橡胶树籽苗芽接技术研究：橡胶树籽苗芽接育苗法研究之一

采用播种后约２周龄的籽苗作砧木在离土条件下进行芽接和留叶防止接穗回枯等技术,在苗圃育苗６－１８个月,可育成接穗茎干直径达０．４ｃｍ以上,具２－６蓬叶的橡胶籽苗芽接苗。与橡胶树芽接桩育苗方法相比,这种育苗方法培育袋苗可育苗时间３－１２个月,降低了育苗成本和劳动强度,提高了单位面积苗圃生产率。     

云南民营橡胶树籽苗芽接技术引进与试验推广

西双版纳2008年成功引进橡胶树籽苗芽接技术，并已向生产推广。籽苗芽接用播种后约2周的种子籽苗芽接，苗圃培育7～10个月，可育成2～4篷叶、茎干直径0．4Cm以上的成苗；苗木定植成活率高，雨季定植可达99．85％；植后恢复生长快，植后6月龄7篷植株可达19．73％，降低了生产成本和芽接劳动强度，提高了苗圃单位面积生产率。     

橡胶树籽苗芽接苗不同物候期的光合特性

在适宜温度(28.5 0.5)℃,相对湿度(75 5)%和正常大气CO2浓度条件下,采用活体测定方法,在不同物候期,对橡胶树籽苗芽接苗砧木和接穗第1蓬叶的光合特性进行了研究。结果表明,橡胶树籽苗芽接苗砧木和接穗第1蓬叶的光合特性变化规律基本相似,从变色期、淡绿期、稳定期,到衰老期,其叶片的表观量子效率(α)、最大净光合速率(Pmax)、光饱和点(PSLI)和叶绿素含量(CHL)等均随着物候期变化而不断变化,变化趋势为先迅速升高,达到最高值后缓慢下降;光补偿点(LCP)的变化趋势则相反。不同物候期的光补偿点和光饱和点有较大的差异,光补偿点为12￣78μmol/(m2·s),光饱点为256￣1109μmol/(m2·s)。与砧木相比,接穗有较高的光饱和点和较低的光补偿点。     

育苗措施对橡胶树小苗芽接苗生长的影响

为了探明育苗措施对橡胶树小苗芽接苗生长的影响,以不同时段播种的'GT1'实生苗为砧木,'云研77-4'云研77-2'GT1'为接穗,通过统计芽接成活率、抽芽率、苗木的茎粗和苗高4个指标,结合隶属函数值法系统地评价了育苗措施对橡胶树小苗芽接苗生长的影响.结果表明:(1)砧木播种时间对3个品种的芽接成活率及生长量的影响效应...     

菠萝蜜的籽苗芽接技术研究

通过对菠萝蜜籽苗芽接技术及不同生长阶段、不同季节对芽接成活率影响的研究,得出嫁接时间在春、秋两季为好,夏季次之,冬季最差,芽接的生长阶段以1～2叶期最佳,不超过3叶期为好。树菠萝的籽苗芽接具有操作简便、工效高、愈合好、省接穗、省时,定植成活率高的特点,为树菠萝嫁接苗的快速大批量生产,研究出了一套高效、快捷的方法。     

橡胶籽苗芽接苗生产试验

在橡胶籽苗芽接过程中进行了一些基础试验，对该技术进行了初步的验证工作，同时也添加了部分新的试验内容。试验结果表明：气候、芽条茎粗等因素影响籽苗芽接苗的成活；橡胶籽苗袋苗比裸根苗的成活率高，但操作比较麻烦，待进一步改进后，将显著提高橡胶籽苗芽接苗生产水平。     

一种新的橡胶无性繁殖方法—籽苗芽接法

本文介绍一种新的橡胶芽接法——籽苗芽接法,即采用2周龄左右的籽苗作砧木,将其拔起用绿色芽片芽接。这种芽接技术的要点是:(1)用于芽接的籽苗砧木应处于伸长后期至展叶期阶段;(2)芽片宜采用鳞片芽和叶柄脱落的叶芽;(3)芽接后籽苗生长的最初阶段应适当遮荫;(4)切砧时必须在砧木残茎上保留2片复叶。籽苗芽接的成活率可达70％以上。在海南岛,秋季播种和芽接,至翌年4—5月芽接苗生长2～3逢叶时,即可出圃定植,比培育芽接桩苗约缩短1年时间。     

橡胶树籽苗期芽接成活的基础生理研究

对橡胶树不同物候期籽苗的芽接成活率及有关生理参数的研究结果表明:①伸长期和展叶期籽苗的芽接成活率明显地高于变色期籽苗的芽接成活率。②伸长期和展叶期籽苗的组织含水量、自由水含量、可溶性糖、淀粉、水溶性蛋白质、氨基酸等物质含量及细胞质浓度都比变色期籽苗的高。③伸长期和展叶期籽苗的水势比变色期的大,而细胞透性则反之。④伸长期和展叶期籽苗的“根冠比”比变色期籽苗的大,但蒸腾强度却相反。由此表明,变色期籽苗的持水力和对水分的调控能力均较差,另一方面营养水平较低,这可能是该物候期芽接成活率低的主要原因。     

