思茅松等位酶实验方法及改进

以思茅松种子的胚乳为实验材料,探索了思茅松等位酶的实验方法.采用聚丙烯酰胺垂直板凝胶电泳与水平切片淀粉凝胶电泳相结合的方法,获得所试验的13种等位酶中AAT,ADH,EST,GDH,G6PD,MDH,PGD6,PGM和SKD等9种电泳效果良好的等位酶酶谱.通过两种电泳方法的有机结合,以及对制样及上样方法的改进,大大地提高了实验效率.本研究得到的等位酶酶谱式样,为下一步思茅松种群遗传分析提供了资料.     

三尖杉属植物的同工酶分析

采用垂直板型不连续聚丙烯酰氨凝胶电泳和水平淀粉凝胶电泳技术对三尖杉属植物粗榧、高山三尖杉、篦子三尖杉进行了同工酶实验。结果获得天冬氨酸转酶(AAT)、谷氨酸脱氢酶(GDH)、葡萄糖6—磷酸脱氢酶(G6PD)、酯酶(EST)和苹果酸脱氢酶(MDH)等5种同工酶的酶谱。酶谱的相似性系数及聚类分析结果表明,粗榧和高山三尖杉酶谱具有较高的相似性,达81．5％,而二者与篦子三尖杉的相似性系数较低,仅为59．3％和50．0％。     

思茅松天然群体的遗传多样性及遗传分化

采用凝胶电泳技术,检测了思茅松(Pinuskesiyavar.Langbinaensis)种子胚乳的9种同工酶。通过对9种酶系统编码的16个酶位点的遗传分析,揭示了思茅松三个天然群体的遗传多样性和遗传分化情况。思茅松天然群体的遗传多样性较高,群体的多态位点比例为0.667;平均每个位点的等位基因数为2.13;期望杂合度和观察杂合度分别为0.288和0.197。群体间的遗传分化程度较低,分化系数仅为0.052,群体间的遗传距离为0.015。表5参15。     

松材线虫和拟松材线虫不同株系酶电泳的研究*

应用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对来自国内及日本、加拿大、法国、挪威的松材线虫及拟松材线虫株系作酶电泳的初步分析。结果表明，不同株系的苹果酸脱氢酶及纤维素酶酶谱各不相同。超氧化物歧化酶有１条在不同株系中迁移率相同的酶带。松材线虫与拟松材线虫在酯酶谱上差异明显，但培养于裂褶菌、多毛孢和葡萄孢上的来自南京黑松上的同一株系线虫的酯酶谱也显示了明显差异，表明了该酶的不稳定性。谷氨酸草酰乙酸转氨酶是唯一可区分两种线虫的酶，松材线虫只有１条迁移率０．３９的带，拟松材线虫只有１条迁移率０．５１的带，可用于两种线虫的生化鉴定。对可溶性蛋白质及过氧化物酶的分析，未检测到清晰可辨的酶带。     

陕北枣树主要害虫过氧化物酶同工酶的分析

用聚丙烯酰胺凝胶电泳法对陕北枣树的6种主要害虫进行过氧化物酶同工酶分析的结果表明:枣树6种主要害虫都表现出过氧化物酶的活性,且酶谱有较大差异.     

7属11种木兰科植物的过氧化物酶同工酶分析

应用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术分析了7属11种木兰科植物的过氧化物酶同工酶，结果表明：11种木兰科植物共分离出12条酶带，其中B带为共有带；不同属种的酶谱存在差异，可作为分类依据。     

过氧化物酶同工酶与银杏性别及年龄的关系

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法对已知性别的银杏成年大树（树龄４０年以上）、在形态上尚未分化出雌雄的实生苗（苗龄２～３年）、实生幼苗（苗龄４０天）以及雌雄树叶诱导的愈伤组织进行过氧化物酶同工酶的测定。经重复实验，发现成年树雌雄株的酶谱存在着差异，雌株较雄株有较多的酶带，且有两条酶带的电泳迁移率相同，但活性不同。实生苗和实生幼苗酶带比成树的明显减少，且在不同株中的活性趋于相同。而对已知性别成年树叶片诱导的愈伤组织进行检测，其酶谱与成树、实生苗和实生幼苗的明显不同，但均出现了雌雄成树共同具有一条酶带，且活性极强。但过氧化物酶同工酶图谱能否作为鉴定银杏植株早期性别鉴定的生理生化指标，尚需进一步探索和研究。     

