AM真菌孢子不同消毒方法的优化研究

采用7种消毒方法,对Gigaspora margarita,Glomus,mosseae和Glomus versiforme 3种丛枝菌根真菌孢子分别进行表面消毒试验。结果表明,Gigaspora margarita的孢子,采用5％氯胺T＋0．04％链霉素消毒液＋2滴Tween 20处理15min,无菌蒸馏水漂洗6—10次的消毒方法最好,萌发率高,且消毒效果好;Glomus,mosseae和Glomus versiforme 2种孢子,可采用上述方法或“差别灭菌法”,即先用2％氯胺T＋200mg／L链霉素＋100mg／L庆大霉素消毒液＋2滴Tween20处理10min,无菌蒸馏水漂洗6—10次后,置于26℃条件下培养3d,再用2％氯胺T＋200mg/L链霉素＋100mg／L庆大霉素消毒液＋2滴Tween20处理10min,最后用无菌蒸馏水漂洗6～10次即可。这2种方法都非常好,消毒效果没有显著差异。     

红壤中不同AM真菌侵染的柑橘中多胺含量的比较

多胺与植物的抗逆性密切相关,而丛枝菌根(AM)真菌能够调控植物的多胺代谢。为了探讨不同菌种的调控能力的差异,在华南地区利用AM真菌进行柑橘的抗逆栽培,本研究以‘暗柳橙’(Citrus sinensis Osbeck‘Anliucheng’)为试材,在盆栽实验中比较了4个菌种(Funneliformis caledonium, Gigaspora margarita,Funneliformis mosseae, Glomus versiforme)对‘暗柳橙’植株生长和多胺代谢的影响。结果表明,接种F. mosseae的植株生物量最高,而接种F. caledonium的植株生物量最低;接种G. margarita的植株叶片中游离态SPM含量最高,接种G. versiforme的植株根系中游离态PUT和SPM含量最高;接种F. mosseae的植株游离态多胺PUT/PAs最低、(SPD+SPM)/PUT最高,与其生物量最高相对应;接种G. margarita的植株叶片中结合态PUT、 SPD含量最高,接种F. mosseae的植株叶片结合态SPM含量最高。本研究表明不同AM真菌菌种对柑橘多胺代谢的影响存在显著差异,进而对植株生长产生不同影响,且多胺的平衡比多胺的含量更为重要。     

柯氏无梗囊霉双重培养体系的构建

利用发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)C58C1诱导烟草Va116产生毛状根，建立烟草Va116毛状根-柯氏无梗囊霉(Acaulospora koskei)双重培养体系；分析不同消毒方法、培养基pH、激素对柯氏无梗囊霉萌发的影响，筛选柯氏无梗囊霉与烟草Va116毛状根建立双重培养体系的最佳条件。结果表明：发根农杆菌C58C1菌液在600nm处的吸光值为0.6～0.8、侵染时间为8～10 min,通过抑菌、除菌培养，获得烟草Va116毛状根，诱导率为53.33%。柯氏无梗囊霉孢子在体积分数75%酒精中消毒1 min, A液(质量浓度20 g/L的氯胺(T)、每0.1 L加2滴吐温20)消毒10 min,转入B液(质量浓度200 mg/L的硫酸链霉素+质量浓度100 mg/L的硫酸庆大霉素)消毒10 min,萌发率最高(为48.33%)、污染率最低(为6.67%);柯氏无梗囊霉孢子在水琼脂培养基萌发，最佳pH为6.0;在独脚金内酯(GR24)质量浓度450 pg/L、精胺(SPM)质量浓度40 mg/L时，柯氏无梗囊霉孢子萌发效果最好，萌发率分别为61.67%、...     

丛枝菌根真菌对实生茶树叶片光合性能的影响

于盆栽条件下研究了丛枝菌根(AM)真菌摩西球囊霉(Glomus mosseae)、地表球囊霉(Glomus versiforme)和珠状巨孢囊霉(Gigaspora margarita)对3年生茶(Camellia sinensis)树叶片光合性能的影响。结果表明,3种AM真菌均能侵染茶树根系,增加叶片数,提高叶绿素含量、净光合速率、蒸腾速率和气孔导度,降低胞间CO2。其中,接种摩西球囊霉的效应最大,单株叶片数比对照增加23.9%,叶绿素含量增加22.4%,净光合速率增加48.7%,胞间CO2浓度下降7.2%。表明AM真菌能促进茶树叶片光合性能,这为AM真菌提高茶叶产量和品质提供了依据。     

