复方黄连解毒散对雏孔雀鸡白痢病的体外抑菌和预防试验

为了探讨复方黄连解毒散对患鸡白痢孔雀的防治效果,试验采用纸片扩散法分别测定高(3 g/m L)、中(2 g/m L)、低(1 g/m L)剂量复方黄连解毒散对孔雀鸡白痢病沙门氏菌的最小抑菌浓度,从而选出对沙门氏菌抑菌效果最佳的浓度。在开食7日龄的雏孔雀饲料中添加高、中剂量的复方黄连解毒散,与空白对照组进行对比,每隔7 d对比2组雏孔雀的身高、体长及体重等生长状况。结果表明:不同浓度的复方黄连解毒散对雏孔雀鸡白痢病沙门氏菌抑制效果不同,高、中浓度对沙门菌有抑制作用,低浓度对其无明显抑制作用,其中高浓度组对孔雀鸡白痢病沙门氏菌抑制效果最明显;预防试验中,B组(中剂量组)雏孔雀在7~49日龄的身高、体长、体重均高于A组(高剂量组)和C组(对照组)。说明复方黄连解毒散对抑制孔雀鸡白痢沙门氏菌有效,可提高雏孔雀的生长性能并减少或避免抗生素的使用,从而降低药物残留。     

白头翁汤对沙门氏菌感染鸡的药效学试验

研究了白头翁汤的体外抑菌效果及对人工感染鸡白痢沙门氏菌雏鸡的治疗效果。结果表明:0.5 mL/只白头翁汤组防治病雏鸡的治愈率为80%,同感染对照组相比,死亡率降低了55%(P<0.01);给药组患病鸡的肝脏、心脏、脾脏等器官的病变程度显著降低(P<0.05)。白头翁汤对鸡白痢沙门氏菌的最小抑菌浓度为4.5 g/L。     

辣蓼散不同极性段提取物体外抑菌效果研究

试验研究辣蓼散不同极性段提取物对兽医临床常见致病菌的体外抑菌效果。采用水和乙醇等不同极性溶剂对辣蓼散进行提取,用纸片法测定6种提取物对绿脓杆菌、鸡白痢沙门氏菌、鸡大肠杆菌等5种病原菌的体外抑菌效果,并用试管二倍稀释法测定各提取物的最小抑菌浓度(MIC)。结果表明:辣蓼散不同极性段提取物对5种病原菌有不同的抑制作用;辣蓼散水煎醇提物的抑菌效果最为明显,对鸡白痢沙门氏菌、鸡大肠杆菌以及金黄色葡萄球菌均有较好的抑菌效果,MIC均为15.62 g/L,对白色念珠菌与绿脓杆菌的MIC均为31.25 g/L。研究结果为辣蓼散在畜牧业中的应用提供参考。     

毛白杨雄花序水提取液对畜禽微生物的体外抑制试验

为了筛选出具有无毒、抗菌效果好的中兽药,试验通过微量抑菌法观察毛白杨雄花序水煎液对鸡大肠杆菌O78、鸡白痢沙门氏菌C79-1和兔大肠杆菌O123的体外抑制情况。结果表明:毛白杨雄花序水煎液对鸡大肠杆菌O78、鸡白痢沙门氏菌C79-1和兔大肠杆菌O123的最低抑菌浓度(MIC)分别为0.125 0 g/mL、0.062 5 g/mL和0.062 5 g/mL。说明毛白杨雄花序水煎液对鸡大肠杆菌O78、鸡白痢沙门氏菌C79-1和兔大肠杆菌O123均具有体外抑制作用,可应用于临床治疗畜禽大肠杆菌病。     

中草药对山羊病原菌体外抑菌作用试验

为了探讨中草药对山羊病原菌的抑菌作用,试验采用试管倍比稀释法,以蒲公英、白花败酱草、马齿苋3种中草药水提物对山羊大肠杆菌、沙门杆菌、葡萄球菌3种致病菌进行体外抑菌试验。结果表明:白花败酱草、马齿苋、蒲公英对山羊大肠杆菌的最小抑菌浓度分别是62.5,125,250 mg/mL;对沙门杆菌的最小抑菌浓度分别是125,250,250 mg/mL;对葡萄球菌的最小抑菌浓度分别是62.5,250,125 mg/mL。白花败酱草对山羊大肠杆菌、葡萄球菌、沙门杆菌抑菌效果较好;马齿苋对山羊大肠杆菌抑菌效果较好;蒲公英对山羊葡萄球菌抑菌效果较好;马齿苋、蒲公英对山羊沙门菌次之。说明这3种中草药对山羊3种病原菌均有不同程度的抑制作用。     

