家禽瘦素（Leptin）信息传导及其生理功能

瘦素（Leptin）的发现使人们了解了许多脊椎动物对能量消耗和采食量所进行的调控。瘦素也参与动物不同的生理功能。在家禽中,瘦素cDNA最初是从鸡中克隆得到的,以评定其生理作用。然而,这种cDNA既未得到许多研究人员的证实,与鸡瘦素相符合的基因组DNA也未被发现。这场争论是家禽内分泌学中必须要得到解释的最重要问题之一。2000年,家禽瘦素受体cDNA首次在鸡中得到确定;同时研究显示,该受体能够调解瘦素信号,以展示其生理功能。本文将概述家禽瘦素研究的最新发现,包括其生理作用和信号传导。     

性连锁矮小鸡生长激素受体基因位点多态性分析

本研究通过构建鸡基因文库克隆了鸡生长激素受体基因，用克隆的基因片段作探针，分析正常鸡和性连锁矮小鸡在生长激素受体基因位点的多态性，证实了矮小鸡在该基因位点存在突变     

利用PiggyBac转座系统构建稳定表达鹅RIG-I的DF-1细胞系

维甲酸诱导基因-I(retinoic acid inducible gene-I,RIG-I)是最近几年发现的一种细胞内模式识别受体,能够特异性的识别并结合病毒RNA,进而发挥抗病毒效应。RIG-I在进化中相对保守,但已有报道和我们的前期研究显示:家禽中鸭和鹅体内均有RIG-I受体,但鸡却缺乏RIG-I受体。为了研究这种天然缺失对鸡是否有不利影响,本研究利用PiggyBac转座系统将鹅源RIG-I转染入鸡胚成纤维细胞系DF-1,两次亚克隆后获得单个克隆,以荧光、RT-PCR及Western blot进行鉴定,最终获得稳定表达鹅RIG-I的DF-1细胞系,为进一步研究鸡的先天性免疫机制和鹅RIG-I的功能打下基础。     

肥胖基因及其产物的研究进展

Ob基因编码的Leptin具有降低脂肪,维持能量平衡,调节代谢、生殖、激素分泌,提高免疫机能等多方面的功能.本文在介绍Leptin、Leptin受体的基础上进一步对Leptin的生物学功能及其作用机制、Leptin的抗性做一简要论述,并提出了Leptin今后的研究方向及其在畜牧业上的应用前景.     

肥胖基因及其产物的研究进展

Ob基因编码的Leptin具有降低脂肪，维持能量平衡，调节代谢、生殖、激素分泌，提高免疫机能等多方面的功能。本文在介绍Leptin、Leptin受体的基础上进一步对Leptin的生物学功能及其作用机制、Leptin的抗性做一简要论述，并提出了Leptin今后的研究方向及其在畜牧业上的应用前景。     

鸟类抗体的特点及其应用前景

鸟类抗体的特点及其应用前景凌育编译（广东省家禽研究所广州５１０４３０）目前，商品性抗体主要可以分为三类：哺乳动物单克隆抗体、哺乳动物多克隆抗体和鸟类多克隆抗体。在鸟类中，最容易用来制备多克隆抗体的品种是鸡。然而，迄今用于制备抗本的动物主要是哺乳动物，...     

瘦素受体研究进展

瘦素（Leptin）是肥胖基因（obese gene,ob基因)的蛋白质表达产物,是一种主要由脂肪细胞分泌的蛋白质,其作用主要是调节动物的能量代谢和生殖活动。与其它激素一样,Leptin必须与其受体特异性结合后才能发挥其生理功能。作者从瘦素受体（Leptin receptor或OB-R）角度出发,探讨了OB-R的结构、组织分布、生物学功能及Leptin与OB-R间的信号传导,为进一步研究Leptin的作用提供参考。     

