水杨酸对“赤霞珠”葡萄中白藜芦醇诱导合成的影响

以"赤霞珠"酿酒葡萄为试材,系统研究了葡萄果实生长发育过程中白藜芦醇(Res)的变化规律,同时探讨了水杨酸的喷施对葡萄果皮及叶片中白藜芦醇合成的诱导作用及与苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性间的关系,以研究不同浓度水杨酸(SA)对酿酒葡萄白藜芦醇诱导合成的影响。结果表明:水杨酸对葡萄白藜芦醇具有显著的诱导效果,在葡萄幼果期诱导率较高,但诱导时间较短暂;而且不同水杨酸浓度对葡萄果皮中白藜芦醇含量和苯丙氨酸解氨酶活性呈正相关,其中4mM的水杨酸对葡萄白藜芦醇的诱导效果最佳。     

不同砧木对‘赤霞珠’葡萄果实白藜芦醇含量及其相关酶活性的影响

【目的】研究不同砧木的‘赤霞珠’葡萄果实中白藜芦醇(resveratrol,Res)含量及相关酶活性,为北疆地区筛选Res含量较高的赤霞珠砧穗组合提供理论依据。【方法】采用‘赤霞珠’(Cabernet Sauvignon,CS)自根苗(CK)为对照,以‘3309C‘’1103P‘’140R‘’SO4‘’5C’5种抗性砧木嫁接‘赤霞珠’为处理组合。对‘赤霞珠’葡萄转色期至成熟期果皮和种子中Res含量及相关酶活性进行动态测定,相关酶包括苯丙氨酸解氨酶(phenylalanine ammonia lyase,PAL)、肉桂酸-4-羟化酶(cinnamic acid 4-hydroxylase,C4H)、4-香豆酸-辅酶A连接酶(4-coumarate CoA ligase,4CL)、丙二酰辅酶A(Malonly-CoA,COA)和4-香豆酰辅酶A(4-coumaroyl-CoA,4CA)。【结果】砧木对砧穗葡萄果实中Res含量及其相关酶活性会产生一定影响,在各砧穗组合中,CS/140R、CS/SO4、CS/5C果皮与种子中Res含量与对照相比均显著增加,其中CS/140R组合在种子与果皮中Res含量均最高;而CS/1103P和CS/3309C组合与对照相比则无显著性差异;各砧木均不同程度地提高赤霞珠葡萄果实内PAL、C4H、4CL、COA、4CA活性,其中‘140R’可显著提高各个酶活性,并在种子与果皮中其活性均显著高于其他砧穗组合;对5种酶活性与Res含量相关性分析后发现,这5种酶活性与Res含量均呈正显著相关水平,其中COA、4CA活性与Res含量相关系数最大。【结论】与自根苗相比,抗性砧木可以提高‘赤霞珠’葡萄种子与果皮内Res含量及其合成相关酶活性,CS/140R组合对提高‘赤霞珠’葡萄种子和果皮中Res含量和PAL、C4H、4CL、COA、4CA活性明显优于其他处理。     

水杨酸和紫外线对诱导采后葡萄果皮内白藜芦醇合成作用研究

以采收后的高妻、佳利酿、田野红3个成熟葡萄品种为试材,采用外源喷施法研究了水杨酸(Salicylicacid,SA)对葡萄果皮白藜芦醇(Resveratrol,Res)含量的影响;采用裂区试验对比研究不同品种、不同紫外线种类、同一紫外线不同辐射剂量对葡萄果皮Res含量的影响。结果表明,100mg/L的SA喷施处理可以显著提高3个葡萄品种果皮中的Res含量,诱导田野红的Res合成的效果显著高于高妻和佳利酿。除UV-B处理对高妻果皮中Res含量无显著影响外,其他UV-B和UV-C处理均能导致采后3个品种的葡萄果皮中Res含量的显著增加,且UV-C对Res诱导积累效果极显著地优于UV-B。辐射剂量在0～3.6kJ/m2范围内,3个葡萄品种果皮Res含量有随UV-B和UV-C辐射剂量的增加而增大趋势,但不同紫外线种类和辐射剂量对Res诱导积累效果因品种不同存在差异。     

