雏鸡感染E.maxima球虫后淋巴组织与外周血T细胞变化的观察

本试验对１５日龄雏鸡感染３０００Ｅ．ｍａｘｉｍａ球虫卵囊后外周淋巴组织与血液中Ｔ细胞的变化进行了观察。试验结果证实，感染球虫鸡的脾，盲，肠扁桃体以及外周血中Ｔ淋巴细胞数量均显著增加。外周血Ｔ细胞的消长曲线远表现出与球虫内生性发育的相关性。     

马立克氏病强毒株感染鸡T细胞受体亚群动态变化的研究

为深入探讨鸡马立克氏病Ｔ细胞受体亚群的变化与疾病发生与发展的相互关系,本实验以马立克氏病强毒株人工感染１日龄ＳＰＦ雏鸡,在不同的感染期,以流式细胞仪分析脾脏、胸腺、外周血淋巴细胞中ＴＣＲ１和ＴＣＲ２Ｔ细胞的动态变化。结果表明,感染鸡脾脏中ＴＣＲ１Ｔ细胞异常增高,而ＴＣＲ２Ｔ细胞在脾脏和外周血中的表现为暂短的升高,其后迅速下降。ＴＣＲ１Ｔ细胞与ＴＣＲ２Ｔ细胞的这种异常变化是ＶＭＤＶ感染雏鸡后Ｔ细胞表     

H9N2亚型禽流感流行株灭活疫苗种毒的筛选

为研究中药对柔嫩艾美尔球虫感染鸡免疫水平的影响,本实验采用流式细胞技术检测柔嫩艾美尔球虫感染鸡外周血CD4^＋T细胞亚群,以及CD8^＋T细胞亚群数目的动态变化。结果表明,接种球虫后,     

流式细胞术AnnexinV-FITC/PI双染法检测猪生殖-呼吸道综合征(PRRS)外周血单个核细胞早期凋亡细胞的研究

细胞膜的改变是细胞死亡的一个基本过程，细胞膜上的磷脂酰丝氨酸（ Ｐ Ｓ）由膜内侧面转移到膜外侧面是细胞凋亡早期的一个重要标志。 Ａｎｎｅｘｉｎ Ｖ 是一种钙依赖的磷脂结合蛋白，与 Ｐ Ｓ有高度亲和性，因而用于早期凋亡细胞的检测。本试验用 Ｐ Ｒ Ｒ Ｓ Ｖ 经滴鼻和喷雾试验感染４０ 日龄 Ｓ Ｐ Ｆ仔猪，于感染后２４ ｈ、第７，１７，２８ ｄ采血分离外周血单个核细胞，细胞经 Ａｎｎｅｘｉｎ Ｖ Ｆ Ｉ Ｔ Ｃ／ Ｐ Ｉ双染色法流式细胞仪检 测。结果显示， Ｐ Ｒ Ｒ Ｓ Ｖ 感染后各期，外周血单个核细胞 Ａｎｎｅｘｉｎ Ｖ＋ ／ Ｐ Ｉ＋ 细胞群（早期凋亡细胞群）的表达率均明显高于正常对照组（ Ｐ＜ ０．０１）。其中以感染后２４ ｈ的表达率为最高。结果表明， Ｐ Ｒ Ｒ Ｓ Ｖ 可以诱导仔猪外周血单个核细胞早期细胞凋亡。     

vMDV感染鸡CD^4＋与CD^8＋T细胞动态变化

人工感染１日龄ＳＰＦ雏鸡马立克氏病强毒株（ｖＭＤＶ）,在不同的感染期,以流式细胞仪分析感染鸡脾脏和外周血淋巴细胞中ＣＤ４＋和ＣＤ８＋细胞的动态变化。结果表明,感染鸡脾脏和外周血中ＣＤ８＋Ｔ细胞异常增高,而ＣＤ４＋Ｔ细胞表现为暂短的升高,其后迅速下降。ＣＤ４＋与ＣＤ８＋Ｔ细胞的这种异常变化是ｖＭＤＶ感染雏鸡后Ｔ细胞表型变化的重要特征之一。     

