老龄哈多利系博美犬睾丸组织结构分析

为比较哈多利系博美犬老龄与青年阶段睾丸的组织结构差异及相关蛋白分布特征,探索博美犬不同年龄阶段睾丸组织结构变化及其对生殖功能的影响,本试验应用特殊染色、免疫组织化学法结合免疫荧光观察比较青年与老龄博美犬睾丸组织化学特点,并用IPP图像分析软件进行定量分析。结果显示,与青年博美犬相比,老龄博美犬生精上皮层数与厚度降低,Leydig细胞数及Sertoli细胞数显著增加(P0.05),生精小管基底膜及血管管壁层胶原纤维与网状纤维含量明显增加。免疫组织化学结果显示,老龄博美犬睾丸细胞外基质(exreacellular matrix,ECM)相关蛋白Ⅳ型胶原(collage,ColⅣ)、硫酸乙酰肝素蛋白多糖(heparan sulfate proteoglycan,HSPG)含量极显著低于青年博美犬(P0.01),层黏连蛋白(laminin,LN)含量显著低于青年博美犬(P0.05)。免疫荧光结果显示,ColⅣ、HSPG和LN主要在Leydig细胞及Sertoli细胞强表达。因此,老龄博美犬胶原纤维与网状纤维含量增加,Leydig细胞数及Sertoli细胞数增多可能与其生精功能的维持相关,其生精功能的下降与ColⅣ和HSPG的变化密切相关。     

老龄哈多利系博美犬睾丸组织结构分析

为比较哈多利系博美犬老龄与青年阶段睾丸的组织结构差异及相关蛋白分布特征，探索博美犬不同年龄阶段睾丸组织结构变化及其对生殖功能的影响，本试验应用特殊染色、免疫组织化学法结合免疫荧光观察比较青年与老龄博美犬睾丸组织化学特点，并用IPP图像分析软件进行定量分析。结果显示，与青年博美犬相比，老龄博美犬生精上皮层数与厚度降低，Leydig细胞数及Sertoli细胞数显著增加（P<0.05），生精小管基底膜及血管管壁层胶原纤维与网状纤维含量明显增加。免疫组织化学结果显示，老龄博美犬睾丸细胞外基质（exreacellular matrix，ECM）相关蛋白Ⅳ型胶原（collage，Col Ⅳ）、硫酸乙酰肝素蛋白多糖（heparan sulfate proteoglycan，HSPG）含量极显著低于青年博美犬（P<0.01），层黏连蛋白（laminin，LN）含量显著低于青年博美犬（P<0.05）。免疫荧光结果显示，Col Ⅳ、HSPG和LN主要在Leydig细胞及Sertoli细胞强表达。因此，老龄博美犬胶原纤维与网状纤维含量增加，Leydig细胞数及Sertoli细胞数增多可能与其生精功能的维持相关，其生精功能的下降与Col Ⅳ和HSPG的变化密切相关。     

老龄牦牛睾丸组织结构研究

探讨高原老龄牦牛睾丸组织结构特点与其生殖机能的关系。采集9~13岁健康老龄牦牛睾丸组织,应用组织化学染色和透射电镜技术,观察其细胞化学特点及结构特征。结果显示,老龄牦牛睾丸体积及重量左侧略大于右侧,光镜下睾丸被膜、间质组织胶原纤维及网状纤维丰富,小叶不明显,Leydig细胞散在于结缔组织之间,生精小管不同程度退化,生精上皮层数为2~5层,细胞间隙变大,部分脱落,Sertoli细胞低矮,细胞质较少。电镜观察Sertoli细胞核外形不规则,内质网呈疏松的泡状,次级溶酶体增加,体积增大。相邻Sertoli细胞间没有观察到并行的内质网层和细丝束这一血-睾屏障所特有外质特化区形态结构,部分生精小管固有膜胶原纤维增生,上皮皱缩;Leydig细胞内脂滴异常丰富,毛细血管内皮细胞间存在紧密连接。间质组织偶有肥大细胞,间质血管及生精小管固有膜中PAS及AB-PAS阳性反应明显。老龄牦牛Sertoli细胞细胞器结构异常,血-睾屏障中Sertoli细胞间的连接处缺陷,且Sertoli细胞与基膜连接的改变可能影响了Sertoli细胞和生精细胞之间的相互作用,进而抑制了生精细胞的功能。     

