应用胶乳凝集技术诊断番鸭小鹅瘟病

为建立番鸭源小鹅瘟病毒(GPV)快速检测方法,本研究采用GPV单克隆抗体(MAb)标记聚苯乙烯胶乳,建立了检测GPV抗原的胶乳凝集试验(LPA)。结果显示:LPA具有较好的敏感性,可以检出GPV最低毒价为1 000 TCI50/10μL;特异性强,仅与GPV产生特异性凝集反应,与其他相关鸭源病毒均无交叉反应;重复性和稳定性好,在4℃保存期达11个月;对人工感染病例的LPA检测结果与PCR符合率为93.3%;对临床18份疑似GPV病例进行检测,LPA和PCR符合率为94.5%。表明LPA具有简便、快速、特异、准确等优点,适用于基层快速诊断番鸭小鹅瘟病。     

一起雏番鸭小鹅瘟的诊治与体会

2016年底福建省宁化县某养殖户雏番鸭发生一起传染病.10日龄雏番鸭出现精神萎顿,食欲废绝,严重下痢,部分雏鸭鼻孔流出浆液性鼻液,排灰黄色或黄绿色稀粪,发病高峰期每天有5%-10%左右雏番鸭死亡.病料冰冻切片经免疫荧光检测,小鹅瘟单克隆抗体检测呈阳性反应,而番鸭细小病毒、番鸭呼肠孤病毒、鸭副粘病毒、禽坦布苏病毒等的单克隆抗体检测呈阴性.发病雏番鸭用小鹅瘟高免蛋黄紧急注射,病情得到明显好转,证实该病为番鸭小鹅瘟病毒感染.     

番鸭鸭疫里默氏杆菌并发小鹅瘟病的诊疗

广东省吴川市黄坡镇某专业户饲养的一群雏番鸭,14日龄时发生一种以眼眶湿润、下痢、脱水并伴有抽搐为特征症状的疫病。经检查,确诊为番鸭鸭疫里默氏杆菌并发小鹅瘟病。现将诊治情况报告如下：     

小鹅瘟病诊断与综合防制

小鹅瘟是雏鹅的一种急性或亚急性败血症 ,主要侵害出壳后 4～ 2 0ｄ的雏鹅 ,成年鹅感染无症状 ,但可经卵将疾病传至下一代 ,该病传播快而病死率高。以发生渗出性肠炎为主要病理变化 ,多年来一直是危害养鹅业的重要传染病。由于采取不同的防治措施使发病情况各有差异 ,所以在现地根据不同的饲养管理条件 ,应采取合理的防制措施。现就一起疫情的诊断与防制报告如下 :1　发病情况某县食品公司是一个以种鹅、孵化、饲养、屠宰加工一条龙大型养殖企业 ,饲养种鹅 80 0 0余套 ,2 0 0 2年 2月未至 4月初孵出鹅雏 6批 ,共 4万多只 ;因在 1月中旬采用…     

雏番鸭细小病毒和小鹅瘟病毒特性比较及二联活苗的应用

三周龄以内的雏番鸭常由雏番鸭细小病毒和小鹅瘟病毒引起的疫病，其发病率和死亡率较高。自1985年以来，在福建、广东、广西、浙江、江西、江苏、山东等省先后发生流行，对养番鸭业危害极大。1988年国内一些学者进行番鸭细小病毒分离与防治研究。法国学者报道了1989年在法国两个地区爆发雏番鸭细小病毒病，并从病群中分离到NX3和GM两个毒株进行部分特性的研究，数年来，在流行的疫区应用小鹅瘟免疫血清和活疫苗进行免疫有保护率。在此基础上，我们于1991年从患病雏番鸭分离到一株病毒(代号为M91)，进行与GPV之间的相关性和差异性研究，为本病的防制提供科学依据。     

小鹅瘟病毒分离与初步鉴定

取死于具有小鹅瘟典型症状的 7日龄吉林白鹅脾脏 ,制成乳剂 ,接种于未免疫小鹅瘟疫苗的健康母鹅所产种蛋的 12日龄鹅胚尿囊腔。结果当盲传至第 3代 ,鹅胚死亡 ,电镜负染尿囊液观察到细小病毒样粒子。雏鹅接种试验结果表明 ,试验组雏鹅表现出小鹅瘟临床症状和剖检特征。由此证明 ,该雏鹅死于小鹅瘟     

