快中子与DES复合诱变选育高产木聚糖酶黑曲霉菌株

为了提高木聚糖酶活力,以黑曲霉AS3.350为出发菌株,利用快中子和DES复合诱变的方法,筛选出一株高产木聚糖酶菌株DES20-4,该菌株经过液体发酵培养,产木聚糖酶活力为157.07 U/ml,是出发菌株的2倍。     

高压电场选育高产酸性木聚糖酶菌株的研究

为获得适用于动物饲料的木聚糖酶高产菌株,并验证高压电场诱变方法的有效性,于农田土壤中筛选出高产菌株,在高压电场中进行诱变,筛选最佳的突变菌株。出发菌株初步鉴定为沙福芽孢杆菌,命名为Bacillus safensis B16。该菌株所产木聚糖酶在pH 5、60℃下酶活性为217.34 U/mL,且60℃时的半衰期为229 min,热稳定性良好。在6～24 kV、极间距为3 cm的高压电晕电场中处理0～10 min,最终在10 kV下处理6 min选育出一株木聚糖酶高产菌株B16106-2,酶活性达到256.73 U/mL,较出发菌株提升了18.12%,且传代7次后菌株的产酶能力基本不变,具有良好的遗传稳定性。突变菌株所产木聚糖酶的最适酶反应条件不变。研究证明,高压电晕电场是一种有效的诱变方式,且筛选出的菌株B16106-2性能良好。     

Neurospora crassa产木聚糖酶发酵条件及酶学特性

从青藏高原土壤中筛选出一株产木聚糖酶较高的菌株Neurospora crassa SD10。通过单因素试验和正交试验对菌株进行发酵条件优化和酶学性质探究。结果表明,菌株SD10最佳发酵条件为:麸皮30 g/L、蛋白胨20 g/L、Mn2+0.5 g/L、培养温度33℃、转速230 r/min、接种量2%、初始pH值8.0、发酵时间84 h。菌株产木聚糖酶的最适反应温度为50℃,最适反应p H值为6.0,在40～50℃和pH值4.0～8.0时有较好的稳定性,能保持80%以上酶活力,Fe2+、Zn2+、K+对酶活力有促进作用,Na+、Mg2+、Ca2+、Mn2+、Cu2+对酶活力有抑制作用。Neurospora crassa SD10优化后产木聚糖酶活力达9.4 U/mL,所产木聚糖酶具有良好的pH值稳定性。     

产低温纤维素酶和木聚糖酶真菌的筛选鉴定及酶学性质

试验从青藏高原高寒草甸土壤中筛选低温降解纤维素的菌株,探究酶学性质.采用刚果红染色法(水解圈法)和3,5-二硝基水杨酸(DNS)法对菌株所产纤维素酶和木聚糖酶进行酶学性质分析,采用形态学和分子生物学进行菌种鉴定.结果 显示,从高寒草甸土壤样品中筛选出一株能同步产生低温纤维素酶和低温木聚糖酶的菌株FY8,经鉴定该菌株为枝...     

诱变选育木聚糖酶高产菌株及其发酵条件的研究

以黑曲霉(Aspergillus niger)XE6为出发菌株,经微波(MW)和硫酸二乙酯(DES)诱变处理,选育出一株遗传性状稳定的高产木聚糖酶菌株mAn1。利用单因素轮换法和正交试验法对菌株mAn1固态发酵产酶工艺进行了研究。结果表明:最适产酶条件为麸皮与玉米芯的添加比例6:4,硝酸铵2g,培养基起始pH值为4.5,固液比为1:1.8,500ml三角瓶中装培养基50g,30℃培养72h,在此条件下所产木聚糖酶的酶活为81151U/g,比出发菌株的酶活提高了34.88%。     

黑曲霉固体发酵木聚糖酶条件的优化

采用单因素试验对黑曲霉（Aspergillus niger）Y-2菌株产木聚糖酶的固体发酵条件进行了研究。结果表明,以麸皮和玉米芯（7：3）作为复合碳源,1%的（NH4）2SO4作为氮源,添加0.5%的无机盐KH2PO4,料水比为1：1.4,接种量为5%,32℃培养72h时,菌株产木聚糖酶活力达到了5213 U/g干物质,比未优化前提高了127%。     

