用ELISA和TRUST法检测献血者血清梅毒抗体的效果比较

血站系统对献血者检测血清梅毒抗体的方法 ,主要有血浆反应素试验 (RPR)、血清反应素试验 (TRU ST)和酶联免疫试验 (EL ISA) ,其中 RPR法和 TRU ST法属于非特异性血清学试验 ,EL ISA属于特异性抗体检测试验。这些检测法的敏感性和特异性都有不同程度的差异 ,给判断结果带来一定的困难。笔者采用目前常用的 EL ISA法和 TRUST法检测血清梅素抗体 ,作了比较研究 ,现将结果报道如下 :1　资料和方法1.1　标本经 EL ISA法检测为阳性的献血者标本 33份 ,经临床确诊的梅毒患者标本 2 0份和室内质控血清 1份。1.2　试剂及仪器梅素 T…     

三种梅毒螺旋体抗体检测方法在新生儿梅毒诊断中的应用

目的 探讨梅毒螺旋体-酶联免疫吸附试验、甲苯胺红不加热血清学试验和梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验在新生儿梅毒诊断中的应用价值。方法 160例疑似新生儿梅毒患儿均行梅毒螺旋体-酶联免疫吸附试验、甲苯胺红不加热血清学试验和梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验检查,比较三种检测方法阳性检出率。结果 梅毒螺旋体-酶联免疫吸附试验对新生儿梅毒的诊断敏感性为95.00%,特异性为91.67%,准确性为93.75%,漏诊率为5.00%,误诊率为8.33%;梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验诊断敏感性为97.00%,特异性为90.00%,准确性为94.38%,漏诊率为3.00%,误诊率为10.00%;甲苯胺红不加热血清学试验疾病诊断敏感性、特异性、准确性、漏诊率和误诊率分别为72.00%、70.00%、71.25%、28.00%和30.00%,三种检测方法敏感性、特异性、准确性、漏诊率和误诊率差异有统计学意义(P<0.05)。结论 与甲苯胺红不加热血清学试验相比,梅毒螺旋体-酶联免疫吸附试验和梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验诊断新生儿梅毒准确性高、特异性强,可提高疾病确诊率。     

规模化猪场猪蓝耳病血清抗体检测与分析

为了解规模化猪场猪群蓝耳病抗体水平,从而为蓝耳病的防控提供理论依据,笔者对利辛县3家规模化猪场共采集462份猪血清样品采用ELISA方法进行蓝耳病抗体检测。结果表明:不同猪场蓝耳病抗体水平存在一定差异,相比中、小、散户,规模化猪场蓝耳病抗体的阳性率较高、离散度较小,结果提示规模化猪场较规范、科学的蓝耳病疫苗免疫与猪群蓝耳病免疫效果有着正相关,合理科学的免疫程序应用应该是猪场防控蓝耳病的首要手段。     

产前、术前及输血前患者梅毒抗体的检测及临床价值

目的 通过检查产前、术前及输血前患者血液梅毒抗体(TP)血清学指标感染情况,防止误为院内感染及输血感染而引起的医疗纠纷,以及利于医务工作者的自我保护.方法 用酶联免疫吸附法、胶体金法检测.结果 13 313例产前、术前及输血前患者用酶联免疫吸附法筛查的阳性率为2.66％,≤20岁阳性检出率(0.88％)为最低,21岁～、31岁～、41岁～、51岁～、61～70岁、＞70岁年龄组的检出率分别是1.24％、2.46％、4.03％、3.49％、4.19％、5.06％(最高).男性检出率(3.92％)高于女性(1.67％).结论 产前、术前及输血前患者TP的检出率较高,与年龄、性别有关.有必要对产前、术前及输血前患者进行TP检测.     

阳江地区某猪场塞内卡病毒抗原和抗体的检测与分析

塞内卡病毒是新发现的一种小RNA病毒,能使猪产生类似水疱样病变,并引起仔猪死亡。塞内卡病毒作为外来病原,近几年呈现蔓延趋势。从广东阳江地区某猪场采集病变组织和血清进行检测分析,针对塞内卡病毒VP1-2A基因进行RT-PCR扩增,得到特异性的单一条带。对PCR产物序列分析表明,与2015年美国毒株USA/GBI29/2015的同源性最高、为99.2%,而与我国2017年毒株CH-HN-2017的同源性为97.1%。将水泡皮处理后接种PK-15细胞,盲传4代产生显著病变,滴度可达107TCID50/0.1mL。对采集的16份血清进行抗体中和试验表明,发病种猪的抗体效价最高达到1︰4096,9头种猪全部感染SVA,发病率为66.7%,总感染率为68.8%。     

