生殖激素控制卵泡细胞凋亡的研究进展

研究表明颗粒细胞凋亡是导致卵泡闭锁的重要原因，而颗粒细胞凋亡涉及许多因素，其中生殖激素，如GnRH、FSH、LH、P4、E、A、GH、Mel、inhibin、activin、follistatin等间接地和直接地对卵巢卵泡细胞凋亡发挥重要的综合控制作用，因此正确理解激素对体内、外卵泡及颗粒细胞发育和衰亡的调节网络具有很重要的理论和实践意义。     

生殖激素与哺乳动物卵泡细胞凋亡

生殖激素能够精确地调节生殖系统的发育活动,通过下丘脑-垂体-性腺轴发挥其微妙的生殖调节作用,促进卵泡的发育.调节凋亡的因素很多,激素在其中起着重要的作用.本文主要介绍不同生殖激素在卵泡发育中对卵泡发育和凋亡的影响.     

鹅卵泡颗粒细胞凋亡及其与生殖激素间的关系

采用正处于产蛋期的扬州鹅10只，取其卵泡分离颗粒层细胞，用70％乙醇固定后，应用流式细胞术分析颗粒细胞凋亡情况。同时，用连续采血的方法，每3h采血一次，分离血浆，用放射免疫分析法测定血浆促卵泡素（FSH）、促黄体素（LH）、雌激素（Ez）水平，用以分析激素水平与凋亡间的关系。结果表明：（1）无论是健康卵泡还是闭锁卵泡，颗粒细胞90％以上均处于G1期，2％～6％处于G2期，S期比例最小；（2）闭锁卵泡颗粒细胞凋亡率极显著高于健康卵泡（P〈0．01）；（3）随着健康卵泡直径的增加，颗粒细胞的凋亡呈降低趋势；（4）健康组鹅的FSH、E2水平要高于闭锁组，而LH水平要低于闭锁组。     

生殖激素对雄性生殖细胞凋亡调控的研究进展

随着工业化生产的不断扩大，由环境内分泌干扰物诱发生殖细胞凋亡的报道日趋增多。因此，激素在生殖细胞凋亡中作用的研究再次成为人们关注的焦点。文章对调节雄性生精活动的主要生殖激素如促黄体素、卵泡刺激素、睾酮等对生殖细胞凋亡的调控进行了综述。目的是为了进一步阐明生殖激素在生殖细胞凋亡过程中的作用机制，为男性不育，生殖系统肿瘤等生殖系统疾病的防治及环境毒物致病机理和药物残留学的研究提供理论基础。     

前列腺素对禽类等级卵泡发育的影响

前列腺素是一类由花生四烯酸通过环氧化酶途径合成的脂类介导物。在哺乳动物排卵、受精、胚泡植入、蜕膜化、子宫平滑肌收缩、黄体退化及卵泡发育过程中起重要作用。对于家禽,前列腺素促进其产卵和子宫收缩;在产卵中期,卵巢静脉血浆中前列腺素的浓度为外周血浆浓度的5～20倍。这种高剂量、脉冲式分泌的前列腺素不仅能促进家禽成熟卵泡的排卵,而且可作为促性腺激素的第二信使介导颗粒细胞对cAMP的反应,促进了等级前卵泡颗粒细胞的增殖,进而在优势卵泡的选择过程中起重要作用。     

奶牛发情周期中生殖激素浓度与卵泡发育对比分析

选择从澳大利亚购进的2岁左右发情周期为21d育成母牛10头,用放射免疫测定法（RIA）测定发情周期血清中促卵泡素、促黄体素、孕酮、雌二醇17β的浓度,用B-型超声波诊断仪检测发情周期卵巢卵泡发育变化。结果显示：优势卵泡发育体积和FSH、LH、与E2浓度在奶牛发情周期中主要表现出两个波峰．对比分析显示奶牛在发情周期第12天（优势卵泡峰时）不发情与不排卵主要原因可能是体内前列腺素等激素量不足所致。     

