六号’苦瓜为供试材料,采用模糊综合评判方法,综合评判根施枯草芽孢杆菌8×10~5、4×10~5、2×10~5CFU·mL~(-1)对苦瓜的株高,茎粗,叶片数,叶片SPAD值,叶片全氮、全磷、全钾含量,瓜长,瓜横茎,瓜肉厚和小区产量的影响。结果发现,根施8×105CFU·mL~(-1)枯草芽孢杆菌后,茎粗和叶片数分别比对照增加7.14%和2.54%,叶片全钾含量比对照增加了4.00%,瓜长、瓜横茎、瓜肉厚及小区产量与对照相比分别增加了0.65%、2.02%、3.67%和2.96%。根据隶属函数的计算结果,各处理的强弱顺序为8×105CFU·mL-1> 4×105CFU·mL-1>空白处理> 2×105CFU·mL~(-1)。     

马铃薯内生细菌的分离鉴定及种群多样性分析

为了分离鉴定马铃薯内生细菌,对相同种植地点的3个不同品种马铃薯内生细菌的群落结构进行分析;从不同品种马铃薯中分离纯化菌株,进行基因序列分析和生理生化鉴定;取相同部位马铃薯组织进行PCR-DGGE操作,并对DGGE图谱上的条带进行差异性分析。最终分离得到9株内生细菌,鉴定1-1、1-2为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilissp.),1-3为类芽孢杆菌(Paenibacillussp.),1-4为韩国假单胞菌(Pseudomonas koreensissp.),1-5、1-6、2-3为解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefacienssp.),2-2为苍白杆菌(Ochrobactrumsp.),3-6为副球菌(Paracoccussp.)。DGGE图谱表明不同品种的马铃薯内生细菌既有差异性又有相似性。最终结果表明3个品种马铃薯内生细菌具有较丰富的种群多样性,且差异性明显,品种可能是影响马铃薯内生细菌群落结构的重要因素。     

大白菜褐腐病（茎基腐病）的病原菌鉴定

2011年在北京、河北、江苏等地的部分大白菜种植区,当地俗称的大白菜“茎基腐病”普遍严重发生,实际调查后共采集到大白菜“茎基腐病”病样12份,分离获得12个真菌分离物,经形态学鉴定,分离到的菌株均为立枯丝核菌Rhizoctonia solani;采用真菌通用引物ITS1/ITS4对病原菌rDNA-ITS进行PCR扩增,并将测序结果在GenBank中进行同源性比对分析,分子生物学鉴定结果与形态学鉴定结果一致。将分离到的菌株分别回接健康的大白菜植株,植株表现出与田间相似的发病症状,重新进行病原菌的分离,得到相同的病原物。基于形态学、分子生物学鉴定和致病性试验最终确定北京、河北、江苏等地大白菜 “茎基腐病” 病原菌为立枯丝核菌Rhizoctonia solani,大白菜“茎基腐病”与大白菜褐腐病、大白菜立枯病属同病异名。     

利用植物根际细菌生物防治黄瓜立枯病研究

从大田种植的黄瓜植株根际分离出113株根际细菌,室内盆栽试验测定了不同根际细菌对黄瓜苗期立枯病的生防效果,从中筛选出1株对立枯病菌具有较强作用的菌株06-83.防治效果为70.1%,优于多菌灵拌种的防治效果.分别利用形态学和生理生化方法对菌株进行了鉴定,发现06-83属于荧光假单孢菌(Pseudomonas fluorescens).利用滑石粉制备含有上述菌株的可湿性粉剂,测定了室温保存条件下不同时期可湿性粉剂中所含细菌的存活能力,发现室温保存120 d后细菌数量仍达到1010cfu/g.     

2019年桂林番茄病害发生情况调查初报

为保障桂林番茄产业可持续发展,2019年对桂林市雁山区、平乐县、临桂区、全州县、资源县、龙胜县、永福县等番茄主产区进行病害调查。结果表明：桂林番茄病害种类较多,包括白绢病、棒孢霉叶斑病、灰叶斑病、立枯病、煤霉病、煤污病、叶霉病、晚疫病、疮痂病、溃疡病、青枯病、细菌性斑点病、细菌性髓部坏死病、黄化曲叶病毒病、根结线虫病,其中番茄青枯病、细菌性斑点病分布广、危害重,是桂林番茄的主要病害。     

芝麻内生细菌G10菌株对芝麻立枯病的生防作用

通过盆栽和小区生防试验测定了内生细菌G10菌株对芝麻立枯病的生防作用。结果表明:G10菌株可以有效防治芝麻立枯病,防治效果分别为81%～89%和61%。利用透明圈法分别测定了G10菌株具有产壳聚糖酶和产蛋白酶的特性;分别利用形态学和生理生化方法对内生菌株G10进行系统地研究,表明该菌株为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。     

诺沃霉素对西瓜立枯病的防治效果

采用室内抑菌试验和浸种盆栽试验探究诺沃霉素A 对西瓜立枯病的防治效果。室内抑菌试验结果表明,诺沃霉素A对立枯丝核菌具有强烈的抑菌活性,抑制中浓度为1.726 0 μg · mL^-1;经10 μg · mL^-1 诺沃霉素A 处理后,在显微镜和扫描电镜下观察立枯丝核菌菌丝形态均发生异常;盆栽试验结果表明,4 000 μg · mL^-1 诺沃霉素A 浸种对西瓜立枯病防效为91.83%。     