检测鸡IBDV血清抗体的IHA的建立

以大肠杆菌表达的传染性法氏囊病病毒(IBDV)衣壳蛋白VP2致敏绵羊红细胞,建立间接血凝试验(IHA).对参考阳性血清(鸡新城疫病毒抗血清、鸡传染性支气管炎病毒抗血清、鸡禽痘病毒抗血清)及鸡参考阴性血清等分别进行微量IHA,加上抑制试验,结果证实其特异性高.对商品肉用仔鸡的30个血清样品、IBDV重组亚单位疫苗免疫试验鸡的20个血清样品,分别进行微量IHA和琼脂免疫扩散试验(AGID),将肉用仔鸡血清的阳性检出率进行t检验(P＜0.05);而20份免疫试验鸡血清样品IHA阳性检出率与AGID阳性检出率均为100%.对30份肉用仔鸡血清样品和20份免疫试验鸡血清样品检测得到的阳性血清的平均滴度进行方差分析,IHA的平均滴度与AGID的平均滴度之间均具有显著性差异.对20份免疫试验鸡血清及IBDV参考阳性血清以3个批次和第2批次IHA试验制剂,分别进行重复性试验,对其IHA平均滴度进行了方差分析,均无显著性差异.对20份免疫试验鸡血清以在4℃、保存期分别为3、6、9个月的IHA的试验制剂进行了微量IHA,检出的IBDV抗体平均滴度中,3个月的与6个月的无显著差异;3个月的与9个月的及6个月的与9个月的,均有显著差异,结果表明该IHA试验制剂在4℃的保存期可达6个月.     

四种检测猪的繁殖与呼吸综合征病毒血清抗体方法的比较

本试验利用猪的繁殖与呼吸综合征病毒美洲株和上海分离株ＳＨ１建立了ＩＦ，ＩＰＭＡ和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ三种抗体检测方法，对１２０份随机抽样猪血清检测表明，美洲株原组ＩＦＡ的阳性率为３０．８％，ＩＰＭＡ的阳性率为３０％，Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ的阳性率为３２．５％，ＳＨ１分离株抗原组ＩＦＡ的阳性率为３７．５％，ＩＰＭ阳性率为３７．５％，Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ的阳性率为４０％，进口ＥＬＩＳＡ试剂盒的检测阳性率为２６     

甲苯胺红不加热试验及酶联免疫吸附试验同步检测无偿献血者梅毒血清的效果比较

目的：比较甲苯胺红不加热血清试验梅毒螺旋体抗体酶联免疫吸附试验同步检测无偿献血者梅毒血清的效果。方法：采用甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）和梅毒螺旋体抗体酶联免疫吸附试验（TP-ELISA）对无偿献血者的血液标本20162例作筛选试验．对两法检出的阳性标本用梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验（TPPA）进行确证。结果：筛选试验中TRUST法的阳性率为0．88％（178／20162）．TP-ELISA法的阳性率为1．03％（207／20162）,两者差异有非常显著性（χ^2=9．92．P〈0．01）。TRUST法检出的阳性标本中经TPPA确认141例．确认率为87．92％（1411／178）;TP-ELISA法检出的阳性标本中经TPPA确认195例,确认率为94．20％（195／207）．两者差异有非常显著性（χ^2=19．38．P〈0．01）。54例TRUST法阴性、TP-ELISA法阳性标本中经TPPA试验确认阳性46例;25例TP-ELISA法阴性、TRUST法阳性标本中经TPPA试验确认阳性12倒。结论：TP-ELISA法对梅毒抗体的检出率高于TRUST法．TRUST法与TP-ELISA法均存在满检和假阳性或假阴性现象,两种筛选试验具有互补性,用此两种方法同时对献血者标本作筛选试验．对于提高血液质量、预防梅毒经输血传播具有重要意义。     

