联合使用电刺激采精与直肠按摩对大熊猫精液采集的影响

研究了实施经直肠按摩输精管壶腹部对大熊猫精液采集的影响。B超检查结果显示,大熊猫具有发达的输精管壶腹部,其位于膀胱与直肠之间;单独实施经直肠按摩输精管壶腹部200~400次后,所有个体均出现程度不等的阴茎勃起,平均阴茎周长从按摩前的6.33 cm增加到7.49 cm,但是单独使用直肠按摩还不足以刺激大熊猫的射精反应。为确定联合使用直肠按摩与电刺激采精对大熊猫精液采集的影响,开展了进一步实验;电刺激按常规方式进行,在每个刺激系列结束后接着进行直肠按摩100~200次。结果显示,对于电刺激采精量低于1.68 mL的个体,直肠按摩可显著增加采精量(P<0.05),采精量从(0.36±0.66)mL增加到(0.95±0.99)mL,但是对于电刺激后采精量在1.9 mL以上的个体,直肠按摩不能增加采精量。电刺激后进行直肠按摩可将大熊猫采精成功率从44%提高到88%。     

食蟹猴阴茎电刺激采精及精液特征的初步研究

采用阴茎电刺激采精法对食蟹猴进行采精,电刺激参数设为电压从32～56V,频率25～30Hz范围调整,波宽固定为10ms,电刺激时间1～10s,在非麻醉情况下成功采精,采精量为(0.20±0.16)mL。在采精过程中没有发现阴茎损伤。对食蟹猴精液特征进行研究,结果发现精子的活力为(88.37±9.33)%,精子密度为(2169.79±1922.38)×106个/mL。扫描电子显微镜观察,精子的形态特点是头部的长径比较短而显两端较钝圆的卵圆形,长(6.58±0.28)μm,宽(4.12±0.20)μm;尾部中段长(13.47±0.36)μm,主段和末段长(67.08±1.52)μm。平均死活精子率9.1%,平均精子畸形率为13.1%,平均精子顶体异常率为3.3%。     

兔的人工授精研究总结

本文研究对兔的采精技术、精液性状、精液的冷冻保存和低温保存以及输精方法等问题进行了一系列试验。用自制的假阴道采精,春季西德长毛公兔平均每次滤精量0.89±0.310毫升,射出精子总数5.025±2.09亿,西德杂种公兔分别为0.66±0.322毫升和3.623±1.751亿;本地长毛公兔分别为0.8±0.324毫升和3.190±1.514亿。冬季西德长毛公兔平均每次滤精量0.675±0.175毫升,射出精子总数2.568±0.561亿;西德杂种公兔分别为0.947±0.368毫升和4.272±1.434亿。同品种但个体不同,滤精量和射出精子总数差异很大。精液冷冻保存,可用含有甘油和DMSO的Tris稀释液,在液氮中(-196℃)保存。用冷冻精液输精母兔230只,情期受胎率73.9％,平均每窝产仔数4.4只。精液低温保存试验,以用葡—柠—蛋—奶稀释液与葡—柠—蛋稀释液稀释在2～5℃中保存,效果较好,在农村中进行输精试验的结果,前者情期受胎率68.7±18.739％,后者63.72±12.987％,差异不显著(P>0.05),因后者配制较简便,目前在农村中乃推广此种。精液稀释倍数分三组,即1:10、1:15、1:20,试验结果以1:15为宜。输精时,发情母兔静注HCG50单位诱排,输精量0.5毫升,输入有效精子数1,000～1,400万,实践证明是适宜的。兔的人工授精技术已在广西14个县(市)重点推广,据不完全统计,两年来共输精母免约10万只次,抽查17,184只,平均情期受胎率62.90％,平均每窝仔数4.04只。     

