禾谷孢囊线虫生防真菌AT9的固体发酵条件优化

AT9菌是对禾谷孢囊线虫(Heterodera avenae)具有生防作用的真菌。通过固体发酵底物、营养物质以及发酵条件进行优化,以期为该菌生产应用奠定基础。首先,采用正交设计筛选了AT9固体发酵基质。其次,通过单因素及正交设计分析了不同碳、氮源以及无机盐的最优配比。最后,运用单因素方差分析筛选了AT9的最佳发酵条件。结果表明:(1)AT9最佳发酵基质为麦麸、玉米粉、玉米秸秆粉按2∶1∶3质量比混配;(2)最佳碳源、氮源与无机盐比例为4%葡萄糖、6%硝酸钾、2%碳酸钙;(3)固料∶水为1∶1.2,20%的接种量,32℃黑暗条件培养8 d为最佳发酵条件。     

一株棘孢木霉生防效果及固体发酵条件探索

棘孢木霉（GX004）菌株是一株分离于土壤中的具有生防潜力的木霉菌株。为进一步研究该菌株在田间技术的应用提供理论依据,进行菌株基本生物学特性、拮抗尖孢镰刀菌4号生理小种（FOC4）效果及其固体发酵条件的探索。本试验采用了室内菌丝生长、产孢量测定法、平板对峙法、对扣培养法、不同浓度木霉孢子培养基研究了棘孢木霉（GX004）基本生物学特性及对FOC4的生防效果,利用水稻和菜籽饼作为固体发酵基质,探究在单因素不同条件下对其产孢量的影响,结果表明：不同温度、pH及光照条件均对该菌的菌丝和产孢量产生影响显著,在培养温度为28℃时产孢量最大,平均产孢对数值约为9.20;在pH5~6比较适合生长,在pH=6时平均产孢对数值约为9.07;光照条件能够促进菌株的生长和产孢,在全光照条件下平均产孢对数约为9.17;在平板中GX004通过空间营养竞争等作用对FOC4的生长有显著的抑制,抑制率达85.2%;产生的挥发性物质对FOC4生长抑制率为39.5%;当木霉孢子浓度为1.65×（102、103、104、105）个/ml时,不同孢子浓度木霉孢子培养基对其平均抑菌率分别为74.0%、76.9%、82.7%、85.6%,当木霉孢子液的浓度为1.65×106个/ml时FOC4几乎无法生长。在实验室条件下,水稻秸秆与菜籽饼按质量比1∶ 1配比,经过121℃灭菌 30 min,接种量8%~12%接种,调节水分使初始含水量达到 70%,在培养箱28℃下培养5天,在此条件下产孢量可达2.0×109个/g以上。     

康氏木霉固态发酵产纤维素酶室温条件的研究

以稻草和麸皮为主要原料,在室温条件下(温度不定)通过单因素筛选出康氏木霉固态发酵产纤维素酶的最佳条件,对氮源、接种量、麸皮添加量、含水量、发酵时间和初始pH值进行研究,结果表明,室温条件下的最佳发酵条件:氮源为尿素,添加量3%,接种量2%,稻草麸皮比7:3,营养液添加量150%,初始pH值3.0,发酵时间72 h,此时,羟甲基纤维素酶和滤纸酶活性最高。     

枯草芽孢杆菌发酵培养基及发酵条件优化

本文对枯草芽孢杆菌的发酵培养基和发酵条件进行了筛选优化。采用单因素试验和正交试验方法,确定该枯草芽孢杆菌的优化培养基为:豆粕40 g/L、玉米粉20 g/L、葡萄糖15 g/L、磷酸氢二钾3 g/L、磷酸二氢钾1.5g/L、硫酸镁0.5g/L、硫酸铵0.35g/L、酵母浸粉0.2g/L、硫酸锰0.2g/L、硫酸亚铁0.1g/L、碳酸钙0.1g/L。最适发酵条件为:初始pH7.2,接种量5%,发酵温度35℃,摇床转速250 r/min。     

匍枝根霉固态发酵产木聚糖酶条件研究

木聚糖酶作为环保型饲料添加剂广泛应用于畜牧业,因其具有改善消化道功能、降低食糜黏度和抗营养性、提高饲料利用率及减少环境污染等特点而备受关注.试验首先通过单因素试验法得到了最佳的氮源、料液比、无机盐和表面活性剂,为进一步提高产木聚糖酶的水平,以玉米芯粉为主要基质,采用响应面分析法优化匍枝根霉产木聚糖酶发酵培养基.优化的培养基为尿0.15、ZnSO40.022、Tween-80 0.08及含水量3 g/g干基质(DS),在最佳培养条件下,经7d发酵酶活达到最大值:13.899 8 U/g DS.     