东北油豆角腐皮镰孢菌根腐病拮抗芽胞杆菌的筛选与鉴定

以东北油豆角腐皮镰孢菌为靶标菌,采用室内平板对峙培养和温室防效测定方法,从发病油豆角根际(围)土壤中筛选拮抗能力强的芽胞杆菌菌株,以期获得腐皮镰孢菌根腐病的生防资源。结果表明:该试验筛选到一株拮抗芽胞杆菌WJ-126,初步鉴定为贝莱斯芽胞杆菌(Bacillus velezensis),在温室人工接种条件下,该菌株对油豆角腐皮镰孢菌根腐病的相对防效可达60.92%。     

中药渣堆肥中拮抗真菌的筛选、鉴定

以发酵后的中药渣为试材,采用稀释涂布平板法进行初筛,通过平板对峙法进行复筛,研究了具有拮抗特性真菌的形态学特征、生理生化特征、18S rDNA分子生物学特征,并检验了拮抗真菌对立枯丝核菌的抑制能力,以期资源化利用中药渣中有生防作用的菌种资源。结果表明:从中药渣中得到了7株对立枯丝核菌有抑制作用的拮抗真菌,F-1为柠檬青霉,F-2为黄曲霉,F-3为塔拉木霉菌,F-4为棘曲霉,F-5为深褐娭姆斯菌,F-6为烟曲霉,F-7为Albifimbria viridis。其中,F-3可产IAA;F-7可以解有机磷。     

多粘类芽胞杆菌ZF197对白菜茎基腐病防治效果

从露地大白菜根际土壤中分离获得一株对白菜茎基腐病病原菌白菜立枯丝核菌（Rhizoctonia solani）有显著抑制效果的生防细菌ZF197，通过形态特征、生理生化特征和多基因系统进化树分析对其进行鉴定；通过大白菜离体叶片和温室盆栽试验研究其对白菜茎基腐病防治效果，并鉴定其在白菜根部的定殖能力；通过酶学试验和抑菌谱试验研究其生物学特性；采用三明治法测定其发酵液的最适培养基和发酵时间。结果表明，菌株ZF197为多粘类芽胞杆菌（Paenibacillus polymyxa），对大白菜离体叶片立枯丝核菌的防效可达82.35%，盆栽防效可达78.57%；该菌株可在白菜根部稳定定殖，处理20 d后定殖量趋于稳定，保持在2.37 × 105 cfu ? g-1左右；菌株ZF197具有广谱拮抗作用，能够有效抑制8种病原真菌和6种病原细菌的生长，其代谢过程中有蛋白酶和纤维素酶的产生。菌株ZF197 96 h发酵液对立枯丝核菌的抑制率最高，可达58.58%；以棉籽饼粉作为碳源的发酵液对立枯丝核菌的抑制率最高。     

马铃薯干腐病拮抗菌的鉴定及生物学特性

在马铃薯干腐病发生严重地区,从健康植株根际土壤中筛选获得1株拮抗菌BAM-2,通过形态特征、生理生化特性及16S rDNA 序列分析鉴定该菌株为甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus)。BAM-2对茄链格孢菌(Alternaria solani)、灰葡萄孢菌(Botrytis cinerea)、接骨木镰孢菌(Fusarium sambucinum)、立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)及梨黑斑病菌(Alternaria alternata)的抑菌率均达80% 以上,其胞外抗菌物质经60～100 ℃处理30 min、胰蛋白酶及胃蛋白酶处理、紫外线照射及反复冻融处理,抑菌率均维持在95%以上;pH值在2～11之间抑菌率保持在83%以上。说明BAM-2的胞外抗菌物质对植物真菌病害抑菌谱广,在热、酸碱、蛋白酶、紫外线照射及反复冻融方面具有较强的稳定性,在研发为抗植物真菌病害的生物农药方面具有较大的潜力。     

马铃薯真菌病害拮抗菌株鉴定及初步应用

针对马铃薯真菌病害发生严重、多种病害混合发生、缺乏安全有效防治方法的问题，对前期筛选出的高效拮抗 菌株BA-26 进行分类鉴定，研究其胞外代谢产物的稳定性，明确防病促生作用。通过形态特征、生理生化特性鉴定以及 16S rDNA 序列分析，BA-26 菌株为解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens），该菌株对8 种马铃薯病原真菌均表现出 较强的拮抗作用，对茄链格孢菌（Alternaria solani）、茄病镰刀菌（Fusarium solani）、燕麦镰刀菌（Fusarium avenaceum） 的抑菌率大于80%；胞外代谢产物经100 ℃处理30 min、紫外照射8 h、pH 2～10 酸碱处理、蛋白酶处理1 h 后，相对抑菌 率均维持在80% 以上；室内抑菌活性测定结果表明BA-26 滤液对茄病镰刀菌的抑制率为91.3%；盆栽试验中，每盆施用 20 mL 浓度为4.0×10⁹ cfu · mL^-1 的BA-26 发酵液使马铃薯根长、须根数、株高、叶片中叶绿素含量分别显著增加32.07%、 111.94%、48.0%、19.6%。表明解淀粉芽孢杆菌BA-26 对马铃薯真菌病害抑菌谱宽，胞外代谢产物稳定性强，有较强的防病 促生作用，具有开发为马铃薯专用生防菌剂的潜力。