放线菌WS-13661活性产物的快速鉴别

放线菌WS-13661的代谢产物对农业病原真菌具有很强的抑制活性.试验对其HPLC半制备组分进行生物测定,表明其活性部位在1 5～20 min;根据HPLC及UV图谱确定其活性成分为五烯类化合物,对其质谱数据进行分析确定了其分子离子峰,经数据库比对,确定其活性成分为钦氏菌素衍生物.     

WS-03574菌株活性成分的分离纯化、抗菌活性及稳定性研究

从武汉地区土壤中分离得到一株放线菌株WS-03574,其发酵粗提物对立枯丝核菌及小麦颖枯病菌等5种病原真菌具有抑制作用.经乙酸乙酯萃取,高效液相制备得到活性成分.该活性成分粗提物自然光处理72 h,活性保留92.6%,在pH值2～11,100℃加热60min基本稳定.     

油茶炭疽病拮抗放线菌CF17发酵液的抑菌活性及活性成分的分离纯化

采用十字交叉法测定CF17发酵液的抑菌谱,并通过离心、旋转蒸发浓缩、丙酮沉淀、固相萃取以及半制备高效液相色谱法对抑菌物质进行分离纯化和鉴定.结果表明,CF17发酵液对油茶炭疽病、油茶叶枯病、油茶软腐病、杉木炭疽病、核桃壳梭孢、降香黄檀炭疽病、檀香炭疽病等的病原菌均有抑菌效果.50%丙酮分离纯化效果优于乙醇沉淀法与乙酸乙酯沉淀法;在固相萃取中,活性物质主要集中在60%乙腈梯度洗柱样品中,最后经HPLC分离收集到一个有明显抑菌圈的样品.经质谱鉴定抑菌成分为Tetramycin A.     

放线菌菌株AH-1的分离鉴定与抑菌活性研究

为筛选具有农用抑菌活性的微生物,从采自安徽黄山山区的土壤中分离得到一株具有抑制真菌活性的菌株AH-1。通过对其形态和培养特征、生理生化特性和16SrDNA序列分析,确定其为卡那霉素链霉菌。室内活性测定结果表明,该菌株发酵液具有广谱、较强的抗植物病原真菌活性,其对小麦根腐病菌和苹果褐腐病菌的菌丝生长抑制率高达94.4%和95.7%。抑制孢子萌发生测结果表明,AH-1菌株发酵液抑制玉米大斑病和马铃薯干腐病菌孢子萌发的EC50分别为15.81mg/L和10.17mg/L。推测,该菌株发酵液中可能含有广谱农用抑菌活性物质,值得深入研究。     

放线菌SL-5链霉素耐药突变菌株的分离、活性筛选及发酵优化研究

【目的】为新型抗生素的开发研究提供有效途径。【方法】对放线菌SL-5在链霉素不同浓度下的耐药突变菌株进行分离和活性筛选,并采用单因素和正交试验对活性菌株进行发酵优化。【结果】从无活性放线菌SL-5的耐药菌株中得到1株活性突变菌株str-14,室内生测结果表明,其发酵液对蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)的抑菌圈直径为17.5 mm。通过单因素和正交试验,确定该菌株的最佳摇瓶发酵培养基配方为:小米10 g/L,葡萄糖20g/L,酵母粉2 g/L,蛋白胨7 g/L,混合VB1.5 mg/L,NaCl 2.5 g/L,CaCO32.0 g/L。最佳培养条件为:初始pH为8.0,装液量70 mL(250 mL三角瓶),180 r/min培养7 d。【结论】通过引入链霉素耐药性突变获得抑菌活性物质,是创制新型抗生素的一条可行之路。     

高原土壤菌株的分离及抗菌活性初步评价

为了发现特殊生态环境的微生物资源,对青海湖土壤以及青藏高原的一个大型真菌进行微生物菌种分离,对部分菌株发酵提取物采用平板检测法进行抗菌活性评价。结果显示,共发现49株菌株,其中1株放线菌和5株真菌的发酵液对普通变形杆菌(Proteus vulgaris)具有明显的生长抑制作用。研究结果表明,青藏高原土壤微生物资源具有发掘新结构抗生素的价值。     

