南京椴茎段植株再生繁育技术

通过对南京椴无菌实生苗茎段的组织培养,探索南京椴带芽茎段分化、增殖及生根的最佳培养条件.结果表明,最适宜诱导南京椴不定芽分化的培养基为MS+BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+蔗糖30.0g/L+琼脂5.2 g/L,诱导分化率为100%;最佳芽增殖及继代培养基为MS+BA 0.5～1.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L+蔗糖30.0 g/L+琼脂5.2 g/L,繁殖系数达4.0～5.0;在生根培养基(1/2MS+BA 0.1 mg/L+IBA 0.5 mg/L+蔗糖20.0 g/L+琼脂5.2 g/L)中添加5.0 g/L AC能明显促进不定根形成,40 d后生根率达56.6%;生根苗移栽至泥炭土中,成活率达80.0%.     

迷迭香离体培养快繁技术的研究

以茎段为起始外植体,进行迷迭香离体培养快繁技术的研究。结果表明:茎段在MS BA 0.2mg/L IBA 0.01 mg/L培养基上腋芽诱导分化效果最好,诱导率可达75%;诱导出的腋芽转入1/2 MS BA0.3 mg/L IBA 0.1 mg/L AC 1 g/L培养基中增殖与伸长效果最佳,每个腋芽的平均诱导芽数为3.5个,平均芽长为3.0 cm;在1/4 MS IBA 0.1 mg/L AC 1 g/L培养基中诱导生根,生根率达87%。     

木糖选择系统下xylA&BADH双价基因对二色胡枝子的遗传转化

【目的】建立安全、无抗生素的二色胡枝子遗传转化体系,通过基因工程技术进一步提高二色胡枝子的抗逆性。【方法】采用PCR法从大肠杆菌DH5α菌株中克隆木糖异构酶基因(xyl A);构建含有xyl A和甜菜碱醛脱氢酶基因(BADH)的植物表达载体p BI121-xyl A-BADH;培养基中用木糖取代一定量的蔗糖建立二色胡枝子的木糖选择系统;以农杆菌介导法对二色胡枝子的子叶节进行遗传转化,通过PCR和Southern检测确定转基因植株;对转化植株及非转化植株进行0.5～2 g·L~(-1)Na Cl胁迫,观测植株生长表现,测定1 g·L~(-1)Na Cl胁迫下转化植株和非转化植株的甜菜碱醛脱氢酶活性、叶绿素、电导率。提取转化植株及非转化植株组培苗叶片中的可溶性总糖,用高效液相色谱仪分析糖成分。【结果】测序结果表明,克隆的木糖异构酶基因与Gen Bank公布的大肠杆菌xyl A核苷酸序列的同源性达到100%,PCR及酶切检测表明正确构建了p BI121-xyl A-BADH植物表达载体。在二色胡枝子遗传转化过程中,应在纯木糖培养基上筛选抗性芽,在抗性芽增殖和生根过程中,可以采用蔗糖5 g·L~(-1)、木糖25 g·L~(-1)的糖类混合剂进行进一步筛选。在农杆菌介导的遗传转化中,外植体预培养1天后,采用LBA4404菌株侵染20～30 min,共培养3天,可以获得相对较多的木糖抗性芽。对获得的部分抗性芽进行PCR及Southern检测,得到2个转基因株系,二色胡枝子遗传转化率低于4.7%。耐盐性观测表明,转基因植株能够在含有2 g·L~(-1)Na Cl的培养基上生长并生根,而非转基因植株在相同培养基上则叶子变黄、脱落,且不能生根。无盐胁迫时,转基因和非转基因植株在甜菜碱醛脱氢酶活性、叶绿素含量和电导率方面无显著性差异;盐胁迫后,非转基因植株的甜菜碱醛脱氢酶活性无明显变化,而转基因植株的甜菜碱醛脱氢酶活性大幅度提升,且达到非转基因植株的8～10倍;盐胁迫后,转基因植株的叶绿素含量显著高于非转基因植株,而电导率则显著低于非转基因植株。高效液相色谱的分析结果显示,转基因植株叶片中测出了果糖和葡萄糖,而非转基因植株叶片中测出了葡萄糖和一种未标示的糖类。【结论】建立了二色胡枝子在木糖选择系统下的遗传转化体系,并获得稳定表达的转基因植株。外源甜菜碱醛脱氢酶基因可提高二色胡枝子的耐盐性;来源于大肠杆菌的木糖异构酶基因的导入会影响二色胡枝子的糖代谢。     

