Establishment of cell suspension line of <Emphasis Type="Italic">Populus tomentosa</Emphasis> Carr.

Leaves of fine Populus tomentosa genotype TC152 were used as explants to establish cell suspension lines. The effects of plant growth regulators on callus induction and establishment of cell suspension lines were studied. The callus induction rate was the highest on a MS solid medium supplemented with 1.0 mg·L^-1 2,4-D. A cell suspension line could be obtained by inoculating calli which were not subcultured into a MS liquid medium supplemented with 1.5 mg·L^-1 2,4-D. The best subculture medium was MS ＋ 0.8 mg＇L-1 2,4-D ＋ 30 g·L^-1 sucrose with a subculture cycle of seven days.     

阔叶十大功劳叶柄愈伤组织诱导及试管苗培养的研究

以大连市引种的阔叶十大功劳嫩叶柄为外植体,采用组织培养方法研究其快繁技术,结果表明:愈伤组织诱导的初代和继代理想培养基是MS+KT 0.6 mg·L-1+2,4-D 2.5 mg·L-1;不定芽分化的理想培养基是1/4MS+ZT0.4 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1;不定芽生根的理想培养基是1/3MS+IAA0.5mg·L-1;试管苗生根继代培养形成的试管苗生长旺盛,生根率为94.6%,生根数为7.2条,每代的繁殖系数为2.8。试管苗移栽平均成活率为89.8%,生长旺盛,在大连地区可正常越冬,翌年即可开花。     

拟南芥悬浮细胞系的构建研究

以拟南芥生态型种子为实验材料,研究其悬浮细胞愈伤组织继代培养效果。结果表明:在MS培养基上加入不同激素对拟南芥愈伤组织的诱导和继代培养产生显著影响,用最佳激素配比的MS培养基构建了良好的悬浮细胞培养体系。其中拟南芥愈伤组织最佳诱导配方为MS+3.0 mg.L-1 2,4-D+0.3 mg.L-1 6-BA;愈伤组织继代配方为MS+1.5 mg.L-1 2,4-D+0.3 mg.L-1 6-BA+1000 mg.L-1 CH;悬浮培养配方为MS+1.5 mg.L-1 2,4-D+0.3 mg.L-1 6-BA+1000 mg.L-1CH。     

刺五加体细胞胚状体发生及成苗的研究

以刺五加试管苗叶片为试材,将叶片接种于含有不同种类和浓度激素的培养基上进行培养,研究不同激素对刺五加胚性愈伤组织诱导、胚状体发生及生根的影响。结果表明：诱导叶片胚性愈伤组织发生的最适培养基为MS＋6-BA 1.5 mg.L-1＋2,4-D 1.0 mg.L-1,胚状体生长发育的最适培养基为MS＋6-BA1.0 mg.L-1＋IBA0.5 mg.L-1,生根的最适培养基为1/2MS＋NAA0.4 mg.L-1。     

Callus induction and plant regeneration from mature bluegrass (Poa pratensis L.) seeds

A protocol was discussed for high efficient plant regeneration from seven bluegrass (Poa pratensis L.) cultivars via an indirect callus induction and somatic embryogenesis method. Mature seeds were used as explants for callus initiation. Callus induction and proliferation efficiencies were investigated on NB, modified MS (MMS) and MS media, supplemented with 2.0 mg·L-1 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D). The MMS medium performed best. Based on the MMS medium, direct and indirect callus induction effects of bluegrass from mature seeds were compared at the range of 1-5 mg·L-1 2,4-D contained in the medium. Under the direct callus induction method, the most suitable 2,4-D concentrations varied among cultivars. Under the indirect callus induction method, a significantly high callus induction frequency (93.33%-98.33%) was obtained and there were barely any statistically significant differences among the tested genetically diverse cultivars. Somatic embryos were promoted on the MMS medium supplemented with 3 mg·L-1 2,4-D, 0.1 mg·L-1 kinetin and 0.8 mg·L-1 CuSO4. Embryogenetic calli developed into plantlets on the MMS medium containing different concentrations of thidiazuron (TDZ), and the differentiation frequencies varied in the range from 20.15% to 77.65%. The 0.25 mg·L-1 TDZ was generally the most suitable concentration for the tested cultivars.     