星斑川鲽精子冷冻保存与生理特性分析

针对星斑川鲽(Platichthys stellatus)养殖群体中雄性个体较雌性小,产精液量低,限制了人工繁殖育苗和杂交育种开展等问题,本研究以性成熟的星斑川鲽为实验材料,对精子稀释液成分、稀释液渗透压、激活海水适宜温度和冷冻精液的适宜稀释比例等进行筛选,并用冷冻精液和鲜精分别与星斑川鲽卵进行受精和孵化实验,实验结果利用SPSS软件中单因素方差分析法和Student-Newman-Keuls进行比较分析。结果表明,利用Ts-2(37.65 g/L蔗糖+10.01 g/L KHCO3+1.21 g/L Tris碱)和SFs-4(60 g/L葡萄糖+10.01 g/L KHCO3+1.21 g/L Tris碱)冷冻保存的精子活力最高,分别为(56.67±5.78)%和(66.67±5.77)%。利用计算机辅助精子分析(computer assisted sperm analysis,CASA)系统对星斑川鲽精子进行分析,测定了用Ts-2和SFs-4保存的冷冻精液中精子运动方式的各项参数。结果显示,测定的各项参数(曲线运动速度(curvilinear velocity,VCL)、直线运动速度(straight line velocity,VSL)、平均鞭打频率(beat cross frequency,BCF)、运动的直线性(linearity,LIN)和运动的前向性(straightness,STR)表明,利用SFs-4保存的精子各项运动参数明显高于Ts-2。利用蔗糖、KHCO3和Tris碱配制不同渗透压稀释液中,在渗透压为319.94 Pa时,精子活力最高,为(61.67±5.00)%,与鲜精相比无显著差异(P0.05)。利用3~18℃海水激活精子,结果显示,当激活海水温度在12℃时精子活力最高,与鲜精相比无显著性差异(P0.05),而其他温度下显著低于鲜精活力(P0.05)。将解冻后的精液稀释10~40倍,与星斑川鲽卵受精,结果显示,在稀释20倍后冷冻精液的受精率最高。本研究利用Ts-2+20%二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)和SFs-4+20%DMSO对星斑川鲽精子成功进行冷冻保存,为星斑川鲽精子冷冻保存、种质库的建立和应用提供理论和技术依据。     

栉江珧和近江牡蛎的精子超低温冷冻保存

栉江珧(Atrina pectinata)和近江牡蛎(Crassostrea rivularis)是我国重要的海产经济贝类,建立其精子冷冻保存技术及精子冷冻库,对种质资源的保护和遗传育种具有重要意义.本研究对其精子冷冻保存过程中冷冻剂种类和浓度的选择、冷冻程序、平衡时间、保存体积、精液稀释方式、保存时间等多个影响因素进行了比较筛选,并利用显微镜直接检测和曙红Y(eosin Y)染色检测结合的方式检验精子存活率.结果表明,二甲亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)作为抗冻剂的保存效果要明显优于甘油(glycerol,Gly),终浓度为8％～10％的二甲亚砜保存效果最好,其栉江珧和近江牡蛎精子活率均可达60％以上,而甘油保护下精子活率小于40％.精液的稀释方式采用将抗冻液等分为3份,依次与精液混合,每次间隔8 min,整个过程约30 min;此种精液稀释方式与一次性混合方式相比,精子活率可提高约30％.稀释后精液需要在4℃下平衡15～25 min,平衡样品与直接冷冻样品相比,精子活率提高约50％.精液降温程序为在样品投入液氮前,于液氮面以上15 cm处停留5 min,5 cm处停留10 min,精子活率可达60％以上;而未经此降温程序直接投入液氮中的样品精子活率接近0.与此降温程序相对应的样品冷冻体积在1.0～1.4 mL范围内为宜.冷冻180 d内复苏的精子活率由90％左右(鲜精)下降至60％左右,180 d后精子活率下降至56％左右.研究结果为栉江珧和近江牡蛎精子超低温冷冻保存、双壳类种质保护和遗传育种提供了理论和技术依据.     