橡胶树雌蕊特异结构的发现初报

橡胶树(Hevea brasiliensis Muell. Arg.)的蒴果中通常含有3颗种子,但大田调查中发现,有含4颗种子和2颗种子的现象。对3个品系的橡胶树蒴果进行大田调查,并对雌蕊进行石蜡切片观察,结果表明：橡胶树的雌蕊中均存在四心室的现象,其发生频率品系间差异较大,没有观察到二心室的雌蕊;在橡胶树雌蕊中存在单个心室内2个胚珠的现象,品系间发生比率差异较大;3个品系的橡胶树均存在4颗种子的蒴果,品系间发生比率差异较大;只有GT1中存在2颗种子的蒴果。橡胶树4颗种子的蒴果由四心室雌蕊发育而来,2颗种子蒴果的形成原因有待进一步研究。     

利用多种植物激素组合促进橡胶籽苗接芽萌动

采用二次回归通用旋转组合设计,利用多种植物激素(IAA,GA,6-BA)不同浓度和浸泡砧木根时间的组合,研究了其对橡胶树(Heveabrasiliensis)籽苗接芽萌动的影响。通过建立模型和计算机模拟选优,研究了各项参试因子对接芽萌动速率比CK快的天数的单因子效应以及各因子间的互作效应,并初步确定了激素与处理时间的优化组合方案:IAA,GA,6-BA浓度分别为8￣25,28￣68,54￣67μg/mL,浸根时间为20￣25min;当IAA,6-BA浓度分别为19,50μg/mL,浸泡砧木根25min时,即可得处理苗木比不处理苗木提早25d。     

巴西橡胶树HbEPSPS基因逆境响应功能解析

草甘膦除草剂的靶标酶为5-烯醇式丙酮莽草酸-3-磷酸合成酶(EPSPS)。为研究HbEPSPS基因在橡胶树中的逆境响应功能,分析其在草甘膦、机械伤害、白粉菌侵染和不同激素处理下的表达模式。结果表明：草甘膦、机械伤害和IAA处理诱导HbEPSPS显著上调;干旱、ABA、SA和ETH处理亦能诱导HbEPSPS显著上调;H2O2处理橡胶树叶片中HbEPSPS表达呈现双峰规律;白粉菌侵染叶片,HbEPSPS表达显著下调。不同部位表达分析结果表明,HbEPSPS基因在花中表达量最高,其次是树皮和叶,在胶乳中表达量最低。此结果表明,HbEPSPS基因在橡胶树草甘膦药害和激素信号响应中具有重要作用,为研究其在橡胶树抗逆机制中的作用奠定良好基础。     

3个巴西橡胶树品种的死皮病调查

在现有割胶制度下对巴西橡胶树3个品种(热研8-79、热研7-33-97、PR107)的死皮病进行了调查。结果表明：这3个品种的幼龄树发病率和停割率从大到小依次为热研7-33-97(开割4年)＞ PR107(开割6年)＞热研8-79(开割3年),中龄树发病率和停割率从大到小依次为PR107(开割15年)＞热研7-33-97(开割8年)＞热研8-79(开割14年)。3个品种的中龄橡胶树比幼龄橡胶树的死皮病发病率、停割率和病情指数都有所上升。总体来看,对于幼龄橡胶树而言,肥水条件较好的地块,年干胶株产量高,发病率和停割率低;而中龄树除热研7-33-97表现出幼龄树的趋势外,其它2个品种(热研8-79和PR107)则干胶株产量高,发病率和停割率也高。绝大多数死皮病属割面干涸类型,少部分为褐皮病;褐皮病有一部分是一开始就发生的,多数是由割面干涸发展而来的。在停割至少1年之后,能够恢复排胶的死皮树比例较小,很少超过10%。在3个橡胶树品种中, PR107品种恢复排胶的比例最高,幼龄树和中龄树恢复率分别达8.70%和6.20%。     

渗透胁迫与植物激素等对巴西橡胶树HbMT2a基因表达的影响

采用荧光定量PCR技术分析HbMT2a基因在不同环境因子诱导下,不同部位和不同无性系间的表达模式。结果表明,不同环境条件下,表达模式有一定差异,但PEG、ABA、6-BA和IAA均上调橡胶树无性系热研7-33-97叶片和树皮中的HbMT2a基因表达;在不同器官中,HbMT2a基因的表达量在根中最高、茎中次之、叶中最低,但是,在PEG诱导条件下,HbMT2a基因上调表达的幅度在叶中最大;降低温度可上调叶片中的HbMT2a基因表达;PEG诱导2 h,HbMT2a基因在抗寒橡胶树品种云研77-4叶片中的上调表达量显著高于不抗寒橡胶树品种热垦501。HbMT2a基因的表达容易受环境因子的影响,而且在抗寒性不同的橡胶树品种间的表达模式存在明显差异,有望作为橡胶树抗性育种的一个分子标记。     

