苦马豆化学成分及应用研究进展

苦马豆是广泛分布在我国西北沙漠地带的豆科牧草.苦马豆无论是从其毒性成分在医药上的使用,还是作为蛋白类饲料的应用,都有很重要的价值.文章从植株的外部形态、不同部位提取物的化学成分、药理学研究、作为营养饲料研究进展等方面进行了综述.     

甘肃棘豆中苦马豆素提取工艺改进初报

用40 kH z超声波水媒处理甘肃棘豆草粉1.5 kg,代替传统的索氏提取法或溶剂冷浸法,水提液浓缩除杂后,用正丁醇萃取,正丁醇萃取液用稀酸水萃取,浓缩后的稀酸水萃取液用氨性氯仿萃取,浓缩氨性氯仿萃取液成浸膏,此浸膏经石蜡油浴升华得到24 m g白色晶体,经薄层层析检验,可初步鉴定为苦马豆素。此法不用柱层析,简化了苦马豆素提取的步骤,提取率为16 m g/kg。     

苦马豆的组织培养与快速繁殖

[目的]研究苦马豆的组织培养与快速繁殖的方法.[方法]以苦马豆上胚轴为外植体,MS为基本培养基,通过不同的激素种类和浓度配比,建立苦马豆组培快繁体系.[结果]组织培养与快速繁殖的培养基为:诱导愈伤培养基为MS+6-BA2.0mg/L+2,4-D 0.25 mg/L;继代培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NA.A0.5 mg/L;诱芽培养基为MS+NAA 0.05 mg/L+ZT0.05 mg/L+AC 0.1;;生根培养基为1/2 MS+ IBA1.5 mg/L+蔗糖(Suc)3;.该组培苗适宜移栽于珍珠岩+蛭石(1∶1)基质中,平均成活率80;.[结论]筛选获得适宜苦马豆上胚轴为外植体的组培快繁的培养条件,为苦马豆快繁体系的建立探索出了一条新的有效的途径.     

苦马豆抗盐愈伤组织突变系的筛选

为获得苦马豆抗盐愈伤组织突变系及筛选抗盐系的适合盐浓度,采用苦马豆子叶外植体在添加1.79 mg/L 2,4-D和1.15 mg/L Kt的MS培养基上诱导的愈伤组织为材料,经不同盐浓度(100,200,280 mmol/L)条件下胁迫,并测定其在不同时间(0,3,6,9天)胁迫处理后的可溶性蛋白含量、SOD和POD活性及丙二醛与脯氨酸含量等生理指标,以确定筛选抗盐系的适合盐浓度.验证性试验显示,200 mmol/L NaCl胁迫下比100 mmol/L胁迫获得的抗性愈伤组织的数量多,而280 mmo儿胁迫下无抗性愈伤组织产生,表明获得苦马豆抗盐愈伤组织突变系的适宜盐浓度为200mmol/L NaCl.     

HPLC分离甘肃棘豆中苦马豆素

甲醇浸泡甘肃棘豆粉 ,回收甲醇浸泡液至浸膏 ,1 mol/L HCl溶解后上 73 2型强酸性阳离子交换柱 ,1 mol/L NH4 OH洗脱并挥发至干 ,得到总生物碱。总生物碱经氨性氯仿提取后 ,通过高效液相色谱柱分离 ,色谱条件是 :反相 ( C1 8硅胶 )柱 ,在 2 5min内用 5%～ 1 0 0 %甲醇线性梯度洗脱 ,苦马豆素一般出现在 80 %～1 0 0 %的范围内 ,表现为一个宽峰。高效液相色谱柱分离后回收溶液得到一种白色细针状结晶 1 .0 4 mg,植物中的提取率为 0 .0 0 52 %。经 TLC、MP、IR、MS鉴定分析 ,确定所分离到的结晶为苦马豆素     

红树莓海尔特兹初代培养中防止外植体褐化的研究

以红树莓海尔特兹(Heritage)的健壮新梢为材料,研究了不同外植体类型、0.1%HgCl2溶液消毒时间、6-BA浓度、防褐化剂、暗培养时间对组织培养中外植体褐化的影响,探讨防止初代培养中外植体褐化的最佳方法。结果表明:以带芽茎段为外植体,用0.1%HgCl2灭菌处理300 s,在MS+6-BA 0.50～0.75 mg/L+NAA 0.1 mg/L+GA 0.2 mg/L培养基中,添加1.5 g/L VC,暗处理5 d,对防止外植体褐化效果最佳。     