艾叶挥发油体外抗菌试验

本试验采用超声波萃取方式提取河南蕲艾艾叶挥发油。用麦康凯琼脂培养基、HE琼脂培养基及营养琼脂培养基对大肠杆菌、鸡白痢沙门氏菌进行复苏培养,并将复苏后的菌种接种营养肉汤于37℃振荡培养箱中进行4 h增菌培养。吸取菌液2 mL到营养琼脂平板,菌液平板中贴3张彼此有一定间距的滤纸纸片(Φ:5 mm),每种菌做6个梯度(5.00、2.50、1.25、0.60、0.30、0.15μL/L),每个梯度做3个重复,并做相应对照(氟苯尼考、庆大霉素、空白)。每张纸片中央用微量移液器加上等量艾叶提取物,置37℃恒温培养箱中培养,测定大肠杆菌、鸡白痢沙门氏菌在加入艾叶提取物后的抑菌圈的大小。试验结果表明:提取物浓度越高,抑菌作用越明显。艾叶提取物对大肠杆菌的效果最好,对鸡白痢沙门氏菌相对较差。5.00μL/L组效果最好、2.50μL/L组次之,1.25、0.60μL/L组对大肠杆菌有抑菌作用,但对鸡白痢沙门氏菌无抑菌作用,0.60μL/L以下浓度对大肠杆菌、鸡白痢沙门氏菌均无抑菌作用。     

四种中草药体外抑菌活性及最优组方研究

选取白头翁、马齿苋、大青叶、秦皮4种中草药,分别用水煎煮法和乙醇浸提法提取其有效成分,采用纸片法和微量稀释法测定了各提取物在体外对鸡大肠杆菌和鸡白痢沙门氏菌的抑菌活性和最低抑菌浓度,最后通过正交试验确定了4种提取物体外抑菌的最优组方.结果表明,白头翁、马齿苋、大青叶的水提物对两种试验菌的体外抑菌活性较醇提取强,秦皮的醇提物抑菌活性较水提物强,且差异极显著(P＜0.01).白头翁和大青叶的水提取物对沙门氏菌的最低抑菌浓度最低(0.025 g/mL);秦皮的乙醇提取物对大肠杆菌的最低抑菌浓度最低(0.025 g/mL).抑制大肠杆菌的最优组方为白头翁、马齿苋、大青叶、秦皮的比为4∶1∶2∶2;抑制沙门氏菌的最优组方为2∶2∶1∶4.     

天蚕素类抗菌肽CLP的设计及其活性测定

为设计研发新型天蚕素类抗菌肽(Cecropin-like antibacterial peptide,CLP),本研究参照抗菌肽Cecropin P1的作用机理和氨基酸组成,通过人工方法设计合成CLP,并分别测定其体外和体内抗菌活性。体外抑菌试验结果显示,新型CLP对金黄色葡萄球菌(ATCC29213)、禽多杀性巴氏杆菌(CVCC474)、鸡白痢沙门氏菌(ATCC10398)、鸡致病性大肠杆菌O1均具有良好的抑菌活性,对这4种细菌的最小抑菌浓度(MIC)分别为6.25μg/mL、1.56μg/mL、3.12μg/mL和6.25μg/mL。酸稳定性试验显示,新型CLP在pH值为6~8时活性最高,热稳定性试验显示新型CLP于100℃加热2 h后仍具有抑菌活性。在对鸡白痢沙门氏菌感染雏鸡的体内疗效试验中,新型CLP显示了良好的治疗效果。本研究为临床上设计有效的天蚕素类抗菌肽提供了参考数据。     

发酵马齿苋对雏鸡白痢防治效果观察

为了检测发酵马齿苋对雏鸡白痢的防治效果,设置发酵马齿苋高、中、低剂量组,非发酵马齿苋高、中、低剂量组,氟苯尼考组与阳性、阴性对照组,检测各组人工感染雏鸡的发病数、死亡数和治愈数。发现4g/L发酵马齿苋与氟苯尼考对雏鸡白痢防治效果相当(P>0.05),两者与阳性对照组相比,在预防试验中能显著抑制雏鸡的发病率和死亡率(P<0.05);在治疗试验中能显著提高雏鸡的治愈率(P<0.05),并降低雏鸡的死亡率(P<0.05)。在雏鸡白痢防治上,4g/L发酵马齿苋效果明显,可代替氟苯尼考作为养禽业的新型绿色开口药。     