彩叶朱蕉组织培养育苗技术研究

以彩叶朱蕉优株顶芽和茎段为外植体,设计不同浓度细胞分裂素、生长素以及培养基组合,诱导芽分化、增殖和生根.MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.01 mg/L+蔗糖30g/L培养基适用于诱导芽的形成,3/4MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.01 mg/L+蔗糖30g/L培养基适用于芽的增殖,3/4MS...     

黄花槐组织培养技术研究

以黄花槐的茎尖和带芽的茎段为外植体,以MS为基本培养基,添加不同种类和浓度的外源激素,研究了诱导芽萌动、分化增殖及生根培养的适宜培养基。黄花槐芽启动培养以MS+BA0.5mg/L、增殖及壮苗培养以MS+BA1.0mg/L+NAA0.2mg/L为理想。生根培养NAA的诱导,效果好于IAA和IBA,而无激素的MS更有利于黄花槐组培苗的生根。     

不同因素组织培养对山苍子茎段腋芽生长发育的影响

以山苍予带腋芽的茎段为外植体。研究了影响茎段诱导分化丛生芽、增殖与生根的主要影响因素。结果表明：山苍子通过茎段外植体直接分化丛芽进行离体培养的途径。最佳丛生芽诱导分化的培养基是1／2MS＋6-BA2.0mg／L＋NAA0.1mg／L，＋AC0.5g／L；最佳增殖培养基为WPM-6-BAl．0mg／L十IBA0．1mg／L＋Vclmg／L，以不定芽形式增殖，增殖系数为5．6，增殖周期为30d左右；生根培养基为改良1／2MS＋NAA0.3mg/L＋IBA0.2mg／L＋AC0.5g／L，生根率91％。     

余甘子丛生芽诱导和快速繁殖研究

本试验以余甘子嫩芽和嫩枝茎段为外植体 ,在 MS培养基中进行离体繁殖和培养试验。结果表明 ,添加细胞分裂素 BA对丛生芽诱导有明显促进作用 ,激素组合以 BA与 NAA为最好 ,嫩芽外植体诱导丛生芽的最适培养基为 MS BA0 .5 mg/ L NAA 0 .1mg/ L,分化率达 90 %以上 ;嫩枝茎段旅导丛生芽所需的 BA浓度相对高些 ,最适培养基为 MS BA 2 .0 mg/ L NAA 0 .1mg/ L,分化率达 5 6 .7% ,丛生芽增殖生长培养基为 MS BA 0 .1mg/ L NAA 0 .1mg/ L Na H2 PO45 0 mg/ L。生根培养基为 1/ 2MS NAA 0 .2 5 mg/ L IBA 0 .2 5 mg/ L ,生根率在 30 %左右     

钙果4号愈伤组织的诱导和植株再生

以钙果4号的茎尖和带芽茎段为材料,接种在不同浓度激素配比的培养基中,研究愈伤组织诱导、分化及植株再生。结果表明:钙果4号芽启动培养以MS+BA0.5mg/L;愈伤组织诱导和分化以MS+BA(1.0～2.0)mg/L+NAA0.5mg/L;芽增殖以MS+6-BA(0.3～0.5mg/L)+NAA0.05mg/L最理想。添加一定浓度(0.2mg/L)的IAA生根效果均好于单独使用IBA、NAA或三者配合使用,生根率可达72.3%。     

山杏茎尖和茎段组织培养体系的建立

为了给山杏快速繁殖提供理论依据,以山杏茎尖和茎段为外植体,以MS为基本培养基,对消毒方式、初代培养基激素配比、分化培养基激素配比和生根培养基激素配比进行筛选。结果表明,茎尖和当年生茎段经75%酒精处理30 s,0.2%升汞消毒6 min,再用2%Na Cl O处理4 min,其诱导效果最佳。茎尖初代培养最佳激素配比为6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L;茎尖愈伤组织分化培养最佳激素配比为6-BA 0.2 mg/L+NAA 0.1 mg/L;茎段初代培养最佳培养基激素配比为6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L;1/2MS+IBA 0.2 mg/L为最佳生根培养基。     