贺兰山东麓不同酿酒葡萄品种成熟期白藜芦醇含量的差异

以不同酿酒葡萄品种"霞多丽""贵人香""烟73""西拉""梅鹿辄""赤霞珠""品丽珠""蛇龙珠"和感染卷叶病毒的"蛇龙珠"等为试材,系统研究了不同成熟期葡萄果实中苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性及白藜芦醇(resveratrol,Res)含量,以了解贺兰山东麓不同酿酒葡萄品种成熟期Res含量的差异。结果表明:宁夏贺兰山东麓不同酿酒葡萄品种Res含量差异较大。白色品种中未检测到PAL,有色品种中PAL活性次序为"赤霞珠""梅鹿辄""品丽珠""烟73""西拉";Res含量最高的是"烟73",其次是"西拉""梅鹿辄""赤霞珠""品丽珠""贵人香""霞多丽";感染卷叶病毒的"蛇龙珠"的PAL活性和Res含量均高于健康植株。     

油菜素内酯和脱落酸调控葡萄果实花色苷合成的研究

【目的】为研究2,4-表油菜素内酯(2,4-epibrassinolide,EBR)和脱落酸(abscisic acid,ABA)处理对葡萄花色苷合成与可溶性固形物含量、果皮苯丙氨酸解氨酶(PAL)和类黄酮糖基转移酶(UFGT)活性以及果实内源ABA含量的影响,探索油菜素内酯调控葡萄果实成熟及花色苷合成的机理。【方法】以酿酒葡萄‘赤霞珠’(Cabernet Sauvignon)和‘烟73’(Yan 73)为试材,在葡萄转色前分别用0.1、0.4、0.8 mg.L-1EBR,1mg.L-1Brz(brassinazole,BR生物合成抑制剂)和200 mg.L-1ABA,均匀喷施于葡萄果实,在葡萄成熟过程中测定葡萄果皮花色苷含量及PAL和UFGT酶活性,同时测定果实ABA和可溶性固形物含量。【结果】在果实着色初期,‘赤霞珠’和‘烟73’葡萄果皮PAL和UFGT活性及果实内源ABA含量均逐渐升高,当果实接近成熟花色苷含量基本稳定时ABA含量开始降低。与对照相比,0.4mg.L-1EBR和200 mg.L-1ABA处理显著增加了果实内源ABA含量,提高了果皮PAL和UFGT活性,促进了果皮花色苷的合成和果实可溶性固形物的积累。0.1 mg.L-1和0.8 mg.L-1EBR处理总体增加了果实内源ABA含量,促进了花色苷的合成和可溶性固形物的积累,并提高了UFGT和PAL酶活性,但比0.4 mg.L-1EBR处理提高的幅度小,且差异显著。1 mg.L-1Brz处理使果实ABA的合成推迟,果实可溶性固形物含量、果皮PAL和UFGT活性以及花色苷含量均低于对照,但差异不显著。【结论】外源EBR和ABA处理促进了葡萄成熟和花色苷合成,在不同浓度EBR处理中,以0.4 mg.L-1处理效果较好;内源ABA可能参与了EBR对葡萄成熟和花色苷合成的调控。     

UV-C辐射对盆栽葡萄北丰叶片和邻近果穗果实白藜芦醇及其糖苷质量分数的影响

以1a生北丰(Vitis thunbergii×V.vinifera)葡萄盆栽结果树为试材,在果实始熟期采用紫外线C(Ultraviolet C,UV-C)辐射结合韧皮部环剥的方法,研究了UV-C辐射对葡萄叶片和邻近果穗果实白藜芦醇(Resveratrol,Res)及其糖苷质量分数的影响。结果表明,UV-C辐射诱导葡萄果实Res合成积累的敏感性低于叶片,辐射葡萄叶片对邻近果穗上果皮Res的影响远远小于UV-C直接辐射葡萄果穗,且辐射诱导葡萄果皮中Res质量分数与叶片中Res质量分数存在着一定的相关性。当叶片位于果穗下方时,叶片中反式白藜芦醇(trans-Resveratrol,trans-Res)、反式白藜芦醇苷(trans-Piceid,trans-PD)和顺式白藜芦醇苷(cis-Piceid,cis-PD)质量分数表现出环剥处理显著高于不环剥处理,然而果皮中的结果正好相反。当叶片位于果穗上方时,果皮中trans-Res、trans-PD和cis-PD质量分数表现出不环剥处理显著高于环剥处理,暗示葡萄Res可能存在韧皮部运输途径,且运输方向是双向的。此外,UV-C直接辐射葡萄果穗处理果皮trans-Res和cis-PD质量分数显著高于对照和UV-C辐射葡萄叶片处理。种子中仅检测到trans-Res,且仅环剥处理和辐射下方叶片不环剥处理显著高于对照。     

