核型多角体病毒对棉铃虫酯酶和酚氧化酶活性的影响

对感染核型多角体病毒(nuclear polyhedrosis virus，NPV)的棉铃虫Helicover pa armigera (Huebner)幼虫血淋巴进行了酯酶和酚氧化酶电泳分析。结果表明：2种酶带在感染12h后其活力发生了明显变化；酯酶酶带2d后发生位移，酚氧化酶酶带5d发生位移，且各自建立新的酶系统。酚氧化酶比活力分析结果表明：感染NPV后，1d达到最高点，2～3d处于最低点，4d后回升。     

寄生对越冬代菜粉蝶蛹血淋巴中蛋白质和糖类代谢的影响

越冬代菜粉蝶Pierisrapae蛹被蝶蛹金小蜂Pteromaluspuparum寄生后,其血淋巴中可溶性蛋白含量在寄生后0.5～2d逐日上升,此后则逐日下降.雌雄寄生蛹血淋巴中可溶性蛋白含量在寄生后1～4d显著高于同期未寄生蛹,寄生后5d则略低于同期未寄生蛹;寄生蛹血淋巴中总糖和海藻糖含量的变化趋势与可溶性蛋白相同,也是寄生后0.5～2d升高,寄生后3～5d降低.寄生后0.5～2d,雌雄寄生蛹血淋巴中总糖和海藻糖含量显著高于同期未寄生蛹,寄生后3～5d则恰好相反.寄生蛹血淋巴中还原糖含量在寄生后0.5～3d日渐升高,寄生后4d维持在较高水平,而寄生后5d则急剧下降.越冬代菜粉蝶蛹血淋巴中海藻糖酶无活力,而雌雄寄生蛹血淋巴中海藻糖酶的活力在寄生后0.5d开始显现,此后逐日升高,至寄生后5d已达43.24～44.27μg葡萄糖·mg-1蛋白·min-1.     

无色杆菌毒蛋白对菜粉蝶幼虫血淋巴酯酶同工酶的影响

对取食过无色杆菌毒蛋白的菜粉蝶幼虫血淋巴进行酯酶同工酶聚丙烯酰胺电泳分析,与对照相比,酯酶酶谱发生变化,对照吸光度为处理组的２￣１０倍。     

家蚕对入侵蛹虫草菌的防御反应研究

为探明家蚕对入侵虫草菌防御反应,用从云南野生蛹虫草中分离的M05菌株,以菌液涂抹方式侵染云蚕7家蚕品种5龄第2天幼虫,对菌株入侵家蚕体壁部位显微观察,对家蚕体液免疫因子血淋巴酚氧化酶、血淋巴蛋白质含量进行测定。结果表明,家蚕气门是M05菌株入侵并发生体壁防御反应的主要部位;菌株侵入体腔,酚氧化酶防御因子被启动,酶活力增强且最大值达0.77 U;家蚕启动防御反应,血淋巴中蛋白质含量增加,当菌株侵入后消耗或破坏了血淋巴中部分蛋白质,血淋巴中蛋白质含量降低。     

蜜蜂球囊菌分泌多种胞外酶侵染蜜蜂幼虫

对健康和患病蜜蜂幼虫血淋巴进行SDS-PAGE电泳和蛋白酶、酯酶的活性染色,以研究蜜蜂球囊菌分泌的胞外酶种类及对蜜蜂侵染的作用.结果表明:健康蜜蜂幼虫血淋巴中的蛋白含量丰富,主要由4种高分子质量的蛋白组成,而患病幼虫血淋巴中的蛋白含量很少,主要蛋白组分被降解;在患病幼虫血淋巴中可以检测到健康幼虫所没有的多种蛋白酶和酯酶...     

蜕皮前后家蚕幼虫血淋巴的蛋白质组学分析

 【目的】对家蚕幼虫血淋巴在蜕皮前后的蛋白质变化进行研究,发现参与蜕皮过程的蛋白质,为深入研究家蚕幼虫的蜕皮过程提供新的思路,也为研究其它昆虫的蜕皮过程提供启示。【方法】应用以双向电泳（2-DE）进行蛋白质分离、以基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）进行蛋白质鉴定的蛋白质组学方法对家蚕幼虫血淋巴在蜕皮前后的蛋白质变化进行研究。【结果】经过蜕皮过程后,家蚕幼虫血淋巴中蛋白质的数量、种类和部分蛋白质的表达量发生了明显的变化：4眠蚕血淋巴中有10个明显的特异蛋白点,5龄起蚕血淋巴中2个明显的特异蛋白点,还有2个蛋白点的表达量发生了明显的上调或下调。经过质谱鉴定,以上14个蛋白点中 有9个具有可信结果,其中4种蛋白被过去的试验证明与蜕皮过程有关,其它5种蛋白质是新发现的与蜕皮过程有关的蛋白质。【结论】化学感应蛋白9、储存蛋白2、抗胰蛋白酶原、酚氧化酶原亚基1和亲环蛋白A、KIF27类蛋白、天蚕素原、副肌球蛋白、神经原钙结合蛋白以及另外5种未被鉴定的蛋白质可能参与了家蚕幼虫的蜕皮过程。     