小鹅瘟的诊断及病毒分离鉴定

小鹅瘟又称鹅细小病毒病，是由鹅细小病毒（Goose parvovirus，GPV）引起的鹅的一种急性、高度接触性、败血性传染病，主要侵害出壳后4-20日龄的雏鹅和雏番鸭，本病的特征性病变是小肠空肠和回肠部分呈急性卡他性、纤维素性坏死性肠炎。根据调查分析情况看，它流行广，传播快，危害严重，10日龄以内雏鹅发病后，死亡率可达100％。近些年，该病已经给我市部分饲养户造成较为严重的经济损失。为此本试验对虎林市月牙湖养殖场死亡的疑似小鹅瘟雏鹅进行了流行病学调查、临床症状和病理学观察。同时对病死雏鹅病料进行了鹅细小病毒的分离鉴定及免疫保护试验。应用琼脂扩散和免疫荧光抗体实验方法对小鹅瘟进行了快速诊断。病毒分离鉴定及诊断结果证实该养殖场发生的雏鹅死亡是由小鹅瘟病毒感染造成。     

一起雏番鸭病毒性肝炎并发小鹅瘟的诊疗报告

近年来，雏番鸭小鹅瘟已陆续发生，笔者在禽病诊断中曾遇到几例，最近还遇到一起雏番鸭病毒性肝炎并发小鹅瘟，现将诊治情况报告如下：     

番鸭小鹅瘟病直接荧光诊断试剂的研制

将抗番鸭GPV单抗腹水采用透析法标记异硫氰酸荧光素（FITC）,制备成抗GPV荧光抗体,研制检测GPV抗原的直接免疫荧光诊断方法。结果显示GPV荧光抗体仅与GPV阳性的组织切片或细胞呈现特异性荧光,与番鸭细小病毒（MPV）、番鸭呼肠孤病毒（MDRV）、鸭副粘病毒（DPMV）、鸭病毒性肝炎病毒（DHV）和正常番鸭组织切片不反应;与间接荧光方法的符合率为92．9％。表明GPV荧光抗体具有较好的特异性、敏感性和准确性,可用于临床快速诊断番鸭小鹅瘟病。     

乳胶凝集试验检测番鸭呼肠孤病毒方法的建立

用纯化的抗番鸭呼肠孤病毒病抗体致敏乳胶成功地建立了检测番鸭呼肠呼病毒的方法。通过试验，确定了抗体致敏乳胶的最佳浓度1：10(0．4242mg/mL)，最佳致敏温度37℃，最佳致敏时间2个小时。人工攻毒雏番鸭30只，用所建立的方法检测粪便。结果表明，攻毒后的第3天粪便中即可检测到病毒，直至攻毒鸭全部死亡都可从粪便中检测到病毒抗原；同样攻毒1日龄雏番鸭30只，剖检取心、肝、脾按常规方法处理，用所建立的方法的检测。结果表明，首先是脾脏在攻毒后第4天3只中有2只检测结果阳性，第5天2只死亡鸭中有一只肝检测结果阳性，脾脏2只都呈阳性，此后的病死鸭脾和肝均为阳性，而心脏则未见有阳性。这对，临床上诊断与防治番鸭呼肠孤病毒感染具有重要的参考意义。     

乳胶凝集试验检测鸡新城疫病毒血清抗体的研究

用硫酸铵沉淀、透析浓缩的鸡新城疫病毒（ＮＤＶ）抗原致敏乳胶,然后所鸡新城疫阳性血清进行方阵滴定,选择出最佳致敏条件并制成新城疫病毒乳胶抗原,由此建立超乳胶凝集试验（ＬＡＴ）,用来检测新城疫血清抗体;用所建立的乳胶凝集试验（ＬＡＴ）和血凝抑制试验（ＨＩ）同步检测６９份鸡血清,结果乳胶凝集试验阳性６２份,阴性７份;血凝抑制试验阳性６６份,阴性３份,两者的总符合率为９４．２％（６５／６９）,且两者的检出率基本一致。结果表明,乳胶凝集试验具有操作简便、快速、敏感性高、特异性强且可用于现场检测等优点,是一种适合基层单位用来检测鸡新城疫病毒血清抗体的新方法。     

四川省鸭瘟病原的分离鉴定

用9～10日龄鸭胚和血清交叉中和试验从四川省七个疑似鸭瘟发病片区分离鉴定了七株鸭瘟病毒。经测定,这七个毒株与鸭瘟标准强毒AV1221F16代的血清型、抗原性一致,没有血凝特性,对氯仿敏感,属于DNA病毒;鸭胚半数致死量DELD50为10^-4.59～10^-5.92/0.2mL;本动物回归使四川麻鸭在3～7天死亡;电镜下观察成熟病毒粒子呈球形成近似球形,带有囊膜,直径150～160nm,具有疱疹病毒的典型形态结构。     