1株饲用黑曲霉的分离鉴定及其纤维素酶活性检测

试验旨在从发酵饲料的微生物中筛选分离鉴定能够高效降解纤维素的曲霉菌株。试验利用PDA培养基对黑曲霉进行分离，通过菌株形态特征和ITS序列分析鉴定分离菌株，构建系统发育树，判定菌株分类地位；检测该菌的菌落形态和生长特性，定性研究该菌的酶谱，选择不同碳源诱导其产内切葡聚糖酶、滤纸酶及木聚糖酶活的变化。结果显示，试验采用PDA培养基分离培养得到1株曲霉，经鉴定该菌为黑曲霉，编号为0729。在接种量为5%、发酵温度30℃，培养第2 d，由木糖诱导黑曲霉产内切葡聚糖酶活和滤纸酶活最高，培养第1 d滤纸诱导的木聚糖酶活最高。研究表明，发酵饲料中富含可降解纤维的微生物资源，黑曲霉可以产纤维素酶、淀粉酶和脂肪酶，对开发反刍动物饲用微生物具有重要作用。     

饲用木聚糖酶固态发酵工艺条件研究

木聚糖酶作为饲料添加剂,可以强化禽畜消化道分解饲料的功能,促进营养物质的吸收。通过单因素试验和正交试验对黑曲霉A-3固态发酵生产饲用木聚糖酶的工艺条件进行了研究。优化的发酵条件如下:采用麸曲种子接种,接种量为10%;装料量为5g/300ml三角瓶、初始pH值为5.5、培养温度为35℃、料水比为1:1.5、培养时间为84h。在优化条件下,菌株产木聚糖酶活力达8291.75IU/g,比优化前提高了63.73%。     

一株霉菌产木聚糖酶液体发酵培养基组分优化及酶学性质的研究

本试验主要对一株产木聚糖酶B45菌株的液体发酵培养基组分进行优化.通过单因素和正交试验确定了所试因素的最佳组合,并对其酶学性质进行研究.结果表明B45菌株液体发酵培养基中的最优组分为碳源(玉米芯)2%,氮源(玉米粉)0.2%,无机盐(KH22PO4 MgSO4)0.1%,微量元素(FeSO4)0.0015%.木聚糖酶的最适反应pH为5.0,最适反应温度为50℃,有较好的热稳定性,但不耐强酸(pH≥4)和碱性(pH≤7).     

产酸性木聚糖酶链霉菌的鉴定、酶学特性及发酵工艺研究

木聚糖是谷物类饲料中的主要抗营养因子。为筛选高效降解半纤维素的菌株,提高粗饲料利用率,本试验采用水解圈法从土壤中筛选出1株产木聚糖酶的细菌,经鉴定为灰略红链霉菌,命名为Streptomyces griseorubens WL003。该菌所产木聚糖酶的最适酶促反应温度和p H分别为65℃、4.5,于30~55℃处理10 min后,残余酶活不低于80%;于p H 3.5~11.0处理1.5 h,残余酶活仍保持在88%以上;Tween-80可提高木聚糖酶活力,而Cu2+、SDS及β-巯基乙醇则会较强地抑制酶活。该菌株以9%接种量接种至最适发酵培养基,碳源为10%麦秸,氮源为1.41%牛肉膏,0.1%吐温-80,初始p H为6.0,经32℃、180 r/min下培养7 d时,所产木聚糖酶活性最高,可达50.82 U/m L,为优化前2.5倍。菌株WL003对麦秸的粗纤维降解效果最好,对苜蓿草粉的粗纤维降解效果最差。证明从土样分离到的酸性木聚糖酶菌株WL003,在降解饲料粗纤维方面具有较好的应用潜力。     

