设施内外春美桃果实有机酸含量及柠檬酸代谢酶活性差异研究

为了研究设施内外桃果实中有机酸含量及柠檬酸代谢酶活性差异,以设施栽培和露地栽培春美桃为试材,采用液相色谱方法测定桃果实中有机酸含量和组分,并分析柠檬酸代谢相关酶活性。结果表明,春美桃果实发育过程中,可滴定酸含量呈先上升后下降的趋势。设施春美桃成熟时果实中可滴定酸含量为0.49%,显著高于露地春美桃成熟时的可滴定酸含量(0.27%)。设施内与露地栽培的春美桃成熟时果实中各有机酸组分主要为苹果酸、柠檬酸、奎宁酸和莽草酸,其中苹果酸占比最高,分别为49.62%和56.47%,但柠檬酸含量差异最大,设施内桃果实中柠檬酸含量占25.31%,露地桃果实中柠檬酸含量占14.86%,说明成熟桃果实中有机酸总含量的差异主要受柠檬酸影响。柠檬酸含量与其相关代谢酶活性的相关性分析结果表明,果实发育前期设施内果实中柠檬酸含量显著低于露地果实,主要是该时期设施内果实中烟酰胺腺嘌呤二核苷酸-异柠檬酸脱氢酶(NAD-IDH)活性高于露地,促进了柠檬酸的降解;果实发育后期设施内柠檬酸含量显著高于露地,主要是该时期设施内柠檬酸合成酶(CS)活性和磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)活性均显著高于露地,促进了柠檬酸的合成。     

果实中糖酸积累机理研究进展

果实中糖、酸含量和糖酸比是决定果实风味最重要的指标。其中,糖类物质的形成及其代谢机理研究的较深入,蔗糖合成酶（sucrose synthase,SS）、蔗糖磷酸合成酶（sucrose phosphate synthase,SPS）和转化酶（invertase,IVR）是果实糖代谢的关键酶。酸的积累与柠檬酸合成酶（CS）、磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶（PEPC）等有关。     

脐橙果实有机酸代谢调控措施的初步研究

以红桔砧 10年生罗伯逊脐橙为试材 ,研究了HC - 3和磷酸盐处理对果实发育过程中有机酸代谢中酶活性变化及有机酸含量的影响。结果表明 :HC - 3强烈地抑制柠檬酸合成酶 (CS)活性 ,使果实中有机酸含量极显著降低 ,同时增加了果实中的总糖含量 ,因此在生产中具有推广应用价值。在盛花后 10周喷施磷酸盐 ,也可显著降低有机酸含量     

脐橙果实发育过程中有机酸代谢相关酶的研究

以罗伯逊脐橙为试材,研究了脐橙果实有机酸代谢相关酶的活性变化动态,及其与果实有机酸积累关系,旨在探索影响脐橙果实有机酸含量的重要酶。结果表明:果实有机酸的积累期,CS、PEPC活性随有机酸积累而增大,并呈显著正相关;有机酸降解期,IDH的活性与有机酸含量呈极显著负相关;而MDH和ACO对酸含量的影响小。因而可认为PEPC和CS是影响果实有机酸合成的重要酶,而影响有机酸分解的重要酶则是IDH。     

‘蛇龙珠’葡萄果实糖酸含量和代谢关键酶活的变化

糖酸是决定葡萄品质及葡萄酒风味的重要指标之一。本研究以酿酒葡萄‘蛇龙珠’为试验材料,在其生长发育过程中的E-L 33、35、36、37和38这5个时期,测定和分析了果实生长发育过程中可溶性糖（葡萄糖、果糖）、主要有机酸（酒石酸、苹果酸）和游离氨基酸的动态变化,并分别测定了果实中磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶（PEPC）和磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶（PEPCK）活性的变化。结果表明,‘蛇龙珠’果实在生长发育过程中葡萄糖和果糖逐渐增加;精氨酸、脯氨酸、缬氨酸、亮氨酸和丙氨酸等游离氨基酸含量逐渐增加;主要有机酸酒石酸和苹果酸含量逐渐下降,PEPC酶的活性在E-L 35时期后表现出与果实中苹果酸含量相似的变化趋势,表明葡萄果实中苹果酸的降解可能受PEPC酶的影响。通过对有效成份含量的研究,更深入地了解葡萄果实的发育过程,并为优化葡萄酒酿造和调整香气特性提供参考。     