猪圆环病毒Ⅱ型血清抗体ELISA检测方法的建立

为了检测猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)抗体,本试验建立了快速、敏感的ELISA诊断方法.通过比较差速离心、蔗糖不连续梯度离心、氯化铯等密度梯度离心和氯仿抽提结合超速离心等4种方法纯化PCV2抗原的包被效果,来确定最佳的PCV2包被抗原纯化方法,在此基础上,通过全病毒抗原最适包被浓度和二抗HRP-SPA稀释倍数的确定、待测血清稀释倍数的确定、封闭液浓度的确定、封闭时间的确定、HRP-SPA反应时间的确定、临界值的确定、特异性测定、重复性测定、符合率比较等,进一步优化检测PCV2抗体的间接ELISA方法.结果表明:对猪的多种病毒阳性血清进行ELISA检测,只有PCV2阳性血清呈阳性;对6份血清进行4次重复试验,方差分析显示P0.05,差异不显著;与PCV2-ELISA试剂盒(INGEZIM公司生产)的符合率比较,其总符合率达88.89%.可见,优化建立的检测PCV2抗体的间接ELISA方法特异性强、重复性高、稳定性好,可用于PCV2血清学诊断和血清学普查.     

湛江市无偿献血人群中HIV抗体的检测情况分析

目的：了解湛江市无偿献血人群中。HIV抗体的检测情况。方法：使用国家批批检定的国产与进口抗-HIV1／2ELISA试剂对湛江市1999～2003年的无偿献血人群的血液标本进行初筛,初筛阳性者送湛江市防疫站及广东省防疫站分别以PA法及WB法确认。结果;80362名无偿献血者中初筛阳性212人,确认为抗-HIV阳性2人。结论：湛江市无偿献血人群中存在。HIV感染者,应加强宣传教育和提高检测质量,对初筛阳性结果报告要作好解释工作。     

新城疫卵黄抗体与血清抗体的效价比较

本试验通过测定新城疫卵黄抗体,种鸡群血清抗体，不同日龄雏鸡母源抗体，说明可以卵黄抗体水平推测种鸡群血清抗体和不同日龄雏鸡母源抗体水平，以便及时免疫。     

乙型肝炎患者抗庚型肝炎病毒抗体的检测与分析

目的：了解乙型肝炎病毒(HBV)与庚型肝炎病毒(HGV)混合感染的状况。方法：用酶联免疫吸附法(ELISA)对315例乙型肝炎患者检测抗庚型肝炎抗体(抗—HGV)。结果，315例乙型肝炎患者中抗—HGV阳性者62例(19．7％)，其中以重型肝炎组抗—HGV阳性率较高(23．7％)，依次为慢性肝炎(21．0％)、肝炎肝硬化(18.0％)和急性肝炎(9.4％)，经统计学处理各型肝炎之间抗—HGV阳性率差异无显著性(χ^2＝2．848 P＞0．05)；抗—HGV阳性与抗—HGV阴性组肝功能指标(包括血清丙氨酸转氨酶、胆红素、白蛋白)的比较差异均无显著性(P＞0．05)；有输血或血制品史组抗—HGV阳性率显著高于无输血或血制品史组(32.6％vs2．2％，χ^2＝44．887，P＜0.01)。结论：HGV感染主要经血液及血液制品途径；HGV无致病性或致病性很轻微，其与HBV混合感染并不加重乙肝患者的肝损害。     

联合检测鸭瘟和鸭病毒性肝炎血清抗体的Dot-ELISA方法研究

本研究提取和纯化了鸭瘟病毒(DPV)和鸭肝炎病毒(DHV)的抗原作为Dot-ELISA的膜载抗原,以辣根过氧化物酶标记的羊抗鸭IgG作为ELISA反应的第二抗体,建立了能够同时检测DPV和DHV抗体的Dot-ELISA方法。与中和试验相对比,本方法具有敏感、特异、快速的优点。     

牛精液中IBRV荧光PCR检测方法的建立及精液带毒与血清抗体的关系

【目的】建立牛精液中牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)的荧光PCR检测方法,并分析精液带毒与血清抗体的关系,为牛精液中IBRV的荧光PCR诊断和判定提供技术依据。【方法】采用Sephycral S-400凝胶过滤法和蛋白酶K预消化法,分别对新鲜牛精液和冻存牛精液进行处理,用DNA Zol方法提取病毒核酸,通过PCR反应条件的优化,建立了牛精液中直接检测IBRV的荧光PCR方法,对该方法进行特异性和重复性检验;最后用该方法分别对120份新鲜牛精液和40份冻存牛精液进行检测,同时用普通PCR方法和病毒分离方法加以对比;并对其中的10头牛定期采集精液、鼻腔拭子和血清样品,用该荧光PCR方法进行病原检测,对血清样品进行IBRV抗体检测。【结果】建立的荧光PCR方法具有较好的特异性,重复性和稳定性很好。用该方法可检测到新鲜牛精液中0.002 TCID50的病毒粒子,检测到冻存牛精液中0.02 TCID50的病毒粒子,检测时间在3 h之内,是OIE已报道方法灵敏度的40~400倍,是病毒分离方法灵敏度的100倍。120份新鲜牛精液和40份冻存牛精液中,检测到阳性样品25份,用普通PCR检测得到阳性样品15份,病毒分离检测得到阳性样品12份。检测结果表明,精液为阳性的牛血清抗体不一定为阳性,血清抗体阳性的牛精液中也不一定携带病毒。【结论】建立了牛精液中IBRV的荧光PCR检测方法;通过分析精液带毒与血清抗体的关系,进一步表明不能简单地以血清抗体阴阳性作为精液是否带毒的依据。鼻腔拭子带毒具有间歇性。     