MB22木聚糖酶发酵条件的研究

通过因素轮换试验和正交试验,对MB22菌产木聚糖酶的培养基配方和发酵条件进行了研究。结果显示最佳培养基组成是:以玉米芯粉和麸皮为碳源,麸皮120g/l,玉米芯280g/l,(NH4)2SO44g/l,CaCO31.5g/l,Tween80,2.0g/l,MgSO4·7H2O1.5g/l;最佳发酵条件为:起始pH5.0,摇床培养温度30℃,转速160r/min,振荡培养84h。在最佳发酵条件下,MB22菌的最高产酶活力可达898.23U/ml。虽然与一些高产菌株相比该菌株的产酶能力还有待于进一步提高,但该试验结果为进一步进行微生物生产木聚糖酶的研究提供了理论依据。     

产木聚糖酶类芽孢杆菌SD-29发酵条件优化

研究旨在对类芽孢杆菌SD-29产木聚糖酶的发酵条件进行优化,获取最佳发酵条件。以类芽孢杆菌SD-29为出发菌株,对其所产木聚糖酶的酶学性质进行分析,通过单因素试验对培养基中的碳源、氮源、金属离子以及初始p H值、接种量、发酵温度和发酵时间进行优化。结果发现,最佳发酵条件为麦芽糖15 g/L、牛肉膏2.5 g/L、NaNO_3 2 g/L、KCl 0.5 g/L、Ca Cl_2 0.3 g/L,初始pH值为7,以2%的接种量接种,30℃、200 r/min培养18 h后,测得发酵上清液酶活为0.663 U/m L,与初始酶活0.144 U/m L相比,扩大了3.6倍。通过单因素试验优化类芽孢杆菌SD-29产酶发酵条件,木聚糖酶活力得到提高,该研究为后续木聚糖酶的性质研究和异源表达奠定基础。     

1株产碱性木聚糖酶的芽胞杆菌的分离鉴定及其相关研究

分离到1株产碱性木聚糖酶的革兰氏阳性菌株,通过菌落形态及16srDNA序列同源性分析,确定该菌株为短小芽孢杆菌。生长条件和产酶条件研究结果显示,最适温度和pH分别为50℃和pH8·0。培养基优化试验显示在有机和无机混合氮源条件下(NH4NO30·57%;牛肉膏1%;蛋白胨0·5%;酵母提取物0·5%;木聚糖0·5%)木聚糖酶产量达到最高(180U/mL)。酶学试验表明最适反应条件为50℃,pH8~9;在pH9的条件下,孵育120min时仍具有75%的活力,表明该酶具有较强的碱耐受性。     

饲用木聚糖酶菌株的筛选及鉴定

利用刚果红透明圈法,从采集的土样中筛选分离一株产木聚糖酶的菌株,根据其形态学和生理生化特征,结合16 SrDNA分子水平分析,鉴定该菌为短小芽孢杆菌。摇瓶发酵粗酶液的性质测定表明,该菌株酶活力可达132.53 IU/mL。     

产木聚糖酶芽孢杆菌的筛选鉴定及肉兔饲喂效果研究

为了筛选可以添加于动物饲粮中的产木聚糖酶芽孢杆菌,试验采用刚果红平板变色圈法进行产木聚糖酶芽孢杆菌的初筛,通过液体发酵测定酶活力的方法展开复筛,并进行动物安全性和胃肠道耐受性试验。通过形态特征观察、生理生化试验和16S r DNA全序列分析与发育树构建将其鉴定到种。制备该菌菌剂并将其添加于肉兔日粮中,考察对肉兔的饲喂效果。结果表明:筛选到产木聚糖酶的菌株枯草芽孢杆菌(Bacillus subtils)A-5,其产酶活力为56.848 U/ml,耐受p H值2.0,在0.1%的胆酸盐溶液和人工肠液中可正常生长。日粮中添加0.25%的菌剂,可使试验兔日增重较对照组提高7.92%(P<0.01),料重比降低6.09%(P<0.01)。说明在肉兔日粮中添加耐受胃肠道环境的产酶菌剂可以促进动物对饲料的利用率,显著促进肉兔生长。研究结果为饲料的合理利用、肉兔的高效养殖提供了新的思路。     

