SPF鸡嗉囊和盲肠内容物乳酸菌的分离与鉴定

为了分离SPF鸡嗉囊和盲肠中的乳酸菌。用BL和乳酸杆菌选择性培养基进行菌种分离，通过生化试验、乳酸纸层析等方法进行鉴定。结果自SPF鸡嗉囊和盲肠中分离到产酸能力强的菌株7株，经鉴定为唾液乳杆菌、发酵乳杆菌和肠球菌为主。其中嗉囊中以唾液乳杆菌为主，盲肠中以发酵乳杆菌和肠球菌为主。     

健康鸡嗉囊和盲肠内容物正常菌群的分离与鉴定

用血琼脂平板和乳清琼脂平板,采用集性没食子酸厌氧培养法,从健康非免疫产蛋母鸡的嗉囊和盲肠内容物中分离出正常菌群,地其中２１株瘘性厌氧的无芽胞杆菌和球菌,从革兰氏染色特性、形态特性、需氧生长条件和生化反应等方面进行了初步鉴定。结果其中有类肠膜明串珠菌１株,肠膜明串珠菌１株,粪链球菌３株,屎锭球菌１株,鸡肠链球菌１少酸链力３株,乳链球菌１株,假长双歧杆菌１株,星状双歧杆菌１株,嗜酸乳杆菌１株,嗜粪乳杆     

鸡消化道乳杆菌的分离及鉴定

用ＭＲＳ培养对４０日龄ＳＰＦ鸡及健康鸡的嗉囊,十二指肠,空肠,盲肠中的乳酸菌进行分离和计数。经过分离和纯化获得６种乳酸菌,一株为球菌,五株为杆菌,分别命名为ＣＸ００１,ＣＸ００２,ＣＸ００３,ＣＸ００４,ＣＸ００５和ＣＸ００６。根据生长速度,耐酸耐胆汁对肠膜粘附试验,我们筛选出两种乳杆蓖ＣＸ００４和ＣＸ００６,作为益生素候选菌种。     

肉鸡嗉囊内容物中乳杆菌鉴定

本文对艾维茵肉仔鸡嗉囊内容物中的乳杆菌进行调查,从16份样品中,共分离到58株乳杆菌,鉴定为12个种,其中植物乳杆菌、唾液乳杆菌、短乳杆菌、双发酵乳杆菌4个种占分离菌株数的66%,确认是肉鸡嗉囊内容物中的优势种群.     

鸡消化道乳杆菌的分离及鉴定

用ＭＲＳ 培养基对４０ 日龄ＳＰＦ 鸡及健康鸡的嗉囊、十二指肠、空肠、盲肠中的乳酸菌进行分离和计数。经过分离和纯化获得６ 种乳酸菌, 一株为球菌, 五株为杆菌, 分别命名为ＣＸ００１ 、ＣＸ００２ 、ＣＸ００３ 、ＣＸ００４ 、ＣＸ００５ 和ＣＸ００６ 。根据生长速度、耐酸耐胆汁对肠粘膜粘附试验,我们筛选出两种乳杆菌ＣＸ００４ 和ＣＸ００６ ,作为益生素候选菌种。经生化试验、Ｇ＋ Ｃｍｏ１ ％ 测定,初步鉴定ＣＸ００４ 为短乳杆菌,但ＣＸ００６ 的种类还不能确定。结果表明这两种乳杆菌可作为禽用益生素的优选菌株。     

鸡消化道内容物乳酸菌的分离与鉴定

为了分离鸡消化道中的乳酸菌,用BL和改良MRS培养基进行菌种分离,通过生化试验、乳酸纸层析等方法进行鉴定,结果自鸡嗉囊和盲肠中分离到产酸能力强的菌株8株,经鉴定为唾液乳杆菌、发酵乳杆菌和肠球菌为主。其中嗉囊中以唾液乳杆菌为主,盲肠中以发酵乳杆菌为主,其次是唾液乳杆菌和肠球菌。     

鸡消化道内容物乳酸菌的分离与鉴定

为了分离鸡消化道中的乳酸菌,用BL和改良MRS培养基进行菌种分离,通过生化试验、乳酸纸层析等方法进行鉴定,结果自鸡嗉囊和盲肠中分离到产酸能力强的菌株8株,经鉴定为唾液乳杆菌、发酵乳杆菌和肠球菌为主.其中嗉囊中以唾液乳杆菌为主,盲肠中以发酵乳杆菌为主,其次是唾液乳杆菌和肠球菌.     