泰州地区鸡白痢血清学调查及中药体外抑菌效果研究

为了解泰州地区鸡白痢血清流行病学现状及中药防治鸡白痢效果,对当地5个鸡场,每个鸡场随机选取30只鸡,采血进行鸡白痢平板凝集试验,共检出阳性样品26份,鸡白痢平均阳性率为17.3%。统计不同养殖模式鸡场的血清学调查情况,结果发现,（1）家林下散养鸡,鸡白痢阳性率为6.7%。2家平养鸡,鸡白痢阳性率31.7%。（2）家笼养鸡,鸡白痢阳性率为8.3%。对5家鸡场中疑似鸡白痢病死鸡采集病料,进行细菌的分离培养、革兰氏染色与镜检、生化鉴定,血清学鉴定,共分离鉴定鸡白痢沙门氏菌5株。选用6种中药对分离的鸡白痢沙门氏菌进行体外抑菌试验,结果发现：鸡白痢沙门氏菌对黄芩、连翘、黄连3种药物高度敏感,抑菌圈直径分别为20.24mm,19.33mm,18.15mm。对夏枯草中度敏感,抑菌圈直径为13.73mm。对金银花、马齿苋不敏感,抑菌圈直径分别为8.20mm、6.55mm。     

中药“地榆散”防治鸡白痢病的研究与应用

经筛选的"地榆、泽泻、黄芩、石榴皮、陈皮"等中药,对鸡白痢沙门氏菌进行体外抑菌试验,单味中药对鸡白痢沙门氏菌的抑菌圈直径均在10mm以上,"地榆散"制剂对鸡白痢沙门氏菌的抑菌圈达12.8mm,高于单味中药抑菌圈。说明由"地榆、泽泻、黄芩、石榴皮、陈皮"等中药按照中兽医学理论设计组成的"地榆散"制剂,对鸡白痢沙门氏菌有明显的抑制作用。治疗试验证明,将"地榆散"制剂,以高、中、低三个剂量对鸡白痢沙门氏菌人工感染鸡的治疗试验表明:中剂量10g/kg添加量,连用5d,间隔10d,再以5g/kg量拌入饲料控制3d疗效最佳,经20d的试验期,治愈率为90%,比药物对照组治愈率高出12%,经P<0.05。对鸡白痢阳性商品产蛋鸡,经60d的试验期,可使鸡白痢的阳性率由100%降低到14%,下降了86%,对照组阳性率仍高达93.3%,仅下降6.7%,治疗组产蛋率提高12%,不治疗组产蛋率下降45%,P<0.01。说明中药"地榆散"不仅对鸡白痢病有明显治疗效果,也对鸡白痢沙门氏菌病有可靠的抗菌效果,且对鸡体无毒副作用。     

5种中草药不同提取方法对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌作用

为了探讨白花蛇舌草、叶下珠、土牛膝、飞机草和马樱丹不同提取方法的提取物对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌作用,试验采用煎煮法和乙酸乙酯浸泡法对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌进行了抑菌试验。结果表明:5种中药制剂对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有抑菌作用,当白花蛇舌草、叶下珠、土牛膝、飞机草和马樱丹的水提液浓度分别为0.25 g/m L、0.75 g/m L、0.50 g/m L、0.50 g/m L和1.00 g/m L时对大肠杆菌的抑菌效果最明显,而水提液浓度分别为0.75 g/m L、0.75 g/m L、0.75 g/m L、1.00 g/m L和1.00 g/m L时对金黄色葡萄球菌的抑菌效果最明显;当白花蛇舌草、叶下珠、土牛膝、飞机草和马樱丹的酯提液浓度分别为0.75 g/m L、0.50 g/m L、0.50 g/m L、0.50 g/m L和1.00 g/m L时对大肠杆菌的抑菌效果最明显,而酯提液浓度分别为0.50 g/m L、0.75 g/m L、0.50 g/m L、0.75g/m L和1.00 g/m L时对金黄色葡萄球菌的抑菌效果最明显。说明5种中草药中均含有抗菌物质,有很好的开发、利用前景。     