西瓜果实发育过程中糖分积累与相关酶活性的变化

以5个西瓜品种为试材,研究了西瓜蔗糖代谢与相关酶调控的关系。结果表明:5个不同品种西瓜果实中糖积累动态十分相似,果实发育前期,糖积累缓慢;进入生长中期,蔗糖迅速积累,单糖下降;生长后期蔗糖下降,单糖略有回升;中育6号西瓜蔗糖含量最高,三白西瓜最低;AI和NI活性变化对糖分的积累和成分构成具有重要影响,SS酶活性对蔗糖的积累作用较小,SPS和蔗糖的积累趋势相一致,在蔗糖代谢中起关键作用。     

枣果实发育过程中有机酸质量分数及相关代谢酶活性的变化

以骏枣和酸枣为试材,采用高效液相色谱(HPLC)检测了枣果实发育过程中有机酸组分和质量分数,并对苹果酸脱氢酶(NAD-MDH)、苹果酸酶(NADP-ME)、磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)、柠檬酸合成酶(CS)等相关代谢酶的活性进行测定。结果表明:(1)骏枣和酸枣果实发育过程中,除酒石酸外,苹果酸和柠檬酸质量分数的变化均呈先升高后降低的趋势。(2)NAD-MDH、CS活性与苹果酸和柠檬酸质量分数的变化趋势基本一致,NADP-ME活性变化则相反。(3)相关性分析表明:NAD-MDH活性变化与苹果酸质量分数呈正相关,NADP-ME活性变化与苹果酸质量分数呈负相关;CS活性变化与柠檬酸质量分数达到极显著正相关;而PEPC活性变化与苹果酸和柠檬酸质量分数相关性不大。因此,NAD-MDH、NADP-ME和CS活性对枣果实中有机酸代谢发挥重要作用,而PEPC作用不大。     

柑橘果实发育过程中有机酸含量及相关代谢酶活性的变化

 测定了柠檬 (高酸 ,CitruslimonL .Burm)、锦橙 (中酸C .sinesisL .Osbeck)、冰糖橙 (低酸 ,C .sinesisL .Os beck)和奉节脐橙 (C .sinesisL .Osbeck)及其低酸芽变株系、晚熟芽变株系果实在发育过程中柠檬酸的含量及其相关代谢酶活性。结果表明 ,除柠檬外 ,汁胞柠檬酸含量均在花后 10 0～ 130d达到高峰 ,以后逐渐下降 ;柠檬酸合成酶活性变化与各类型柑橘果实中柠檬酸含量差异没有明显联系 ;细胞溶液中的乌头酸酶后期升高对柑橘果实中酸的降解有明显影响 ;磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶活性和磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶 /NAD 异柠檬酸脱氢酶值较高 ,酸积累较高。     