种公牛的科学饲养与管理

种公牛在养殖过程中占有很重要的比例,其饲养管理非常关键,其中最重要的是增进体质健康和提高精液质量。科学饲养中最重要的一条是饲料的营养搭配。喂给种公牛的饲料应含有全价营养,特别是蛋白质、矿物质和维生素,在饲料中要有足够的含量。这些营养物质对精液的形成、提高精液质量、对公牛的健康生长均有良好作用。想要种公牛使用期限长,且有好的结果,就要合理利用种公牛,万不可过度使用,还需创造适宜的环境条件,掌握熟练的采精技术。由此,就种公牛的科学饲养与管理进行探讨分析。     

电刺激对产后母猪行为及生产性能的影响

解救被压哺乳仔猪是提高规模化养殖场生产效益的重要手段,其中电刺激是最新技术之一,为优化目前电刺激技术研究参数单一,母猪过度反应等问题,该研究基于反应有效性和惊吓指数两类参数分析了产后母猪不同身体部位在不同刺激电压下的反应,确定了电刺激技术参数适宜值,并验证了该参数对母猪生产性能的影响。结果表明：电刺激装置通电0.5 s后,母猪在刺激电压2 000和2 400 V下的有效反应率皆为75%以上,且这2种刺激电压下发生有效反应的概率极显著高于1 200 V(P<0.01)。母猪腰部的有效反应率为70.8%,该部位发生有效反应的概率比侧腹部和大腿根部高将近3倍左右。当刺激部位为腰部,刺激电压为2 400 V时,母猪惊吓指数上限高于60%;当刺激部位为腰部,刺激电压2 000 V时,惊吓指数上限低于60%,综合有效反应和惊吓指数结果,建议电刺激适宜参数为：电压2 000 V,刺激部位为腰部。生产试验结果表明：在整个哺乳期,执行电刺激适宜参数的试验组母猪的平均日采食量（5.50 kg）和断奶窝质量（58.91 kg）略高于对照组的日采食量（5.45 kg）和断奶窝质量（58.42 kg）,但...     

额尔齐斯河江鳕精子冷冻保存研究

额尔齐斯河中蕴藏着丰富的冷水鱼类种质资源,江鳕(Lota lota)是其中之一,建立其精子冷冻保存技术和精子冷冻库,对种质资源保存具有重要意义。本研究利用无机盐、葡萄糖、蔗糖、胎牛血清等配制7种精子稀释液,以5∶1的比例稀释精液,激活后观察统计精子活力。结果显示,江鳕精子仅在SS、D15和CM中具有(13.33±2.89)%~(8.33±2.88)%活力。在此基础上配制22种梯度稀释液(SS-00~SS-10和D15-0~D15-7),以同样的方法稀释和观察精子活力。结果显示,SS-0(56.67±5.77)%、SS-2(63.33±5.77)%、SS-5(53.33±5.77)%和D15-7(63.33±5.77)%中精子活力较高,与鲜精活力(76.67±5.77)%接近(P0.05)。将二甲基亚砜(DMSO)和甲醇(MeOH)以3∶2比例配制成混合抗冻剂(DM),分别以5%~12%浓度加入到精子稀释液SS-5和D15-7中,以5∶1比例稀释精液,冷冻保存精子。结果显示,冷冻前,5%DM的SS-5和D15-7中精子活力(73.33±5.77)%与鲜精无显著差异(P0.05),当DM浓度升高到10%~12%时,精子活力接近于0;冷冻后,在DM浓度为6%的SS-5中,精子活力较高为(26.67±5.77)%(P0.05);在DM浓度为7%的D15-7中,精子活力较高为(26.67±5.77)%(P0.05)。本研究结果为额尔齐斯河江鳕精子冷冻保存提供了一定的理论和技术依据。     

