运输过程中对禽流感病毒抗原的快速检测

<正>青海省民和动物防疫监督检查站位于青海最东段,与甘肃省兰州市红古区相连,分别在109国道享堂段和兰西高速马场垣入口段执行动物防疫监督检查工作,2008年仅从此两条道口进入来自甘肃、宁夏、陕西、山西等地的鸡48万只,为了加强动物     

IBD试纸条对中强毒力苗毒及分离野毒的检测研究

以琼扩为对照，应用IBD试纸条分别检测了人工感染鸡、疫苗接种鸡、自然发病鸡3种不同类型的法氏囊样品以及不同的疫苗。毒株测定结果显示，IBD苗毒228E、MB、V877、NF8、QC试纸条均为阳性，琼扩对照均为阴性，分离强毒H4、He3、Y2试纸条及琼扩对照均为阳性。法氏囊样品测定结果显示，自然感染病例，H4、He3、Y2感染鸡，228E、MB、V877、NF8接种鸡两种方法测定均为阳性，QC则为阴性。对法氏囊样品的检测结果证明，IBD试纸条具有特异、敏感、快速的特点，其敏感性高于琼扩的敏感性，为IBD诊断提供了新方法。     

胶体金免疫层析试纸条法与血凝抑制试验、琼脂扩散法检测禽流感病毒抗体的比较

用本实验室建立的胶体金免疫层析试纸条法检测了鸡血清中的禽流感病毒抗体，并与传统的血凝抑制试验、琼脂扩散法检测结果进行了比较。结果表明，胶体金免疫层析试纸条具有特异性强、灵敏度高、方法简便、快速等优点，适合于鸡禽流感病毒抗体的现场快速检测。     

胶体金快速诊断方法对鸡减蛋综合征病毒的检测

选择15nm的胶体金颗粒作为标记物，制备了鸡减蛋综合征病毒（EDSV）胶体金试纸条。该试纸条能检出浓度约为1．35μg／mL的纯化EDSV，用该试纸条检测135份临床样本，并与HA方法相比较，结果显示，二者的阳性符合率为89．8％。特异性试验结果显示，与鸡新城疫病毒（NDV）、鸡传染性腔上囊病病毒（IBDV）、鸡传染性支气管炎病毒（IBV）无交叉反应。表明，该试纸条用于检测EDSV具有快速、操作简便、特异性强等优点，可用于大批量抗原样本的检测。     

猪病轻简化实用快速诊断技术与应用

诊断是有效控制和消灭疫情的基础,准确的诊断结果是制定动物疫病防控措施的科学依据,动物疫病诊断技术是反映动物防疫整体水平的重要指标。免疫层析试纸快速检测技术具有操作简便、快捷、无需特殊仪器设备、检测结果清楚直观、试剂稳定和便于保存等特点,适用于动物疫病现场快速检测,对猪病诊断、指导免疫和建立适宜的免疫程序等有重要作用。国家生猪产业技术体系自启动以来,以实现猪病检测技术的快速、灵敏、特异、简便化为目标,疫病控制研究室围绕重要猪病病原,重点开展了免疫层析试纸技术研究,成功研制了一批具有自主知识产权的抗体快速检测技术产品,获得国家二类新兽药证书2项,河南省科技进步一等奖1项,每年向国家生猪产业技术体系综合试验站,基层兽医站以及不同类养猪企业免费提供猪病快速检测试纸4万条以上,为防控生猪疫情提供了技术支撑。     

鸡毒支原体胶体金免疫层析试纸条的研制和初步应用

为研制一种用于快速检测鸡毒支原体(MG)的胶体金免疫层析试纸条,采用直径20nm的胶体金颗粒标记纯化的MG多克隆抗体,硝酸纤维素膜检测线和质检线分别喷加纯化的MG多克隆抗体和兔抗鸡IgG抗体,制作胶体金试纸条。试纸条检测MG阳性显示两条红色反应条带;阴性为一条红色反应带。本试纸条可检测到1∶1 280倍稀释的MG抗原,即颜色变化单位为8×104 CCU/mL,具有高度的灵敏性。用试纸条检测衣原体、滑液支原体、猪肺炎支原体、鸡大肠埃希菌和鸡白痢沙门菌等均呈阴性,表明该试纸条具有较好的特异性。对试纸条检测呈MG阳性的38只病鸡进行MG培养验证,所得结果一致;同时对MG培养检测的另外95份病鸡样品进行试纸条测试比对,符合率为96.84%,证明该试纸条具有很高的准确性。该胶体金免疫层析试纸条检测MG操作简单,灵敏度、准确度、特异性等均符合要求,可以用于养殖场批量MG的检测。     