β-谷甾醇等化合物对昆虫血淋巴蛋白质含量的影响

采用“Ｆｏｌｉｎ－酚”法,就β－谷甾醇（β－ｓｉｔｏｓｔｅｒｏｌ）、瑞香亭（ｄａｐｈｎｏｒｉｔｉｎ）以及狼毒色原酮（ｃｈａｍｅｃｈｒｏｍｏｎｅ）３种化合物对菜粉蝶（Ｐｉｅｒｉｓ ｒａｐａｅ Ｌ．）５龄幼虫血淋巴中蛋白质含量进行了测定。结果表明：２４ｈ后,这３种化合物提高了幼虫血淋巴中蛋白质的含量,４８ｈ和７２ｈ后,这３种化合物均降低了幼虫血淋巴中蛋白质的含量。     

柿子单宁对几种蛇毒中主要酶的抑制作用及其机理初探

 【目的】分析柿子单宁（persimmon tannin,PT）对江浙蝮蛇、尖吻蝮蛇、眼镜蛇毒中主要酶活力的抑制作用,初步研究两者相互作用的机理。【方法】将蛇毒与PT以不同比例混合后在37℃下温育1 h,离心分离,测定上清液中主要酶活力变化,并采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳对粗毒和作用后所得沉淀及上清液进行分析。【结果】当蛇毒与PT质量比达到1﹕1时,粗毒中蛋白质水解酶、磷脂酶A2、L-氨基酸氧化酶、精氨酸酯酶、乙酰胆碱酯酶、类凝血酶活力被完全抑制,且酶活力的下降与PT含量呈剂量增加效应;SDS-聚丙烯酰胺电泳表明,PT与蛇毒蛋白具有很强的非特异性结合能力。但对不同结构蛋白质结合能力和选择性也明显不同。【结论】柿子单宁在体外条件下对蛇毒中几种酶的活力具有明显的抑制作用,PT与蛋白结合是导致酶失活的重要原因。     

无色杆菌毒蛋白对菜粉蝶中肠的组织病理学影响

无色杆菌毒蛋白经口进入菜粉蝶幼虫体内 6、12、18、2 4h以后 ,菜粉蝶幼虫的中肠组织逐渐遭到破坏 ,开始有些肠壁细胞伸长 ,在顶端形成囊泡 ,以后囊泡和细胞核脱落进入肠腔 .处理后期临近死亡的幼虫中肠肠壁组织被严重破坏 ,仅残留基层细胞 ,并形成一些空腔 ,从而影响昆虫的正常取食 .表明这种毒蛋白能引起菜粉蝶幼虫肠道严重的病理变化     

苯氧威对黄粉虫体液免疫功能的影响

[目的]研究保幼激素类似物苯氧威对仓储害虫黄粉虫体液免疫功能的影响。[方法]配制3种不同浓度苯氧威,采用点滴法处理黄粉虫,在大肠杆菌刺激前后测定黄粉虫血淋巴中酚氧化酶、溶菌酶活性和抗菌活力变化。[结果]当使用E.coli DH5α刺激后,与对照组相比,处理组酚氧化酶、溶菌酶活性及抗菌能力均明显降低。[结论]苯氧威对仓储害虫黄粉虫体液免疫功能具有明显的抑制作用,能有效控制黄粉虫的危害。     

青翅蚁形隐翅虫毒素粗提物对菜青虫3种酶活性的影响

[目的]研究青翅蚁形隐翅虫毒素的杀虫机制,为研制开发该杀虫剂提供理论依据。[方法]采用青翅蚁形隐翅虫毒素粗提物饲喂和点滴菜青虫,测定和分析了虫体组织中肠酯酶、谷-丙转氨酶、乙酰胆碱酯酶和乙酰胆碱的变化情况。[结果]饲喂夹毒叶片的3龄菜青虫在48h后中肠酯酶含量下降明显,酶活性略受抑制。经毒素点滴处理的3龄菜青虫谷-丙转氨酶含量24、48h后均降低,24、48h后酶比活力均呈现增强趋势;经毒素粗提物处理的菜青虫24、48h后乙酰胆碱酯酶含量变化不大,但均有明显的降低,酶比活力增强。毒素粗提物对乙酰胆碱有抑制作用。[结论]青翅蚁形隐翅虫毒素粗提物对菜青虫幼虫具有较好的抑制作用。     