小鼠精原细胞体外增殖与冷冻保存

利用一步酶法将7日龄昆白系小鼠睾丸分离获得生精上皮单细胞悬液(主要含精原细胞和支持细胞),分别接种于D-MEM、D-MEM/F12和KSOM后,系统研究其精原细胞的存活和增殖情况,并对生精上皮单细胞、曲细精管及完整睾丸进行了-70℃冷冻保存,同时对生精上皮单细胞进行了液氮冷冻(-196℃)保存。结果表明,小鼠精原细胞在D-MEM和D-MEM/F12中均能存活并增殖,表现为在培养的第1～9天/1～8天呈逐渐减少趋势,第9～13天/8～12天呈增殖趋势,第17天/16天以后增殖减缓,而在KSOM中只短暂存活不能增殖。生精上皮单细胞、曲细精管及完整睾丸-70℃短期(1周和2周)冷冻保存及单细胞悬液液氮短期(2周)和中长期(1和3个月)冷冻保存后,均可获得较理想的细胞存活率(均大于85%)。     

公兔精液冷冻保存的研究

本研究着重对公兔精液冷冻保存所用的防冻剂的选择及其用量、精液的稀释方法、平衡时间、降温速度及解冻温度等方面进行了一系列试验研究,最后进行输精试验,以验证试验效果。公兔采精用假阴道法,采精后立即检查精液一般性状,精子活率达0.7以上始供试验用。稀释液用 Tris 缓冲液为基础液,其成份为:Tris2.52克,葡萄糖1.05克,柠檬酸1.41克,蒸馏水84毫升,卵黄16毫升。稀释液中的防冻剂以 DMSO 和甘油并用效果较好。当 DMSO 最终浓度从0增至9%时,解冻后精子活率亦随之而提高;当甘油最终浓度为1.25、2.5和3.75%时,解冻后精子活率较好,三者间无明显差异(P>0.05),最终浓度为0和5%时,冻后精子活率则比以上三者有明显的下降(P<0.05)。解冻后精子顶体完好率则随着 DMSO 或甘油浓度的增加而下降。以冻后精子活率和顶体完好率这两个因素综合衡量,DMSO 和甘油的最终浓度分别以4.5%和1.25%效果较好。稀释精液时,采用两次稀释法的冷冻效果比一次稀释法的好。但两者差异不显著(P>0.05)。平衡时间以0.5—1小时效果较好,而2小时和3小时的效果较差。冷冻精液时,在-25—-50℃间的降温速度以每分钟下降3—8℃效果较好,如超过11℃,解冻后精子活率则有下降的趋势。颗粒冻精在40—50℃进行干解冻的效果比30℃和60℃的好。输精时,母兔先静注 HCG50—100单位以诱发排卵,输精量为0.5—0.8毫升。输精母兔230头,情期受胎率73.9%,平均每窝产仔数4.4头。     

玻璃化冷冻对哺乳动物卵母细胞骨架系统的影响

玻璃化冷冻技术已广泛应用于多种哺乳动物卵母细胞的冷冻保存。相比传统的冷冻方法,玻璃化冷冻具有操作简便、费用低、效率高等特点,因而极大提高了卵母细胞的利用效率。然而由于卵母细胞自身的特点,造成玻璃化冷冻技术的应用存在许多问题,主要表现为冻后结构的改变和后续发育能力降低。本文主要综述了细胞骨架在卵母细胞成熟与受精中的作用以及玻璃化冷冻对细胞骨架的影响,并论述了细胞骨架稳定剂在玻璃化冷冻中的应用。     

对教师个人多媒体教学平台的研究

多媒体教学技术被广泛地应用于教学,有效提高了课堂教学效率和教学质量。但过分或不当使用多媒体技术也会影响和制约着教学效果,限制教师主动性和禁锢教师临场发挥。有必要对这项技术在形式、手段和方法上进行一些反思,重新探讨教学中所需要的多媒体软硬件环境以及平台,研究适合高校教师使用的多媒体辅助教学平台及工具。     

