海南飞机草病原真菌鉴定、致病力测定及其寄主范围分析

对海南多个市县的飞机草发病情况进行调研发现,飞机草叶斑病受自然环境及病菌种类的影响,从发病样品上分离获得46株病原真菌。经过形态学观察与分子鉴定比对,确定飞机草的重要病原真菌分别为:链格孢Alternaria alternata、新月弯孢Curvularia lunata和尖孢镰刀菌Fusarium oxysporu。通过离体叶片针刺法和活体接种法对病源真菌致病力进行测定,结果显示,强致病力菌株12个(占26.09%),中等致病力菌株13个(占28.26%),弱致病力菌株19个(占41.30%),无致病力菌株2个(占4.3%),其中链格孢菌株LGB100501、LGB100401和弯孢菌株WB110216表现出较高的致病力。利用11个高致病力菌株针对8种海南常见杂草进行寄主范围测试,结果表明,不同菌株致病力存在差异,仅有13.6%的供试杂草对这些菌株表现出高度和中度感病。     

玉米弯孢菌叶斑病产量损失测定及药剂防治

玉米弯孢菌叶斑病产量损失测定结果表明,产量损失率与玉米品种及弯孢菌菌株密切相关,相同菌株对不同玉米品种及不同菌株对相同玉米品种产量影响有差异,产量损失幅度为10.10%～48.62%;玉米弯孢菌叶斑病影响玉米产量构成,使玉米穗变短、细,百粒重减少.通过药剂防治试验结果看出,药剂防治能有效地防治玉米弯孢菌叶斑病.70%代森锰锌WP500倍液防治效果最好,达95.46%。     

黑龙江省玉米弯孢菌叶斑病病原鉴定及其产细胞壁降解酶和漆酶活性分析

对黑龙江省感染玉米弯孢菌叶斑病的叶片进行采集,利用组织分离法对病原菌进行分离,并进一步单孢纯化,经形态学特征并结合真菌核糖体(Internal Transcribed Spacer,ITS)序列分析确认病原菌为新月弯孢菌(Curvu-laria lunata)。细胞壁降解酶和漆酶活性测定显示,病原菌可产生多聚半乳糖醛酸酶(PG)、聚甲基半乳糖醛酸酶(PMG)、纤维素酶(β-1,4-内切葡聚糖酶,Cx)和漆酶(Laccase),PG和PMG的活性在第4天有一个峰值,在第10天PG有一个小峰值;而Cx的活性较低且变化幅度不大。新月弯孢菌生长到72h漆酶酶活达到最高峰,随后酶活逐渐下降;各种酶可连续产生,首先是漆酶酶活迅速增加,其次是PMG,再次是PG,而Cx的变化较小。研究首次发现新月弯孢菌产漆酶,推断其可能也在病菌侵入过程中发挥了重要作用。     

部分玉米种质资源对弯孢菌叶斑病的抗性评价

利用田间自然条件下人工接种的方法,对94份玉米自交系和杂交种(组合)进行抗玉米弯孢菌叶斑病的鉴定,同时筛选出用作QTL分析群体构建的抗病和感病自交系。结果表明,供试自交系一般表现为中抗和中感,没有对新月弯孢菌免疫、高抗和高感的材料。抗病材料只有8个,可作为玉米弯孢菌叶斑病QTL分析群体构建的材料。杂交组合中抗病材料占了多数,而且出现了5个高抗组合。     

解淀粉芽孢杆菌B9601-Y2对玉米叶斑病的防治效果

采用凹玻片法测定解淀粉芽孢杆菌B9601-Y2(Y2)发酵液、上清液和芽孢对4种病害的孢子萌发抑制率,研究Y2对玉米叶斑病的防治效果。结果表明,Y2发酵液、上清液和芽孢对大斑病菌抑制率分别为82.72%、76.71%、4.89%,对小斑病菌抑制率分别为88.04%、82.85%、5.63%,对圆斑病菌抑制率分别为84.90%、79.90%、10.81%,对弯孢霉叶斑病菌抑制率分别为98.79%、95.05%和6.23%。温室盆栽试验表明,Y2的最佳施用浓度为1×10~7CFU/m L,最佳施药时间为接种病菌前8 h,对4种叶斑病的预防效果分别达80.83%、84.62%、84.33%和87.74%。田间试验表明,Y2悬浮剂对4种病害的预防效果分别为65.90%、69.21%、67.97%和70.22%。     