不同提取方法对东亚飞蝗酚氧化酶活性的测定与比较

[目的]研究东亚飞蝗酚氧化酶活性及动态变化。[方法]通过不同抽提方法制备虫体体液和淋巴液,测定不同位点酚氧化酶活性及动态变化。[结果]血淋巴中酚氧化酶活性显著高于虫体体液中酚氧化酶活性,且雌虫酶活性显著高于雄虫;虫体体液内酚氧化酶活性随着体外放置时间的延长而显著增强;成虫血淋巴内酚氧化酶活性随着时间的延长而显著增强。[结论]酚氧化酶一部分存在于东亚飞蝗组织和细胞中参与虫体发育和构建,一部分存在于血淋巴中参与免疫防御作用。酚氧化酶稳定性非常强,是昆虫宽泛适应能力和强大免疫能力的有效保障。     

复方大蒜油添加剂对中国对虾免疫机能的增强作用

从大蒜中提取大蒜油，配以从多种中草药中提取的皂甙类天然活性物质，组成复方制剂，以０．２％的比例添加于对虾饲料中，对中国对虾体液免疫功能和提高防病能力的作用进行研究。结果表明，对虾血细胞吞噬率、杀伤率和吞噬指数有极显提高（Ｐ〈０．０１），血细胞杀伤指数显提高（Ｐ〈０．０５）；对虾血淋巴中的溶菌活力极显提高（Ｐ〈０．０１），酚氧化酶活力显提高（Ｐ〈０．０５）；溶藻弧菌攻毒后，对虾免疫保护率提高     

球孢白僵菌对葱蝇成虫血淋巴蛋白质及游离氨基酸的影响

【目的】球孢白僵菌(Beauveria bassiana)是一种重要的昆虫病原真菌,在毁灭性害虫葱蝇(Delia antiqua)的防治上具有重大潜力。研究旨在明确球孢白僵菌侵染葱蝇成虫后,血淋巴中蛋白质和游离氨基酸的变化及其致病的关系,揭示球孢白僵菌对葱蝇的生理调控机制。【方法】基于球孢白僵菌对葱蝇成虫的室内生物测定的研究基础,使用菌株GZGY-1-3,采用点滴法,用浓度为1×10~8个孢子/mL的孢子悬浮液处理葱蝇初羽化成虫,采用BCA法及高效液相色谱——串联质谱法(HPLC-MS/MS)测定球孢白僵菌侵染不同时间(12、24、36、48、60和72 h)后,侵染组与对照组葱蝇成虫血淋巴中蛋白质总量及20种游离氨基酸含量;分析不同处理时间蛋白质和游离氨基酸总量和重要氨基酸的含量变化。【结果】球孢白僵菌侵染12—36 h,侵染组与对照组血淋巴蛋白浓度变化趋势相近,均呈先下降后小幅度上升趋势。但侵染组血淋巴中蛋白含量高于对照组,侵染24 h后,侵染组血淋巴内蛋白质是对照组的1.20倍;侵染48 h后,侵染组中蛋白含量下降到最低,仅为对照组的0.83倍。侵染60—72 h,血淋巴蛋白含量升高。葱蝇成虫血淋巴中共检测出20种游离氨基酸。侵染12—36 h,葱蝇成虫血淋巴中游离氨基酸总量下降;侵染36 h,游离氨基酸总量下降到最低,仅为对照组的0.63倍;侵染48—60 h,游离氨基酸总量持续上升;侵染60 h后,游离氨基酸总量上升到最高,为对照组的2.01倍;感染72 h,游离氨基酸总量下降。侵染后,血淋巴内游离氨基酸种类没有变化,各种游离氨基酸的含量波动差异较大。球孢白僵菌对血淋巴重要氨基酸的含量变化有显著影响。【结论】球孢白僵菌的侵染引起葱蝇成虫血淋巴中蛋白质和游离氨基酸的一系列变化,严重阻碍了葱蝇成虫的正常生理活动,在葱蝇生物防治中具有应用潜力。     