先天性梅毒24例临床分析

目的:探讨先天性梅毒的早期诊断及有效的治疗措施。方法:回顾性分析2001年5月至2007年3月收治先天性梅毒24例患者的临床资料。结果:梅毒螺旋体乳胶凝集试验(TPPA)和快速血浆反应素环状试验(RPR)均为阳性;皮疹痊愈出院22例,自动出院2例;按时随访21例,复查血快速血浆反应素环状试验,在3、6、12个月内RPR转阴率分别为4.76%、71.14%.90、48%,部分患儿生长发育正常或接近正常。结论:先天性梅毒若能及时正规治疗,疗效好,预后佳,多数可治愈且生长发育正常。     

比格犬三联高免血清制作与犬细小病毒抗体的检测

以犬细小病毒(CPV)、犬瘟热病毒(CDV)和犬传染性肝炎病毒(ICHV)的灭活强毒接种于7只基础免疫后的比格犬,接种10 d后检测犬体内血清的CPV抗体效价。对抗体效价大于或等于1∶1 280的犬,放血分离血清而得三联高免血清。试验结果为:把效价为1∶320的抗原用于试验的7只犬中,1~6号犬的血清效价均等于或大于1∶1 280,达到高免血清效价要求。而7号犬的血清效价为1∶640,小于1∶1 280,不符合试验要求。     

头晕起病的神经梅毒1例临床分析

目的研究排除各种病因的头晕患者患有神经梅毒的可能性．方法对1名排除了各种病因的头晕患者行输血3项检查显示：TPPA阳性，进而行TRUST（梅毒血清学试验）检查．结果患者输血3项提示：TPPA及TRUST（梅毒血清学试验）阳性．考虑此患者为神经梅毒．结论临床如遇此类患者应进一步行脑脊液及血清VIA—ABS等相关检查．     

PCV2衣壳蛋白肽段的表达及其血清抗体间接ELISA检测方法

利用可溶性重组PCV2-Cap蛋白肽段为抗原,建立PCV2血清抗体间接ELISA诊断方法(rhcap-ELISA)。将PCV2cap基因中含主要表位的片段克隆到表达载体pGEX-6p-1上,转化E.coli,降低诱导温度至18℃诱导,获得大小为34 ku的可溶性融合蛋白。Western blotting试验证实该融合蛋白具有很强的免疫学活性,通过亲和层析柱对可溶性蛋白进行纯化。用融合表达的可溶性蛋白肽段作为抗原,建立猪圆环病毒(PCV2)血清抗体间接ELISA诊断方法。该方法的交叉反应结果表明,重组抗原与PRRSV、CSF、PPV和PRV阳性血清之间不存在交叉反应;用rhcap-ELISA和商品化的同类试剂盒(PCV2-Ab-Kit)检测137送检血清样品,2种试剂盒的阳性检测率分别为79.56%和83.21%。因此,rhcap-ELISA猪圆环病毒抗体检测试剂盒具有良好的敏感性和特异性,适合于在大规模的PCV2血清抗体的检测工作中使用。     

规模猪场种猪伪狂犬病血清抗体和病原检测与分析

采集武汉市两个规模猪场的370头份种猪血液和鼻拭子样本,运用ELISA方法对血清样本进行猪伪狂犬病抗体检测,结果两个猪场种猪的伪狂犬病gB抗体平均阳性率分别为77.1%和77.9%,猪伪狂犬病gE抗体平均阳性率分别为2.4%和3.9%;运用PCR方法对种猪鼻拭子样本进行猪伪狂犬病病原检测,结果显示,猪伪狂犬病病毒的阳性率分别为1.2%和5.4%.检测结果对猪场伪狂犬病的控制和净化具有指导意义.