猪口蹄疫O 型抗体检测试纸条对比试验

为了解不同猪口蹄疫O 型抗体检测试纸条的性能,通过检测已知相关及非相关阳性血清样品、阴性血清样品和免疫 猪血清样品,对4种猪口蹄疫O型抗体检测试纸条的敏感性、特异性进行研究评估,并对比猪口蹄疫O型VP1结构蛋白抗体ELISA诊断试剂盒的检测结果。结果表明,仅有A试纸条的敏感性和特异性较好,且与试剂盒抗体检测结果的符合率较高（90%）;而其他试纸条的敏感性和特异性较差,与试剂盒抗体检测结果的符合率较低（40%～65%）。通过对比检测,仅有A试纸条可用于大量临床样品的快速检测和现场检测,更适合基层兽医和养殖户使用,而其他试纸条的检测性能还有待进一步优化提升。     

试纸探针条检测鸡传染性法氏囊病疫苗中病毒含量的试验

试纸探针条可识别市售的国产或进口鸡传染性法氏囊病（IBD）代表性疫苗毒株及其鸡胚培养毒或细胞培养或其接种鸡的囊毒，并可检出经甲醛灭活的IBD标准强毒、田野囊毒、鸡胚培养毒或细胞培养毒。活的或灭活待检疫苗水溶液中IBDV的含量越高，试纸探针条上阳性线显现越快、颜色越深且明显；在30分钟的结果观察时间内，该条可检出每0.1mL样品中800ELD50或10^7.0TCID50的病毒含量，该条检测灭活IBDV的效价是AGP测定效价的32倍以上，试纸探针条为估价疫苗中IBDV的含量或疫苗质量提供了一条简便、快速、经济的新途径。     

猪旋毛虫病4种检测方法的比较

目的 试验比较快速试纸条法、快速ELISA法、常规镜检法和人工胃液消化法检测猪旋毛虫病效果。方法 采用上述4种方法分别对1566头屠宰猪作旋毛虫病的检测。结果 旋毛虫检出率分别为1．66％、1．66％、1．21％和1．60％。结论 快速试纸条法具有特异、敏感、快速、简便的特点，用于现场检测可收到立等可取的效果。     

用于检测猪瘟抗体的免疫金标试纸条的研制与应用研究

以猪瘟抗原包被硝酸纤维素膜的检测区，在其下端附着胶体金标记的猪瘟抗原，组成免疫金标试纸条，根据胶体金免疫层析原理，用该试纸条建立检测猪瘟抗体水平的免疫金标检测法。再用本试纸条检测法与Dot-ELISA及间接血凝法对298份猪、鸡、鸭、鹌鹑、兔、鼠、羊血清进行猪瘟抗体检测，结果符合率达100%。试验结果表明，本法与Dot-ELISA及间接血凝法一样特异、敏感和微量，而且检测时间短、直观，结果容易判定，适用于大面积猪瘟抗体监测普查。     

禽白血病抗原快速检测试纸条的研制及初步应用

禽白血病给养鸡业带来极大损失,目前检测该病病原的方法主要有ELISA、PCR及RT-PCR、原位杂交(ISH)、间接免疫荧光(IFA)等。本研究应用2株抗禽白血病病毒(ALV)p27蛋白特异性单克隆抗体5D3和4F12研制了ALV快速检测试纸条。结果证明该试纸条具有良好的特异性,与H9亚型禽流感病毒、新城疫病毒、马立克氏病病毒、小鹅瘟病毒、鸡贫血病病毒没有交叉反应;采用p27表达蛋白检测试纸条灵敏性,检测下限达到70ng/mL;应用该试纸条检测71份临床样品,与商业ELISA试剂盒检测结果比较,二者符合率达到93%。该试纸条的研制,为基层快速检测ALV提供了条件。     

蛋鸡场沙门氏菌快速检测方法应用比较

探索蛋鸡场沙门氏菌快速检测方法.经试纸条、分离培养初步确定沙门氏菌阳性菌株后,进行血清学分型和荧光PCR鉴定.在601份鸡棉拭子、粪便、饮水和饲料样品中分离出37株沙门氏菌,其中沙门氏菌D群2株、其他群35株.试纸条、分离培养和荧光PCR方法相比较,快速分离培养结合荧光PCR方法敏感、快速、准确,适合实验室检测;试纸条法快速、简便,适合蛋鸡场的快速初筛和日常监测;传统方法培养时间长,有待改进.     

猪旋毛虫病快速检测试纸条的研制及特性测定

以旋毛虫重组分泌(excreting secretion．ES)抗原为基础,采用免疫金技术成功研制出旋毛虫病快速检测试纸条,试验结果显示试纸条与猪肺线虫、猪囊尾蚴、猪细颈囊尾蚴、猪米氏住肉孢子虫、猪蛔虫无交叉反应。证明旋毛虫病试纸条具有良好的特异性和敏感性,其敏感性与ELISA相当,与ELISA及消化法的检测结果符合率为100％。5min内肉眼观察获得结果,具有特异、敏感、快速、简单等特点,不需要任何专业技能和其他试剂。本方法的建立对猪旋毛虫病诊断和流行病学调查具有很大的应用价值。     