丛枝菌根真菌对番茄植株内源激素含量的影响

于温室盆栽条件下对番茄(Lycospersicon esukurentamu)幼苗接种丛枝菌根(AM)真菌摩西球囊霉(Glomusmosseae)、地表球囊霉(Glomus versiforme)、根内球囊霉(Glomus intraradices)、幼套球囊霉(Glomus etunicatum)或珠状巨孢囊霉(Gigaspora margarita)10d后定期采样,应用间接酶联免疫吸附分析法(ELISA)测定各处理番茄植株根和叶片内源激素吲哚乙酸(IAA)、赤霉素(GA)、玉米素核苷(ZR)和脱落酸(ABA)含量。接种20d G.mosseae处理的番茄根系菌根侵染率高达68.5%,显著高于其他接种处理;供试AM真菌显著增加了番茄植株鲜重、株高、地上部和地下部干重、其根或叶内IAA、GA、ZR和ABA含量均显著高于不接种对照,以G.mosseae处理的根或叶中IAA、GA、ZR和ABA含量最高。     

铁线蕨的组织培养与快速繁殖

以铁线蕨孢子为外植体进行组织培养,研究不同消毒处理对外植体的影响,孢子体的初代培养及原叶体的增殖.结果表明,外植体最佳消毒方式为:用刀片把叶片背面的孢子刮下,用无菌滤纸包裹,先用70％乙醇溶液浸泡30s,再用0.1％ HgCl2消毒8min;铁线蕨孢子萌发的最适宜培养基为1/2 MS+活性炭2 g/L,孢子萌发率最高可达33.3％;原叶体增殖的适宜培养基是1/2 MS+1 mg/L6-BA+O.1 mg/L NAA+活件炭1g/L.增碚倍数可达3.8倍.     

药用植物草珊瑚快速繁殖体系的建立

对草珊瑚(Sarcandra glabra)进行组织培养快速繁殖技术研究,建立草珊瑚的快速繁殖体系。结果表明,草珊瑚外植体的最佳消毒灭菌方法为使用75%乙醇消毒30 s,再用无菌水涮洗1遍,然后置于0.1%HgCl_2溶液(加1～2滴表面活性物质吐温-80)浸泡消毒8～9 min,用无菌水浸洗2次,每次浸洗5 min。草珊瑚不定芽诱导的最适培养基为MS+1.5 mg/L 6-BA+0.3 mg/L IAA+0.5 mg/L NAA;草珊瑚丛生芽继代增殖的最佳培养基为MS+1.5 mg/L 6-BA+0.3 mg/L IBA。诱导草珊瑚生根的最适宜培养基为1/2MS+1.0 mg/L IBA+0.3 mg/L NAA。草珊瑚试管苗移栽的最佳基质为泥炭土+蛭石,比例为1∶1。     

植物遗传转化中农杆菌抑制的研究

以农杆菌GV3101侵染预培养的无菌烟草叶方块,共培养2 d后,外植体通过5种表面脱菌处理后转接在培养基上进行抑菌和筛选培养。结果表明,共培养后的材料先用无菌水冲洗6~8遍,以脱去材料表面大部分农杆菌,再用2%(V/V)NaClO漂洗10 min,然后无菌水冲洗5遍,捞出后放在无菌滤纸上吸干多余水分,转接在抑菌和筛选培养基MS+BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+Cef 500 mg/L+HygB 20 mg/L上的抑菌效果良好。     

不同培养条件对驱蚊香草愈伤组织诱导的研究

以驱蚊香草的幼嫩叶片为外植体,应用正交设计法对愈伤组织诱导条件进行研究.结果表明:诱导愈伤组织的最佳培养基配方为:MS+2,4-D2 mg/L+6-BA0.5 mg/L+IBA 0.2 mg/L;外植体用10%的84消毒液消毒10 min效果最好;最适培养温度为20 ℃,最佳光照时间为10 h/d.     

除虫菊组织培养快繁技术研究

摘要:通过除虫菊组织培养技术外植体消毒试验,确定了消毒方法:75 %酒精中浸泡30s ,再放入0.1 %升汞中处理10 min,无菌水冲洗2～3次;通过正交试验及优化筛选,建立了除虫菊适宜增殖培养基:MS+BA 0.5 mg/L+NAA 0.05 mg/L和MS+BA 1.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L;通过在培养基中添加不同浓度生长素,得到适合除虫菊的生根培养基:1/2MS+NAA 0.5 mg/L.