中药"球康"对E.tenella感染鸡肠道CD4+和CD8+T细胞的影响

本试验采用免疫组化方法检测球虫感染鸡肠道组织中CD4^＋、CD8^＋T细胞数量,探讨中药“球康”抗球虫的作用机理。试验共设不感染不给药组、不感染给“球康”组（2％拌料）、感染给“球康”组和感染不给药组共4组。感染球虫后第2、4、5、7和9天,每组随机捕杀4只鸡,采取盲肠中段进行检测。结果,雏鸡感染球虫后,盲肠组织中CD4^＋、CD8^＋T细胞数量显著高于不感染组,感染给中药“球康”组鸡CD4＋T细胞数量在第2,4,5和9天均高于感染不给药组,在第4天和第5天差异显著（P＜0．05）;CD8＋T细胞数量在第2,5,7和9天高于感染不给药组,第5天差异显著（P＜0．05）,第7天达到最高峰。说明中药“球康”通过增加球虫感染鸡肠道黏膜CD4^＋、CD8^＋T细胞数量,提高细胞免疫水平,以增强机体对球虫的抑杀作用。     

柔嫩艾美尔球虫（E．tenella）感染鸡IsG生成细胞及血清IgG变化

为了探明鸡球虫保护性免疫机制，通过人工复制的鸡球虫病鸡，利用免疫组化技术和斑点酶联免疫吸附试验（Dot-ELISA），分别检测了柔嫩艾美耳球虫（E．tenella）初次感染雏鸡后，盲肠局部和免疫器官中IgG生成细胞数的动态变化，循环血液中特异性IgG水平的动态变化；雏鸡母源抗体的动态变化和不同抗体水平雏鸡的抗球虫能力。结果表明：（1）攻毒后雏鸡盲肠粘膜、脾脏、法氏囊、盲肠扁桃体中的IgG生成细胞早于第2～3d（d）开始增殖，在第9～12d达到峰值，随后即开始下降，盲肠扁桃体中的IgG生成细胞数在第22d仍高于对照组。（2）雏鸡感染E．tenella后第6d即可在循环血液中检测到特异性IgG，于第18d达到峰值，第30d降至感染后第7d时的水平。（3）特异性母源抗体IgG水平高的雏鸡，抗球虫水平高。雏鸡母源抗体IgG水平随日龄增长逐渐下降，同时雏鸡的抗球虫水平也随之降低，母源抗体IgG水平与抗球虫能力有明显的正相关性。     

雏鸡一次免疫鸡球虫早熟株三价苗后外周血T细胞变化的观察

通过α－醋酸萘酯酶（ＡＮＡＥ）组织化学染色法，对雏鸡接种鸡球虫早熟株三价苗引起细胞免疫情况进行了研究。试验结果表明，免疫组雏鸡Ｔ细胞百分率上升３９．２％，对照组上升８．７％，免疫组明显高于对照组（Ｐ〈０．０１）。     

日粮中加硒对鸡柔嫩艾美尔球虫的效力试验

试验在日粮中添加两个水平（０．５ｍｇ／ｋｇ、０．７５ｍｇ／ｋｇ）亚硒酸钠，分试验组与对照组对海赛鸡人工感染柔嫩艾美尔球虫（Ｅ．ｔｅｎｅｌｌａ）进行试验，通过抗球虫指数（ＡＣＩ）、平均增重、病变值、死亡率等几项指标测定，说明日粮中添加硒对鸡抗柔嫩艾美尔球虫的效力。     

柔嫩艾美尔球虫和巨形艾美尔球虫混合感染致病性研究

材料和方法１．试验动物ＡＡ肉鸡，购自江苏省家禽研究所，出壳后运回实验室饲养在杀灭卵囊的笼具中至１５日龄，经数次粪检未见卵囊后供试验。２．球虫卵囊为本教研室分离鉴定的纯种柔嫩艾美尔球虫和巨形艾美尔球虫孢子化卵囊，４℃保存。３．试验分组挑选体况相近的１５日龄ＡＡ肉鸡５０羽，分成５组。第１组为不感染对照组；第２组为单种球虫感染组，每羽经口接种柔嫩艾美尔球虫孢子化卵囊１万个；第３、４和５组为混合感染组，每羽分别同时感染柔嫩艾美尔球虫和巨形艾美尔球虫孢子化卵囊：０．５＋５万、１＋１０万和２＋２０万个。４．…     

绵羊妊娠期外周血T细胞及其亚群的观察

应用酸性ａ－萘酯酶（ＡＮＡＥ）组化反应标记绵羊妊娠期外周血Ｔ细胞，与间情期相比，Ｔ细胞总数和辅助性Ｔ细胞（Ｔｈ）无明显变化（Ｐ＞０．０５），而抑制性Ｔ细胞（Ｔｓ）明显增加（Ｐ＜０．０５）。间情期和妊娠期Ｔｈ／Ｔｓ分别为４．６７和２．６。结果提示，妊娠期羊可能通过增加Ｔｓ细胞来压低母体免疫水平。     

