胚胎培养液的小白鼠胚胎培养检测法

胚胎移植实践中,经常将犊牛血清加入到PBS液中配制成冲卵液和培养液．但不同来源的犊牛血清或因保存时间、条件不同其生物活性可能有所不同,因此在正式试验前,通常用小白鼠胚胎培养法进行生物学活性评估。对新采用的培养液,为观察其培养效果有时也需应用胚胎培养法进行比较。1目的利用4～8细胞阶段的小白鼠胚胎,观察在不同培养条件下小白鼠胚胎的培养效果,从而对该培养液进行评估。2小白鼠的起数排卵2．1试验动物用“昆白”系成年小白鼠,雌鼠体重22g以上,2．5月龄以上;雄鼠具有正常的繁殖配种能力。在室温下笼养,喂全价饲料。2…     

昆明白小鼠胚胎生殖细胞的分离与培养

以昆明白品系小鼠胎儿生殖嵴为材料，以不同的培养液分离培养胚胎生殖细胞（EG cells），发现小鼠胎儿肝细胞条件培养液的效果好于未添加白血病抑制因子（LIF）的基础培养液，而差于添加了1000IU／mL LIF的基础培养液。同时，试验对比了从不同胎龄胎儿分离培养原始生殖细胞（PGCs）的情况，鉴定了EG细胞的生物学特性；EG细胞经体外培养，可以分化为神经样细胞、上皮样细胞和简单类胚体。     

昆明小鼠胚胎成纤维细胞体外培养条件初步研究

本研究旨在探索影响小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblast,MEF)分离培养的因素,建立有效的胚胎成纤维细胞培养体系,为构建饲养层细胞与体细胞核移植技术的细胞核供体建立平台。本研究用组织细胞培养液DMEM作为基础培养液,观察了不同胎龄、不同血清浓度及不同胰蛋白酶作用时间等因素对MEF分离培养的影响。结果显示,在所进行的4个胎龄8.5、10.5、12.5、14.5 d的比较试验中,原代成纤维细胞分离培养的最适胎龄为12.5 d,细胞贴壁迅速,12 h已完全贴壁,增殖速度快;在所进行的不同时间5、10、15、30 min的胰蛋白酶消化中,最佳时间为5~10 min;在所进行的5个血清浓度7%、9%、10%、11%、13%的比较试验中,添加11%胎牛血清浓度培养效果最佳,从3~5代增殖倍数稳定在1.35左右,传代时间也相对较长。以上结果表明,采用12.5 d胎鼠,胰蛋白酶消化5~10 min,在含有11%血清的DMEM培养液中培养MEF细胞时,原代和传代效果最好,传代至第3~5代时细胞生长增殖最旺盛,处于对数分裂期,适宜作为饲养层细胞与体细胞核移植细胞核供体。     

鹅胚胎体外培养的研究

以蛋重为 (12 4 .90± 0 .91) g(A组 )、(130 .30± 0 .99)g(B组 )、(134.5 6± 1.0 1) g(C组 )的豁鹅蛋壳作为代用蛋壳 ,将第 1次换壳后的鹅胚转移至其中进行孵化 ,记录孵化第 3～ 4 .5天和第 6 ,15 ,31天的活胚数 ,同时分析代用蛋壳大小对孵化效果的影响。结果表明 :在整个孵化过程中 ,C组代用蛋壳优于B组和A组 ,尤其在孵化中期 (第 6～ 15天 ) ,A组与C组对照差异显著 (P <0 .0 5 )。结果表明 ,在鹅胚体外操作中 ,第 2次换壳所用的代用蛋壳的大小以大于或等于(134.5 6± 1.0 1) g为宜。     

猪胚胎的体外培养

猪胚胎4—细胞期之前培养的难度较大。这期间的体外发育障碍可以采用一些方法加以克服,而使其从1—细胞期发育至囊胚期。试验证实,小鼠输卵管可用以培养猪胚胎;猪胚胎和输卵管细胞一起培养或者培养液里补充猪输卵管液可以提高培养成功率。简化改进培养液后观察到:谷氨酰胺(glutamine)可以作为猪胚胎从结合子发育至囊胚过程中的能重来源;葡萄糖对猪胚胎体外发育没有抑制作用;培养液里补充牛磺酸(taurine)和亚牛磺酸(hypotaurine)可提高猪胚胎的发育程度。迄今已极道的猪胚胎培养液有多种,但是对猪胚胎体外发育障碍的原因还未见报道,现有的培养方法还有待改进。     

动物胚胎体外培养研究进展

近年来动物胚胎体外培养取得了新进展.致密化前期胚胎利用葡萄糖作为能量底物的能力有限,但致密化后胚胎培养中葡萄糖的添加是必须的.自由氨基酸在早期胚胎的发育中是必需的,非必须氨基酸在致密化前发挥作用,致密化后期胚胎则需要所有氨基酸.血清对早期胚胎的发育有多重影响,BSA等一些生物大分子物质的配合添加可以取代血清的胚胎营养作用,并消除血清的负作用.在无血清培养液中,一些生长因子和细胞因子的加入是必须的.GSH等抗氧化物质添加进培养液可以对抗反应氧的作用,对胚胎发育起到保护作用.     