鸡PDKPDK4基因的克隆及组织差异表达研究

丙酮酸脱氢酶激酶4(PDK4)基因在动物机体的糖-脂代谢过程中起着重要的调节作用。为揭示PDK4基因对家禽生长和脂肪沉积的影响,以快速生长型肉鸡(隐性白羽洛克鸡)和慢速生长型肉鸡(杏花鸡)为试验对象,采用分子克隆、生物信息学分析和实时荧光定量PCR等方法,克隆鸡PDK4基因并分析其多态位点及在不同生长速度肉鸡组织的表达差异。克隆获得杏花鸡PDK4基因全长3 473 bp序列,并筛查到22处核苷酸多态性位点。生物信息学分析结果表明鸡PDK4蛋白与哺乳动物该基因蛋白序列之间的同源性较高,与爪蟾、斑马鱼的同源性较低;实时荧光定量PCR结果表明PDK4基因在不同生长速度的肉鸡组织中的表达存在较大差异,从组织表达来看,PDK4基因在脂肪组织中(皮脂和腹脂)的表达高于下丘脑和肝脏;从品种来看,PDK4基因在杏花鸡各组织的表达高于隐性白洛克鸡。可见,PDK4基因对家禽的生长和脂肪沉积有重要影响,是影响家禽生长和脂肪沉积的重要候选基因。     

太行鸡VIPR-1基因表达特点及其功能分析

旨在研究太行鸡血管活性肠肽受体-1(VIPR-1)基因的分子结构和特征,并结合该基因在高/低产蛋群体中的表达特性及其组织表达谱分析其功能。采集260日龄太行鸡高产(H)/低产(L)组个体血液、卵巢组织和内脏组织,分别提取DNA和RNA,随后将RNA反转录,设计VIPR-1特异性引物进行PCR扩增、克隆、测序,获得CDS区序列后运用生物信息学方法对序列结构进行分析;以鸡GAPDH基因作为内参,在不同组织中使用半定量RT-PCR进行组织表达谱分析;在H和L组卵巢组织中使用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)对VIPR-1基因的表达量进行检测。结果显示,VIPR-1基因CDS区全长1 341 bp,共编码446个氨基酸,该基因编码蛋白的二级结构主要由α-螺旋、延伸、β-旋折叠及无规则卷曲4种结构组成;同源性分析显示,太行鸡VIPR-1基因与鸭、火鸡的同源性最高(分别为92.24%、90.11%),与其他动物一致性也在64.51%～67.18%之间。组织表达谱显示,VIPR-1基因在太行鸡卵巢中表达量最高;qRT-PCR分析表明,VIPR-1 mRNA在高产太行鸡卵巢组织中的表达量显著高于低产太行鸡(P0.05)。本研究为进一步探讨VIPR-1基因在家禽产蛋性能中的调控作用提供了依据,为后期深入研究蛋鸡产蛋分子机制奠定基础。     

猪肥胖（OB）基因的研究进展

OB基因是近年刚被克隆的新基因，其产物Leptin是反映体内脂肪含量和调节体重的重要信号因子。克隆和分析研究OB基因，对猪的育种和提高瘦肉率有重要意义。本文综述了最近国内外猪OB基因的研究进展，主要包括OB基因cDNA的克隆和分析、OB基因产物Leptin的测序、表达及生物学功能、OB-R基因的研究现状等，对OB基因的研究前景进行了展望。     

猪黑素皮质素受体-4基因在成纤维细胞中的沉默研究

黑素皮质素受体-4(melanocortin receptor-4,MC4R)、黑素皮质素受体-3(melanocortin receptor-3,MC3R)、瘦素(Leptin)和缩胆囊素受体(cholecystokinin A receptor,CCKAR)基因均是与采食量相关的功能基因,为了研究这4个基因之间可能存在的互作关系,本研究采用RNAi方法,将体外培养的成纤维细胞中的MC4R基因沉默,然后采用Real-time PCR方法对Leptin、MC3R和CCKAR基因的表达变化情况进行了研究。结果表明,MC4R被沉默后,Leptin、MC3R和CCKAR的表达水平均没有发生显著变化。     

