不同培养条件对高山红景天愈伤组织红景天甙含量的影响

采用高山红景天种子、试管苗叶片诱导的愈伤组织在不同条件下进行培养，测定红景天甙含量．结果表明：红景天甙含量受光温条件的影响，在温度为16，20，24，28℃条件下，24℃时含量最高，在光照时间为10，12，14，16h条件下，14h时含量最高；在蔗糖浓度分别为2％，2．5％，3％，3．5％，4％条件下，3．5％浓度时含量最高；不同继代时间对含量无明显影响．     

组织培养生产高山红景天有效成分的研究：II.高山红景天愈…

对高山红景天愈伤组织中有效成分红景天甙、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性及氨基酸含量进行了检测。结果表明：愈伤组织红景天甙含量是天然根的５９．４％，具有ＳＯＤ活性，含有丰富的氨基酸等营养物质。     

高山红景天愈伤组织的诱导和植株再生的研究

本文报道了高山红景天(Rhodiola Sachlinensis A.Bor)种子、子叶、胚轴、籽苗及试管苗叶片的脱分化和植株再生。用MS基本培养基附加1 mg/L 6-BA、0.5mg/L 2,4-D,种子脱分化形成愈伤组织,诱导频率为76％;附加2.0mg/L 6-BA、0.2mg/L NAA,子叶、胚轴、籽苗、试管苗叶片脱分化形成愈伤组织,诱导频率分别为66％、100％、50％、100％。愈伤组织的分化实验表明,以种子为外植体诱导的愈伤组织分化能力最强,以胚轴为外植体诱导的愈伤组织不能分化。从不同激素种类和浓度的组合对愈伤组织生长和分化的效果看,MS基本培养基附加1.5mg/L 6-BA、0.2mg/L NAA最有利于愈伤组织分化,而附加3 mg/L 6-BA、0.3mg/L NAA最有利于愈伤组织生长。经观察基本培养基MS、1/2MS、1/2MS+0.5 IAA、1/2MS+1 IAA对苗子的生根效果发现,MS基本培养基的生根效果最好。利用种子诱导愈伤组织,然后分化成植株的方法,可作为快速繁殖高山红景天的手段。     

组织培养生产高山红景天有效成分的研究 Ⅰ．高山红景天愈伤组织的诱导与培养

以高山红景天的叶片、子叶、茎和根为外植体。诱导产生了大量的愈伤组织．筛选出适于愈伤组织大量培养的固体培养基．以６ＢＡ４～８ｍｇ／ｌ，ＮＡＡ２～２．５ｍｇ／ｌ为最佳激素种类和浓度．研究了固体培养条件下愈伤组织生长规律，绘制了生长曲线，并筛选出优良的细胞无性系．     

组织培养生产高山红景天有效成分的研究──Ⅱ．高山红景天愈伤组织药用成分的检测

对高山红景天愈伤组织中有效成分红景天甙、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性及氨基酸含量进行了检测．结果表明：愈伤组织红景天甙含量是天然根的５９．４％，具有ＳＯＤ活性，含有丰富的氨基酸等营养物质。     

高山红景天叶片外植体条件对愈伤组织诱导的影响

以高山红景天不同性别植株不同部位、不同切段、不同时期的叶片为外植体,分析了外植体条件对愈伤组织诱导的影响。结果表明:高山红景天不同部位、切段、时期叶片的愈伤组织诱导效果有差异,横切基部段和纵切带叶脉段及上部叶片愈伤组织诱导率高;雌株叶片早期取材、雄株中期取材可能提高诱导效果。     

高山红景天愈伤组织诱导及生长的研究

以高山红景天种子、试管苗的叶片、茎等为外植体，研究了影响愈伤组织诱导和生长的激素浓度和光温条件．结果表明，在浓度为2．0，8．0mg／L的NAA和浓度为3.0，5．0，8．0mg／L的6-BA配合的MS培养基上得到了较好的愈伤组织诱导效果，附加2，4-D时浓度为1．5mg／L的愈伤组织诱导率显著高于0．5mg／L浓度，特别是与浓度为5．0，8．0mg／L的6-BA配合时效果更明显．适合愈伤组织生长的温度为20～24℃，光照长度为12～14h．     