SPF鸡肠道乳酸菌和肠球菌的分离鉴定与分布

应用MRS琼脂和乳酸杆菌琼脂培养基从SPF鸡肠道分离益生菌并计数,通过菌株形态学观察、生理生化试验和16 S rDNA基因序列分析与系统发育进化分析进行种属鉴定。结果发现,分离的6种益生菌中,4种乳酸菌分别为口乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、唾液乳酸杆菌、戊糖片球菌,2种肠球菌分别为粪肠球菌和屎肠球菌;在鸡肠道中,乳酸菌与肠球菌盲肠密度最高,乳酸菌数量显著大于肠球菌数(P0.05)。     

短乳杆菌的分离鉴定及其对鸡肠粘膜SIgA分泌的影响

用RS培养基，从SPF鸡的消化道分离到1株乳酸杆菌。该菌生长速度快，耐酸，耐胆汗，对肠道粘膜有较强的粘附力，能提高鸡肠粘膜的SIgA滴度。对该菌的形态特征、培养特性、生理生化特性、药物的敏感性及G C等进行试验，证明该菌为短乳杆菌。该菌可作为禽用闪生素的候选菌株。     

奶牛阴道嗜酸乳杆菌的分离鉴定

应用选择性培养基从奶牛阴道中筛选出1株产酸革兰氏阳性杆菌,通过形态学、培养特性、生化特性、16SrDNA基因序列测定与同源性分析,确定该菌为嗜酸乳杆菌;动物试验表明,该菌无致病性.本试验为进一步研究调节奶牛阴道微生态平衡、防治奶牛子宫内膜炎的微生态制剂奠定基础.     

SPF鸡的饲养管理与隔离器的安装使用

SPF鸡是一种无特定病原的实验动物。SPF鸡对各种病原微生物有敏锐的感受性,且重复性好,能够保证实验结果的精确性。SPF鸡饲养环境监测主要是对噪声、照明、空气中细菌及粉尘、温度、湿度、气流速度、换气次数、系统压力梯度和过滤器的过滤效率等进行测定,实施良好的监控机制是确保SPF鸡质量的重要措施,因此应特别注意饲养SPF鸡隔离器的安装使用,并加强对SPF鸡的饲养管理。     

鸽源支原体的分离鉴定

对来自武汉市郊某养鸽专业户及市场食用鸽共７０只采集口腔咽部粘膜拭子及其中１５只鸽子的气管、气囊和肺等材料进行了支原体的分离鉴定，其中口腔咽部拭子几乎１００％能分离到支原体，但均与细菌共存而不易纯化，其他部位均未分离到支原体。对已纯化的３４个分离物中的１９个进行了鉴定，用鸽支原体ＭＭＰ１株、鸽口支原体ＭＭＰ４株及鸽鼻支原体６９４株作为标准抗原制备抗血清，以代谢抑制试验进行了血清学鉴定。结果表明，所有分离物均能在修改ＦＭ－４培养基上生长，在固体培养基表面形成典型的“油煎蛋”状或“脐状”菌落；光镜下和电镜负染后观察，菌体多呈现球状、点状等多形态，经超薄切片后观察，菌体外无细胞壁包绕，仅有由３层单位膜构成的细胞膜结构，所有分离物在无醋酸铊及青霉素的培养基上连续传５代不回复为细菌形态，能在含有猪血清的培养基上生长，其中５株水解精氨酸而不发酵葡萄糖，１４株发酵葡萄糖但不水解精氨酸。经抗血清代谢抑制试验鉴定，前者为鸽支原体，后者为鸽口支原体。     

鸡源耐镉乳酸菌株的分离与鉴定

本试验旨在从鸡肠道中分离筛选出耐镉(Cd)的乳酸菌,为将其开发应用于防控家禽饲料重金属Cd污染提供理论基础。取鸡肠道内容物的样品进行乳酸菌分离,以耐受100 mg/L的Cd为标准筛选乳酸菌,采用分子生物学方法鉴定菌株。对筛选出的乳酸菌株进行生长性能、耐Cd性能及Cd吸附性能等测定。结果表明：本试验共筛选出5株耐Cd乳酸菌,分别为1株约氏乳杆菌Cd3-1和4株卷曲乳杆菌Cd1-1、Cd5-2、Cd4-5和Cd8-2。其中Cd3-1、Cd5-2和Cd8-2菌株最高可耐受1 000 mg/L的Cd,而Cd1-1和Cd4-5菌株最高可耐受400 mg/L的Cd。各菌株对50 mg/L Cd的吸附率随溶液pH的升高而增加,在pH为6.0和7.0时Cd的吸附率均显著高于pH为2.6时Cd的吸附率(P<0.05)。5株乳酸菌均可耐受0.3%的胆盐,且可抑制金黄色葡萄球菌的生长。综合上述结果,本试验从鸡肠道中分离筛选鉴定出5株耐Cd乳酸菌,包括1株约氏乳杆菌和4株卷曲乳杆菌,在pH接近中性的条件下,对Cd的吸附率可达30%。     