抑制素pCIS基因免疫对黄牛卵泡发育和生殖激素的影响

分别用O(C)、0.75(T1)、1.50(T2)、2.25(T3)和3.0(T4)nag·头'-1的抑制素pCIS基因疫苗免疫58头黄牛,以探讨抑制素pCIS基因免疫对卵泡发育和生殖激素的影响.结果表明,抑制素pCIS基因免疫组的大卵泡(d≥10 mm)数显著高于对照组(P<0.01),中卵泡(7 mm≤d<10 mm)数和小卵泡(4 mm≤d<7 mm)数与对照组均没有显著差异(P>0.05),T1组左右两侧成熟卵泡大小与对照组差异不显著(P>0.05),其它3组两侧成熟卵泡均显著大于对照组(P<0.05).抑制素pCIS基因免疫黄牛的促卵泡素(FSH)平均含量高于对照组,且在加强免疫阶段差异显著(P<0.05);加强免疫后雌二醇(E2)和孕酮(P4)含量均显著增加,且均与对照组差异显著(P<0.05).这些结果表明,抑制素pCIS基因免疫可促进FSH分泌,进而影响黄牛卵泡发育和成熟.     

生殖激素调节颗粒细胞凋亡的机制研究进展

研究表明颗粒细胞凋亡是卵泡闭锁的重要原因,调控颗粒细胞凋亡的因素是多种的,而生殖激素如生长激素、抑制素、活化素、卵泡抑素等间接地和直接地对卵巢卵泡颗粒细胞凋亡发挥重要的综合调控作用,这些激素通过多种信号转导途径调节颗粒细胞的凋亡,成为卵泡的存活因子和死亡因子.这些途径相互交联,构成信号网络,与卵巢的旁分泌、内分泌、自分泌途径一起参与卵泡闭锁和颗粒细胞的凋亡.     

P4及FSH处理对育成母羊卵泡发育和生殖激素分泌的影响

旨在研究孕激素(P₄)与促卵泡素(FSH)联合或单独使用对湖羊育成母羊卵泡发育及生殖激素分泌的影响。选择体况良好、发情周期正常的湖羊育成母羊80只,体质量(35.16±1.66)kg,利用P₄阴道栓+孕马血清促性腺激素+氯前列醇钠(P₄阴道栓+PMSG+PG)方法进行发情周期同步处理,选择撤栓后24～48 h发情的72只羊进入正式试验,撤栓后5 d记为试验第0天。将72只试验羊随机分为9组,每组8只,其中1,2,3组在第0天埋植P₄阴道栓,埋植持续时间分别为5,8,11 d; 4,5,6组用FSH处理,分别在试验的第4,7,10天肌肉注射FSH 2次(早上8:00注射70 IU和下午6:00注射30 IU);7,8,9组P₄+FSH联合处理,在第0天埋植P₄阴道栓,埋植持续时间分别为5,8,11 d,并在第4,7,10天肌肉注射FSH 2次(时间、剂量同4,5,6组)。9组试验羊分别在第0,5,8,11天静脉采血,并手术观察记录卵泡数。结果显示,试验9组卵...     

生殖激素对哺乳动物卵母细胞体外成熟的影响

生殖激素是卵母细胞成熟培养液中必不可少的成分,它对卵母细胞的完全成熟至关重要。本文综述了其化学特性和对卵母细胞成 熟培养的影响,并对其作用机理进行了简单阐述。     

促卵泡素对鸡等级前卵泡细胞发育的影响

实验研究了鸡等级前卵泡颗粒细胞和膜细胞的发育及促卵泡素(FSH)对其增殖的调控作用。形态学观察显示小白卵泡只有1层颗粒细胞,大白卵泡出现2层颗粒细胞,而小黄卵泡和大黄卵泡中则有多层颗粒细胞。结果表明:卵泡颗粒细胞和膜细胞的密度和细胞层厚度随着卵泡发育的等级而增加。卵泡体外悬浮培养表明,FSH显著刺激小黄卵泡和大黄卵泡中颗粒细胞的增殖,但对膜细胞无显著促增殖作用。由此推测,FSH通过刺激颗粒细胞的增殖促使等级前卵泡进入等级发育。     