红松成熟合子胚愈伤组织诱导的研究

以红松(Pinus koraiensis Sieb.et Zucc.)成熟合子胚为基准试验材料,对红松愈伤组织诱导的影响因素进行了初步研究。结果表明,不同的培养基对有效愈伤组织的诱导效果不同,初始诱导应选用LM培养基使外植体完全脱分化,反复继代后可以产生有效愈伤组织,供试的其他培养基继代后则极少产生有效愈伤组织;不同的激素组合和浓度配比对有效愈伤组织的诱导率影响不同,2,4-D是愈伤组织启动的不可或缺的植物生长调节剂,其作用远远大于NAA。在LM+2mg.L-1 2,4-D+0.5mg.L-16-BA的诱导培养基中加入0.5mg.L-1 KT或0.5mg.L-1 TDZ,可明显提高有效愈伤组织的诱导率(可达75.7%)。     

人参叶片愈伤组织诱导数学模型分析

取人参叶片作为外植体诱导愈伤组织,利用二元二次通用旋转组合设计数学模型筛选植物激素浓度组合,结果表明:2,4-D与KT对人参叶片外植体诱导愈伤组织方程为:Y=0.653 30+0.229 63X1+0.140 85X2-0.130 83X12-0.197 48X22+0.100 00X1X2;叶片诱导愈伤组织最佳培养基为MS附加7 mg·L-12,4-D和0.9 mg·L-1KT,诱导率最高可达80%以上。     

刺槐未成熟合子胚的体细胞胚胎发生和植株再生

以刺槐不同胚龄的未成熟合子胚为外植体,采用混合正交试验设计,研究幼胚胚龄和不同外源激素种类及质量浓度对刺槐胚性愈伤组织的诱导和体细胞胚分化、萌发的影响.结果表明:开花后8周(55天左右)是胚性愈伤组织和体胚诱导的最佳外植体取材时期;MS+2,4-D 5.0 mg·L-1 +BA0.5 mg·L-1是诱导胚性愈伤组织的最佳培养基,出愈率最高为95.42％±0.02％;MS +NAA0.5 mg·L-1 +BA0.5 mg·L-1+谷氨酰胺250 mg·L-1+水解酪蛋白500 mg·L-1是体细胞胚诱导和分化的最佳培养基,直接体细胞胚发生率最高为92.40％±0.12％,通过愈伤组织诱导体细胞胚发生的频率最高为90.73％ ±0.49％.一旦形成球形胚,将培养物转接到不含任何生长调节剂的MS培养基上,体细胞胚经成熟萌发可进一步形成完整小植株.     

香蕉薄切片愈伤组织再生体系的建立研究

以巴西香蕉品种的薄切片为外植体高频地诱导出愈伤组织,并诱导出了不定芽,获得了再生植株。在实验过程中,利用正交实验中筛选出愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+2,4-D 4.0 mg.L-1+KT 1.0 mg.L-1+NAA 1.0 mg.L-1+活性炭200 mg.L-1,诱导率可达100%,愈伤组织增殖的最佳培养基是MS+2,4-D 2.0 mg.L-1+6-BA 0.5 mg.L-1+NAA 0.5 mg.L-1+活性炭100 mg.L-1,继代3-4次的愈伤组织在6-BA浓度为5.0 mg.L-1的分化培养基上能分化出不定芽,继代10次之后愈伤组织在继代培养基上开始出现褐化现象,愈伤组织增殖明显受到抑制,褐化的愈伤组织逐渐死亡。     