60Co-γ辐照模式下玉米中赤霉烯酮和品质的变化及对绵羊定时人工授精的影响

为研究经赤霉烯酮(ZEN)自然污染与⁶⁰Co-γ辐照处理后的玉米对绵羊定时人工授精中澳洲白种公羊、湖羊母羊的生殖性能的影响,本试验选取含ZEN玉米样本,分别用0、3、5、8、10 kGy剂量的⁶⁰Co-γ辐照,并测定辐照后玉米主要营养成分变化。然后分别将未污染玉米(Ⅰ对照组)、经10 kGy ⁶⁰Co-γ辐照的污染玉米(试验Ⅱ组)、污染玉米(试验Ⅲ组)饲喂定时人工授精的绵羊,检测澳洲白种公羊的精液质量,测定湖羊母羊的繁殖性能指标。结果表明,未经⁶⁰Co-γ辐照的玉米含ZEN 2 153 μg·kg^-1,在10 kGy ⁶⁰Co-γ辐照剂量下,玉米中ZEN降解率为83.7%;当⁶⁰Co-γ辐照剂量低于10 kGy时,玉米淀粉表面结构无变化,主要营养成分无显著变化。试验Ⅱ组澳洲白种公羊的采精量、精子活力、精子密度与试验Ⅲ组相比显著升高(P<0.05),与Ⅰ对照组相比无显著差异(P>0.05);试验Ⅲ组澳洲白种公羊第30天精子畸形率与试验Ⅱ组、Ⅰ对照组相比均显著升高(P<0.05),显微镜下观察可见双尾精子、双头精子、无尾精子等现象,其中双尾精子头部、尾部不完整;试验Ⅱ组湖羊母羊同期发情率、受胎率、产羔率和羔羊始重等指标与试验Ⅲ组相比显著升高(P<0.05),与Ⅰ对照组无显著差异(P>0.05)。综上,使用经10 kGy ⁶⁰Co-γ辐照后ZEN含量低于2 153 μg·kg^-1的玉米饲喂繁育绵羊,对绵羊定时人工授精无不利影响。本研究结果为⁶⁰Co-γ辐照模式下玉米中赤霉烯酮和品质的变化对绵羊定时人工授精的影响研究提供了理论依据。     

Pathogens as drivers of population declines: The importance of systematic monitoring in great apes and other threatened mammals

Until recently, the focus of great ape behavioural and ecological research has been distinct from the focus of scientists working in medical and veterinary sciences. More scientists are calling for a connection between medical and field research due to recent disease outbreaks in great apes, including Ebola, and indications of cross-transmission of Ebola and other viruses between primates and humans. A major limitation to progress is the lack of information on infectious diseases and their transmission in wild primates. Here, we present examples of successful pathogen detection in wild great apes and describe approaches and techniques that can be used in the field, focusing in particular on investigation of deaths and non-invasive sample collection. This interdisciplinary approach is providing new insights to infectious diseases of great apes and is helping to protect the health of great ape populations. This framework can also be applied to other mammals under threat from infectious diseases, including African wild dogs, seals and Tasmanian devils. In addition to providing benefits for great ape conservation, research that integrates infectious disease with primate ecology provides insights to emerging diseases in humans and the role of disease in primate evolution.     

水稻同化物转运及其对逆境胁迫响应的机理

产量形成是“源库流”协调统一的过程,但由于极端天气频发,使得水稻生长环境恶化,源库关系严重失调,对产量的形成造成不利影响。例如水稻开花结实期遭遇极端高温将严重抑制物质转运,导致籽粒充实度下降,产量降低,品质变劣。近年来,有关水稻同化物转运和分配机理及其对逆境胁迫的响应机制方面的研究,主要形成了以下主要观点：（1）同化物在叶片主要通过质外体与共质体途径装载,然后利用“源”端和“库”端压力梯度,通过叶、茎、穗轴、枝梗和小穗轴等维管系统向颖果输送,于籽粒背部维管束卸载,形成籽粒。（2）同化物装载、运输及卸载中任意一个环节遇到高温、低温、干旱及氮素缺乏等逆境均可能导致同化物转运受阻,造成“流”的不畅,阻碍光合产物及其它营养物质进入籽粒,影响稻米产量及品质。（3）但由于研究手段及技术所限,目前有关逆境胁迫对同化物在韧皮部的装载、运输及卸载影响的研究相对较少,新技术的开发应用可为该研究领域提供新的发展机遇。     