生防细菌SF-16产芽胞条件的研究

生防细菌SF-16为土壤中筛选得到的1株细菌,研究表明,其对多种植物致病真菌有抑制作用。为了提高生防细菌SF-16的芽胞形成率及芽胞数量,以及为工厂化生产生物菌剂提供理论依据,采用摇瓶发酵对芽胞形成的主要影响因素进行了考察。通过单因素实验和正交实验对SF-16菌株产芽胞条件进行了分析,确定了摇瓶发酵最佳条件为:乳糖0.5%、黄豆饼粉2.0%、MnSO4·5H2O0.30%。在该优化条件下,发酵液中颉颃菌的出芽率达到98.3%,最终生物量达到2×109个/mL。     

MB22木聚糖酶发酵条件的研究

通过因素轮换试验和正交试验,对MB22菌产木聚糖酶的培养基配方和发酵条件进行了研究。结果显示最佳培养基组成是:以玉米芯粉和麸皮为碳源,麸皮120g/l,玉米芯280g/l,(NH4)2SO44g/l,CaCO31.5g/l,Tween80,2.0g/l,MgSO4·7H2O1.5g/l;最佳发酵条件为:起始pH5.0,摇床培养温度30℃,转速160r/min,振荡培养84h。在最佳发酵条件下,MB22菌的最高产酶活力可达898.23U/ml。虽然与一些高产菌株相比该菌株的产酶能力还有待于进一步提高,但该试验结果为进一步进行微生物生产木聚糖酶的研究提供了理论依据。     

一株真菌产酶条件的优化及发酵蛋白饲料的研究

试验研究了M-1真菌对小鼠的安全性、在3种液体培养基中的生长情况、产酶活力、产酶条件的优化及发酵蛋白饲料的影响,结果表明,这株真菌对小鼠是安全的;在缺乏氮源的液体培养基中能生长,但生长不良,而在含微量氮源的培养基和沙堡弱肉汤培养基中生长效果较好;该真菌能产淀粉酶和纤维素酶,而蛋白酶活性极低;发酵培养基组成为豆粕粉60%、麦麸35%、菜籽饼5%、营养盐[2%(NH4)2SO4、0.1%MgSO4·7H2O、0.2%KH2PO4],料水比1:1.5,pH值自然,培养温度30℃,72h,相对湿度70%,发酵较佳,香味好,粗蛋白含量高。试验结果表明该菌株可以用于发酵生物蛋白饲料。     

含醇酸奶的发酵条件优化

通过多菌种混合发酵来制造与传统开菲尔饮品类似的含醇酸奶。对发酵条件优化的结果表明,在添加了50g糖和30g功能性蛋白粉的共800g牛奶基料中加入9个单位菌种,在34℃条件下发酵培养17h,所得的产品中酒精度最高,有一定的刹口清新感。     

酵母培养物固体发酵工艺优化研究

酵母培养物近年在我国饲料行业中的应用方兴未艾,它作为一种新型饲料单细胞原料添加剂,被越来越多的养殖客户接受.北京英惠尔早在2008年就开始研究生产酵母培养物,其良好的产品性能已被大量的养殖客户认可.但生产工艺的研究改良永无止境,如何稳定、高效地生产酵母培养物产品,降低生产能耗,始终是工业生产不懈探索的课题.酵母培养物固体发酵工艺的优化,是北京英惠尔产品在生产工艺环节节能改良方面的第一个研究课题.     

固态发酵制备富肽蛋白的条件优化研究

试验首先利用响应曲面法对豆粕固态发酵过程中影响蛋白酶产率的因素进行优化,以确定变温发酵温度转变的最佳条件。以蛋白酶活力为指标,对蛋白酶活力的二次回归模型分析采用SAS 9.1.3统计软件。通过优化,豆粕发酵时蛋白酶产生的最佳条件为发酵温度30℃、基质层厚度1.75 cm、含水量44%及发酵时间44 h,此条件发酵豆粕中蛋白酶活力可达907.94 IU/g。由此确定变温发酵在44 h后提高发酵温度至40℃,再继续发酵28 h,对比变温发酵与恒温发酵样品中蛋白含量与酸溶蛋白含量,结果表明变温发酵可以减少微生物对营养物质的消耗,但可以产生更多的低分子肽类物质,发酵72 h后其酸溶蛋白含量可达19.75%,其含量比恒温发酵提高6.45%。     

