植物体细胞胚胎发生的研究进展

体细胞胚胎发生在植物组织培养中是一种普遍现象。介绍了植物体胚发生的方式和起源,综述了体胚发生过程中多糖类物质、蛋白质和核酸的变化,体胚发生过程中内源激素的变化和外源激素的作用等研究进展。     

龙眼体细胞胚胎发生过程中内源多胺的变化

采用高效液相色谱测定了龙眼胚性愈伤组织体胚发生过程中内源多胺含量的变化.结果表明:龙眼胚性愈伤组织中内源多胺含量比非胚性愈伤组织高;体胚发生过程中内源多胺含量变化趋势大致呈“M”状,在胚性愈伤组织Ⅱ和球形胚阶段转折;内源多胺含量的变化先于形态学的变化.     

灵发素(LFS)对诱导半夏体细胞胚胎发生过程中内源激素含量的影响

以半夏叶柄为材料,比较MS+BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L(CK)和MS+LFS 0.3 mg/L(Lingfasu,LFS,灵发素)2种培养基在诱导体细胞胚胎发生和发育过程中内源激素的变化差异。结果表明:在半夏体细胞胚胎发生和发育过程中,2个处理组内源激素变化趋势,除ABA大致呈"M"状外,IAA、GA_3和ZR激素大致呈"∧"状;在半夏体胚发生的重要时期(胚性愈伤组织时期和早期胚时期),LFS处理组中IAA和ABA的含量显著高于CK组,ZR在早期胚时期高于对照29.0%,GA_3含量以CK组含量较高。此结果表明,LFS对半夏体细胞胚胎的发生和发育过程中内源激素IAA、ZR、ABA和GA_3的调控起着重要作用。     

甘蔗愈伤组织分化绿苗内源激素变化规律研究

对甘蔗愈伤组织分化过程中的内源激素进行了测定,分析,结果表明：甘蔗愈伤组织分化过程中,伴随愈伤口分化过程中的变化,内源激素发生一系列的变化,IAA的强烈合成与胚性细胞的发生相联系,当胚性细胞大量发生时,IAA的合成达到峰值,当CTK达到峰值时,分化苗大量发生,而GA1 3的合成和分化苗的长高密切相关,GA1 3在分化20d才达到峰值,分化20d后,各种内源激素含量下降并趋向稳定。     

甘蔗愈伤组织分化绿苗内源激素变化规律研究

对甘蔗愈伤组织分化过程中的内源激素进行了测定、分析.结果表明:甘蔗愈伤组织分化过程中,伴随愈伤分化过程中的变化,内源激素发生一系列的变化,IAA的强烈合成与胚性细胞的发生相联系,当胚性细胞大量发生时,IAA的合成达到峰值,当CTK达到峰值时,分化苗大量发生,而GA1+3的合成和分化苗的长高密切相关,GA1+3在分化20 d才达到峰值,分化20 d后,各种内源激素含量下降并趋向稳定.     

内源激素对橡胶树花药体细胞胚发生的影响

以巴西橡胶树花药为外植体,对巴西橡胶树再生过程中不同类型愈伤组织的内源激素含量及比值进行测定。结果表明:过高或过低的内源激素含量和不同内源激素含量比,大多会导致橡胶树外植体在分化过程中出现非胚性愈伤和畸形胚,因此橡胶树花药体细胞胚再生过程与其内源激素密切相关。     

香榧幼胚发育与胚性感受态之间的相关性

以突破种鳞第8周至第15周种子的香榧Torreya grandis ‘Merrillii’幼胚为外植体,研究了香榧幼胚胚龄、生长素等对香榧胚性愈伤组织以及体细胞胚直接发生的影响,筛选出高胚性感受态的香榧幼胚胚龄,并根据幼胚内源吲哚乙酸（IAA）和脱落酸（ABA）质量分数检测结果,初步确定了高胚性感受态的香榧幼胚生理特点。结果表明:在SH附加0.1 mg·L-1 NAA培养基中培养,第9周幼胚的胚性愈伤组织发生率最高,为48.3%,第10周幼胚的体胚直接发生率最高,为42.7%;而培养于SH基本培养基中的第14周幼胚直接萌发率最高,为65.1%。香榧不同胚龄幼胚内源ABA及IAA质量分数检测结果表明:不同发育时期香榧幼胚的内源IAA及ABA质量分数具显著差异（P < 0.05）。其中香榧第8周幼胚内源IAA的质量分数最高,为53.90 ng·g-1,随着胚龄的逐渐增加,内源IAA质量分数呈下降趋势,第15周内源IAA质量分数最低,为35.60 ng·g-1。内源ABA质量分数随着胚龄的增加呈先缓慢下降,再快速上升,后下降,其中第15周达到最大值,为160.20 ng·g-1。通过对香榧幼胚离体培养及内源激素的测定,发现香榧第8~12周幼胚具有较高的胚性感受态。该研究结果对维持香榧幼胚高胚性感受态,开展香榧胚性愈伤组织及体胚发生培养条件的优化提供了技术指导。     