犬隐睾及睾丸肿瘤中PGP9.5和NPY的分布比较

试验旨在分析肽能神经递质蛋白基因产物9.5（protein gene product 9.5,PGP9.5）和神经肽Y（neuropeptide Y,NPY）在犬隐睾及睾丸肿瘤中的分布和表达,并与同年龄正常睾丸组织进行比较,为认识犬睾丸肿瘤恶变临床诊断提供参考。应用HE染色、Masson三色染色、Gomori银浸染、甲苯胺蓝染色观察各组织中网状纤维、胶原纤维及肥大细胞等组织特征,采用免疫组织化学SP法及免疫荧光法结合IPP统计分析PGP9.5和NPY在组织中的表达及定位。结果显示,正常犬睾丸生精上皮由4~7层生精细胞及Sertoli细胞构成,间质组织胶原纤维和网状纤维分布稀疏。隐睾生精小管基底膜胶原纤维厚度增加,Sertoli细胞核浓缩位于生精小管基底,间质网状纤维增多。睾丸肿瘤组织结构不清晰,胶原纤维和网状纤维无规则分布,肥大细胞较正常组及隐睾组显著增多。免疫荧光定位表明,PGP9.5在正常睾丸Leydig细胞中呈中等阳性表达,生精细胞中无明显表达;隐睾Leydig细胞及生精细胞中呈强阳性表达;睾丸肿瘤中偶有表达。NPY在正常睾丸Leydig细胞中偶见阳性表达,生精细胞中无表达;隐睾Leydig细胞及生精上皮中无表达,间质小血管管壁呈高密度强阳性表达;睾丸肿瘤组织中无明显表达。免疫组化统计表明,睾丸肿瘤组织中PGP9.5和NPY较正常组极显著降低（P<0.01）,隐睾组PGP9.5和NPY表达显著或极显著增加（P<0.05;P<0.01）。因此,犬隐睾时PGP9.5及NPY的表达增高,提示犬隐睾时已有发展为肿瘤的趋势,且与肿瘤恶变程度相关。     

高原牦牛隐睾组织结构特征

观察成年牦牛隐睾的组织结构特点,分析高原环境对其生殖微环境的影响。应用HE、Masson’s、Gomori’s特殊染色以及免疫组织化学方法和透射电镜观察比较成年牦牛隐睾与单侧正常睾丸、正常睾丸组织结构特点,进而用IPP图像分析软件进行定量统计。与正常组睾丸相比,隐睾生精小管管径极显著减小(P0.01),基膜增厚,腔内生殖细胞丢失,散在少数幼稚型Sertoli细胞,胞内线粒体变性且含有大小不等的脂褐素颗粒;间质内胶原纤维增生,间质/管腔面积比极显著增大(P0.01),Leydig细胞数量减少,胞内线粒体肿胀,间质血管数量减少,管壁增厚皱缩,血管内皮细胞内含大量脂褐素颗粒;睾丸实质部分钙化。单侧正常组睾丸生精上皮细胞为3~4层,Sertoli细胞发育成熟,少见初级精母细胞及精子;间质/管腔面积比与正常睾丸无明显差异(P0.05),Leydig细胞数量较多,内质网丰富呈一定扩张状态,线粒体减少。免疫组织化学显示,VEGF及VEGFR2在隐睾组与单侧正常组、正常组睾丸均表达于Sertoli细胞、Leydig细胞及各级生精细胞,血管内皮细胞偶见表达;隐睾组VEGF表达量较正常组、单侧正常组睾丸明显下降(P0.05),VEGFR2表达量明显高于正常组与单侧正常组(P0.05);单侧正常组VEGF及VEGFR2表达量较正常组均无明显差异(P0.05)。高原低氧环境,牦牛隐睾血管发育受阻,组织出现不同程度的纤维化和局部钙化,Sertoli细胞发育异常严重影响生精功能;单侧正常睾丸Leydig细胞数量增加,而其中线粒体数量减少,发育程度较正常组织有所降低,隐睾组织中VEGF与VEGFR2可能参与调节双侧睾丸生精抑制作用。     