中国野生葡萄果皮和叶片白藜芦醇含量测定

【目的】探讨中国野生葡萄果皮和叶片中白藜芦醇(Resveratrol,Res)含量的特点,为进一步开发利用中国野生葡萄资源提供理论依据。【方法】以51个野生葡萄株系为材料,利用高效液相色谱法(HPLC)连续2 a测定成熟果皮和叶片中白藜芦醇的含量,并结合气候条件进行对比分析。【结果】在51个野生葡萄株系中,约60%的葡萄果皮中白藜芦醇含量高于叶片,株系间果皮、叶片Res含量(ω)存在很大差异,其中果皮中含量最高的‘双溪腺枝葡萄03’(2013年与2014年分别为67.82μg·g~(-1)和68.44μg·g~(-1))比含量最低的‘洪江刺葡萄04’(2013年0.08μg·g~(-1),2014年0.09μg·g~(-1))高855.5倍,叶片中含量最高的‘高山二号’(2013与2014年分别为10.27μg·g~(-1)和11.69μg·g~(-1))比含量最低的‘冯举沟桑叶葡萄02’高256.8倍。结合采样地2 a的气候条件分析,果皮中的Res含量几乎未受气候条件影响,而叶片中Res含量在采样的2 a间变化幅度较大。【结论】腺枝葡萄中的‘双溪腺枝葡萄03’‘芷江水腺枝葡萄’‘双溪腺枝葡萄01’及山葡萄中的‘山葡萄N43-3’‘长白9号’‘双优’等果皮富含白藜芦醇。研究为有效利用和开发野生葡萄资源中的白藜芦醇及促进功能性食品开发提供理论依据。     

壳聚糖对葡萄冷藏期间果皮色素及相关酶活性的影响

以红地球葡萄为试材,探讨不同壳聚糖处理对冷藏期间葡萄果皮色素含量及相关酶活性变化的规律。结果表明:果实贮藏期间,叶绿素、胡萝卜素和花色苷含量及苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性逐渐降低,多酚氧化酶(PPO)活性逐渐上升,过氧化物酶(POD)活性呈现先上升后下降的趋势;壳聚糖处理有效控制叶绿素、胡萝卜素和花色苷的降解,抑制PPO活性的上升及PAL和POD活性的下降,长时间保持果实艳丽,提高葡萄果实的商品价值和外观品质。     

采后UV-B对葡萄果实中多酚及PAL活性的影响

以酿酒葡萄‘赤霞珠(Vitis vinifera L.cv.Cabernet Sauvignon)’果实为试验材料,研究采后不同剂量UV-B对葡萄果实中多酚含量及PAL活性的影响,为人为调控葡萄果实乃至葡萄酒品质提供理论依据。以成熟葡萄果实进行UV-B照射0 min(对照)、15 min、30 min、45 min、60 min、120 min,并随机取样测定果实中总酚、黄烷醇类多酚及PAL活性,结果表明:采后UV-B处理能显著提高葡萄果实苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性,诱导采后葡萄果实多酚类物质积累。     

荔枝果实感染霜疫病后的生理变化

人工接种霜疫病菌的荔枝果实感病后,病斑部位的果皮和距离病斑部位较近的果皮中■产生速率和MDA含量较高,而SOD活性较低;距离病斑部位较远的果皮中■产生速率和MDA含量较低,而SOD活性较高;邻近病斑部位的果皮中PPO、POD和PAL活性较高,而距病斑部位较远的果皮中PPO、POD和PAL活性较低。表明霜疫病菌的侵染对荔枝果皮中以SOD为核心的活性氧清除酶系统产生了破坏作用,导致SOD活性下降,使得自由基等活性氧与其清除系统之间的相对平衡被破坏,启动膜脂过氧化,膜脂过氧化产物MDA含量显著增加,造成对细胞的伤害,加速荔枝果实衰老和劣变。同时霜疫病菌侵染诱导荔枝果皮中POD、PPO和PAL活性增高,是加速荔枝果皮酶促氧化褐变的一个重要原因。     