艾叶水提液对3种细菌的体外抑菌试验

为了观察艾叶水提液对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和乙型伤寒沙门氏菌的体外抑菌效果,试验采用二分法和牛津杯法分别测定艾叶水提液的最小抑菌浓度(MIC)和抑菌效果。结果表明:艾叶提取液浓度为2,1,0.5和0.25 g∕m L时,金黄色葡萄球菌与大肠杆菌和乙型伤寒沙门氏菌的抑菌效果差异显著(P0.05);在浓度为2,1 g∕m L时,提取液对金黄色葡萄球菌表现为高敏,对大肠杆菌和乙型伤寒沙门氏菌均表现为中敏;3种细菌的MIC均为0.125 g∕m L。说明艾叶水提液对3种菌均有抑制和杀灭作用,对金黄色葡萄球菌的抑菌效果略优于大肠杆菌和乙型伤寒沙门氏菌。     

复方板黄口服液对畜禽常见病原菌的体外抑菌作用研究

为了研究板黄口服液对畜禽常见病原菌的体外抑菌作用,研究通过体外试验观察药物对禽巴氏杆菌、鸡葡萄球菌、鸡白痢沙门杆菌、肺炎克雷伯菌、牛巴氏杆菌、牛大肠杆菌的抑菌效果。结果表明:板黄口服液对鸡葡萄球菌的最小抑菌浓度(MIC)为125 mg/m L,对牛巴氏杆菌、禽巴氏杆菌、鸡白痢沙门杆菌、肺炎克雷伯菌、牛大肠杆菌的MIC均为250 mg/m L。说明板黄口服液对禽巴氏杆菌、鸡葡萄球菌、鸡白痢沙门杆菌、肺炎克雷伯菌、牛巴氏杆菌、牛大肠杆菌有很好的抑制作用。     

15种中药对猪大肠杆菌的体外抑菌试验

为了探讨黄连等15种中草药对猪大肠杆菌的体外抑菌作用,试验采用琼脂扩散法和微量二倍稀释法应用15种中草药水提取物对猪大肠杆菌进行体外抑菌试验,测定抑菌圈直径和最小抑菌浓度(MIC)。结果表明:黄连、大黄均对大肠杆菌O101呈高度敏感,抑菌圈直径分别为20.8,20.3 mm,其MIC值为7.813 mg/m L,抑菌效果最好;黄芩、黄柏、金银花呈中度敏感,其MIC值为31.25 mg/m L;而苦参、马齿苋、败酱草等不敏感,其MIC值为500 mg/m L,抑菌效果差。     

葎草等4种中草药对猪大肠杆菌的体外抗菌研究

为了充分利用现有中草药资源,避免畜产品中化学抗生素的药物残留,试验选取葎草等4种中草药,利用水煎法和75%乙醇超声波辅助浸提法制备中草药的水煎提取液和75%乙醇提取液,并用提取液对猪源大肠杆菌进行体外抗菌试验。结果表明:4种中草药的75%乙醇提取液的抑菌效果和抗菌活性均比水煎提取液好,马齿苋、蒲公英及紫花地丁75%乙醇提取液的最小抑菌浓度(MIC)为62.5~125 mg/m L,最小杀菌浓度(MBC)为125~500 mg/m L。说明这4种中草药可用于防治猪大肠杆菌病。     

鸡白痢沙门氏菌与其它致病性沙门氏菌的血清型特异性PCR鉴别检测方法的建立

为建立鸡白痢沙门氏菌与其他常见致病性沙门氏菌的血清型特异性快速PCR检测方法,本研究通过对Gen Bank中鸡白痢沙门氏菌、鸡伤寒沙门氏菌和肠炎沙门氏菌全基因组进行生物信息学分析,确定SEEP17495基因为鸡白痢沙门氏菌的检测靶基因,设计特异性引物,建立了一种能够直接从粪便样品中检测鸡白痢沙门氏菌的PCR检测方法。结果显示:该方法对于两株鸡白痢沙门氏菌均可以特异性地扩增出356 bp的目的片段,但对于7株常见非沙门氏菌致病菌和29株其他常见致病性沙门氏菌血清型的扩增结果均为阴性。该方法无论检测鸡白痢沙门氏菌纯培养菌,还是检测模拟鸡粪样品中的鸡白痢沙门氏菌,检测的灵敏度均为103cfu/m L。本研究建立的PCR检测方法具有良好的特异性和灵敏性,并且能够快速检测出粪便样品中的鸡白痢沙门氏菌,为鸡白痢沙门氏菌的检测提供了一种快速、有效的方法。     

