壳聚糖固定化海洋微生物YS2071脂肪酶及其酶学性质

采用壳聚糖为载体,优化了海洋微生物YS2071脂肪酶的壳聚糖固定化条件。结果显示,在壳聚糖浓度为2% (m/v)、氢氧化钠浓度为12% (m/v)、乙酸浓度为1% (v/v)、戊二醛浓度为0.25% (v/v)、与戊二醛交联的时间为12 h及添加2 ml (1120 U)的游离脂肪酶时,固定化脂肪酶的活力最高,其活力回收率达到69.4%。对游离脂肪酶与固定化脂肪酶的酶学性质进行比较,结果显示,游离脂肪酶的最适反应温度为40℃,而固定化脂肪酶的最适反应温度为45℃,固定化脂肪酶的温度稳定性明显优于游离脂肪酶。最适反应pH均为8.0,脂肪酶经过固定化之后,酸碱耐受性增大。重复利用10次的固定化脂肪酶的酶活力保留率仍高于65%。固定化脂肪酶贮藏半衰期为96 d,而游离脂肪酶的贮藏半衰期是33 d。固定化脂肪酶与游离脂肪酶的酶活力保留率在不同有机试剂中表现出不同的稳定性。     

固定化微生物技术及其在水产养殖中的应用

本文介绍了固定化微生物技术的发展史和吸附法(载体结合法)、包埋法、共价法、交联法等6种固定化微生物的制备方法以及固定化微生物技术在水产养殖中的应用.     

壳聚糖固定化海洋低温碱性蛋白酶YS-80-122的研究

以壳聚糖为固定化载体,采用吸附交联法,以戊二醛为交联剂,对海洋低温碱性蛋白酶YS-80-122进行固定化。通过单因素和正交试验优化得到最佳固定化条件为pH7·0,戊二醛终浓度0·2%,吸附时间50min,酶载体比例40mg/g,交联时间16h,交联温度10℃,固定化酶酶活回收可达47·52%。固定化酶和游离酶的最适作用温度均为30℃,最适作用pH分别为9·0和10·0,相比游离酶,固定化酶可在更宽的温度和pH范围内发挥高活性,且其温度和pH稳定性得到显著提高。室温下经冷冻干燥的固定化酶贮存90d后活性基本保持不变,贮藏半衰期约为190d。以酪蛋白为底物,重复使用7次后酶活仍保留有79·2%,操作半衰期约为21次使用率。     

亚硝酸盐氧化细菌固定化方法的优化研究

对亚硝酸盐氧化细菌的包埋固定化及其应用进行了研究.选用聚乙烯醇(PVA)和海藻酸钠(SA)混合物作为包埋载体,试验发现混合载体中聚乙烯醇(PVA)和海藻酸钠(SA)的含量、包埋菌液浓度和交联时间对固定化效果有重要影响.利用正交试验对这4个因素进行优化,得到最佳包埋条件为:聚乙烯醇8%、海藻酸钠1%、包埋菌液浓度26 g/L、固定化小球交联时间16 h.对影响固定化菌降解亚硝酸盐氮的因素进行了研究,发现固定化菌的适宜降解条件为:温度30℃、pH 7.0及DOI≥2.0 mg//L.将固定化菌用于养殖水亚硝酸盐氮降解,10 d内将业硝酸盐氮从1.210 mg/L降至0.041 mg/L,具有稳定、持续降解的特点.     

固定化光合细菌在中华绒螯蟹人工育苗中的应用

用包埋法制备固定化光合细菌,并通过制备方法及使用方法的改进,使净化水质效果得到改善。四种不同包埋载体的试验结果表明,含３％沸石的海藻酸钙凝胶珠强度最大,净化水质活性最高。水体中ＮＹ３－Ｎ,ＮＯ２－Ｎ的含量及ＣＯＤ值的下降度随包埋比的增大而增大。对固定化光合细菌的用量及活化处理方法进行了探讨。     