氮源和碳源对高山红景天愈伤组织诱导的影响

以高山红景天种子和叶片为外植体,以MS为基本培养基,研究不同氮源含量比例及不同碳源浓度对高山红景天愈伤组织诱导的影响。结果表明,适当调节不同氮源比例可以提高愈伤组织诱导率,而且与适宜浓度的植物生长调节剂配合使用效果更明显;叶片为外植体时,高山红景天雌株和雄株叶片均在硝酸铵和硝酸钾含量为500／3050（mg／L）的培养基上愈伤组织诱导效果最好。糖的种类和浓度也影响诱导率,蔗糖的效果最好,其浓度因材料不同而有所不同,种子和雌株叶片在浓度为3％时诱导率最好,雄株叶片在3％～7％时都能取得好的效果。     

高山红景天愈伤组织的玻璃化法保存及植株再生

采用玻璃化法对高山红景天的愈伤组织进行了超低温保存研究.高山红景天愈伤组织在8%蔗糖中暗培养5 d后,先用25℃的60%玻璃化保护剂PVS2预处理20 min,转至100% PVS2于-20℃乙醇浴中处理2 h后,投入液氮进行保存,48 h后使用40℃水浴快速化冻.冻存后的愈伤组织用液体培养基MS+6-BA 2 mg/L+NAA 0.5 mg/L+40%蔗糖洗涤3次,再转入MS+6-BA 2mg/L+NAA 0.5 mg/L固体培养基中在22℃条件下进行暗培养,2周后转入光照培养（光照强度800 lx）. 6周后观察到高山红景天愈伤组织呈鲜绿色,长势较为旺盛,存活率可达到78.24%.冻存后的愈伤组织可诱导成苗.      

高山红景天不同性别植株形态的比较研究

[目的]进一步了解高山红景天不同性别间的形态特点。[方法]以栽培高山红景天和野生高山红景天为材料,进行高山红景天不同性别植株形态的比较研究。[结果]结果表明,高山红景天不同性别间形态有一定的差异,株高雌株略高于雄株,主茎叶片数雄株多于雌株．叶片形态雄株比雌株狭长且薄、两性植株叶片较宽,茎粗雄株比雌株细,茎数雄株明显多于雌株,地下部根茎粗、根茎长和根茎数等性状雄株均大于雌株。[结论]该研究为高山红景天的性别分化机理、组织培养和遗传育种研究提供基础理论依据。     

高山红景天不同性别植株花器形态的比较

[目的]进一步了解栽培高山红景天花器的形态结构。[方法]对高山红景天不同性别植株的花器结构进行较为详细的比较研究。[结果]结果表明,高山红景天是多型的性别类型,有雌株、雄株、雌雄同株。雌雄同株是雄花、两性花同株类型,即一个植株的不同茎上着生雄花和两性花两种花序,两性花的花序中也有不同比例的雄花和两性花;高山红景天雌蕊心皮数目4为基本型,雄蕊花药数目8为基本型,两性花的雌蕊心皮和雄蕊花药数目都比单性花少的变异类型多。[结论]该研究为今后进一步进行高山红景天性别分化机理、性别利用、生殖生物学等方面的研究提供了可靠的理论依据。     

高山红景天花器的解剖结构研究

以栽培高山红景天花为材料,采用石蜡切片技术观察了不同性别高山红景天花器的解剖结构,结果表明:不同性别高山红景天花器的解剖结构有所不同,且雌花和两性花的子房内均有数目不等的胚珠发育,而雄花子房内无胚珠发育.     