苦马豆叶绿体基因组密码子偏好性分析

为确定苦马豆叶绿体基因组密码子的使用模式,利用Codon W 1.4.2、CUSP、Chips等软件,对苦马豆叶绿体基因组中可编码蛋白质基因的密码子偏好性进行分析。结果表明,密码子第3位GC含量最低,为27.14％,29个RSCU＞1的密码子中28个以A、U结尾,苦马豆叶绿体基因组密码子偏好以A、U结尾。有效密码子数ENC平均值为47.110,密码子偏好性较弱。GC₁、GC₂与GC₃无相关性,ENC与GC₃相关性显著,GC₃对密码子的偏好性存在影响。中性绘图分析和PR2-plot图分析表明,密码子偏好性主要受到选择因素的影响,而ENC-plot绘图分析发现,密码子偏好性还受到突变因素的影响。最终通过构建高低基因表达库,得到GAA、CGA、UUG、GUU、AUU、UCA、CAU、CAA、CCA、ACU、GCU、UUA、UAU、AAA、GAU、GGU 16个最优密码子。研究结果对苦马豆资源的开发和利用具有重要意义。     

萃取法提取甘肃棘豆中的苦马豆素研究初报

将1.5kg甘肃棘豆干粉经水提取,提取液浓缩后用正丁醇萃取,萃取液加入稀硫酸调节pH7.0,回收溶剂,制成浸膏;将浸膏与二氧化硅粉末混匀后用氯仿萃取该浸膏中的小极性杂质。用氨性氯仿萃取,收集氨性氯仿萃取液,挥干后升华得到7.5mg针状结晶,与苦马豆素标准样品对照进行TLC检测,其Rf值及斑点颜色与苦马豆素标准样品一致;通过熔点和IR、MS、1HNMR、13CNMR等鉴定其化学结构,为苦马豆素,计算甘肃棘豆苦马豆素的产率为5mg/kg。     

苦马豆果实中总黄酮的提取和含量测定

[目的]探索苦马豆果实中总黄酮的提取方法和含量测定方法。[方法]以采集于青海省贵德县的苦马豆果实为材料,运用微波技术提取该果实中的黄酮类物质,并以芦丁为对照品,采用分光光度法测定提取物中的黄酮类物质的总含量。[结果]采用微波技术从苦马豆果实中提取出黄酮类物质,对其进行全波长扫描操作,样品在波长510nm处显示最大吸收,吸光度为0．242,计算出苦马豆果实中总黄酮含量为2．17％。5次平行测定的精密度相对偏差RSD为1．14％。样品液稳定性实验表明,吸光度值在5—45min内基本不变。回收率实验表明,测定平均回收率为98．86％,RSD为2．73％。[结论]采用微波技术可提高总黄酮的提取效率。采用分光光度法的测定方法简便、快速、灵敏,结果准确可靠,可作为苦马豆果实中总黄酮的含量测定方法。     

甘肃棘豆中苦马豆素的分离与鉴定

用升华法从甘肃棘豆中分离到一种白色细针状结晶，经ＴＬＣ、ＭＰ、ＩＲ、ＭＳ鉴定分析确定为苦马豆素，经计算甘肃棘豆中的提取率为 １４μｇ／ｇ。     

植物组织培养污染原因分析及外植体的消毒

归纳了组织培养中污染原因及不同污染原因所造成的表观现象,并概括了解决外植体引发污染的方法.     

沙漠豆繁殖及育种的研究进展

对近年来国内外有关沙漠豆繁殖及育种研究的进展和成果进行了归纳总结。针对沙漠豆的繁殖及育种存在的问题提出了见解并展望了未来的发展趋势,旨在推动我国引种沙漠豆,并进行繁殖及育种的研究进程。     

工厂化生产组培苗的污染及其控制研究

每月对组培环境空气中污染菌、组培苗污染监测表明:组培苗污染程度与组培环境空气中的真菌数量均随时间呈同步变化;组培环境空气中真菌主要有12种,其中,优势菌为芽枝霉、灰霉、木霉、曲霉、青霉等5种。甲醛熏蒸可使组培环境空气中的真菌减少87%～100%。     