玉米弯孢病菌毒素的研究进展

玉米弯孢菌毒素作为病原菌的致病因子之一,在玉米弯孢菌叶斑病病害的发生、发展过程中具有明显的致病作用,对其进行系统深入的研究可以更好地了解玉米弯孢菌叶斑病的致病机理,探索新的防治途径。本文对玉米弯孢病菌毒素的培养条件、理化性质、生物活性、致病机理的研究作了概述。     

玉米弯孢菌叶斑病菌致病性遗传变异

通过对采集国内各地的玉米弯孢叶斑病菌接种玉米不同品种,做寄主-病菌互作试验,结果发现,病菌菌株和玉米品种在地域上存在一定的相关性,本地菌株对当地主推玉米品种具有一定的致病专化性,证明病菌致病性遗传和分化与玉米品种遗传背景有关。     

张家口市鲜食玉米病害调查及防治药剂的筛选

2013—2015年,对张家口市鲜食玉米病害进行了田间调查及防治药剂的筛选。通过症状观察、病原鉴定及采用生长速率法测定了10种杀菌剂对病菌的抑制作用。结果表明:张家口市鲜食玉米病害共12种,其中鲜食玉米大斑病、纹枯病和弯孢霉叶斑病发生普遍,危害严重。在10种杀菌剂中,13.3%抑霉唑硫酸盐水剂1 000倍液、35%苯甲·咪鲜胺水乳剂500倍液、32.5%苯甲·嘧菌酯悬浮剂900倍液和4%四氟醚唑水乳剂500倍液对鲜食玉米大斑病菌的抑制效果均高于91%;13.3%抑霉唑硫酸盐水剂1 000倍液和35%苯甲·咪鲜胺水乳剂500倍液对纹枯病菌的抑制效果均为93%;32.5%苯甲·嘧菌酯悬浮剂900倍液、13.3%抑霉唑硫酸盐水剂1 000倍液、4%四氟醚唑水乳剂500倍液和35%苯甲·咪鲜胺水乳剂500倍液对弯孢霉叶斑病菌的抑制效果为94%。     

玉米尾孢菌,弯孢菌叶斑病发病规律初探

尾孢菌 (Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａｍａｙｄｉｓ)和弯孢菌(Ｃｕｒｖｕｌａｒｉａｌｕｎａｔａ(Ｗａｋｋｅｒ)Ｂｏｅｄｉｊｎ)叶斑病均为发生在玉米叶片上的病害。 1996年辽宁省部分地区严重发生玉米弯孢菌斑病(拟眼斑病 )和尾孢菌斑病 (灰斑病 ) ;1997年作物生育期间高温多湿 ,庄河地区玉米普遍发病 ,其中沈单 7号、掖单 13号、东试 7号等品种表现较为严重 ;1998年发病比上一年稍轻 ,玉米叶斑病主要表现为拟眼斑病和灰斑病 ,发生也较重。拟眼斑病和灰斑病可使玉米减产 10 %～ 2 0 %,个别严重地块减产可达2 5 %～ 30 %,所以研究玉米尾孢菌、弯孢…     

玉米弯孢霉叶斑病菌产生的细胞壁降解酶的致病作用研究

研究表明玉米弯孢霉叶斑病菌在活体内外可以产生一系列的细胞壁降解酶（PG、PMG、Cx），并且几种酶的产生有一定的时间顺序，首先是PG和PMG的产生，PG活性高于PMG的活性，而纤维素酶的活性变化不大，而且活性相对较弱，对掖单13和浓试29的损伤率，表明感病品种被损伤的程度比抗病品种强，而且PG对两个品种的影响较为明显。说明PG在弯孢菌中起主要作用。     

7株木霉菌对火龙果3种病原菌的拮抗作用

本研究利用对峙培养及发酵液、挥发性物质的抑菌活性测定,分析了7株木霉菌对火龙果溃疡病菌、煤烟病菌和白绢病菌的拮抗作用,并测定木霉菌几丁质酶活性。结果表明：通过对峙培养发现7株木霉菌对火龙果3种病原菌均有一定的抑制作用,其中木霉菌HL135、FJ069和2325-2分别对火龙果溃疡病菌、煤烟病菌和白绢病菌抑制率最大,其抑制率分别为(67.60±0.85)%、(84.85±5.25)%和(80.63±1.20)%。7株木霉菌的发酵液和挥发性物质对3种病原菌也有不同程度的抑制作用。通过对木霉菌几丁质酶活性测定,发现木霉菌SC012具有较高的几丁质酶活性。这些结果将为开发木霉菌复合制剂防治火龙果病害提供理论基础。     