思茅松景洪大渡岗居群的核型变异研究

以思茅松主产区的思茅居群为参照,对景洪大渡岗居群的校形态结构进行了系统研究。结果为;(1)二者的间期核构形都为复杂染色中心型,前期染色体属于中间型,核型公式均为K(2n)=24=24m,核型不对称性都属于1A型;(2)二者在次缢痕数目及其分布上有明显差异。思茅居群仅有1对染色体具有次缢痕,位于第3对染色体长臂上,景洪大渡岗居群有4对染色体具有次缢痕,分别位于第1、3、6对染色体短臂和第2对染色体长臂上。综合前期对思茅松4个不同居群染色体核型的研究,建议研究思茅松各居群的花粉母细胞减数分裂行为及从等位酶位点和DNA水平上深入研究思茅松居群的遗传结构与分化。     

毛白杨种内过氧化物同工酶变异

用聚丙烯酰胺凝胶电泳分离了105份毛白杨的过氧化物同工酶，经三年重复，共获8种酶谱，表现了毛白杨种内遗传多型性。第一种酶谱是毛白杨种的主要酶谱型，占全部试材的85．7％，同属一种酶谱型的材料，其形态性别及生长习性都有明显差异，曾被定为新种、变种或变；不同酶谱材料的形态分歧应晚于酶分子水平的分歧。将8种酶谱的相似系数值进行聚类，第Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ类酶谱因发生较早可聚为一类，此类是毛白杨的主要类。第Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ、Ⅷ种酶谱是近代毛白杨与派内几个种进行多元化、多地、多次杂交的新类型。     

3种松树针叶中过氧化物酶同功酶的研究

用垂直平板聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法，分析了油松、赤松和黑松1年生针叶中中过氧化物酶同功酶活性和谱带数量。结果表明：油松和黑松各有3条谱带，赤松有4条谱带。其中，P4带是3种松树的共同谱带，P3带为油松的特征带，P1、P2带为赤松的特征带。     

黄土丘陵区野杏表型变异种质的种子可溶性蛋白图谱研究

运用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,对黄土丘陵区野杏表型变异种质43株样木的种子可溶性蛋白图谱进行研究.结果表明：43株表型变异野杏样木的种子可溶性蛋白电泳谱带丰富、多态、稳定,蛋白质亚基主要集中在14.4 ～ 66.5 KD,分布较广,多数种质都有其特征谱带.依据特征谱带的分子量进行聚类,将43株表型变异野杏样木划分为9类.从蛋白质水平得到的分类结果与形态特征及生物学特性既有相似之处,也有一定程度的异质性.研究表明种子蛋白质可作为野杏种内类群划分的遗传标记.     

思茅松天然种群及其种子园的遗传多样性

采用垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳和水平切片淀粉凝胶电泳技术对思茅松 3个天然种群和思茅松种子园的遗传多样性状况进行了研究。 9种同工酶系统 16个基因位点的分析结果表明 :思茅松天然种群具有较高的遗传多样性 ,多态位点比率P =70 1% ,等位基因平均数A =2 2 7,平均预期杂合度He=0 2 91;群体间的遗传分化程度较低 ,基因分化系数GST=0 0 5 2。思茅松种子园的遗传多样性较天然种群丰富 ,以上各遗传参数值依次为P =73 5 % ,A =2 4 2 ,He =0 2 95 ,种子园营建是林木遗传改良的一种有效途径     

刺槐群体等位酶分析

等位酶(allozyme)是同工酶的一种,是同一基因位点不同等位基因所编码的一种酶的不同形式,是结构基因编码的产物,遗传和表达遵循孟德尔定律.通过一定方式的电泳,从酶谱上可以分析、识别出编码它们的等位基因,再统计出各种等位基因频率和基因型频率,便可进一步计算出群体的各项遗传学参数,从而了解一个群体的遗传结构(王中仁,1996).对一个物种的遗传结构进行研究,有助于理解该物种的地理变异模式、遗传多样性等,并提供为该物种遗传资源保护、利用做出决策的重要信息(沈浩等,2001;金燕等,2003).等位酶分析方法广泛应用于研究天然居群的遗传结构、基因丰富程度以及栽培植物种质资源遗传多样性及树木种源群体遗传变异模式等(车永和,2003;甘四明等,1998).     

山茶属植物RAPD分析中琼脂糖凝胶电泳条件的研究

为了摸索适宜于山茶属植物DNA琼脂糖凝胶电泳条件,分析了电压、缓冲液、琼脂糖密度、EB(Ethyle Bromide)密度、染色时间及操作方法对山茶属植物RAPD分析中琼脂糖凝胶电泳实验结果的影响.结果表明,适宜于山茶属植物DNA琼脂糖凝胶电泳条件是:琼脂糖凝胶密度为18 g/L,电泳缓冲液为TBE,电压为6～9 V/cm,电泳时间为溴酚兰和二甲苯青之间跑出约5 cm,电泳开始时先让缓冲液与凝胶保持水平电泳5 min,然后加缓冲液至浸没凝胶约1 mm深,继续电泳至结束,用5 mg/L的EB染色40 min,水洗40 min.     