猪尿液中盐酸克伦特罗检测方法比较

利用快速检测试纸条法、竞争酶标免疫法(ELISA)和气相色谱-质谱分析方法(GC-MS)分别对84份猪尿液样品进行盐酸克伦特罗检测。结果显示,ELISA方法与气相色谱-质谱分析方法(GC-MS)符合率为100%,快速检测试纸条法与固相萃取-气相色谱-质谱分析方法(GC-MS)符合率为90.5%。     

猪旋毛虫病的几种常见实验室鉴定方法效果比较

分别采用快速试纸条法、快速ELISA法、常规镜检法和人工胃液消化法4种方法对1566头屠宰猪做旋毛虫病的检测,旋毛虫检出率分别为1.66%、1.66%、1.21%和1.60%,通过对这4种方法检测效果进行比较,发现快速试纸条法具有特异、敏感、快速、简便的特点,用于现场检测可收到立等可取的效果。     

“瘦肉精”免疫胶体金试纸条的结构原理和使用注意事项

央视3.15特别节目《健美猪真相》节目播出以后,各地普遍加强了对瘦肉精的查验力度。瘦肉精免疫胶体金试纸条作为一种方便、快速且适于现场操作的检测方法,在广大基层检测单位得到了广泛应用。为了提高广大基层检测人员对免疫胶体金试纸条检测方法的了解,本文拟对免疫胶体金试纸条结构、原理和在其使用过程中的注意事项进行阐述,以期能够对瘦肉精的检测工作起到帮助作用。     

猪尿中莱克多巴胺残留量快速检测方法的建立

为了现场灵敏、特异、快速地检测猪尿中莱克多巴胺(RAC)的残留情况,试验用胶体金标记RAC单克隆抗体构建一种能够快速检测猪尿中RAC的免疫层析试纸条,通过正交试验优化试纸条中标记抗体的量、胶体金结合垫上胶体金单克隆抗体(CG-mAb)溶液的体积和牛血清白蛋白封闭的莱克多巴胺(RAC-BSA)的浓度得到最优组合,并测定试纸条的特异性、稳定性、检测时间和检测限。结果表明:经过优化后得到的最优组合为标记抗体的量1.5μg/mL,胶体金结合垫上CG-mAb溶液的体积1.5μL,RAC-BSA的浓度0.2 mg/mL;该试纸条可在3 min内特异性地检测RAC,检测限为3 ng/mL,在室温条件下能保存12个月。说明试验构建的快速检测猪尿中RAC试纸条能达到现场使用的要求,适用于快速筛查猪尿中RAC的残留。     

弓形虫抗体免疫胶体金快速检测试纸条的研制

将样品垫（加样区）、包被了弓形虫排泄分泌抗原和胶体金结合物的结合垫、包被了弓形虫排泄分泌抗原和抗弓形虫抗体的硝酸纤维素膜、吸水垫依次首尾互相衔接粘贴在白色塑料板上，组装成检测弓形虫抗体的免疫胶体金快速试纸条。然后用其进行动物弓形虫病血清抗体检测，并用弓形虫IHA诊断试剂进行对照试验。经对已知弓形虫阴、阳性血清检测，与弓形虫IHA检测结果的符合率为82．5％，金标试纸条较弓形虫IHA诊断试剂能提前2d检测到抗体。结果表明，检测弓形虫抗体免疫胶体金试剂（金标试纸条）的敏感度高于IHA。     

猪瘟病毒抗体纳米荧光检测试纸条的临床应用

为探究猪瘟病毒抗体纳米荧光检测试纸条的临床应用效果,对181份未免疫猪瘟疫苗、71份已免疫猪瘟疫苗的临床猪血清,采用本研究试纸条和北京世纪元亨公司的ELISA试剂盒分别进行抗体检测,对4头存在母源抗体的不同免疫时间仔猪血清、不同阶段的猪血清,采用本研究试纸条进行抗体检测,并对检测结果进行分析统计。结果显示,本研究试纸条与北京世纪元亨公司的ELISA试剂盒的阴性符合率为100%,阳性符合率为95.77%,经Kappa检验两者一致性良好;初生仔猪首免后,猪瘟抗体滴度有所下降,30 d后加强免疫,抗体滴度逐渐升高,试纸条检测结果与猪瘟抗体衰减变化过程呈正相关;不同阶段猪群的猪瘟抗体阳性率均为100%,抗体平均值较高,离散度较整齐,与规模化养猪场合理免疫程序相吻合。综合表明,本试纸条的临床应用效果较好,可用于实时监控猪群的猪瘟抗体变化,适用于基层规模化猪场的猪瘟抗体快速检测。     

犬病快速检测试纸条

犬病快速检测试纸条是采用胶体金标记免疫层析技术制成的,是一种快速检测犬体内特定抗原(抗体)的试纸。目前可检测犬传染病数十种,此试纸条具有快速、简便、实用等优点,现已被广泛应用在犬病的临床诊断中,同时它也作为犬饲养者家中自测犬病的首选工具。本文以犬瘟热病毒抗原检测试纸条举例说明。检测方法:用生理盐水沾湿的棉签收集病犬的眼