河北省鸡病原性大肠杆菌的分离与鉴定

从河北省不同地区的发病鸡场分离培养出91株大肠杆菌，经致病力试验鉴定为病原性大肠杆菌，血清学鉴定，除有23株未能定型外，其余68株共鉴定出13个血清型，其中以O78、O2、O111、和O35等5个血清型检出率较高，分别占定型菌株的33．80％、26．50％、11．80％、5．88％和5．88％，而O78，O2和O111仅3个血清型却拥有49个分离株，占定型菌株的72．10％。     

Experimental Infection of Mycoplasma ovipneumoniae in SPF Chicken Embryos

In order to evaluate the SPF chicken embryos as a candidate of the experimental model of Mycoplasma ovipneumoniae (Mo) infection,the 7-day-old SPF chicken embryos were infected with different concentrations of Mo(10⁸,10⁹ and 10¹⁰ ccu/mL) by injection of vitelline fluid and allantoic cavity.The mortality and Mo detection rate (PCR detection and isolation) of infected chicken embryos were employed to evaluate the optimal inoculation route,dose and sampling site.Three different isolates of Mo were submitted to injection of chicken embryos for pathogenicity comparison.The results showed that the optimal inoculation route and dose were vitelline fluid injection with 0.2 mL (10⁹ ccu/mL) Mo per embryo and the sampling site for detection was also vitelline fluid.Three Mo isolates revealed good infectivity and lethality to the chicken embryo.The chicken embryos mortality caused by FL3 strain (45%) and MoGH3-3 (40%) were both higher than that by A3 strain (25%),but with no significance (P>0.05).The detection rate of Mo from the chicken embryos in FL3 group (100%) was higher than that of MoGH3-3 strain(85%) and that of A3 strain (90%),but with no significance(P>0.05).This experiment preliminarily proved that the SPF chicken embryos could be infected and partially killed by Mo,and the virulence of different strains of Mo to the chicken embryos was different.The results provided the data for further establishment of the chicken embryo infection model of Mo,which would benefit the research on Mo pathogenicity and vaccine development.     

绵羊肺炎支原体人工感染SPF鸡胚的研究

为探索SPF鸡胚作为绵羊肺炎支原体实验室感染模型的可行性,本试验用不同浓度绵羊肺炎支原体（10⁸、10⁹、10¹⁰ ccu/mL）经由卵黄囊和尿囊腔两个部位接种7日龄SPF鸡胚,通过统计鸡胚死亡情况和不同鸡胚组织样品中绵羊肺炎支原体检测阳性率（PCR检测和支原体分离鉴定）,确定绵羊肺炎支原体鸡胚感染方式、感染剂量和最佳分离部位,再用3株不同来源的绵羊肺炎支原体分离株感染鸡胚,观察其对鸡胚的致病力。结果表明,绵羊肺炎支原体感染鸡胚最佳接种途径为卵黄囊接种,感染剂量为10⁹ ccu/mL、0.2 mL/只,最佳分离部位为卵黄液。3株支原体均能感染和致死鸡胚,并均能从卵黄液中分离到绵羊肺炎支原体,但对鸡胚的致病性存在一定差异：FL3株致鸡胚死亡率为45%,略高于MoGH3-3株（40%）,二者均高于A3株（25%）,但差异均不显著（P>0.05）;FL3株鸡胚检测阳率为100%,高于MoGH3-3株（85%）及A3株（90%）,但差异也不显著（P>0.05）。本试验初步确定了绵羊肺炎支原体可感染和致死SPF鸡胚,不同分离株对SPF鸡胚致病力有差异,表明SPF鸡胚可作为下一步建立绵羊肺炎支原体实验室感染模型的候选,为绵羊肺炎支原体致病性研究和疫苗研制奠定基础。     

一株鸡传染性贫血病毒对不同日龄SPF鸡的致病性研究

为评价鸡传染性贫血病毒AV1550株的致病性,取1日龄、7日龄和14日龄SPF鸡分别经胸部肌肉注射不同病毒含量的病毒液,同时设置正常对照,隔离饲养观察21日。感染后14日采血测定红细胞压积,21日统计死亡率、体重变化以及胸腺、骨髓、法氏囊病变情况并测定1日龄SPF鸡感染后不同组织中的病毒载量。结果表明,1日龄SPF鸡感染AV1550株后,表现出精神沉郁、增重减缓、贫血等明显的临床症状,死亡率为53.9%;死亡鸡或观察期结束时存活鸡剖检,可见胸腺萎缩,骨髓变成淡黄色;不同剂量感染后14日,均能引起红细胞压积显著下降;21日时,胸腺病毒载量最高,可达106.7copies/mg 。7日龄SPF鸡感染后,出现增重减缓,高感染剂量（100000EID50）出现贫血,部分鸡出现胸腺萎缩和骨髓病变,但病变率低于30%。14日龄SPF鸡感染后,不引起明显临床症状。研究证实,CAV对SPF鸡的致病性具有明显的日龄依赖性,红细胞压积降低、骨髓病变、胸腺萎缩以及胸腺病毒载量测定可作为评价CAV致病的指标。