氢溴酸常山酮对肉鸡球虫病的防制作用研究

为探究氢溴酸常山酮对多种鸡球虫的预防效果,试验在体外利用细胞毒性检测(CCK-8试验)及子孢子入侵DF-1细胞的抑制试验评估了氢溴酸常山酮对柔嫩艾美耳球虫入侵宿主细胞的抑制作用;在体内利用最适抗球虫活性百分率(POAA)、病变计分减少率(RLS)、相对卵囊产量(ROP)及抗球虫指数(ACI)四项指标评估了高、中、低剂量氢溴酸常山酮对柔嫩、毒害、堆型、巨型艾美耳球虫混合感染的预防效果。结果显示,无细胞毒性浓度为0.01 mg/mL的氢溴酸常山酮在体外能有效抑制柔嫩艾美耳球虫子孢子入侵DF-1细胞;同时发现高、中剂量氢溴酸常山酮(添加量分别为500 g/t、400 g/t)在体内能有效预防四种混合球虫的感染。研究结果提示氢溴酸常山酮在体内外均能有效抑制球虫感染,并且在临床应用中仍可以有效预防球虫感染。     

鸡T细胞表面抗原生物学特性

对鸡Ｔ细胞特异性单克隆抗体（ＭｃＡｂ）１Ｂ６识别的Ｔ细胞膜抗原的理化特性、组织学分布及相应Ｔ细胞的免疫学功能进行了研究。结果表明，由１Ｂ６ＭｃＡｂ识别的Ｔ细胞膜抗原为１条６００００～６５０００的单链蛋白；该抗原分布于６３．３％的胸腺细胞、１７．３％的脾细胞以及２５％的外周血淋巴细胞。体外试验表明，采用补体介导的细胞溶解试验除去脾细胞中的１Ｂ６＋Ｔ细胞后，其淋巴因子产生活性显著降低。由此证明，１Ｂ６＋Ｔ细胞是淋巴因子产生的主要细胞。根据１Ｂ６ＭｃＡｂ鉴定的Ｔ细胞理化特性、组织学分布及功能特性，１Ｂ６＋Ｔ细胞属于ＣＤ４＋Ｔ细胞。     

亚麻油日粮抗感染柔嫩艾美耳球虫的效力研究

采用2因子多水平试验设计研究了亚麻油日粮抗感染柔嫩艾美耳球虫的效力。结果表明：感染球虫显著地影响试鸡的增重率(P＜0．05)；感染组试鸡的日采食量均大于不感染组，但差异不显著(P＞0．05)；根据抗球虫指数ACI的公式计算获得，4％亚麻油日粮抗球虫指数为145，6％亚麻油抗球虫日粮指数为147，8％亚麻油的日粮抗球虫指数达162．7。该研究证明适宜比例的亚麻油日粮能防止球虫的感染。     

新疆山羊蓝舌病病毒株回归羊体试验

用新疆山羊ＢＴＶ细胞接种健康山羊和绵羊，表现体温升高；白细胞和外周血中的Ｔ、Ｂ淋巴细胞持续下降；淋巴结、脾、舌、颊、肺动脉及胎儿的相应器官不同程度出血和淋巴细胞、巨噬细胞浸润．以及红细胞和各靶器官有明显ＢＴＶ抗原存在．结果表明，该病起引起的特异性变化，与我国云南、四川、湖北ＢＴＶ有一定差异，而且绵羊的致病性高于山羊．同时表明，ＢＴＶ可以通过母体胎盘引起胎儿靶器官的病理损伤，提示了ＢＴＶ感染与流产的关系，在国内山、羊蓝舌病病理形态学的研究尚无报道．     

雏鸡感染柔嫩艾美尔球虫局部黏膜免疫细胞的动态变化

本试验采用免疫组化法检测柔嫩艾美尔球虫感染雏鸡后盲肠黏膜sIgA+细胞和T细胞亚群的动态变化。结果发现:sIgA+细胞和CD4+T细胞数量在感染球虫后第2天就明显升高,第5天达到高峰,随后逐渐下降。而CD8+T细胞在感染球虫后第4天,才显著增加,感染后第7天达到高峰。表明雏鸡感染球虫后,机体能迅速启动黏膜免疫应答,不同的免疫细胞在抵抗柔嫩艾美尔球虫感染不同阶段发挥不同的作用。     