木聚糖酶固态发酵工艺及酶学特性研究

筛选出一株高产木聚糖酶的菌株U6-5,菌体固态发酵产酶条件的研究表明,最佳发酵培养基配方为:麸皮50g、花生壳粉30g、玉米芯粉20g、NH4NO30.5g、水110ml,每克原料接种量为3.05×105个孢子,最适发酵温度28～30℃,在此培养条件下发酵26～28h,木聚糖酶酶活达到6105U/g。该木聚糖酶具有较高的耐热、耐储藏性能。     

黑根霉发酵产木聚糖酶的条件优化

利用本实验室提供的黑根霉CY8降解玉米秸秆产木聚糖酶，观察了接种量、碳源、氮源、金属离子、表面活性剂对产木聚糖酶活和纤维素酶活的影响，确定最佳培养条件为：接种量3ml，碳源m（麦麸）：m（玉米芯）和m（麦麸）：m（玉米秸秆）均为3：7，氮源为尿素，Co2＋、Mg2＋、Na＋、K＋对木聚糖酶有促进作用，Mg2＋的激活作用最大，可使酶活性提高37.4％，其它离子如Ca2＋。‘对酶活的影响较小。Tween80表面活性剂对菌株产木聚糖酶有促进作用。在不同温度下观察了酶的热稳定性，结果表明：该酶热稳定性较差，在50C以下热稳定性较好（木聚糖酶活计），而随着温度的升高，酶活力很快丧失．当温度达到80℃时，酶活在40min内就全部丧失。     

产木聚糖酶乳酸杆菌对肉仔鸡生产性能、免疫器官指数及血清指标的影响

试验选用1日龄AA肉仔鸡240只,随机分为3个处理组,每个处理组4个重复,每个重复20只。三个处理组分别饮清水、乳酸杆菌菌液和产木聚糖酶乳酸菌菌液。通过测定肉仔鸡增重、采食量、料肉比、血液生化指标和免疫器官指数,研究产木聚糖酶乳酸杆菌对肉仔鸡生产性能及免疫功能的影响。结果表明,在试验前、后期通过饮水添加产木聚糖酶乳酸杆菌对肉仔鸡生产性能无显著影响(P0.05),但可显著提高法氏囊指数(P0.05)。添加产木聚糖酶乳酸杆菌对肉仔鸡可显著提高血清中球蛋白和葡糖糖水平(P0.05),显著降低肉仔鸡生长前期血清中尿素、总胆固醇、甘油三酯水平(P0.05)。通过在饮水中添加产木聚糖酶乳酸杆菌可改善肉仔鸡机体免疫水平,但对肉仔鸡生产性能无显著影响。     

木聚糖酶固态发酵条件的优化

采用单因素试验和正交试验对宇佐美曲霉（Aspergillus usamii）B-2菌株产木聚糖酶的固态发酵的工艺条件进行了研究。结果表明,该菌的最适培养条件为：发酵最佳培养基为麸皮50％、玉米芯50％、硫酸铵2％、尿素3％,发酵温度为30℃,料水比1：1．2,自然pH值,培养48h,木聚糖酶可以达到8500U左右。     

发酵花生壳粉生产复合酶的初步研究

从实验室保藏的菌株中选取了一株能发酵花生壳粉产酸性蛋白酶的菌株黑曲霉HKS-07,并通过诱变得到高产菌株UV11,对培养基组成及培养条件进行了优化研究试验。结果表明,菌株UV11在m(麸皮):m(花生壳粉)为6:4、豆粕10%、(NH4)2SO42%、MgSO4·7H2O0.05%、K2HPO40.1%的培养基质上,加水比1:1.1,接种量为105~106个/g,置28～30℃下培养24～30h,产酶量为酸性蛋白酶1226U/g、纤维素酶7996U/g、木聚糖酶3192U/g、糖化酶1080U/g,热稳定性好,具有良好的应用前景。