棉花色素腺体和棉酚对棉铃虫生长发育和抗药性的影响

 以３对陆地棉色素腺体近等基因系为材料，研究了棉花色素腺体和棉酚对棉铃虫生长发育和抗药性的影响。结果表明，棉花色素腺体对棉铃虫的生长发育具有明显的抑制作用，而对于棉铃虫的抗药性具有明显的诱导作用。对棉铃虫体内的羧酸酯酶和谷胱甘肽转移酶活力测定结果表明，取食无色素腺体棉的棉铃虫体内的两种解毒酶活力均显著低于取食于相应的有色素腺体近等基因系的棉铃虫。不同棉酚含量的半人工饲料饲喂棉铃虫的结果表明，在一定范围内，棉铃虫的生长发育与饲料中的棉酚含量成负相关，而与棉铃虫的抗药性成正相关．棉铃虫体内的２种解毒酶活力随所取食饲料中的棉酚含量增加而增加，但当棉酚含量超过０．３％时，棉铃虫体内的两种解毒酶活力均受到抑制。     

核型多角体病毒对斜纹夜蛾两种酶活性的影响

对感染核型多角体病毒的斜纹夜蛾(Spodoptera lituta)幼虫血淋巴酯酶和酚氧化酶进行了电泳分析,结果表明,两种酶的谱带在感染病毒后12h发生了明显的变化,导致酶带位移和新酶带的产生,在虫体内建立了新的酶系统;酚氧化酶比活性在感染核型多角体病毒后12 h最低,48h达到最高点.     

石河子地区棉田棉铃虫种群体内相关酶活及含量的测定

[目的]测定石河子地区棉铃虫体内羧酸酯酶、磷酸酯酶、谷胱甘肽-S-转移酶以及多功能氧化酶(MFOs)四类主要解毒代谢酶的含量及活性,并与敏感品系棉铃虫进行比较,为棉铃虫抗药性研究提供实验依据.[方法]利用紫外分光光度计比色法测定酶源蛋白含量及比活力.[结果]石河子地区棉铃虫体内的MFOs的酶原蛋白含量及比活力均高于敏感品系棉铃虫且差异显著,其酶源蛋白含量分别为105.943 167、96.158 47μ头,比活力(0.485 3 ±0.002 1)、(0.352 3 ±0.001 4)μM/μg·30 min,其余三种酶在两品系间差异不显著.[结论]MFOs活性的增加是石河子地区棉铃虫抗药性增强重要因素之一.     

无色杆菌毒蛋白对菜蛾血淋巴酯酶同工酶的影响

对取食过无色杆菌毒蛋白的菜蛾幼虫血淋巴进行酯酶同工酶聚丙烯酰胺电泳分析,与对照相比,酯酶酶谱发生变化,酶活力降低.经胶条扫描分析,在主酶带区,对照吸光度为处理组的3～12倍     

氟啶脲对甜菜夜蛾蛋白质和糖类代谢的影响

研究了亚致死浓度氟啶脲处理甜菜夜蛾幼虫,分析其对幼虫体内蛋白质和糖类代谢的影响。结果表明:亚致死剂量氟啶脲处理甜菜夜蛾幼虫后,能显著增加血淋巴中可溶性蛋白质含量。而且这种作用具有明显的持续性,处理结束后48 h,各处理组血淋巴中蛋白质含量持续增加,LC_(10)、LC_(20)处理组蛋白质含量分别为18.54 mg/mL,19.55 mg/mL,为对照组含量的3.5倍和3.7倍。96 h时高浓度处理组LC_(30)、LC_(40)和对照组的蛋白量显著增加,96 h时对照组的蛋白含量显著高于各处理组。同时蛋白质SDS-PAGE结果也进一步表明,亚致死浓度氟啶脲处理甜菜夜蛾结束后48 h,血淋巴中蛋白质含量继续增加;而96 h后则表现出下降趋势。血淋巴中总糖含量的研究表明,不同亚致死浓度氟啶脲处理甜菜夜蛾后,幼虫血淋巴中糖含量比对照组有一定程度降低,但差异不显著。在处理结束后48 h、96 h时,各处理组的糖含量要高于对照组,其中LC_(30)处理组的总糖含量最高,在48 h、96 h时其含量分别为对照组的1.4和1.8倍。     

转Bt基因杨树对美国白蛾幼虫中肠解毒酶及乙酰胆碱酯酶的影响

以转Bt基因欧洲黑杨叶片饲喂4-5龄美国白蛾幼虫，对其中肠几种重要解毒酶及乙酰胆碱酯酶的活性进行了测定。结果表明，中肠多功能氧化酶受到强烈抑制，饲喂4h后，多功能氧化酶的活性比对照降低50.89%，48h后，该酶活性仅为对照的1/6，酯酶及羟酸酯酶的活性也受到明显抑制，饲喂48h后，上述两种酶的活性分别比对照降低73.58%和56.55%，谷胱甘肽S-转移酶变化比较复杂，饲喂24h后其活性出现峰值；48h后与对照持平，中肠乙酰胆碱酯酶活性无明显变化，转基因叶片对幼虫中肠解毒酶活性的抑制可能是其毒杀害虫的作用机制之一。