天然活性小分子物质分离技术研究

现代新保健品和新型药品的研究开发都离不开天然产物。阐述了天然植物化学中活性小分子物质的提取分离纯化方法,如萃取法、色谱技术Sephadexlh20等,期望为分子结构解析、活性测定和结构修饰打下基础。     

产抑菌活性物质放线菌菌株的筛选

[目的]筛选产抑菌活性物质的放线菌菌株。[方法]以金黄色葡萄球菌、对青霉素和头孢菌素类耐药的金黄色葡萄球菌和大肠杆菌作为指示菌,采用滤纸片扩散法对300株放线菌的发酵产物进行抗菌活性筛选,通过最小抑菌浓度法（MIC）对筛选的阳性菌株进行抗菌活性测定。[结果]筛选到抗菌活性物质产生菌111株,抑菌率为37.0%;其中对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和耐药金黄色葡萄球菌有抑制活性的菌株分别为111、10和47株。各菌株的最小抑菌浓度有很大差别,菌株174883对金黄色葡萄球菌的抑菌活性最强,其发酵样品稀释到2 048倍仍然表现出抑菌活性。用青霉素酶和头孢菌素酶作用于阳性菌株发酵产物,筛选到6株菌株代谢产物的抑菌活性变弱,菌株32349和kj0428的抑菌活性被抑制最明显。[结论]筛选得到的阳性放线菌菌株具有良好的抗菌活性,为新型抗生素的筛选提供了研究基础。     

分离纯化低聚异麦芽糖的酵母菌菌株筛选

利用酵母菌对不同碳源消耗能力和消耗速度不同的原理，对酵母菌进行筛选试验，选出一株只利用葡萄糖，麦芽糖而不利用异麦芽糖，潘糖，异麦芽三糖等分枝低聚糖的优良酵母菌10号，并对该菌的特性进行了研究。利用10号菌种发酵低纯度的低聚异麦芽糖溶液，可使其纯度达到95%以上。     

放线菌活性物质的挖掘与分离技术研究进展

放线菌是一类广泛分布且备受人类关注的微生物资源,其能产生多种多样的结构新颖、具有生物活性的次级代谢产物,是多种天然产物的重要来源,具有极大的研究和开发价值。本文阐述了以生物活性为导向进行筛选挖掘、基因组挖掘、转录组挖掘等放线菌天然活性物质的挖掘手段,并结合近年研究成果分别论证各方法的优势及适用条件,为合理选择挖掘手段提供参考;概述了溶媒萃取法、离子交换层析法、薄层层析法等天然活性物质分离方法及其优缺点。文中重点综述伴随着基因组学和现代分子生物学的迅速发展而兴起的包括生物信息学分析、同源表达、异源表达等利用基因组挖掘活性物质的方法,以期为微生物资源的挖掘与利用提供相应的参考。最后合理分析目前放线菌开发利用中存在的一些问题,并简要提出相应的建议,就将来放线菌的研究方向和发展前景进行了展望。     

拮抗放线菌WS-03030的分类鉴定及其抗菌成分的初步研究

WS-03030是从武汉地区土壤中分离到的1株具有抗真菌活性的菌株.经形态学、培养特征、生理生化特征培养观察及16SrDNA序列分析,将WS-03030鉴定为吸水链霉菌;WS-03030发酵液的乙酸乙酯粗提物经半制备高效液相及活性测定确认了产生的活性物质,活性物质通过高效液相制得的纯品对稻瘟病菌、黄色镰刀菌和小麦颖枯病菌的最低抑制浓度(MIC)仅1.5625μg·mL-1.     