大白菜非整倍体组织培养中污染控制研究

[目的]为大白菜珍贵遗传材料的保存提供参考。[方法]以受细菌污染的大白菜非整倍体组培苗和田间植株为材料,以常规消毒处理为对照,分别采用常规消毒＋培养基中添加不同抗生素和农用杀菌荆预处理＋常规消毒对组培苗和外植体（取自田间植株）进行处理,研究不同处理对污染的控制效果。[结果]对照组组培苗培养7、14d时,污染率分别为9．1％和36．4％,培养基申添加100mg／L氨苄青霉素可有效控制污染;常规消毒外植体接种7d后污染率迭58,8％,杀菌剂预处理＋常规消毒可有效控制真菌对外植体的污染,但对细菌无明显作用。[结论]培养基中添加氨苄青霉素、采用合适杀菌剂对外植体进行预处理可有效控制大白菜非整倍体组织培养过程中的污染。     

干旱胁迫对破除硬实的苦马豆和披针叶黄华种子萌发影响

随胁迫的加剧,2种豆类种子的吸水速率和累计吸水率显著下降,萌发起始天数推迟,发芽率、发芽指数和活力指数显著下降,萌发最低渗透势阈值分别为10%(PEG6000)和20%(PEG6000);2种种子萌发于48 h累计吸水率的回归方程为:y=4.881x2-57.622x+162.71(R2=0.896 7),y=-4.666 7x2+19.67+79.286(R2=0.882 9);随模拟干旱的加剧,幼苗高度、根长、次生根个数和鲜重受到抑制,5%的PEG可促进苦马豆根长、次生根的生长;随胁迫的加剧,幼苗干重、子叶养分转化率和幼苗饱和含水量降低,幼苗根干重和根冠比先升高后降低;吸胀的苦马豆受到干旱胁迫后复水不再萌发,受到20%~30%PEG胁迫的披针叶黄华吸胀种子复水后萌发率随干旱胁迫的加剧而增加。     

北沙参外植体消毒方法研究

分别以北沙参田间栽培苗及温室盆栽苗的幼嫩叶片、田间高畦栽培苗的幼嫩根尖和温室水培苗的幼嫩叶柄为外植体,研究不同消毒组合对外植体污染率的影响。结果表明,75%酒精消毒20 s后再用0.1%升汞消毒5 min,接种外植体的存活率较高,且污染率较低。     

抗生素对水生植物小对叶外植体分化的影响

[目的]研究小对叶对常用的抗生素的敏感性。[方法]将培养2周的小对叶无菌苗叶片切成0.5 cm×0.5 cm的小块,在添加不同浓度梯度的卡那霉素、潮霉素、壮观霉素和氯霉素4种抗生素的MS1培养基上进行培养,诱导其分化出芽,研究了4种抗生素对小对叶外植体分化的影响。[结果]一定浓度的抗生素对小对叶离体叶片的分化均具有抑制作用;确定了4种抗生素作为小对叶遗传转化研究的筛选标记的适宜浓度:卡那霉素为15 mg/L,潮霉素为10 mg/L,壮观霉素为60 mg/L,氯霉素为20 mg/L;小对叶对4种抗生素的敏感程度为:潮霉素>卡那霉素>氯霉素>壮观霉素。[结论]在进行遗传转化之前,对待转化材料进行抗生素敏感性测定是建立小对叶遗传转化系统的必然条件。     

光照、温度、土壤水分和播种深度对苦马豆种子萌发和幼苗生长的影响

研究光照、温度、土壤水分和播种深度等因子对苦马豆种子萌发的影响。结果表明,持续光照、持续黑暗、16 h/8 h光暗交替时苦马豆种子最适宜的萌发温度为25℃;16 h/8 h光暗交替下,25℃/15℃日夜变温是苦马豆种子萌发最适宜温度,其萌发对光照不敏感;苦马豆种子萌发最适宜土壤含水量为80～130g/kg,最适宜播种深度为0.5～3.0 cm。播深试验表明萌发形成的幼苗为子叶出土型。     

降低彩色马蹄莲组培初代培养污染因素的筛选

[目的]筛选降低彩色马蹄莲组培初代培养污染率的最佳方法。[方法]以正在萌芽的红色、黄色马蹄莲1年生小球茎为培养材料,选取水浴温度、表面消毒时间、表面消毒剂种类、防腐剂种类4个因素进行正交设计,培养10 d后统计每个组合的污染率、褐变率。[结果]选取的4种因素对污染率均有极显著影响(P<0.01),其中水浴温度、表面灭菌时间、表面消毒剂种类对褐变率有显著影响(P<0.05)。从单个因素来看,水浴温度40℃时污染率较低,0.1%HgC l2处理的污染率较低,无防腐剂处理的污染率较低;水浴温度45℃时褐变率较低,表面灭菌时间短的处理减少褐变率的效果较好。[结论]水浴温度50℃、0.1%HgC l2处理20 m in、无防腐剂培养基的污染率最低。