鸡SGOL2基因的克隆测序和表达分析

本研究通过对前期研究得到的候选鸟类卵巢特异表达基因LOC100857982进行克隆测序和表达分析,检验该基因是否在成年母鸡卵巢高度特异表达并对其功能进行初步分析,为进一步揭示卵巢的生长发育和成熟机制奠定理论基础。本研究采用RACE方法克隆出LOC100857982的cDNA全长,并进一步分析了该基因的序列,利用qRT-PCR方法对该基因进行表达分析。结果表明:LOC100857982的cDNA全长为1 306 bp;比对序列分析发现该基因是鸡SGOL2基因;系统进化树分析表明该基因与非洲爪蛙的遗传距离最近,符合基本的进化规律。qPCR结果显示该基因在25周龄白来航母鸡的卵巢中过表达。本研究表明鸡SGOL2基因是卵巢组织的特异表达基因。结合序列分析和表达分析,本研究推测该基因对母鸡的开产具有重要的作用。本研究还表明了实际克隆测序全长cDNA对基因功能研究的重要性,即使在高质量的鸡基因组中,Ensembl预测基因仍然有很多缺陷,从而导致以此为基础的一些生物学推断发生错误。     

鸡类胰岛素生长因子结合蛋白2基因编码区克隆及表达

为了研究鸡类胰岛素生长因子结合蛋白2(insulin-like growth factor binding protein2,IGFBP2)基因在鸡脂肪发育中的功能,通过RT-PCR和5'-RACE的方法克隆该基因编码区序列并检测IGFBP2基因在鸡组织中表达。结果显示:本试验克隆并获得了鸡IGFBP2基因编码区536 bp序列,并用生物信息学方法证明了该序列的正确性。在检测的7周龄鸡27种组织中,IGFBP2基因在26种组织中均有表达,仅在胰腺中没有表达。     

家禽淋巴组织的形态和机能

I、家禽的淋巴系统及淋巴组织的特性家禽和哺乳类一样存在胸腺和脾脏,除此以外,鸟类在泄殖腔的背侧还有鸟类特有的法氏囊。没有扁桃体,但能够看到附属于肠管的淋巴装置,特别是鸡在盲肠颈部有大的淋巴组织的集簇叫作盲肠扁桃体。鸭子不形成大的淋巴集簇,在盲肠颈部和体部有散在     

视黄酸诱导基因-Ⅰ在家禽天然免疫应答中作用的研究进展

家禽的天然免疫应答在抵抗病毒感染的过程中起着关键性作用,视黄酸诱导基因-Ⅰ(retinoic acid inducible gene-Ⅰ,RIG-Ⅰ)作为细胞质内一类识别病毒双链RNA的模式识别受体,与天然免疫应答密切相关。它可通过RNA配体结合病原相关分子模式监测细胞质中的病毒RNA,此过程激活了RIG-Ⅰ及下游线粒体抗病毒信号蛋白(MAVS),最终导致干扰素调节因子(IRF3/7)和核因子κB(NF-κB)活化,诱导产生Ⅰ型干扰素等免疫细胞因子,进而使细胞做出相应的抗病毒天然免疫反应。但由于鸡体内缺乏RIG-Ⅰ基因,目前大多将鸭源或鹅源RIG-Ⅰ基因转染鸡成纤维母细胞(DF-1)研究RIG-Ⅰ基因在鸡感染禽类病毒时是否具有免疫功能。文章介绍了RIG-Ⅰ在家禽体内的表达及其介导的抗病毒天然免疫信号通路,并简述了RIG-Ⅰ在家禽体内抗病毒作用的研究概况,为抑制家禽病毒的感染和免疫系统研究,以及研制新型抗病毒疫苗或免疫佐剂等提供参考。     