育亨宾生物总碱的分离与纯化

本实验旨在将低含量的育亨宾生物碱纯化、富集,并分离其多种成分。选用8.00%育亨宾盐的粗品,先用酸溶碱沉和有机物萃取的提取方法得到较高含量的育亨宾生物碱,即纯化的育亨宾生物碱。然后用紫外分光光度法粗略的测定纯化的育亨宾生物碱的含量,再通过超高效液相色谱法精确的测定纯品的育亨宾生物碱含量。其分离可通过配置合适的洗脱液,过碱性氧化铝的柱子实现。最终获得纯度较高的育亨宾生物碱,并收集到其在柱层析过程分离开的各条带,即育亨宾生物碱的各种同分异构体,将其各种成分成功的分离开。经过碱性氧化铝的柱层析,将纯化的育亨宾生物碱分离为两条色谱带。     

番茄红素分离纯化研究

以5%番茄红素粉为原料,研究了应用不同型号树脂对番茄红素进行分离纯化的效果。结果表明,不同型号树脂对番茄红素的分离纯化效果不同,其分离纯化效果顺序为X-5AB-8S-8离子交换树脂,最适静态吸附样液浓度为0.03 g/L、最适静态解吸时间为1 h、最适动态上样速度为2 BV/h、最适洗脱剂为乙酸乙酯。番茄红素经X-5吸附后,以乙酸乙酯为洗脱剂,可将番茄红素浓缩5.9倍,具有良好的富集纯化效果。     

抗生素分离纯化技术

从发酵液中分离纯化抗生素,是抗生素新药研发的难点。根据抗生素性质的差异建立的分离纯化方法各不相同,因此采用合理有效的分离纯化技术路线是新型抗生素研究成功与否的关键。本文综述了抗生素分离纯化常采用的技术手段,并且报道了一些国内外最近研制出的新型抗生素的分离纯化方法。     

拮抗放线菌ZZ-9菌株发酵液的抑菌谱及稳定性测定

为探究拮抗放线菌ZZ-9(Streptomyces rochei)菌株发酵液的抑菌谱,并明确传代培养、温度、光照、pH及紫外线等理化因素对发酵液稳定性的影响。以15种植物病原真菌为供试菌,采用菌丝生长速率法测定发酵液的抑菌谱,并以苹果树腐烂病菌(Cytosporasp.)为指示菌,测定不同条件下发酵液的稳定性。抑菌谱结果表明:ZZ-9菌株发酵液对供试的15种病原真菌均具有不同程度的抑制作用,其中对苹果树腐烂病菌和立枯丝核菌抑制效果最好,生长抑制率可达96%以上,且效果持久;而对苹果轮纹病菌、蚕豆褐斑病菌、月季叶霉病菌等抑制效果较差,抑制率在27%以下。稳定性试验结果表明:菌株传接6代时,活性稳定,从第7代开始菌株活性下降显著;发酵液耐高温,对强酸强碱处理、可见光及紫外线照射均有较好的稳定性;且在4℃及室温(20~25℃)下可贮藏至少30d而保持其抑菌活性几乎不变。因此,拮抗放线菌ZZ-9菌株次生代谢产物具有较广谱的抑菌活性和较强的稳定性,具有开发成微生物农药的潜力。     

茶黄素的提取分离与纯化研究进展

综述了国内外茶黄素的提取和分离纯化方法的研究成果和研究现状，并分析评价了柱层析法和高速逆流色谱法的优缺点，认为两者结合是理想的分离纯化工艺。     

蒜氨酸酶的分离纯化条件分析

采用（NH4）2SO4盐析、Sephadex G-200凝胶过滤对蒜氨酸酶进行了部分纯化。结果表明,蒜氨酸酶的含量和酶活性在（NH4）2SO4为30％～50％时较高,40％时蒜氨酸酶活性最高;经Sephadex G-200凝胶过滤获得的酶液纯化倍数为34．45,回收率为1．72％。     

柱层析法在分离纯化番茄红素中的应用

采用柱层析法分离纯化番茄红素.结果表明.最佳分离条件为吸附剂100～200目层析硅胶;常温下吸附,洗脱;番茄红素油树脂与丙酮的比例为1:10;洗脱剂为丙酮;洗脱流速为3.5mL·min-1;高效液相色谱分析表明,柱层析后样液色谱图基本上与番茄红素标准溶液色谱图一致,能达到分离纯化的目的.