南瓜果实发育过程中糖代谢及相关酶活性的变化

【目的】揭示南瓜果实发育过程中糖分积累以及相关酶活性的变化规律。【方法】以"红香栗"、"黄狼"、"蜜本"3个南瓜品种为试材,对花后1~8周果实内的果糖、葡萄糖、蔗糖、淀粉等营养成分含量及相关酶活性进行了研究。【结果】随着果实的迅速成熟,"黄狼"和"蜜本"的己糖总量持续下降,收获前才略有升高,"红香栗"的已糖含量在花后第3周之前有一段上升过程,随后迅速下降,果实成熟时3个品种的己糖含量相差不大。"黄狼"中中性转化酶活性呈单峰变化,"红香栗"和"蜜本"为双峰变化。"黄狼"和"蜜本"蔗糖磷酸合成酶活性变化趋势相似,都有2个高峰,分别出现在授粉后的第4周和第6周,第6周后逐渐降低。"红香栗"淀粉磷酸化酶活性的变化呈明显双峰型,高峰出现在第2周和第4周;在前6周,"蜜本"的淀粉磷酸化酶活性一直在7.6μg/(g.min)上下浮动,到第7周迅速下降到最低点,此后又急剧上升;"黄狼"的淀粉磷酸化酶活性在初期4周变化不大,于第5周下降到最低谷,此后又持续上升。随着果实的成熟,3个品种的蔗糖含量升高,淀粉含量呈增加趋势;酸性转化酶活性下降,蔗糖合成酶活性增高。【结论】"红香栗"为淀粉积累型品种,"黄狼"的淀粉和糖类含量都较低,"蜜本"在淀粉和糖类的积累上表现出明显的优越性。在3个品种果实生长前期,其转化酶活性均高于合成酶活性;在果实生长中后期,转化酶活性逐渐下降而合成酶活性上升,于成熟时趋于平衡。     

脐橙果实发育中糖分积累与SPS活性研究

分析研究了脐橙果实生长和成熟过程中汁泡、果实维管束和果皮内糖分含量与SPS活性变化动态.研究结果表明:无论是汁泡还是果实维管束和果皮,它们的还原糖含量高于蔗糖的含量;在果实细胞膨大初期,果皮中的总糖分含量高于汁泡;在果实细胞膨大后期和成熟前期,汁泡中的总糖分含量高于果皮,但是与维管束的总糖含量接近;而到成熟采收时,3个组织的总糖含量则相互接近,而且都以葡萄糖含量占优.SPS参与了脐橙果实蔗糖的贮藏和运输过程,汁泡中的SPS活性在果实成熟前变化较小,在果实的成熟和糖分的积累时期,其活性急骤上升,至成熟期,远高于其他两个组织中的SPS活性;而果皮中的SPS活性在果皮糖分含量增加时活性持续下降;维管束中的SPS活性则基本上随着果实成熟而缓慢下降,至成熟期,活性处于较低水平.     

气候因子与脐橙果实糖、酸含量的灰色关联度分析

对 11个主要气候因子与脐橙果实糖、酸含量的灰色关联度分析研究 ,结果表明 :对果实糖含量影响最大的气候因子是年均温 ,其次是幼果期 (5月、6月 )和成熟期 (10月、12月 )的月均温 ;对果实有机酸含量影响最大的则是年降雨量、年均温 ,其次是果实生长期的月均温 ,尤以脐橙果实有机酸下降期 (9月 )和有机酸合成期 (5月、6月 )的均温影响较大     

3种中间砧对长果形纽荷尔脐橙树体特性和果实品质的影响

将罗伯逊脐橙36号、锦橙和国庆1号温州蜜柑作为长果形纽荷尔脐橙的中间砧（基砧为枳）进行田间试验研究，结果表明：罗伯逊脐橙36号的冠幅和树冠体积最小，锦橙的春梢和夏梢生长量均最小，而秋梢则反之；中间砧粗度和接穗粗度均表现为锦橙、罗伯逊脐橙36号、国庆1号依次递减；3种中间砧与接穗在亲和性上无显著的差异。罗伯逊脐橙36号花量过大，国庆1号花量过小，锦橙花量适中且单株产量最高。罗伯逊脐橙36号在果实综合品质表现上略好。3种中间砧对中片光合色素含量与相对组成有显著的影响；对叶片糖分含量有明显的影响。对叶片P含量影响无显著性差异，对叶片的N、K、Fe、Ca含量有显著的影响。     

In vitro Plant Regeneration from the Mature Tissue of Navel Orange (Citrus sinensis L. Osbeck) by Direct Organogenesis