白刺花胚性愈伤组织诱导及体细胞胚发生

【目的】探讨不同植物生长调节剂对白刺花胚性愈伤组织诱导的作用,以及培养基中氮源和无机盐浓度对白刺花体细胞胚发生和植株再生的影响,以期建立白刺花体细胞胚发生、发育及调控技术体系,为白刺花种苗快速繁殖体系建立及遗传转化研究提供参考。【方法】以白刺花叶片为外植体,研究生长调节剂2,4-D(1.0、2.0、3.0、4.0 mg ·L -1 )、NAA(0、0.5、0.8、1.0 mg ·L -1 )、6-BA(0.2、0.5、1.0、2.0 mg ·L -1 )和TDZ(0、0.2、0.5、1.0 mg ·L -1 )组合对胚性愈伤组织诱导,及NAA(0、0.2、0.5 mg ·L -1 )、6-BA(0、0.5、1.0 mg ·L -1 )和TDZ(0、0.2、0.5 mg ·L -1 )组合对体细胞胚发生的调控作用,筛选最优生长调节剂组合;并研究培养基中KNO 3和NH 4NO 3比例对体细胞胚发生的作用,及MS培养基中无机盐浓度(1/5MS 、1/4MS、1/3MS、1/2MS)对体细胞胚萌发的影响,筛选最佳的体细胞胚发育及成熟萌发条件。【结果】白刺花叶片外植体胚性愈伤组织诱导适宜培养基为MS + 2,4-D 3.0 mg ·L -1 + NAA 0.5 mg ·L -1 + 6-BA 0.2 mg ·L -1 + TDZ 1.0 mg ·L -1 +蔗糖40 g ·L -1 +琼脂7.0 g ·L -1 ,诱导率为42.0%。采用MS基本培养基时,最佳的体细胞胚发生培养基为MS + NAA 0.5 mg ·L -1 + 6-BA 1.0 mg ·L -1 + TDZ 0.5 mg ·L -1 +蔗糖40 g ·L -1 +谷氨酰胺100 mg ·L -1 +琼脂7.0 g ·L -1 ,体细胞胚发生率为78.46%,总胚数为对照的3.6倍;MS培养基中,KNO 3浓度提高1倍、NH 4NO 3降至1/2时,体细胞胚发生率可提高至91.33%,总胚数为采用MS基本培养基时的1.4倍;1/3MS培养基有利于体细胞胚的萌发,萌发率为82.75%,幼苗长势良好,单株平均鲜质量为76 mg,幼苗驯化移栽1个月后成活率达90%以上。【结论】白刺花叶片接种于添加2,4-D、NAA、6-BA和TDZ不同组合的诱导培养基上,可脱分化形成愈伤组织或胚性愈伤组织,2,4-D浓度对愈伤组织形态和质地有较大影响。TDZ有利于体细胞胚的形成,适宜浓度的生长素与细胞分裂素组合及硝态氮和铵态氮的比例对体细胞胚的形成和发育具有调控作用,降低MS无机盐浓度可提高体细胞胚萌发率,本试验体系的再生植株移栽成活率达90%以上。     

不同激素配比对库拉索芦荟愈伤组织诱导的影响

以MS为基本培养基，添加不同浓度的2，4-D、NAA、KT或其组合，研究库拉索芦荟愈伤组织的诱导及生长情况。结果表明，两种生长素均可诱导出愈伤组织，但较高浓度的2，4-D易导致褐化，而高浓度的NAA诱导出的愈伤组织含水量较高，以两种生长素配合使用再辅以低浓度的KT效果较好，其中15mg/L的KT 4mg/L的2，4-D 0．1mg/L的KT的组合，愈伤组织诱导率达到90％，且愈伤组织生长较旺盛。     

巨桉无性系EG5叶片高效再生体系的建立

以巨桉栽培无性系EG5无菌苗的叶片为外植体进行愈伤组织诱导与植株再生研究。结果表明:愈伤组织高效诱导和不定芽分化的最适培养基为改良MS+0.12 mg·L-1TDZ+0.25 mg·L-1NAA;硝酸铵对EG5叶片愈伤组织生长及植株分化的影响较大,最适宜质量浓度为0.412 5 g·L-1;最佳伸长培养基配方为改良MS+0.3 mg·L-16BA+0.05 mg·L-1IBA+0.3 mg·L-1IAA;暗培养10 d能促进不定芽分化,延缓愈伤组织老化和褐变速度。生根培养基为改良MS+0.4 mg·L-1NAA时生根率最高,为65.47%,移植成活率为90%以上。     

柳叶蜡梅叶片愈伤组织诱导实验研究

以不同方式处理柳叶蜡梅种子，观察其在MS培养基上萌发和生长的状况。结果显示：98％浓硫酸处理的种子发芽率达32％，其它处理萌发率低。以种子无菌苗叶为外植体，接种于2，4-D、NAA、6-BA组合不同浓度生长调节剂的MS固体培养基上，进行愈伤组织诱导实验；外植体愈伤组织诱导培养基MS＋NAA0．3mg·L^-1＋6-BA1．0mg·L^-1的诱导率为80％，生长稳定可分化出苗。     