UvSMEK1, a Suppressor of MEK Null,Regulates Pathogenicity,Conidiation and Conidial Germination in Rice False Smut Fungus Ustilaginoidea virens

Rice false smut, which is caused by Ustilaginoidea virens, is an emerging disease of rice spikelets in rice-growing areas worldwide. However, the infection mechanism of U. virens on rice spikelets is still unclear. Here, we characterized a suppressor of mitogen-activated protein kinase kinase or ERK kinase(MEK) null(UvSMEK1) in U. virens that is conserved among filamentous fungi. Compared with wild type U. virens strain P-1, Uv SMEK1 deletion mutants were defective in pathogenicity and conidial germination. In addition, conidiation of UvSMEK1 deletion mutants was significantly reduced on yeast extract tryptone(YT) plates, but increased in YT broth compared with the wild type. Compared with Uv SMEK1 expression level during the vegetative mycelia and conidiation stages, UvSMEK1 dramatically increased during infection of rice florets. Surprisingly, the Uv SMEK1 deletion mutants exhibited higher tolerance to H2 O2 and NaCl. In summary, presented evidence suggested that UvSMEK1 positively regulated pathogenicity, conidial germination and conidiation in YT broth, and negatively regulated conidiation on YT medium and tolerance to oxidative and osmotic stresses. The results enhance our understanding of the regulatory mechanism of pathogenicity of U. virens, and present a potential molecular target for blocking rice infection by U. virens.     

稻瘟病菌分生孢子发芽和附着胞形成的影响因素研究

在8种培养基膜,多种cAMP、IBMX浓度梯度的琼脂表面膜,不同营养液及pH值条件下,研究了稻瘟病分子孢子发芽和附着胞形成的状况,并对稻瘟病拮抗细菌培养液的作用进行了研究。稻瘟病菌(Magnaporthe grisea) 91-11B1的分生孢子悬浮液浓度在10000~1000个/mL 和pH值在7.0为最适孢子萌发条件,但不影响附着胞的形成。疏水基物表面、营养饥饿或洋葱表皮细胞表面可以刺激附着胞形成。2.5 mmol/L cAMP和8.0 mmol/L磷酸二酯酶抑制剂IBMX显著地促进附着胞的形成。与去离子水和水洗法相比,自来水和振落法获得的分生孢子更有利于附着胞的形成。筛选到3株对孢子发芽及附着胞形成有强烈抑制作用的拮抗细菌     

10种无机盐对橡胶树多主棒孢病菌的抑菌作用及对粗毒素的钝化

以橡胶树棒孢霉落叶病病原菌及其产生的粗毒素为供试材料,研究了10种无机盐对多主棒孢菌株菌丝生长、分生孢子萌发的抑制作用和对其粗毒素的钝化作用。结果表明:CuSO4.5H2O、FeCl3和FeSO4.6H2O在2～5mg/mL浓度范围内对多主棒孢病菌菌丝生长及其孢子萌发都有很强抑制作用,菌丝生长抑制率为100%,孢子萌发率为0。KMnO4在0.5～5 mg/mL浓度范围内能够完全抑制孢子的萌发,而1～5 mg/mL浓度范围内却促进菌丝的生长。KMnO4和FeCl3在浓度为0.5 mg/mL时对该毒素均有很强的钝化作用,萎蔫指数分别为2.04%和3.97%。     

Antifungal properties of quinoa (Chenopodium quinoa Willd) alkali treated saponins against Botrytis cinerea

Quinoa (Chenopodium quinoa Willd) is a Latin American food staple readily available in large quantities in Peru, Bolivia and Ecuador. The outer husk of the grain is removed prior to consumption to reduce its bitter taste. At present, quinoa husks are considered as a by-product with no commercial value, despite its high content of triterpenoid saponins (20–30%). Due to this, the present work was undertaken to test if quinoa saponins have antifungal properties against Botrytis cinerea and if this activity is enhanced after alkaline treatment, since recent reports indicate that alkaline treatment of quinoa saponins increase their biological activity. Six products were tested against B. cinerea: (1) non-purified quinoa extract, (2) purified quinoa extract, (3) alkali treated non-purified quinoa extract, (4) alkali treated purified quinoa extract, (5) non-purified quinoa extract treated with alkali but without thermal incubation and (6) purified quinoa extract treated with alkali but without thermal incubation.