真菌诱导子对毛葡萄愈伤组织细胞次生代谢的影响

以毛葡萄Vitis heyneana Roemer et Schultes愈伤组织为试验材料,研究了不同种类真菌水溶性诱导子及其不同浓度、不同添加时间和作用时间对毛葡萄愈伤组织细胞次生代谢产物的影响。结果表明:真菌诱导子的加入提高了毛葡萄细胞中总黄酮、总酚的含量及过氧化物酶(POD)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)的活性,在培养的第28d以80μg/mL浓度的诱导子处理毛葡萄愈伤组织效果最好。不同真菌来源的诱导子对毛葡萄愈伤组织次生代谢的影响效应不同。这些研究结果暗示了通过真菌诱导子调控葡萄次生代谢的可能性。     

S-诱抗素处理对'巨峰'葡萄果实花青素含量及品质的影响

为研究S-诱抗素对'巨峰'葡萄果实生长、果实着色效果、果实品质、花青素含量及相关酶活性变化的影响,指导S-诱抗素在'巨峰'葡萄生产上合理使用,采用不同质量浓度(0、100、200、300、400 mg/L)的S-诱抗素在葡萄果实转色初期进行茎叶喷雾处理。结果表明:S-诱抗素处理后外观色泽得到有效改善,葡萄果皮着色指数(CIRG)、花青素、叶绿素含量显著提高;随着时间推移,果实可溶性固形物、维生素C含量有不同程度的提高,可滴定酸含量明显下降;花青素合成相关酶PAL、CHI活性提高。葡萄果实转色初期(第2次膨大期,转色面积为50%～10%)不同浓度S-诱抗素处理对葡萄着色存在低促高抑的影响,其中用300mg/LS-诱抗素茎叶喷雾处理1次作用效果最好。     

香蕉果实贮藏冷害与PAL活性及可溶性蛋白的关系

研究了200μmol/L脱落酸(ABA)和5mmol/L腐胺(Put)处理对贮藏于8℃下条件的香蕉果实耐冷性的影响及其与PAL活性及可溶性蛋白的关系。结果表明:与对照果实相比较,ABA和Put两种处理都不同程度地减轻香蕉果实贮于8℃条件下的冷害。具体表现在,两种处理均延缓了果皮颜色变暗与细胞膜透性的升高,提高了果皮可溶性蛋白含量,维持果实果皮较高的PAL活性。本文还讨论了香蕉果实耐冷性与果皮PAL活性的关系。     

葡萄白藜芦醇提取和HPLC定量测定适宜条件的研究

 研究了浸提溶剂种类、浸提方式、浸提温度和浸提时间对葡萄果皮和种子白藜芦醇(Res)提取的效果。结果表明, 果皮采用乙酸乙酯浸提溶剂, 研磨后25℃下浸提24 h, 种子采用甲醇浸提溶剂,研磨后25℃下浸提48 h, Res浸提效果最好。上述提取条件下, 采用高效液相色谱测定‘北醇’葡萄果皮和种子中的Res含量分别为3.51μg·g^{- 1} FM和8.81μg·g^{- 1} FM。反式Res在检测波长为306 nm条件下,采用等浓淋洗能很好地被检测到。     

腐胺对藤稔葡萄果皮色素及相关酶的影响

通过对藤稔葡萄喷施不同浓度腐胺(Put),研究了腐胺对葡萄果皮色素及相关酶的影响.结果表明:不同浓度的Put都起到了延缓叶绿素降解的作用,影响花色素苷合成和色泽表现.Put影响葡萄果皮中花色素苷合成途径中苯丙氨酸氨解酶(PAL)、多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)3个酶活性.     

葡萄离体叶片和果实白藜芦醇及其糖苷合成对UV-C辐射诱导的响应

以‘北丰’和‘北全’葡萄离体叶片和果实为试材,研究了葡萄不同器官内白藜芦醇（Res）及其糖苷合成对紫外线C（UV-C）辐射诱导的响应,结果表明：不同器官反式白藜芦醇（trans-Res）合成积累对UV-C辐射诱导反应存在差异。叶片适宜的UV-C辐射剂量为1.8 kJ · m-2,而果皮为1.8 ~ 5.4 kJ · m-2,果实Res合成积累对UV-C辐射诱导的敏感性低于叶片。3.6 kJ · m-2 UV-C辐射果粒对种子中trans-Res含量没有显著影响,直接辐射完整种子或剖开种子切面也不能显著提高trans-Res含量。UV-C辐射处理的叶片和果皮中trans-Res含量随辐射后常温避光孵育时间的延迟表现出先升后降的趋势,而反式白藜芦醇苷（trans-PD）和顺式白藜芦醇苷（cis-PD）含量在12 ~ 48 h内迅速提高,之后维持在相对稳定状态。种子中trans-Res含量在整个孵育过程中与对照之间均不存在显著差异。     