Somatic embryogenesis from cell suspension cultures of aspen clone

Suspension cultures initiated from callus derived from petiole explants of aspen hybrid (Populus tremuloides × P. tremula) produced somatic embryos. Callus was induced on a MS medium supplemented with 5 mg·L–1 2,4-D and 0.05 mg·L–1 zeatin under light conditions. Embryogenic calli were obtained when a subsequent subculture of calli was suspended in the same basal me-dium with 10 mg·L–1 2,4-D. The highest number of globular embryos were induced from embryogenic calli by cell suspension cul-ture in a MS liquid medium supplemented with 10 mg·L–1 2,4-D. Genotype and 2,4-D concentration were vital to the induction of embryogenic calli producing competent cells. Embryogenic calli for each genotype were heterogeneous. Green calli with gel-like consistency could yield more competent cells than light yellow embryogenic calli. However, some globular embryos broke into slices and some developed abnormally after one month of culture under the same or other hormonal conditions.     

陈山红心杉胚性愈伤组织的培养

以未成熟陈山红心杉胚胎为外植体,MS为基本培养基,通过添加不同浓度的6-BA和2,4-D,研究胚性愈伤组织的培养条件.结果表明:2,4-D是胚性愈伤细胞分化和生长的关键因子,最佳培养条件是:MS+6-BA 0.5mg/L+2,4-D 1.0mg/L,继代周期40天左右.     

艳丽花楸组培快繁技术研究

以艳丽花楸的侧芽和种子萌发苗为外植体,MS为基本培养基,添加不同配比的植物生长调节剂,进行离体培养。结果表明:较之种子萌发苗,当年侧芽外植体更适合作为诱导材料。在芽的诱导及增殖阶段,当激素水平为6-BA0.5 mg.L-1+NAA0.10 mg.L-1时,增殖效果较好,分化率可达90%,单芽平均分化芽数大于5个。在生根诱导阶段,采用质量浓度为2.8 mg.L-1的IBA较为合适,生根率可达到95%。     

马先蒿无性系建立的研究

为满足马先蒿观赏栽培对种苗的需要,以生长点为材料,采用组织培养的方法,进行了愈伤组织诱导与分化、试管苗的生根与生根继代增殖培养,以及移栽和定植的研究。结果表明:MS+6-BA0.6mg·L-1+2,4-D1.0mg·L-1+NAA0.3mg·L-1是生长点愈伤组织诱导和分化培养的理想培养基;1/3MS+ABT2号10mg·L-1是不定芽生根培养和试管苗生根继代增殖培养的理想培养基;试管苗移栽和定植的成活率分别为93.4%、98.5%,定植的试管苗保持了马先蒿的植物学性状和观赏性状。     

牡丹愈伤组织诱导和继代培养体系的建立

以牡丹为材料,研究了不同外植体、激素对愈伤组织诱导和继代增殖的影响,结果表明:①牡丹子叶、胚轴是诱导愈伤组织的最佳外植体;②牡丹子叶愈伤组织诱导的最佳培养基为:MS+Ca2+;③牡丹愈伤组织增殖的最佳培养基为:MS+2,4-D 0.5 mg.L-1+NAA 1.5 mg.L-1+Vc 500 mg.L-1;④在培养基中添加500 mg.L-1Vc或去除Cu2+,具有较好的抗褐化效果。     

北美兰云杉胚性组织诱导的研究

以1/2LM为基本培养基,加入不同种类和质量浓度的植物生长调节剂,对5个种源的北美兰云杉成熟合子胚进行诱导培养,结果表明:成熟合子胚在一定激素质量浓度范围内的1/2LM培养基上均能诱导出胚性组织,5个种源的兰云杉成熟胚的胚性组织诱导率分别为26.76%、24.17%、25.04%、24.63%和69.57%。而在不同激素组合中,以BA7.5 mg.L-1+2,4-D15.0 mg.L-1的激素组合对北美兰云杉胚性组织的诱导率最高。