2种免疫多糖对刺参组织主要免疫酶活性的影响

研究了口服不同剂量海藻硫酸多糖、壳聚糖对刺参(Apostichopus iaponicus)酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)、溶菌酶(LSZ)、超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响.在基础饲料中分别添加0.25%、0.5%、1.0%海藻硫酸多糖(质量百分比);0.5%、1.0%、2.0%壳聚糖,以基础饲料饲喂组为对照,饲喂7d.于投喂后第2天、5天、9天和15天检测ACP、AKP、LSZ与SOD活性.结果显示,投喂后15d内,各实验组ACP、AKP活性均随时间和剂量增加持续升高,与对照组具有显著性差异(P＜0.05),其中添加1.0%海藻硫酸多糖与2.0%壳聚糖效果最佳,1.0%海藻硫酸多糖组的ACP、AKP酶活最高,分别是对照组的3倍、2.3倍,2.0%壳聚糖添加组的ACP、AKP活性分别是对照组的3.9倍、4.4倍:LSZ活性则随时间延长先升高后降低,最高时与对照组具有显著性差异(P＜0.05),且LSZ活性与免疫多糖添加量不成正比关系,0.5%海藻硫酸多糖与1.0%壳聚糖组效果最佳,酶活最高分别是对照组的1.4倍、3.3倍;SOD活性均在第2天显著升高,短暂的升高后逐渐降低趋于对照,1.0%海藻硫酸多糖、2.0%壳聚糖组SOD酶活最高,分别是对照组的1.7倍、2.1倍.研究结果表明,海藻硫酸多糖和壳聚糖可作为刺参免疫增强剂使用,建议其适宜添加量分别为1.0%海藻硫酸多糖、2.0%壳聚糖.     

磁性壳聚糖微球固定化褐藻酸酶的研究

利用反相悬浮交联法制备磁性壳聚糖微球(magnetic chitosan microspheres, M-CS),并对褐藻酸酶进行固定化研究.结果表明,M-CS呈规则的圆球形,具有较好的磁响应性,可稳定地保存在弱酸和弱碱中.其弱碱交换量随着戊二醛用量的增加而减少,悬挂醛基则相应地增加.M-CS对褐藻酸酶的吸附动力学实验表明,M-CS容易吸附褐藻酸酶,但吸附的酶量受载体与酶的比例、溶液的离子浓度、戊二醛的用量、溶液pH的影响明显,而温度对吸附的酶量的影响则相对较弱.酶学性质研究表明,相对于游离的褐藻酸酶,固定化酶的最适温度略有升高,可明显改善其热稳定性和酸碱稳定性,与底物的亲和力也有所增强.     

卡托普利/壳聚糖-明胶网络多聚物缓释微球制备工艺的研究

利用壳聚糖、明胶为载体材料,乳化交联法制备卡托普利/壳聚糖明胶网络多聚物缓释微球(Cap/CGNPMs), 以部分因子设计试验优化微球的制备处方和工艺。结果表明,壳聚糖分子量(700000 Da)、药物与载体材料投料比(1∶4)、交联剂组成(甲醛+三聚磷酸钠)、交联度(1∶0 .75)、添加0 75%微晶纤维素为制备Cap/CGNPMs 的较理想条件。按较理想处方和工艺制得的Cap/CGN PMs粒径分布范围为220~280μm,包封率46. 23±4 .51%,载药量9. 95±0 .77% , 方法重现性好,体外释药试验证明,Cap/CGNPMs具有良好的缓释延效作用。     

复凝聚法制备焦酚缓释微囊工艺优化

用复凝聚法制备以壳聚糖和海藻酸钠为囊壁、以焦酚为囊芯的缓释微囊,研究微囊形态、色泽及包埋率等指标来探究囊壁配比、囊芯浓度(1、2、3、4、5 mg/mL)和DMSO含量(17%、29%、38%、44%、50%)对焦酚缓释微囊制备的影响,以优化焦酚缓释微囊制备工艺。结果显示,壳聚糖与海藻酸钠复凝聚反应最佳含量比例为1:2;囊芯浓度为3 mg/mL焦酚缓释微囊呈球形,大小均匀,包埋率为51.56%,当助溶剂DMSO含量为17%时,包埋率达到93.35%,微囊大小均匀呈球形,色泽晶莹透亮。     

黄海黄杆菌YS-9412-130固定化细胞产酶技术

3种不同的包埋材料固定化YS－9412－130菌体细胞,进行半连续发酵。结果表明,用2.5%卡拉胶固定化细胞,产酶效率最高;添加明胶对产酶不利而添加豆饼粉与玉米粉后,酶活力有显著提高;卡拉胶固定化细胞发酵液中游离菌体浓度随发酵时间变化略有上升,总体水平较低。发酵液酶活随菌体浓度的增大而呈上升趋势;固定化细胞半连续发酵效率远高于游离细胞分批发酵的效率。