miRNA-200a通过靶向ZEB1参与调节鸡胸肌细胞增殖分化

ZEB1在细胞增殖分化中发挥关键作用,然而关于ZEB1在鸡胸肌细胞增殖分化过程中的功能及其与miRNA互作的研究极少。为探索miRNA如何通过靶向ZEB1参与调节鸡胸肌细胞增殖分化,实验检测了ZEB1在55周龄和20周龄鸡胸肌组织中的表达,使用Target Scan及miRDB在线软件预测鸡ZEB1基因的靶向miRNA,构建ZEB1野生型、突变型双荧光报告载体,并在DF1细胞中验证了ZEB1的靶向miRNA,双荧光素酶报告实验结果说明miR-200a通过特异性结合ZEB1 3'非编码区种子序列直接靶向并抑制ZEB1基因的表达。结果表明:由于miR-200a在55周龄鸡胸肌表达下调,对ZEB1的抑制作用减弱,导致ZEB1在55周龄固始鸡胸肌组织表达较20周龄显著升高(P0.01)。本研究首次在鸡上证明miR-200a是ZEB1的靶向miRNA,且miR-200a可能通过靶向ZEB1参与调节鸡胸肌细胞的增殖分化,为深入理解miRNAs在家禽及其他鸟类中的分子调节机制提供了基础与依据。     

Leptin的生物学功能及其对脂肪沉积的调控作用

Leptin（瘦素）是肥胖基因ob基因的表达产物,由脂肪细胞分泌,与下丘脑Leptin受体结合,可抑制食欲中枢,减少进食量,并通过兴奋交感神经系统,促进脂肪分解,增加产热,从而发挥降低体重,提高瘦肉率的功能。对Leptin的生物学功能及其对脂肪沉积的调控作用进行综述,以期为营养上调控畜禽肉品质,以及生产优质畜禽产品提供理论依据和科研基础。     

鸡脾脏组织抑制消减cDNA文库构建及其差异表达基因的分析

为分离与鸡抗病性密切相关的差异表达基因,并进行功能分析,利用抑制性消减杂交技术,以大骨鸡和海兰褐商品代蛋鸡20周龄时的脾脏组织为试验材料构建消减cDNA文库。文库的插入片段集中在600 bp左右,挑取760个克隆进行PCR筛选获得663个阳性克隆,经过点杂交筛选后选择了531个阳性克隆,从中随机挑取100个阳性克隆进行测序。经过同源性比对归并后得到37个差异表达基因或ESTs序列,其中,32个是已知基因,包括一般抗病性或免疫性能、特异抗病相关基因、细胞信号分子、膜蛋白质、转录因子等差异表达基因;5个为功能尚未确定的基因。并对4个可能影响鸡抗病性能的差异表达基因进行了RT-PCR半定量检测鉴定。该试验结果为进一步研究这些差异表达基因在抗病过程中的重要功能及其调控作用机理奠定了基础。     

禽类“Leptin”及其对尿囊膜血管生成的影响

哺乳动物leptin的基因序列已被确认并成功克隆.尽管禽类“leptin cDNA”序列还未得到一致承认,但鸡leptin受体基因确实存在并已成功克隆,从另一方面证明了在禽类体内确实存在着与哺乳动物leptin结构和功能相似的分子.本文综述了禽类“leptin”发现及存在的争议,leptin受体结构以及哺乳动物leptin对禽类尿囊膜血管生成的影响.     

动物肥胖度的高效调节蛋白Leptin

Leptin是动物肥胖基因的表达产物，有人称之为肥胖蛋白，具有明显降低机体肥胖程度的功能，因此也有人称之为瘦蛋白。最早发现这种新蛋白的是美国洛克菲勒大学的Zhang，YR等人（1994）发现小白鼠的能量平衡受到某种物质的调控，该物质主要是由肥胖基因编码的。他们克隆了几种类型的小白鼠肥胖基因并进行测序，发现mRNA由4．5kb组成，其中一段编码167个氨基酸的序列相对保守。进而他们又从小白鼠白脂肪组织eDNA文库中克隆出了肥胖基因eDNA，测序发现5’端由97个碱基组成，随后是编码167个氨基酸的保守序列，3’端则由3700多个碱基组成的非翻译序列。这段保守序列编码产物就是高效调控能量平衡的物质，命名为Leptin。最近猪、鸡的Leptin基因也得到了克隆，并获得了表达产物。