Untreated quinoa extracts showed minimum activity against mycelial growth of B. cinerea. Also, no effects were observed against conidial germination, even at 7 mg saponins/ml. However, when the saponin extracts were treated with alkali, mycelial growth and conidial germination were significantly inhibited. At doses of 5 mg saponins/ml, 100% of conidial germination inhibition was observed, even after 96 h of incubation. Fungal membrane integrity experiments based on the uptake of the fluorogenic dye SYTOX green showed that alkali treated saponins generate membrane disruption, while non-treated saponins had no effects.

The higher antifungal activity of alkaline treated saponins is probably due to the formation of more hydrophobic saponin derivatives that may have a higher affinity with the sterols present in cell membranes.     

玉米圆斑病拮抗菌芽孢杆菌21的鉴定及抑菌研究

利用形态特征、培养性状、生理生化特征及16Sr DNA序列分析,对获得的具有生防潜力的芽孢杆菌21进行鉴定,确定该菌株为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis spp.)。利用显微观察法,研究枯草芽孢杆菌21对玉米圆斑病菌的抑制作用,结果显示,该菌株不同浓度发酵液处理后玉米圆斑病菌孢子萌发率出现下降趋势,萌发率最低为0;经发酵液处理后的玉米圆斑病菌芽管产生畸形,在发酵液浓度为90%时,芽管畸形最严重;处理后的玉米圆斑病菌菌丝出现畸形,菌丝中的内容物有外渗趋势。     

7株拮抗细菌对蝴蝶兰叶基腐病菌的抑菌作用及其小区防效评价

以7株拮抗细菌对蝴蝶兰叶基腐病菌进行室内抑菌及小区防病试验。室内平板对峙法结果表明:以兰花内生枯草杆菌FJAT-9986的拮抗作用最强,其抑菌率为61.90%;JK-2抑菌率为50.44%;FJAT-8769的拮抗作用最弱,抑制率仅为34.09%。抑菌圈法复筛测定结果表明,菌株JK-2对蝴蝶兰叶基腐病菌的抑制作用最强,其抑菌圈直径为22.42 mm。拮抗细菌对病原菌孢子萌发实验结果表明,稀释50倍后,JK-2显示出强的抑制病原菌孢子的萌发作用,对蝴蝶兰叶基腐病的田间防效为76.7%,表明JK-2可作为田间防治的菌株。     

油樟油对植物病原真菌活性的抑制作用

对油樟油抗菌活性研究表明,该油对水稻稻瘟病菌、松赤枯病菌、玉米纹枯病菌、玉米弯胞病菌、小麦赤 霉病菌及胶胞炭疽杆菌的菌丝生长有强烈的抑制作用;半抑制浓度( IC50 ) 、最低抑制浓度(M IC)和最低杀菌浓度 (MBC)显示,油樟油对玉米纹枯病菌的抑制作用最强,抑制活性高于樟属其它精油;处理菌丝生长量减少,孢子萌 发受到抑制;电镜下观察菌丝的横切面表明,处理菌丝的细胞壁消失,原生质解体。     

玉米茎腐病拮抗放线菌的筛选及抑菌促生活性鉴定

以禾谷镰孢菌为靶标,采用稀释培养法和平板对峙法从采集的玉米连作土壤中分离筛选出具有拮抗活性的放线菌菌株,选取1株拮抗效果最佳的菌株进行形态学、生理生化特征和系统发育分析,并对其进行抑菌活性试验,挖掘对玉米茎腐病致病菌-禾谷镰孢(Fusarium graminearum)有较高拮抗效果的根际促生菌资源。结果表明,玉米连作土壤中分离得到5株禾谷镰孢菌拮抗菌株,其中菌株G1为高效拮抗菌株。经形态学、生理生化结合16S rDNA将菌株鉴定为公牛链霉菌(Streptomyces tauricus)。拮抗菌株G1发酵液对禾谷镰孢的菌丝生长和孢子萌发均有明显的抑制作用,具有分泌吲哚乙酸和异羟肟酸型铁载体的能力。公牛链霉菌G1在由禾谷镰孢病菌引起的玉米茎腐病防治中具有良好的应用开发潜力。