杉木抗炭疽病机制的初步研究

用聚丙烯酰胺凝胶电泳分析方法研究杉木抗炭疽病的机制,结果表明,正常生长的各杉木无性系多酚氧化酶(PPO)和过氧化物酶(POD)同工酶酶谱的差异,与其抗病性无相关性;经接种后,抗病无性系的PPO谱带在6—18天内有所增加,酶活性也增强,酶谱第一区域保持稳定,POD酶带无明显减弱或减少。而感病无性系则相反。实验证明,20号无性系确属抗炭疽病的无性系。     

箭胡毛杨及其亲本遗传关系的同工酶分析

通过对箭胡毛杨及其亲本箭杆杨和胡杨聚丙烯酰胺凝胶电泳,分析了过氧化物酶（PER）、酯酶（EST）、苹果酸脱氢酶（MDH）同工酶电泳结果,明确了其酶谱的特征及分布,并通过排序分析方法分析其相互之间的亲缘关系。结果表明,箭胡毛杨杂种兼具父母本特征,与母本箭杆杨亲缘关系较近,是箭杆杨与胡杨的杂种后代。     

35个白杨派树种过氧化物同工酶数量分类研究

采用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳系统对河南杨属白杨派１０种、８变种、９变型和８无性系的过氧化物同工酶进行了测定。结果表明，银白杨等１０种杨树，均有特征酶谱；毛白杨酶谱具有多态特性；每个变种、变型及无性系也有特征酶谱，或与其它变种、变型、无性系的酶谱带数目、宽度、Ｒｆ及其活性强弱有别。采用系统聚类方法对３５种杨树酶谱各因子进行综合性探讨，结果与其形态分类、酶谱分类相吻合，但与白杨派系统分类和毛白杨种下系统分类单位不一致，既不支持白杨派分为３亚派（白杨亚派、毛白杨亚派和山杨亚派，山杨亚派又分３系，山杨系、齿叶山杨系和响叶杨系）的观点，也不支持毛白杨种下分意见的观点。同时进一步提示出：毛白杨酶谱，不是其杂交亲本酶谱的简单叠加，而其酶谱错综复杂，即其形态的多样性与酶谱的多态性、起源的多种性，既不吻合，也不平行，它们的谱系图呈交叉网状结构而特异。     

杏树品种过氧化物同工酶数量分类的研究

采用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳系统,对河南早熟杏和桃杏１０个品种进行了过氧化物同工酶的测定。其结果表明,杏树酶谱具多态特性,其主导酶谱Ｒｆ为０４４～０４５;每个品种均有特征酶谱（Ｒｆ）,或以酶带数目、宽度、活性强弱相区别。同时,采用排序方法及系统聚类分析方法,对杏树１０个品种的过氧化物同工酶酶谱的相似程度进行研究结果发现：两种方法研究的结果与其酶谱分类、形态分类非常吻合,从而为杏树品种的鉴定与检验及其合理划分,提供了新的依据和手段。     

天牛科纤维素酶同工酶研究

用聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳方法分析了天牛科两个亚科１８种雌成虫、１２种幼虫消化道中肠组织纤维素酶复合酶中Ｃｘ酶同工酶．Ｃｘ酶同工酶在亚科间、族间差异较大；同族内各属间的酶谱差异也较大；同属内不同种间酶谱较接近，但每种各具其特征酶带，彼此易区分。Ｃｘ酶同工酶用于亲缘关系相近种的分类、鉴定有重要价值，可作为天牛科分子分类的一个有用的辅助手段。文章还就楔天牛族Ｓａｐｅｒｄｉｎｉ的分类系统问题进行了讨沦．     

欧李叶片过氧化物酶同工酶与叶果生理性状的相关性

为给欧李同工酶在数量性状遗传变异上的应用提供理论参考,利用聚丙烯酰胺凝胶电泳方法,对113份同一生境条件下野生欧李实生群体材料的叶片进行了过氧化物酶(POD)同工酶分析,同时对同工酶酶量大小(酶带宽窄)与叶片和果实生理性状的相关性进行了分析.研究结果表明:欧李实生群体叶片的过氧化物酶同工酶共分为7种酶谱类型,谱带数量最...