我国部分地区鸡、猪源沙门氏菌血清型与耐药性比较

本研究将2012—2017年分离自山东等6省份的194株鸡源和89株猪源沙门氏菌进行了血清型鉴定和9大类13种药物的药敏试验。血清型鉴定结果显示:鸡源沙门氏菌血清型以肠炎(59.69%)、婴儿(13.61%)和鸡白痢(8.90%)为主,猪源沙门氏菌血清型以鼠伤寒(58.43%)、肠炎(12.36%)、印第安纳(11.24%)和德尔卑(7.87%)为主,两者优势血清型差异极显著(P0.01)。最小抑菌浓度(MIC)分布结果显示:沙门氏菌对氨苄西林、头孢噻呋、庆大霉素、大观霉素、四环素、多西环素、氟苯尼考、磺胺甲基异噁唑、复方新诺明、恩诺沙星和氧氟沙星耐药的问题较为突出,对黏菌素E的耐药率相对较低;猪源菌株比鸡源菌株耐药严重,对11种药物的耐药率均高于鸡源菌株。2种来源的分离菌株对阿莫西林/克拉维酸钾、头孢噻呋、庆大霉素、大观霉素、四环素、多西环素、氟苯尼考、恩诺沙星、氧氟沙星的耐药率差异均极显著(P0.01),对黏菌素E的耐药率差异显著(P0.05);猪源分离菌株的耐药问题较欧盟国家突出,与鸡源菌株5耐以上的菌株比例差异极显著(P0.01)。肠炎和鼠伤寒沙门氏菌对阿莫西林/克拉维酸、庆大霉素、大观霉素、四环素、氟苯尼考、磺胺异噁唑和黏菌素E的耐药率差异极显著(P0.01),对氨苄西林耐药率差异显著(P0.05)。不同年份间沙门氏菌分离株对氨苄西林、阿莫西林/克拉维酸、头孢噻呋、庆大霉素、大观霉素、四环素、氟苯尼考、复方新诺明、恩诺沙星和黏菌素E的耐药率差异极显著(P0.01),对多西环素和氧氟沙星耐药率差异显著(P0.05)。结果表明:肠炎、鼠伤寒分别是我国部分地区鸡、猪源沙门氏菌的优势血清型;沙门氏菌耐药性与动物来源、血清型和分离年份相关,且鸡、猪源沙门氏菌耐药情况比欧盟国家严重。     

单味中草药提取物对猪源沙门氏菌的抑菌效果

本试验旨在探讨黄连、苦参、黄柏、黄芪、甘草五种中草药对猪源沙门氏菌的抑菌效果。试验制备黄连、苦参、黄柏、黄芪、甘草五种中草药提取物后,采用牛津杯法测定五种中草药提取物对猪霍乱沙门氏菌的抑菌作用,并采用梯度稀释法测定其最小抑菌浓度(Minimum Inhibitory Concentration,MIC),观察其对沙门氏菌的体外抑制作用。结果表明,空白对照组无抑菌圈,阳性对照组抑菌圈直径为(20.13±1.47)mm;与对照组相比,苦参、黄芪组抑菌作用差异显著(P>0.05),敏感程度均为高敏;黄连、黄柏、甘草组的差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01),敏感程度为高敏或中低敏;黄连、苦参、黄柏、黄芪、甘草五种中草药的MIC浓度分别为20g/L、10g/L、80g/L、20g/L、160g/L。试验显示,黄连、苦参、黄柏、黄芪、甘草五种中草药均可一定程度地抑制猪源沙门氏菌,苦参抑制作用最强,与抗生素效果一致,其次分别为黄芪、黄连、黄柏、甘草。     

蛋氨酸羟基类似物的抑菌和酸化剂效果研究

采用单因子试验设计,研究了蛋氨酸羟基类似物(HMB,Rhodimet AT88)对有害微生物的抑菌和杀菌效果,以及对仔猪生产性能的影响。选用120头28日龄断奶的DLY仔猪,随机分为6个处理:HMB1.14、2.28、3.42 g/kg3个组,基础日粮组,DL-蛋氨酸1.0 g/kg组以及复合酸化剂3.0 g/kg组。结果表明:①HMB对大肠杆菌O8、O157、O149、鸡白痢沙门氏菌、坏死性肠炎梭菌的最低抑菌浓度为1000￣1400mg/kg,最低杀菌浓度为1200￣1400mg/kg;②HMB降低饲料系酸力,极显著降低仔猪腹泻率(P<0.01);③试验1￣6周,HMB1.14 g/kg和2.28 g/kg组显著提高仔猪生产性能(P<0.05);HMB2.28g/kg组效果优于复合酸化剂3.0g/kg组,显著高于DL-蛋氨酸1.0g/kg组(P<0.05)。HMB在断奶仔猪饲料中具有蛋氨酸和酸化剂双重效应。