海南黎药血叶兰的无菌播种及高效繁育技术初探

以血叶兰（Ludisia discolor）的果荚作为实验材料,采用超净工作台无菌播种,探索血叶兰种子离体萌发和高效繁育技术。将种子播种在不同配方的培养基中,探讨添加土豆和椰汁的KC、花宝1号、1/2MS培养基对种子萌发的影响。将种子萌发获得的血叶兰根状茎作为研究对象,转接到添加不同花宝、不同浓度KT、NAA、IBA等生长调节剂的1/2MS培养基中,筛选出诱导血叶兰根状茎的分化培养、丛生芽培养、壮苗生根培养的最佳培养基。结果表明,诱导种子离体萌发最适宜的培养基是KC+20g/L土豆+20g/L蔗糖+7g/L琼脂;诱导血叶兰根状茎分化的最佳培养基是1/2MS+1g/L花宝4号+20g/L蔗糖+7g/L琼脂+1g/L活性炭;诱导血叶兰丛生芽增殖的最佳培养基是1/2MS+3.0mg/L KT+0.3mg/L NAA+20g/L蔗糖+7g/L琼脂,增殖系数是5.05;优选的血叶兰无菌苗壮苗生根的培养基是1/2MS+0.5mg/L IBA+0.5mg/L NAA+20g/L蔗糖+7g/L琼脂。     

糙皮桦‘Jacquemontii’茎段离体快速微繁殖技术研究

以糙皮桦‘Jacquemontii’带腋芽茎段为外植体,以WPM为基础培养基,添加不同类型及质量浓度的植物生长调节剂,进行诱导茎段的腋芽萌发、丛芽增殖及生根等一系列组织培养研究,以筛选出适合‘Jacquemontii’组织培养的最优培养基配方,成功获得健壮的再生植株。结果表明,腋芽茎段最佳诱导培养基:WPM+1.5 mg/L 6-BA+2.5mg/L GA3,其萌芽率达71.67%;最佳增殖培养基:WPM+3.0 mg/L 2-ip+0.5 mg/L IAA+1.5 mg/L GA3,其增殖倍数为8.12;最佳生根培养配方:1/2WPM+0.8 mg/L IBA+0.5 mg/L NAA+0.5 mg/L活性炭,生根数为3—6条,生根率达97.92%。     

二色胡枝子组织培养的研究

为探索建立植株再生系统技术,以二色胡枝子种子为材料,对该树种组织培养进行了研究.结果表明,以0.1%升汞对种子灭菌2 min,发芽率较高,污染率仅为5%;基础培养基为1/2 MS,直立苗比例达到80%以上,显著高于MS和B5培养基;在增殖培养中,BA对分化系数影响最大,NAA其次,ZT的作用不明显,适宜的增殖培养基为1/2 MS BA 1.0 mg/L NAA 0.01 mg/L,分化系数可达3.15;随着NAA浓度提高,对生根抑制作用加强,其浓度不宜超过0.5 mg/L, IBA对生根有促进作用,浓度以IBA 1.5 mg/L 为宜.     

中山杉微体快繁技术研究

以优良无性系中山杉301茎段为外植体,通过在MS或1/2MS培养基中添加不同浓度和比例的NAA、6-BA、IBA、KT对其进行芽诱导分化、增殖培养和生根诱导,以提升中山杉微体快繁技术研究水平。研究结果表明:以中山杉301带腋芽幼嫩枝条为外植体可以实现微体快繁。MS培养基中NAA含量较高时可以增加萌芽数量,6-BA含量过高对萌芽有抑制作用;诱导分化培养基配方以MS+NAA 0.2mg/L+6-BA 0.4mg/L效果最佳。增殖培养配方以MS+NAA 0.3mg/L+6-BA 0.4mg/L效果最佳,丛芽分化良好,增殖倍数3.8。相同浓度的IBA和NAA以1/2MS生根诱导数量远远高于MS培养基,生根诱导配方以1/2MS+IBA 0.3mg/L+NAA 0.2mg/L效果最好,较相同激素条件下的MS培养基生根率提高8%。     