不同滤光膜袋对‘红地球’葡萄果实品质的影响

【目的】探索光质对‘红地球’葡萄果实品质的影响。【方法】以‘红地球’葡萄为试验材料,转熟时对果穗进行红、橙、绿、蓝、白滤光膜与避光套袋处理,测定分析了转熟至采收期间套袋对果实单果质量、糖酸积累、着色与花色素苷合成等品质特征的影响。【结果】研究表明蓝色滤光膜套袋‘红地球’葡萄果实中可溶性固形物与总糖含量增加,葡萄糖、果糖、蔗糖3种糖分含量相比白膜分别提高了7.2%、13.7%、17.2%,糖酸比提高,显著促进了花色素苷的合成,色度角h最小,果皮中主要花色素苷组分芍药素-3-O-葡萄糖苷和矢车菊素-3-O-葡萄糖苷较白膜显著增加,分别提高18.4%与12.5%,PAL活性增强,促进了葡萄积累花色素苷;而避光处理的‘红地球’果实糖酸比小,花色素苷合成显著受到抑制。【结论】在我国南方湿热地区果实部位光环境对设施葡萄品质具有重要作用,蓝色滤光膜套袋可以增加蓝紫光的比例,调控葡萄光合产物分配,诱导苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性,促进欧亚种‘红地球’葡萄果实糖的积累和着色,改善品质。     

苯并噻二唑处理提高采后沙糖橘对指状青霉菌的抗性

对沙糖橘(Citrus reticulata Blancdo‘Shiyueju’)果实进行苯并噻二唑(S-methyl benzo thiadiazole-7-carbothioate,BTH)渗透处理后接种指状青霉菌孢子,12h后即可明显诱导果皮中抗病相关蛋白CR-CT1和CR-BG3基因表达并在贮藏期间维持较高水平;不同浓度BTH处理果实的发病率和病斑面积均比对照低,其中以0.025g·L-1BTH处理的效果最好;BTH处理提高了果皮几丁质酶(CT)、β–1,3–葡聚糖酶(GUN)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)、多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)活性和H2O2含量,表明BTH诱导的沙糖橘果实抗病性与果实CR-CT1和CR-BG3基因的表达增强,CT、GUN、PAL、PPO和POD等相关酶活性和H2O2含量提高密切相关。     

紫外照射诱导采后番茄苯丙氨酸解氨酶的分离纯化

为了解苯丙氨酸解氨酶(PAL)在紫外诱导采后果蔬抗病性中的作用,以番茄为试材,经2.4 kJ/m2短波紫外线(UV-C)照射,取果皮经冰浴研磨、硫酸铵分级沉淀、凝胶过滤和离子交换层析,分离纯化PAL,测得UV-C照射组PAL总蛋白含量为0.030 mg,较对照组高0.002 mg,酶比活为11 466.0 U/mL,比对照组高1 109.0 U/mL,分离纯化倍数为16.4倍,对照为15.0,表明UV-C照射可诱导PAL产生,提高活性.纯化获得的PAL经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,呈现一条带,其分子量约为304 kD.     

不同色价山葡萄总酚及相关酶活性的比较分析

以14份山葡萄品系为试材,根据果汁颜色的差异,应用方差分析法和相关性分析法,对14份果汁颜色深浅不同的山葡萄资源的色价值、总酚含量和苯丙氨酸解氨酶(PAL)、多酚氧化酶(PPO)活性进行了比较分析。结果表明:14份山葡萄资源果实色价值变化幅度为5.889~62.861g-1;其果实色价值、总酚、PAL及PPO活性存在明显差异;色价值与总酚及PAL、PPO活性呈显著正相关;总酚含量又与PAL和PPO活性呈正相关。由此可见,果汁颜色越深的山葡萄资源,果实总酚含量越高,说明其具有的抗氧化能力较强;但由于其较高的PPO活性,在加工过程中应控制褐变的发生。