一种测定巴西橡胶树树皮中过氧化氢含量的方法

研究植物体内 H2O2 的含量变化有助于确认植物提高非生物胁迫耐性的生物技术策略。Ti(Ⅳ)-PAR-H2O2 比色法灵敏度高、特异性强、稳定性好,广泛用于植物 H2O2 测定,但不同研究所用的反应条件不一致。在本研究中,系统优化了 Ti(Ⅳ)-PAR-H2O2 比色法的反应条件,并比较了丙酮提取法和 TCA 提取法对橡胶树萌条韧皮部 H2O2 的提取效果。结果表明,丙酮提取法稳定性差,TCA 提取法稳定性好。本研究报道了一种简单、快速的测定橡胶树树皮 H2O2 的方法,为进一步研究橡胶树中 H2O2 的生理功能打下良好基础。     

一种测定巴西橡胶树树皮中过氧化氢含量的方法

研究植物体内 H2O2 的含量变化有助于确认植物提高非生物胁迫耐性的生物技术策略。Ti(Ⅳ)-PAR-H2O2 比色 法灵敏度高、特异性强、稳定性好，广泛用于植物 H2O2 测定，但不同研究所用的反应条件不一致。在本研究中，系统 优化了 Ti(Ⅳ)-PAR-H2O2 比色法的反应条件，并比较了丙酮提取法和 TCA 提取法对橡胶树萌条韧皮部 H2O2 的提取效果。 结果表明，丙酮提取法稳定性差，TCA 提取法稳定性好。本研究报道了一种简单、快速的测定橡胶树树皮 H2O2 的方法， 为进一步研究橡胶树中 H2O2 的生理功能打下良好基础。     

橡胶树树皮miRNA定量表达分析的内参筛选

世界所需天然橡胶主要来自橡胶树，橡胶树的乳管是合成和储存天然橡胶的组织，树干树皮中的次生乳管与天然橡胶生产密切相关，由维管形成层分化而来。次生乳管数量与天然橡胶产量呈显著正相关。因此，乳管分化是天然橡胶生产面临的一个重大理论课题。植物miRNAs是一类长约20~24个核苷酸的非编码小RNA分子，通过介导基因沉默在植物生长发育、细胞分化及逆境适应中起着非常重要的调节作用。橡胶树乳管分化过程中差异miRNAs的鉴定对于进一步认识乳管分化的分子机理具有重要的作用。实时荧光定量PCR（qPCR）已广泛用于miRNA的定量表达分析，选择合适的miRNA内参对于准确进行miRNA的表达定量至关重要。本研究以冠菌素（coronatine, COR）诱导橡胶树萌条分化次生乳管的实验系统，采用小RNA Poly A加尾的qPCR技术分析COR处理对形成层区3个非编码RNA（U6 snRNA、5S rRNA、18S rRNA）和6个miRNA（hbr-miR159b、hbr-miR396b、miR169-x、miR172-y、miR535-x、miR894-x）候选内参的表达稳定性的影响。geNorm和NormFinder软件的联合分析结果显示，表达稳定性最高的是hbr-miR396b和miR894-x，稳定性较差的是U6 snRNA。hbr-miR396b和miR894-x可作为合适的内参基因，用于分析COR影响下的miRNA相对定量表达，为鉴定橡胶树次生乳管分化相关的差异表达miRNAs奠定良好基础。     

一种测定巴西橡胶树胶乳中过氧化氢含量及其在胶乳各组分中分布的方法研究

胶乳活性氧产生与清除失衡是导致橡胶树发生死皮的一个重要因素。由于直接用丙酮提取胶乳中的过氧化氢,存在测定结果重复性不好和准确性不高的问题。笔者在加入丙酮前使用不同提取液对胶乳样品进行预处理,在加入丙酮后使用萃取剂,建立了一种适合测定胶乳中过氧化氢的方法,发现胶乳中的过氧化氢主要分布于C-乳清和黄色体组分,为进一步研究橡胶树乳管活性氧代谢打下良好基础。     

橡胶树HbGAIP-B基因的克隆与表达分析

DELLA是赤霉素信号传导途径中一类重要的阻遏蛋白。本研究通过RT-PCR技术,从橡胶树优良品种‘热研7-33-97’胶乳中克隆了1个DELLA蛋白编码基因(GenBank登录号为KT696440)。该基因全长cDNA序列2135bp,阅读框1905bp,编码634个氨基酸,其编码蛋白含有DELLA和GRAS结构域,分子量为69.89ku,理论等电点为5.50。HbGAIP-B氨基酸序列与麻疯树JcGAIP-B、蓖麻RcGAIP-B、拟南芥AtRGA、AtGAI、AtRGL1、AtRGL2和AtRGL3的相似性分别为82.43%、78.18%、65.05%、61.73%、52.28%、53.51%和49.92%。进化树分析表明,HbGAIP-B与JcGAIP-B亲缘关系最近。定量PCR分析表明,HbGAIP-B的表达受割胶处理诱导下调。赤霉素和乙烯利处理4h显著上调HbGAIP-B的表达,茉莉酸甲酯处理4h小幅下调HbGAIP-B表达。