牡丹“虞姬艳妆”的茎尖培养

以牡丹"虞姬艳妆"(Paeonia suffruticosa cv.YuJi YanZhuang)茎尖和单芽茎段为材料,研究不同植物激素配比对其芽的诱导、增殖,愈伤组织诱导、分化及生根的影响。结果表明:适合牡丹"虞姬艳妆"腋芽诱导的培养基为MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.05mg/L+活性炭1.00g/L,萌芽率为66.67%;适合芽增殖的培养基为MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.01mg/L,增殖系数为2.80;适合茎段愈伤组织诱导的培养基为MS+6-BA1.0mg/L+IBA0.5mg/L+活性炭1.00g/L,诱导率为62.5%;适合愈伤组织分化的培养基为MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.01mg/L,分化率为80%。     

甜樱桃的组织培养

用甜樱桃早红宝石的茎段为外植体,以MS为基本培养基,研究6-BA对外植体芽诱导的影响、2种激素6-BA和IBA不同浓度组合的芽增殖效应及IBA的生根效果。试验结果表明:甜樱桃的最佳增殖培养基为MS+6-BA1.0mg/L+IBA0.1mg/L+蔗糖30g/L+Agar7g/L,最有效的生根培养基为1/2MS+IBA0.5mg/L+Sug-ar30g/L+Agar7g/L。     

甜樱桃的组织培养技术研究

用甜樱桃早红宝石的茎段为外植体,以MS为基本培养基,研究6-BA对外植体芽诱导的影响,研究2种激素6-BA和IBA不同浓度组合的芽增殖效应及IBA的生根效果。试验结果表明:甜樱桃的最佳增殖培养基为MS+6-BA1.0mg/L+IBA0.1mg/L+Sugar30g/L+Agar7g/L,最有效的生根培养基为1/2MS+IBA0.5mg/L+Sugar30g/L+Agar7g/L。     

神仙草组织培养快繁技术的研究

以神仙草的茎段和叶片为外植体,研究神仙草在添加了不同的激素成分及不同浓度的培养基中对不定芽诱导、继代增殖和生根培养的影响,结果表明:初代培养的适宜培养基是MS+BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L;继代增殖适宜培养基是:MS+BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L;生根适宜培养基是:1/2MS+NAA 1.0mg/L。     

文冠果组织培养技术初步研究

以文冠果腋芽茎段为外植体,MS培养基为基本培养基,采用不同激素组合对其进行离体培养试验,结果表明:6-BA1.0·mg·L-1+NAA0.5·mg·L-1的激素组合适宜诱导腋芽和分化苗增殖培养。生根培养基以1/2MS培养基添加不同浓度的IBA,经30天生根培养,分化苗基部未见生根,生根培养试验有待于进一步研究。     

樱桃李茎段离体培养与快速繁殖技术

以引种栽培的樱桃李茎段为试材,探讨基本培养基、植物生长调节剂种类及浓度配比等多种因素对茎段腋芽萌发、生长与增殖的效应,建立离体培养的适培养条件与技术体系。结果表明：MS＋IAA0.4mg/L＋6-BA 0.8mg/l＋琼脂7g/L＋蔗糖30mg/L适宜茎段腋芽萌发和生长;增殖培养和生根培养的最适培养基分别为3/4MS＋IAA 0.5mg/L＋6-BA 1.0mg/L＋琼脂6.5g/L＋蔗糖30mg/L及1/2MS＋IBA 1.4mg/L＋琼脂7g/L＋蔗糖30mg/L。     

二色胡枝子组培再生体系优化的研究

为了实现二色胡枝子高效再生体系的优化,以二色胡枝子为材料,研究了6-BA、2,4-D、NAA等因素对其子叶节再生、节段扩繁和试管苗生根的影响。试验结果表明：子叶节再生最佳培养基为MS＋6一BA0．1mg／L;最佳增殖培养基为MS＋6-BA0．1mg／L＋NAA 0．01mg／L;IBA,NAA对二色胡枝子试管苗的生根作用有影响,最佳生根培养基为1／2MS＋IBA0．5mg／或者1／2MS＋NAA0．1mg／L。