植物体细胞胚发生的研究进展

体细胞胚发生是植物界的一个普遍现象,具有广阔的应用前景和巨大的潜在经济价值。从体胚发生的形态学研究、内源激素变化、抗氧化物酶活性变化、蛋白质和糖代谢以及基因表达等方面进行了综述,以期为进一步深入研究体细胞胚的发生发育规律及植物高效再生体系的建立提供参考。     

大豆内源激素对体内生理代谢调控的研究现状

从大豆内源激素对花芽(序)发育、花荚脱落、子粒蛋白质积累、抗性生理、胚性愈伤组织诱导及外源激素对内源激素的影响等方面探讨了大豆激素与生理代谢的关系。     

不同糖种类及浓度对百子莲‘Big Blue’体胚发生的影响

【目的】研究碳源种类及浓度对体胚诱导的生理调节机制,可为百子莲体胚发生体系优化提供参考。【方法】研究了不同浓度(2%、3%、4%)蔗糖、葡萄糖、麦芽糖对百子莲体胚诱导及发育成熟的影响,并测定了体胚发育成熟期糖代谢、内源激素、氧化胁迫等生理指标。【结果】蔗糖对百子莲体胚发生的效果较好,其次为葡萄糖,麦芽糖较差;在幼胚诱导阶段,3%蔗糖效果较好,胚性细胞诱导数为117.33个/g;在成熟胚发育阶段,2%蔗糖效果较好,幼胚发育成熟胚51.75个/g。碳源对体胚发育糖代谢、激素代谢及氧化胁迫具有显著调节作用。淀粉与蔗糖之间的代谢平衡对百子莲成熟胚发育可能具有决定作用;高浓度的IAA、GA对成熟胚发育不利;H_2O_2含量和SOD活性增强对成熟胚发育不利。【结论】2%蔗糖为百子莲成熟胚发育的较佳碳源,淀粉与蔗糖间的转化、IAA、GA为限制百子莲成熟胚发育的主要因子,可为技术优化和体胚发生理论的研究提供参考。     

攸县油茶胚状体发生及其组织学观察

[目的]研究以攸县油茶(Camellia yuhsienensis Hu)成熟子叶为外植体的胚状体发生情况。[方法]以子叶为外植体,接种于MS+2.0mg/L2,4-D+1.0mg/LKT培养基上,诱导胚性愈伤组织。胚性愈伤组织块转接至以MS为基本培养基,添加不同浓度6-BA和NAA的激素组合的培养基上诱导产生胚状体。取不同发育阶段的组织块制作石蜡切片,进行组织学观察。[结果]成熟子叶块接种于诱导培养基MS+2.0mg/L2,4-D+1.0mg/LKT,15d左右开始出现胚性愈伤组织。胚性愈伤组织转接至培养基为MS+2.0mg/L6-BA+0.6mg/LNAA时胚状体诱导率最高,为87.78%;无激素培养基也能诱导胚性愈伤组织产生胚状体,但诱导率极低,仅为6.67%。组织学观察表明,胚性细胞由愈伤组织表面及其内部邻近的若干细胞分化而来,经过球形胚、心形胚、子叶形胚等不同发育阶段直至成熟胚状体。[结论]诱导胚性愈伤组织分化为胚状体的最佳培养基为MS+2.0mg/L6-BA+0.6mg/LNAA。     

内源激素对黄姜体细胞胚发生的影响

以不同的培养基诱导外植体以建立优良的体细胞胚胎发生系统,并结合其发育过程中内源激素含量的动态变化,进一步探讨黄姜体细胞胚胎发生机理。选择2a生新鲜优良盾叶薯蓣41号,取以腋芽萌发而来的无菌枝条切段,采用MS BA1.5mg/L NAA0.5mg/L、LS BA1.5mg/L和l/2MS NAA1.0mg/L为诱导培养基,对培养过程中的内源激素的动态变化进行了分析。结果表明,高含量的生长素(IAA)、细胞分裂素(Z、ZR)和赤霉酸(GA3)有利于胚性细胞的形成。可为黄姜愈伤组织及体细胞胚胎形成的调控作用提供理论的参考依据,也可为其它植物的组织培养提供参考。     