OPN5对鸭颗粒细胞凋亡、增殖及类固醇激素生成的影响

旨在研究视神经蛋白（neuropsin,OPN5）对鸭颗粒细胞凋亡、增殖及类固醇激素生成的影响。本研究分别对鸭颗粒细胞进行OPN5过表达质粒和OPN5 siRNA处理72 h （n=6）,应用EdU细胞增殖检测技术、流式细胞技术、Annexin V-FITC、RT-PCR、Western blot及ELISA技术系统地检测颗粒细胞的增殖、凋亡情况及生殖相关基因的mRNA、蛋白水平及激素水平的变化规律。结果显示,OPN5过表达能促进鸭卵泡颗粒细胞增殖,抑制鸭卵泡颗粒细胞凋亡;能极显著地促进GnRHR、FSHR、LHR的表达 ,并抑制GnIH、GnIHR的表达（P<0.01）;能显著或极显著上调StAR、CYP11A1、3β-HSD、CYP17A1、CYP19A1的mRNA水平（P<0.05或P<0.01）;显著升高OPN5、3β-HSD及CYP19A1的蛋白表达水平（P<0.05）和极显著升高E2、P4分泌水平（P<0.01）,并极显著降低INHβ的水平（P<0.01）。OPN5 siRNA能够显著降低OPN5的表达水平（P<0.01）,抑制卵泡颗粒细胞增殖并促进凋亡,极显著下调GnRH、GnRHR、FSHR、LHR（P<0.01）,促进GnIH、GnIHR的表达（P<0.01）;并极显著抑制StAR、CYP11A1、CYP17A1的表达（P<0.01）;显著降低OPN5、3β-HSD及CYP19A1蛋白表达水平（P<0.05）及极显著降低E2、P4的分泌水平（P<0.01）,并能极显著升高INHβ的水平（P<0.01）。研究表明,OPN5能促进鸭卵泡颗粒细胞的增殖,抑制其凋亡,促进颗粒细胞中类固醇激素的生成和分泌。     

两种日粮及补添左旋精氨酸对萨福克肉羊繁殖性能及血清激素水平的影响

试验研究了萨福克肉羊妊娠期日粮中添加左旋精氨酸(L-Arg)对其繁殖性能以及血清中激素水平的影响。选择年龄、胎次相近的萨福克母羊105只,分为3组,每组35只。随机选取一组作为对照组:饲喂配方1精料,自然发情;试验Ⅰ组:饲喂配方2精料,外源激素处理(孕酮海绵阴道栓+PMSG+A3),添加L-Arg;试验Ⅱ组:饲喂配方2精料,外源激素处理(孕酮海绵阴道栓+PMSG+A3)。3组分别在补饲前、配种后、配种47 d后采集血清样品。检测血清样品中7种激素的水平。结果表明:在经过PMSG+A3处理,促进卵巢排卵后,给萨福克羊添加L-Arg在改善胚胎的附植和存活率方面未见显著效果。在补饲前、配种后以及配种47 d后,添加L-Arg会降低萨福克肉羊血清中E3、P、Cor的含量。在补饲前、配种后以及配种47 d后,添加L-Arg对萨福克肉羊血清中E2、FSH、LH、hCG的分泌无显著影响。     

SMAD7对山羊卵泡颗粒细胞增殖、凋亡的影响

旨在探究SMAD7对山羊卵泡颗粒细胞增殖和凋亡的影响。本试验收集3~4月龄大足黑山羊母羊的卵泡颗粒细胞,通过过表达或siRNA干扰、ELISA、qRT-PCR、Western blot及流式细胞术等技术与方法探究SMAD7对颗粒细胞增殖、凋亡及类固醇激素分泌的影响。结果发现,SMAD7过表达显著下调颗粒细胞增殖活力并促进细胞凋亡,抑制PCNA表达（P<0.05）,下调BCL2/BAX的比值（P<0.01）;同时,SMAD7干扰显著上调颗粒细胞增殖活力,显著上调PCNA表达（P<0.05）与BCL2/BAX表达量比值（P<0.05）。SMAD7过表达极显著上调颗粒细胞的孕酮分泌,下调雌二醇表达水平（P<0.01）;同时SMAD7干扰极显著下调孕酮分泌,上调雌二醇分泌（P<0.01）。进一步研究发现,SMAD7过表达显著抑制SMAD2、SMAD3的mRNA和蛋白表达（P<0.05）;SMAD7干扰则显著促进SMAD2、SMAD3的mRNA和蛋白表达（P<0.05）。结果表明,SMAD7抑制山羊卵泡颗粒细胞的增殖和雌二醇分泌,促进凋亡和孕酮的合成,并且抑制SMAD2、SMAD3的表达,进而调节卵泡的发育与闭锁。     