犊牛固态发酵微生态制剂的试验研究

研究旨在研制一种犊牛微生物发酵饲料,并确定其发酵培养条件。以前期试验筛选的益生酵母菌、枯草芽孢杆菌和乳酸菌为协同发酵菌株,选取麸皮、玉米粉、豆粕等为发酵饲料原辅料,采用DPS软件对原料进行均匀混料设计,通过对固体发酵条件下各菌株生长情况的测定,将高活菌数的菌株进行配伍组合,确定了其最佳组合及接种比例,通过测定发酵饲料中的活菌数β-葡聚糖,柠檬酸、多肽等营养活性物质的含量,结合DPS软件中的Topsis法综合评价筛选出最优复合微生态制剂的发酵组方以及发酵模式。结果表明,复合菌最佳配伍组合为酿酒酵母、东方伊萨酵母、枯草芽孢杆菌、乳酸菌,接种比例为2:3:1:1,优化的固态发酵配方为麸皮63.84%,玉米粉27.44%,豆粕6.41%,无机盐2.31%。结合发酵饲料的芳香气味,在先进行36 h有O_2发酵,再进行12 h无O_2发酵条件下,可使发酵产物活菌数达到5.3×10~(11)CFU/g,β-葡聚糖为10.515 mg/g,柠檬酸为164.508 mg/ml,多肽为160.55 mg/g,乳酸的含量为427.344μg/g。     

木聚糖酶固态发酵条件的优化

采用单因素试验和正交试验对宇佐美曲霉（Aspergillus usamii）B-2菌株产木聚糖酶的固态发酵的工艺条件进行了研究。结果表明,该菌的最适培养条件为：发酵最佳培养基为麸皮50％、玉米芯50％、硫酸铵2％、尿素3％,发酵温度为30℃,料水比1：1．2,自然pH值,培养48h,木聚糖酶可以达到8500U左右。     

In vitro antagonistic activities of Lactobacillus spp. against Brachyspira hyodysenteriae and Brachyspira pilosicoli

The sensitivity of Brachyspira hyodysenteriae and Brachyspira pilosicoli, respectively the causative agents of Swine Dysentery and Porcine Intestinal Spirochaetosis to two probiotic Lactobacillus strains, L. rhamnosus CNCM-I-3698 and L. farciminis CNCM-I-3699 was studied through viability, motility and coaggregation assays. The cell-free supernatant of these lactobacilli contains lactic acid, that is stressful for Brachyspira (leading to the formation of spherical bodies), and lethal. It was demonstrated for the first time the in vitro coaggregation properties of two probiotic Lactobacillus strains (active or heat-treated) with two pathogenic strains of Brachyspira, leading to (1) trapping of spirochaetal cells in a physical network as demonstrated by SEM; (2) inhibition of the motility of Brachyspira. Such in vitro studies should encourage in vivo studies in animal model to evaluate the potential of the use of probiotic lactobacilli through a feeding strategy for the prevention of B. hyodysenteriae and B. pilosicoli.     

About the presence of a thermolabile (TL) antigenic fraction in Leptospira interrogans

Antisera prepared with living serovars of Leptospira interrogans have a fraction anti-TL able to neutralize TL antigen of Leptospira strains. After neutralization, any leptospiral serovar is able to adsorb heterologous antisera prepared with living strains.     

粪肠球菌R-WL发酵培养基的优化

本试验旨在优化培养基提高粪肠球菌(Enterococcus faecalis)R-WL发酵液的菌体密度,为高效、优质的微生态制剂产品研制奠定基础。首先通过生长曲线的测定、培养条件和培养基成分的单因素试验,确定菌种RWL的最适培养条件为:时间14 h、pH 8.5、温度37℃、接种量3%,最适碳源为乳糖,浓度为10 g/L,最适氮源为蛋白胨+酵母膏,浓度为30 g/L。然后通过Plackett-Burman试验分析培养基中对粪肠球菌发酵影响最重要的主要因素为蛋白胨、乙酸钠和柠檬酸二铵,再通过最陡爬坡试验获得主要因素的最适范围,最后通过Box-Behnken试验和响应面分析得到主要因素的最适添加量。结果表明:最优发酵培养基配方为:乳糖10 g/L、酵母膏15 g/L、蛋白胨12.18 g/L、乙酸钠4.5 g/L、柠檬酸二铵4.5 g/L、硫酸镁0.58 g/L、硫酸锰0.25 g/L、磷酸氢二钾2 g/L、轻质碳酸钙3 g/L,初始pH 8.5。通过试验验证,优化后发酵培养基的发酵菌液活菌数可达(6.44±0.10)×109cfu/mL,比原MRS培养基活菌数提高了71.28%。     

Predacious activity of the nematode-trapping fungus Duddingtonia flagrans against cyathostome larvae in faeces after passage through the gastrointestinal tract of horses

This study was undertaken to examine the potential of the nematode-trapping microfungus Duddingtonia flagrans to survive passage through the gastrointestinal tract of horses and subsequently to destroy free-living stages of cyathostomes in faecal cultures. Three different oral dose levels were tested, two horses being used for each level. Faeces were collected twice daily and the number of parasite eggs per gram of faeces were determined. The numbers of infective third stage larvae which developed in faecal cultures were determined after the cultures had been incubated for 2 weeks at 24°C. Results showed a positive relationship between dose level and reduction in the number of infective larvae. Fungi were recovered in faeces at times which corresponded to high larval reduction.