感染球虫的肉鸡日粮中添加甜菜碱能够增加十二指肠上皮淋巴细胞数量并增强吞噬细胞功能

甜菜碱通常用于细胞渗透压的调节,本试验的目的在于探索甜菜碱、渗透压、球虫病之间的联系。试验一,肉鸡饲喂玉米-大豆型日粮,分为3个处理,基础日粮中分别添加甜菜碱0、0.5、1.0g/kg,其中一半肉鸡感染堆型艾美尔球虫。球虫感染降低了肉鸡增重和饲料效率,并且增加了十二指肠、空场黏膜的渗透压(P0.01)。甜菜碱降低了十二指肠渗透压(P0.01),特别是有球虫感染的时候。球虫感染增加了十二指肠固有层厚度(P=0.04)和白细胞的数目(P0.01),特别是在高甜菜碱水平时(互作p=0.05)。球虫可以使绒毛高度降低(p=0.05),但当添加1.0g/kg甜菜碱时情况得以改善(互作p=0.04)。试验二,将腹膜巨噬细胞和外周血异嗜细胞在渗透压分别为200、310、600或900mOsmol,甜菜碱含量分别为0、0.1、0.5或1.5mmol/L的(4×4因子)介质中培养6h,然后加入堆型艾美尔球虫。从结果来看,高渗透压介质与等渗透压介质比较,吞噬作用与NO的释放受到了抑制,而IL-1、IL-6的含量升高。0.1mmol/L甜菜碱组显著(p=0.04)增加异嗜细胞NO的产生,并具有增加巨噬细胞NO产生的趋势(p0.1)。甜菜碱可以促进异嗜细胞分泌趋化因子增强单核白细胞趋化性。除了增加白细胞的数目外,巨噬细胞增强单核白细胞趋化性和NO的释放或许可以解释感染球虫时添加甜菜碱能够降低肠道损伤的现象。     

球虫体外模型的建立及在生物学和生产中的应用

本研究建立了柔嫩艾美耳球虫（Ｅｉｎｅｒｉａ ｔｅｎｅｌｌａ）体外培养的鸡胚模型和细胞模型，建立了一株柔嫩艾美耳球虫鸡胚适应株和交替传代的原代鸡肾细胞培养适应株，采用细胞模型探索出Ｅ．ｔｅｎｅｌｌａ有４代裂殖生殖阶段，采用细胞模型培养Ｅ．ｎｅｃａｔｒｉｘ能发育至第３代裂殖阶段，完善了鸡胚筛选抗球虫剂的方法，测定出药物最小抑制浓度（ＭＩＣ）和最小毒性浓度（ＭＴＣ）并分析出与实际生产应用的关系。在熔剂的     

柔嫩艾美耳球虫感染鸡的体液免疫机理研究

为了揭示鸡柔嫩艾美耳球虫（E．tenella）病的免疫机制，试验从分子水平、细胞、亚细胞对人工攻毒病鸡特异性抗体、免疫细胞的动态变化及在抗球虫中的作用进行了探讨，试验结果如下：一是雏鸡感染E．tenella后，第6天即可在外周血液中检测出特异性IgG，于第18天达到峰值，第23天开始下降，第30天时降至感染后第7天的水平；二是揭示了雏鸡感染E．tenella后，鸡体IgG生成细胞的动态变化规律为：主要免疫器官胸腺、法氏囊、脾脏、盲肠扁桃体和盲肠局部的IgG生成细胞于第2天和第3天开始增殖，在第9天至第16天达到峰值，然后逐渐下降，盲肠扁桃体中的IgG生成细胞在第18天降至对照组水平，盲肠、脾脏和法氏囊中的IgG生成细胞数在第22天仍高于对照组，且差异显著。     

湖南省衡阳市鸡球虫病病原种类与流行情况调查

本文通过地衡阳市辖区县市区鸡球虫感染的调查研究，结果表明，衡阳市鸡球虫感染严重，鸡群感染率为56．2％，尤以雏鸡感染严重，农户放养鸡感染率高达72．8％，专业户饲养鸡高达63．5％，青、成年鸡农户放养、专业户饲养的感染率分别为37．5％，30．85，经实验室鉴定，共查出柔嫩艾美耳球虫、毒害艾美耳球虫、巨型艾美耳球虫、早熟艾美耳球虫、堆型艾美耳球虫、和缓艾美耳球虫6个种，其中柔嫩艾美耳球虫为优势种，检出率达94．6％。，调查还表明衡阳市鸡球虫发病主要有4－6月份的梅雨季节，鸡日龄、饲养管理水平，不同的饲养环境条件等与鸡球虫感染关系密切。