定时输精对经产母猪繁殖性能及生殖激素的影响

试验旨在建立高效的经产母猪定时输精（timed artificial insemination,TAI）技术,研究了定时输精对经产母猪繁殖性能、断奶-分娩间隔、不同胎次母猪产仔性能及断奶后7 d内血清生殖激素水平的影响。选取309头2~8胎次二元（长×大）经产母猪,随机分为对照组和试验组,对照组母猪进行常规人工授精（artificial insemination,AI）,试验组母猪进行断奶后24 h注射PMSG 1 000 IU,间隔72 h注射GnRH 100 μg,在注射GnRH后24和40 h各输精1次的定时输精技术。通过统计两组母猪的断奶1周内发情率、受胎率、分娩率、窝均产仔数等,判断定时输精对经产母猪繁殖性能的影响;通过对断奶时间和分娩时间的统计,检测定时输精对经产母猪断奶-分娩间隔的影响;用放射免疫（RIA）方法检测2~4胎次母猪断奶1周内血清E₂、LH、FSH和P₄的含量,研究定时输精对母猪生殖激素的影响。结果显示,试验组母猪发情率显著高于对照组（P<0.05）,但两组间受胎率、分娩率差异不显著（P>0.05）,窝均产仔数、窝均合格仔数和繁殖效率有增加的趋势,但差异不显著（P>0.05）;定时输精显著缩短了母猪的断奶-分娩间隔（P<0.05）。在胎次方面,3~4胎母猪使用定时输精的效果较好,其发情率、受胎率和分娩率均显著高于对照组（P<0.05）。在生殖激素方面,试验组E₂水平在注射PMSG后迅速上升,且在定时输精处理后66~96 h内持续高于对照组（P<0.05）,试验组P₄水平在断奶后至配种前显著低于对照组（P<0.05）,但配种后快速升高,并高于对照组;LH和FSH的含量在两组间无显著差异。综上,定时输精可有效提高经产母猪的断奶发情率,并减少其非生产天数,可显著提高3~4胎母猪的繁殖性能。     

绵羊miR-200b对卵泡颗粒细胞周期和凋亡的影响

旨在揭示miR-200b在绵羊卵泡颗粒细胞的作用。本研究利用在线工具（TargetScan、miRTarBase及miRDB）预测miR-200b的靶基因,并利用KOBAS对其进行GO和KEGG通路富集分析。将分离培养的绵羊卵泡颗粒细胞分为4组,分别转染miR-200b mimic、mimic NC、miR-200b inhibitor和inhibitor NC,每组6个重复。采用CCK8法分别检测转染24、48和72 h颗粒细胞的存活率;采用荧光定量PCR检测miR-200b、CDK4、CDK6、CCND1、CCND2、Bax和Bcl-2基因的表达水平。利用3种在线工具预测到25个miR-200b的共同靶基因,GO和KEGG通路富集分析发现这些基因富集在细胞的增殖分化、细胞周期及生殖发育过程;转染miR-200b mimic、miR-200b inhibitor和NC后,颗粒细胞存活率随时间延长呈“V”型趋势降低,且48 h达最低（P<0.01）;miR-200b inhibitor与inhibitor NC组相比,miR-200b表达量无显著差异（P>0.05）;与mimic NC相比,miR-200b mimic组极显著促进miR-200b表达（P<0.001）,显著下调CDK4（P<0.01）、CDK6（P<0.001）和CCND1（P<0.001）、CCND2（P<0.05）和Bcl-2（P<0.01）基因表达水平,Bax表达并无显著变化（P>0.05）,且极显著下调Bcl-2与Bax比值（P<0.001）。综上所述,miR-200b抑制绵羊卵泡颗粒细胞细胞周期和增殖并促进其凋亡。     

赛乐硒对发情奶牛外周血生殖激素含量和繁殖性能的影响

选用35头处于干奶期40d、泌乳期相近和上胎平均日产奶量20kg的荷斯坦奶牛,采用完全随机区组设计分为7组,即:对照组,基础日粮(不加硒);试验组1、2、3添加亚硒酸钠,分别在基础日粮中加硒7.5mg/d、15mg/d和22.5mg/d;试验组4、5、6添加赛乐硒,分别在基础日粮中加硒7.5mg/d、15mg/d和22.5mg/d,研究赛乐硒和无机硒对奶牛发情周期生殖激素分泌和繁殖性能的影响。结果表明:赛乐硒较无机硒显著提高了发情周期促性腺激素释放激素、促卵泡素、促黄体素、雌二醇和孕酮含量,显著提高了受配率和受胎率,缩短了胎衣排出周期,促进母牛正常发情。适宜补硒量为15 mg/d。