An efficient in vitro regeneration system by direct organogenesis from mature nodal and internodal stem segments of Newhall navel orange (Citrus sinensis L. Osbeck) was developed. Illuminating conditions together with plant growth regulators affected the adventitious bud regeneration frequency and efficiency. The initial 15 d darkness inoculation is beneficial for the adventitious bud regeneration. The highest regeneration frequency (85.2%) and bud formation efficiency (3.7 per responsive internodal stem segment) were obtained in the media supplemented with 1.0 mg L-1 BAP and 0.5 mg L-1 NAA. ABA at 0.2 mg L-1 positively affected the bud formation efficiency, which amounted to 8.5 buds per internodal segment in the presence of BAP at 1.0 mg L-1. The adventitious shoots successfully rooted and were transferred to the soil.     

Production of Transgenic Anliucheng Sweet Orange (Citrus sinensis Osbeck) with Xa21 Gene for Potential Canker Resistance

Citrus canker, an epidemic quarantine disease caused by Xanthomonas axonopodis pv. citri, has brought a great damage in citrus production worldwide. Herein, a rice PRR (pattern recognition receptor) gene Xa21 together with GUS reporter gene and hygromycin phosphotransferase gene (HPT) was introduced into Anliucheng sweet orange (Citrus sinensis Osbeck) via Agrobacterium-mediated transformation of embryogenic callus. The transgenic calluses were screened on MT basal medium containing hygromycin (HYG) and detected by histochemical GUS staining. The transgenic plantlets were recovered through somatic embryogenesis pathway. The regenerated plantlets were accustomed to and maintained in the greenhouse. The transgene integration of recovered plantlets was identified by PCR and Southern blot hybridization. It showed that all the transgenic plantlets tested had undergone single copy integration, the expression of Xa21 in eight different transgenic lines detected by qRT-PCR can be divided into three grades, high for T5 and T6, middle for T4 and low for the rest. The tolerance to citrus canker disease of the three recovered transgenic lines T2, T4 and T6 was assessed by in vitro pin-puncture inoculation. The results showed that all the three transgenic lines conferred improved resistance to citrus canker bacterium infection and the T4 transgenic line displayed the highest resistance. The mechanism and feasibility of rice Xa21 in triggering innate immunity in citrus was briefly discussed.     

细胞壁酶活性与甜橙果实质地的相关性研究

对在中亚热带生态类型的江安罗伯逊脐橙和伏令夏橙果实生长发育全过程中的果胶甲酯酶(PE)、多聚半乳糖醛酸酶(PG)、纤维素酶(Cx)与果胶、半纤维素(hemicellulose,HC)、木质素(lignin)等果实质地成分的相关动态变化的研究结果表明:PE、PG和Cx在果实生长发育过程中一直存在,不同种类甜橙的PE、PG活性都以成熟期为转折点;随着PG和PE两种酶活性的增加,果胶物质分解,果实硬度下降,Cx活性对细胞壁中难溶态半纤维素含量影响最大;随着果实的生长发育进程,果实内木质素的含量呈现急剧下降的趋势。     