乳胶凝集试验与血清中和试验检测猪伪狂犬病血清抗体的 …

应用血清中和试验（ＳＮＴ）和伪狂犬病乳胶凝集试验（ＬＡＴ）诊断试剂盒对两种伪狂犬病是性血清、伪狂犬病病毒（ＰＲＶ）高兔血甭及６０份被检猪血清进行了ＰＲＶ抗体效价测定和相关性分析,两种方法测得的抗体效价之间呈强相关性（ｒ＝０．９６）,且ＬＡＴ效价比ＳＮＴ一般高出一个滴度;能干为自３５个猪场的４１４份猪血清进行了ＰＲＶ抗体检测,并与ＳＮＴ检测结果进行了对比,结果在ＳＮＴ检测为阳笥的１７１份血清中,ＬＡ     

间接免疫荧光方法快速检测番鸭呼肠孤病毒病

本研究应用具有免疫荧光特性的抗番鸭呼肠孤病毒病单克隆抗体(MDRV 237-11)建立了检测番鸭呼肠孤病毒病抗原的间接免疫荧光(Mab-IFA)方法。结果显示人工感染MDRVMW9710株病毒后发病和死亡番鸭组织切片均可检出阳性病灶;且组织匀浆经尿囊腔途径接种12日龄番鸭胚,取死亡胚心制作冰冻切片进行IFA鉴定呈阳性结果。表明该方法特异性好、可用于快速检测番鸭呼肠孤病毒病。     

野生水禽鸭瘟病毒的分离与鉴定

取急性死亡的某动物园野生水禽进行病毒分离,通过鸡(鸭)胚接种、动物回归试验、病毒主要理化特性测定、免疫预防试验等证实分离株为鸭瘟病毒,揭示野生水禽完全有自然感染鸭瘟的可能性,家鸭与野生水禽在相互间传播鸭瘟病毒上具有双向性.     

鸭坦布苏病毒和鸭瘟病毒二重荧光定量RT-PCR方法的建立

The study was conducted to establish the duplex Real-time PCR assay for detecting both duck tembusu virus (DTMUV) and duck plague virus (DPV). According to the sequences of DTMUV E gene and DPV UL6 gene in GenBank, two sets of specific oligonucleotide primers for DTMUV and DPV along with two TaqMan probes were designed. The duplex Real-time PCR assay was developed through optimization of reaction conditions and validation of specificity, sensitivity and repetitiveness of the method. The sensitivity of the assay were both 100 template copies for DTMUV and DPV. There was no specific bands of the same sizes were amplified from other duck pathogens, such as duck Newcastle disease virus, duck hepatitis virus, muscovy duck parvovirus, duck circovirus, H9 subtype avian influenza virus, egg drop syndrome virus. This duplex Real-time RT-PCR assay is a sensitive, quick, specific and quantitative test for detection of DTMUV and DPV, and will be useful for the control of these viruses in ducks.     

乳胶凝集试验检测鸡传染性鼻炎血清抗体的研究

将Ａ型和Ｃ型鸡副嗜血杆菌培养后,菌落计数,离心计数,离心后用０．０１ＭｐＨ７．４磷酸盐缓冲液洗涤菌体２次。经过对致敏温度、致敏时间、致敏乳胶的菌体浓度及菌体的处理方式等条件的选择,建立了检测鸡传染性鼻炎血清抗体的乳胶凝集试验。与琼脂扩散试验相比,特异性一致,但更加敏感,且操作简便、快速。结果说明,该方法有较好的应用前景,尤其适用于本病的现场快速诊断。     

小鹅瘟病毒贵州株的分离与鉴定

采用鹅胚接种、动物感染、电镜观察及病原核酸与结构蛋白分析等方法对贵州省某养殖场疑似小鹅瘟病例进行了病原的分离与鉴定.结果:该病例组织病料可使鹅胚呈现特征性病变,雏鹅人工感染后能表现出与自然感染病例相似的症状;电镜下病毒粒子直径为20～25 nm,无囊膜,具有典型细小病毒特征;经1%琼脂糖凝胶电泳,病毒核酸扩增片段约为5100 bp;经SDS-PAGE发现,病毒结构蛋白由3条多肽组成,即VP1、VP2、VP3,分子量依次为88、68、57 ku.实验成功分离得到了一株贵州小鹅瘟病毒流行毒株.