龙眼胚性愈伤组织体胚发生同步化调控及组织细胞学观察

以龙眼“红核子”胚性愈伤组织为材料 ,对龙眼体细胞胚胎发生进行同步化调控 ,并采用石蜡切片进行组织形态学观察 .结果表明 ,通过控制培养基中 2 ,4-D质量浓度可以调控龙眼体胚的发育进程 ;龙眼胚性愈伤组织的胚胎发生一般是内起源 ,且起源于单细胞     

体细胞胚胎发生及其基因表达的研究进展

在合适的培养条件下,植物体细胞会模仿胚胎发育过程产生体细胞胚胎。体细胞胚胎发生提供一个实验系统,便于研究植物形态建成的分子和细胞机制等方面。文中主要对体细胞胚胎发生的影响因素(激素、胁迫因素和Ca2 等)和该过程中的基因表达与调控方面论述了国内外研究进展。     

中国沙棘体细胞胚胎间接发生与植株再生

以中国沙棘组培苗茎尖为外植体,在1/4 MS基本培养基上,对愈伤组织、胚性愈伤组织及体细胞胚胎进行诱导,探讨植物生长调节剂配比对中国沙棘愈伤组织、胚性愈伤组织的诱导和体细胞胚发生的影响。结果表明:在KT 1.0 mg/L + NAA 0.3 mg/L的最佳组合中,暗培养20 d后,愈伤组织的诱导率达到90.10%;暗培养30 d后,胚性愈伤组织的诱导率达到77.67%;将胚性愈伤组织转移到新鲜诱导培养基上,光培养20 d,平均体细胞胚发生数达到15.48。为了得到完整的再生小植株,将胚状体转移到不含任何生长激素的体细胞胚发育及植株再生培养基上,分析了KT和白砂糖不同浓度的组合对小植株再生的影响。结果发现:WPM + KT 0.05 mg/L + 白砂糖 20 g/L + 琼脂粉 6.5 g/L + CH 0.5 g/L处理上的植株再生率达到60.30%。该研究建立起了完整的中国沙棘体细胞胚胎间接发生的再生体系。      

龙眼体细胞胚胎发生过程中特异表达蛋白的双向电泳分析

以龙眼品种红核子LC2胚性细胞系为材料,进行体细胞胚胎(简称体胚)发生及其同步化调控,获取体胚发生过程中各个主要发育阶段的培养物(胚性愈伤组织、球形胚、子叶形胚、早期成熟胚、中期成熟胚、晚期成熟胚),采用双向电泳对体胚发生过程中特异表达蛋白进行分析.结果表明:(1)龙眼胚性愈伤组织中,pI为4-5的酸性蛋白表达种类最多,在体胚发育的过程中逐渐消失,相反,pI为5-6的微酸性蛋白的表达逐渐增多;(2)体胚发育后期,尤其是成熟胚晚期,分子质量大的蛋白大量减少,分子质量较小的蛋白增多并逐渐积累;(3)虽然在各个发育阶段都会出现一些新的特异蛋白,但是没有改变蛋白质种类逐渐减少的趋势;(4)发现了一些有差异的特异蛋白点,尤其是成熟胚后期,有一系列大分子质量的蛋白消失,新出现了一部分分子质量较小的蛋白,其中几种表达量很大,可能与体胚发育有密切关系.     

龙眼胚性培养物APX同工酶的分析方法建立及其在龙眼体胚发生过程中的变化

以龙眼胚性培养物为材料,进行抗坏血酸过氧化物酶(APX)同工酶的聚丙烯酰胺凝胶电泳分析方法研究,建立一套适合分离龙眼胚性培养物中不同类型APX同工酶的垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳方法;进一步研究了APX同工酶在龙眼体胚发生过程中的变化,发现在胚性愈伤组织、球形胚、子叶形胚3个阶段APX同工酶存在差异.     

植物体细胞胚胎发生的研究进展

体细胞胎发生在植物组织培养中是一种非常普遍的现象,本文对近年来体细胞胚胎发生的研究进行了综述,介绍了体细胞胎的形态发生、植物激素对体细胞胚胎发生的影响,体细胞胚胎发生中的生理生化变化及其胚性基因表达。