不同贮藏方式对赣南纽荷尔脐橙果实品质的影响

【目的】研究机械冷库（Mcs）、山区水冷贮藏库（Ecvs）和通风贮藏库（Vws）对赣南纽荷尔脐橙(Citrus sinensis Osbeck‘Newhall’)果实的贮藏效果,为优化柑橘贮藏条件及贮藏库的改良提供理论依据。【方法】将商业成熟度的纽荷尔脐橙果实分别放置于3种不同类型的生产贮藏库,持续跟踪贮藏库的环境参数变化;运用气相色谱仪、红外线CO2分析仪等设备,分析贮藏果实的生理和生化指标,并进行感官评价。【结果】在贮藏期内,3种贮藏库内部环境参数持续变化,Mcs内部温度和相对湿度分别维持在2.1-11.2℃和64.4%-99.0%之间。随着气温升高,Mcs内部与运输或货架期环境的温差逐渐加大,与Vws、Ecvs存在显著差异。Vws与Ecvs内部温度和相对湿度的皮尔森系数分别达到0.80以上,变化趋势一致,但是,比较两种贮藏库相同时刻的温度和相对湿度,Ecvs延缓库内部温度升高,维持库内相对湿度的能力优于Vws。同时,Mcs内部CO2和乙烯浓度显著高于其他贮藏库。果实可滴定酸和可溶性固形物含量随着贮藏期的延长逐渐下降,而且果实可滴定酸比可溶性固形物下降更剧烈。在105 d(days of storage,DOS)后,Ecvs贮藏果实的可滴定酸含量显著高于Vws和Mcs贮藏果实,而果实可溶性固形物含量在各贮藏方式之间无显著性差异。果实的柠檬酸和苹果酸浓度在135 DOS显著下降,3种贮藏方式之间,果实柠檬酸和苹果酸的浓度存在差异,在65 DOS后,Ecvs贮藏果实柠檬酸和苹果酸浓度高于Mcs、Vws贮藏果实。在135 DOS前,Mcs维持果实硬度、可溶性糖、Vc效果明显优于Ecvs和Vws;但是在160 DOS,Mcs贮藏果实的硬度、可溶性糖和Vc损耗加剧,其含量显著低于Ecvs贮藏的果实。此外,果实的乙醇、乙醛、甲醇的浓度在105 DOS显著升高,3种贮藏方式之间,Mcs贮藏果实在160 DOS的乙醇积累量(723.02 μg•L-1)显著高于Ecvs、Vws贮藏果实,果实风味品质降低。Ecvs、Vws贮藏果实感官满意度随贮藏期延长不断波动,而Mcs贮藏果实感官满意度先升高后逐渐下降,在160 DOS显著低于Vws和Ecvs贮藏的果实。【结论】贮藏库与运输、货架期环境的温差,贮藏库内气体成份,尤其是乙烯,显著影响果实有机酸、乙醇、乙醛和甲醇的含量,导致不同贮藏库的果实品质和感官满意度的差异。Mcs贮藏果实在135 DOS品质出现劣变,Ecvs贮藏果实寿命可延长至160 DOS,而Vws贮藏果实品质在65 DOS后显著下降,不适于长期贮藏脐橙。     

利用EMS诱变获得抗溃疡病甜橙突变体的研究

研究以大红甜橙实生苗上胚轴为试材,采用甲基磺酸乙酯(EMS)对其节间茎段进行诱变处理,通过用不同浓度溃疡病菌粗提物进行离体筛选,以确定适宜的抗溃疡病选择压,并获得抗溃疡病突变体材料。结果表明,以1.8%的EMS溶液浸泡节间茎段2 h可获得"半致死"效应;溃疡病菌粗提物浓度为4%时为适宜的抗病选择压。对1 030个再生不定芽进行两次不连续离体筛选,再经离体接种溃疡病菌鉴定后获得35个抗性芽,成活率为3.4%。该试验初步获得抗溃疡病粗提物的大红甜橙突变体株系23株,为后续进一步研究提供材料基础。     

光对柑桔组培无性系芽梢的生根效应

 以建水无籽蜜桔(Citrus reticulate)4个幼胚繁殖的芽梢为材料.实验结果表明: (1)芽梢接种后经4天暗培养再置于白光下继续培养的比未经暗处理的能提高生根率3.8%,提高生根势63.9%.若延长培养时间,则有明显的抑制作用. (2)3000Lux的白色光强有益于生根. (3)光谱中650nm的单色红光(光强300～430Lux)比白色光能提高生根率25.3%～39.7%,提高生根势47.3%～51.4%,且能加速生根进程和根系生长.红光主要作用时间在接种后的第4天以后.550 nm的单色黄光(光强443～1800 Lux)与白光相比,效果不太明显.410 nm的单色蓝光在低光强(460 Lux)时具有一定正效应.当光强增至600 Lux时,往往具有负效应.