动物胚胎体外培养研究进展

近年来动物胚胎体培养取得了新进展，致密化前期胚胎利用葡萄糖作为能量底物的能力有限，但致密化后胚胎培养中葡萄糖的添加是必须的，由于氨基酸在早期胚胎的发育中是必需的，非必须氨基酸在致密化前发挥作用，致密化后期胚胎则需要所有氨基酸，血清对早期胚胎的发育有多重影响，BSA等一些生物大分子物质的配合添加可以取代血清的胚胎营养作用，并消除血清的负作用，在无血清培养液中，一些生长因子和细胞因子的加入是必须的，GSH等抗氧化物质添加进培养液可以对抗反应氧的作用，对胚胎发育起到保护作用。     

山羊早期胚胎体外培养试验

山羊早期胚胎体外培养试验邓世全（四川畜牧兽医学院荣昌６３２４６０）前言＊胚胎移植不但可提高优良母畜的繁殖潜力，扩大＊良种畜群，也是研究受精、胚胎发育和遗传工程的有力＊手段，还是体外受精、胚胎分割，核移植、嵌合体和基因＊导入技术的必要组成部分。我们在兔...     

蛋鸡杂种胚胎生活力及其杂交遗传力的研究

在利用京白快羽母鸡对１７０只罗曼Ｄ系公鸡的快慢羽基因位点进行测交试验的过程中，收集了杂种后代孵化期胚胎生活力的数据用于本研究，结果表明：（１）孵化后期（１３－２１天）平均每天的胚胎死亡率约为前中期的两倍，孵化前期（１－６天）的死亡率略高于中期，孵化中期（７－１２天）的死亡率最低；（２）罗曼Ｄ系纯合慢羽公鸡杂交后代的生活力与杂合公鸡后代相比没有显著的差异，据此可以假设：快慢羽基因与胚胎生活力性状间无相关关系；（３）用ＨｅｎｄｅｒｓｏｎⅢ估计的胚胎生活力性状的杂种遗传力在０．００６到０．０５４之间，ＲＥＭＬ方法的估计值在０．００１到０．０４７之间。用ＨｅｎｄｅｎｏｎⅢ估计的遗传力一般均高于ＲＥＭＬ方法的估计值。     

不同时期鸡胚胎体外培养的比较研究

试验采用代用蛋壳体外培养方法进行了不同时期鸡胚胎换蛋壳培养的研究。结果显示：体外受精卵体外培养发育率为10％。X期胚胎体外培养的孵化率为1．2％；孵化1日龄的胚胎体外培养的孵化率为7．9％；直接去1／4壳的鸡胚孵化率为3．7％；鸡胚胎换蛋壳以后，添加6～8札的稀蛋白对换壳鸡胚发育比较适宜。     

牛早期胚胎体外培养的研究进展

本文就目前牛早期胚胎体外培养的常用基础培养液、牛早期胚胎的体外培养方法以及影响牛早期胚胎发育的一些常规添加成分的发展现状作了比较全面的概括，并指出了体外培养体系的研究价值和意义。     

牛早期胚胎体外培养的研究进展

本文就目前牛早期胚胎体外培养的常用基础培养液、牛早期胚胎的体外培养方法以及影响牛早期胚胎发育的一些常规添加成分的发展现状做了较全面系统的概括,并指出了体外培养体系的研究价值和意义。     

牛体外受精胚胎的体外培养研究进展

家畜体外受精（IVF）技术自上世纪八十年代获得成功以来，发展十分迅速，九十年代已进入试管胚的开发应用阶段。目前，IVF胚胎的质量与体内胚相比仍有很大差距。在进行IVF胚胎体外培养时，常会出现“体外发育阻断”现象，主要表现为细胞数较少、卵裂球形状不规则、存在死亡的细胞和细胞质碎片、发育速率和抗冻性降低以及酶活性和营养物摄取的改变等方面。近年来，为了克服胚胎体外发育所存在的某些缺陷，国内、外对不同动物的胚胎体外培养体系和培养方法进行了系统研究，取得了长足进展。本文就牛IVF胚胎体外培养方面的研究进展综述如下。     

猪胚胎体外培养影响因素的研究

以孤雌激活胚胎为研究对象,对猪胚胎体外培养过程中的相关影响因素进行了探讨。体外成熟的猪卵母细胞经孤雌激活后,用添加0.5%牛血清蛋白(BSA)的NCSU-23(北卡罗来纳州立大学-23)培养基培养的囊胚率(36.7%)极显著高于添加5%、10%和15%胎牛血清(FCS)的NCSU-23(11.8%,18.5%和10.3%,P0.01)。在NCSU-23中添加一定比例的TCM-199(10%,25%和50%),虽然对猪卵母细胞孤雌激活后的分裂率无显著影响(89.6%vs87.0%,83.4%和82.6%,P0.05),但囊胚发育率随着TCM-199比例的增加而显著下降(30.1%vs25.0%,11.1%和1.1%,P0.05)。结果表明:培养液中添加BSA的猪胚胎体外培养效果优于添加FCS;猪胚胎的体外培养不需要成分复杂的培养液。     

猪早期胚胎体外培养和保存研究进展

早期胚胎的体外培养和保存不仅是研究胚胎生物学的基础,而且也是胚胎移殖推广和应用的先决条件。目前,家兔、牛、绵羊和山羊胚胎的体外培养与冷冻保存技术已基本成功,但猪这方面的研究却不足。本文就猪早期胚胎的体外培养     

胚胎生殖细胞体外培养体系研究进展

本文简述了胚胎生殖细胞(Embryonic GermCells，EG细胞)生物学特性，原始生殖细胞生存的维持需要有饲养层或应用条件培养基，现在大多数的培养要加入细胞因子以维持其生存和增殖。本文作一简述。