风助式喷雾器雾滴在果树上的分布

风助式喷雾器可以有效地提高果园施药效率和改善雾滴在树冠中的分布。风助式喷雾器喷头的选择、喷头在喷雾器上的布置、风扇的大小、风扇的转速以及喷雾器与喷雾目标之间的相对位置等都是决定喷雾质量的重要因素。经过试验对以上因素进行了分析,并指出风扇高位、高风速、喷头低位是比较理想的设备组合。     

Reproduction and teratogenesis: current methods and suggested improvements.

The risks to human reproduction, particularly in regard to possible induction of birth defects, from present levels of environmental chemicals are thought to be low but in need of closer scrutiny than is now the case. Methods currently used to estimate the hazards to reproduction of new chemicals and drugs are reviewed and some shortcomings and potential sources of error are noted. Specific suggestions are made for improving existing methodology. In addition to the widely used treatment span encompassing all or most of the period of organogenesis, it is proposed that some exposure periods of shorter duration be added to avert possibly adaptative changes in maternal homeostatic systems. Greater diversity of test animals, beyond the rodent-rabbit species largely used today, is urged with the objective of better matching metabolic pathways in a test animal to those of man. The demonstration of an embryotoxicity effect-level must be regarded as essential in all tests, and once found this level should be used as the basis of extrapolating downward to find an acceptable tolerance level of dosage. More attention should be focused on postnatal functional evaluation after prenatal and perinatal exposure of test animals to environmental chemicals, especially those that might interfere with the maturation of the central nervous system, endocrine glands, and immunological mechanisms. The use of nonhuman primates should be reserved for the testing of drugs essential for use during human pregnancy or early pregnancy, because of the scarcity of such animals and the high costs of doing meaningful tests with them.     

Physical properties, molecular structures, and protein quality of texturized whey protein isolate: effect of extrusion temperature

Although extrusion technology has contributed much to increasing the effective utilization of whey, the effect of extrusion conditions on the functional properties of the proteins is not well understood. In this work, the impact of extrusion temperature on the physical and chemical properties, molecular structures, and protein quality of texturized whey protein isolate (WPI) was investigated at a constant moisture content and compared with WPI treated with simple heat only. The Bradford assay methods, sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis, and reversed-phase high-performance liquid chromatography techniques were used to determine protein solubility and to analyze compositional changes in the two major whey proteins, α-lactalbumin and β-lactoglobulin. Circular dichroism and intrinsic tryptophan fluorescence spectroscopic techniques were applied to study the secondary and tertiary structures of the proteins. This study demonstrated that extrusion temperature is a critical but not the sole determining factor in affecting the functional properties of extruded WPI.     

利用分子标记辅助选择Pigm-1基因改良恢复系R20的稻瘟病抗性

水稻稻瘟病是水稻的重要病害之一,给我国甚至全世界的水稻安全生产带来了巨大隐患.选育优质抗稻瘟病恢复系,进而培育稻瘟病水稻杂交组合,是选育抗稻温病品种的有效途径之一.本研究以双抗77009为抗性基因Pigm-1的供体亲本,以感病恢复系R20为受体亲本,通过杂交和连续回交方法,并利用分子标记辅助选择技术,定向改良优质水稻恢...     

远程视频监控在农产品质量安全追溯系统中的应用研究

将远程视频监控技术集成到农产品质量安全追溯体系的建设中,能够对数据采集过程进行有效监督,保证追溯数据的准确性和真实性,提高追溯系统的信息质量。分析了远程视频监控系统对农产品质量安全追溯能力的提升作用,从集成方式、关键技术等方面进行详细阐述,介绍了其在东莞市生猪质量安全追溯系统中的应用。