高山红景天花粉形态观察

利用扫描电镜对高山红景天花粉进行了观察,结果表明:来自长白山与大兴安岭的高山红景天花粉的外形、大小较为接近,花粉表面纹饰均呈不规则排列,且纹饰间存在较大的间隙,但无孔隙;两种来源的高山红景天花粉表面纹饰的分叉与交叉的程度则存在较大的差异,来自长白山的花粉表面纹饰分叉与交叉情况比来自大兴安岭的花粉更为复杂,这些花粉表面微观形态的差异将为高山红景天种质资源来源的鉴定提供依据。     

高山红景天叶片愈伤组织诱导与植株再生

以高山红景天叶片作为外植体,研究了影响愈伤组织诱导、芽增殖、生根的主要因素。结果表明:高山红景天叶片切块诱导愈伤组织的最佳培养基为MS 6-BA 2mg/L NAA0.5mg/L,诱导率达88.33%;高山红景天叶片切块经诱导可产生3种色泽的愈伤组织,其中只有绿色愈伤组织诱芽容易,绿色愈伤组织在附加1mg/L6-BA 0.1mg/LNAA的MS培养基中有利于芽的分化和增殖,培养7周左右,平均每个外植体分化形成的再生小植株数达到21.33个;增殖苗转入1/2MS培养基中生根率高达100%。     

冰冻切片技术在高山红景天细胞学研究中的应用

为了解决利用普通石蜡切片观察植物样品需要进行脱水、浸透、包埋操作且耗时长的问题,以高山红景天为试材,对其根和茎进行冰冻切片,过程简单有效且图版清晰,在1d内即可获得高质量图片。冰冻切片的关键步骤是选择合适的甘油浓度、切片时采用的温度及展片技术。     

高山红景天(Rhodiola sachalinensis A.Bor)茎尖包埋-玻璃化法超低温保存与植株再生

使用包埋-玻璃化法对两种来源的高山红景天茎尖进行超低温保存研究,探讨蔗糖预处理、包埋过程中渗透处理和不同温度下玻璃化液PVS2处理的时间对超低温保存后茎尖存活率的影响.结果表明,茎尖依次在0.3、0.5、0.7、1.0 mol.L-1的蔗糖溶液中各预培养1 d后,转入1.0 mol.L-1的蔗糖溶液中继续培养4 d,然后使用附加2 mol.L-1甘油和1 mol.L-1蔗糖的包埋液渗透处理60 min,包埋珠在0℃处理180～210 min后投入液氮,48 h后用40℃水浴快速化冻3 min,用合有1 mol.L-1蔗糖的改良MS培养液洗涤20 min,转入MS+6-BA 1 mg.L-1+NAA 0.1 mg.L-1固体培养基中在22℃条件下进行暗培养,2 d后转移入光照培养,最高成活率接近100%,再生植株生长和分化正常.     

高山红景天GH3基因克隆及序列分析

参照已知植物GH3的氨基酸序列,通过比较找出相对保守的氨基酸序列设计简并引物,通过RT-PCR和RACE法得到高山红景天GH3的3'端,其长度838bp,编码200个氨基酸的602 bp位于GH3的开放阅读框内和一段长36bp的3'非编码区(3'UTR).序列比较结果表明,GH3推导的氨基酸序列与已公布的几种植物GH3氨基酸序列有较高的序列同源性.     

采收前短期红膜遮阴处理对高山红景天根的生长及红景天苷产量的影响

[目的]为提高栽培高山红景天的经济价值,研究了采收前短期红膜遮阴处理对高山红景天根生物量、红景天苷含量及产量的影响。[方法]对高山红景天分别进行了10、20、30和40 d的红膜遮阴处理,测定了雌株和雄株高山红景天根中红景天苷的含量和产量。[结果]红膜遮阴处理显著提高了高山红景天根中红景天苷的含量和产量,并且无论是雌株还是雄株,高山红景天根中红景天苷的产量均表现为在红膜遮阴处理20 d时最高,增幅分别达到21.21%和32.91%。[结论]从生产实际出发,在收获前20 d对高山红景天进行遮红膜处理,有利于提高红景天苷的产量。