双峰驼隐睾组织结构分析

比较观察同年龄(2岁)双峰驼(Camelus bactrianous)正常睾丸与隐睾的显微及超微结构特点。采用光镜和电镜制片及组织化学染色技术,比较双峰驼隐睾与正常睾丸的组织结构特点,进而用IPP图像分析软件进行定量分析。结果:光镜下双峰驼隐睾生精上皮由1~3层细胞组成,生精小管平均直径显著减小(P0.05),间质组织面积极显著增加(P0.01),间质/管腔面积比较正常组极显著增大(P0.01)。电镜观察,双峰驼正常睾丸生精小管固有膜层发育良好,相邻Sertoli细胞之间形成典型连接复合体;生精细胞之间多处形成细胞间小管和桥粒结构。隐睾生精上皮基膜增生明显,其上半桥粒结构不清晰,发育不成熟的Sertoli细胞相邻细胞膜间存在不完全的桥粒结构,可见相邻精母细胞间的胞质桥及Sertoli细胞与初级精母细胞之间桥粒连接;双峰驼正常睾丸Leydig细胞内滑面型内质网和粗面型内质网相延续;隐睾Leydig细胞形态不规则,胞内肿胀线粒体数量较多,内质网不发达;隐睾间质毛细血管基膜不清晰;血管内皮细胞之间可见缝隙连接。双峰驼隐睾生精小管组织结构主要变化为Sertoli细胞异常分化及精子发育阻滞;隐睾Sertoli细胞多为幼稚型,其与基膜连接的改变以及Sertoli细胞外质特化区形态结构及桥粒结构不完整影响了血-睾屏障构成;Leydig细胞内质网发育不均衡为其分泌功能与机体发育阶段关系研究提供思路。     

高原地区小尾寒羊附睾细胞外基质相关蛋白分布特征研究

旨在研究高原地区小尾寒羊附睾细胞外基质相关蛋白的分布特征。应用Masson’s、Gomori’s、PAS和AB-PAS(pH=2.5)组织化学染色方法观察5只健康成年高原地区小尾寒羊附睾的组织结构特点,进而用免疫组织化学SP法观察层粘连蛋白(LN)、Ⅳ型胶原蛋白(ColⅣ)和硫酸乙酰肝素蛋白多糖(HSPG)的分布特征。高原地区小尾寒羊附睾各部分管腔为柱状纤毛上皮,附睾尾间质胶原纤维和网状纤维较附睾头及附睾体明显增多。PAS反应显示附睾头和附睾尾阳性强于附睾体,AB-PAS反应显示附睾头、体、尾阳性差异较小。免疫组织化学显示,ColⅣ在附睾头和附睾体组织中表达最强,HSPG次之,LN表达较弱,HSPG和LN的阳性表达差异不显著(P0.05);而HSPG在附睾尾组织中表达最强,LN次之,ColⅣ表达较弱,HSPG和LN的阳性表达差异不显著(P0.05)。高原地区小尾寒羊附睾尾间质胶原纤维和网状纤维的分布较附睾头和附睾体多,附睾各部分中PAS的反应强弱与附睾上皮分泌功能的变化密切相关,附睾头和附睾尾输精管的分泌功能增强。附睾头上皮基细胞ColⅣ、HSPG和LN分泌增加,且ColⅣ、HSPG和LN与血管的调节作用密切相关。     

FGF22及其受体在庆阳黑山羊正常睾丸与隐睾中的表达比较

试验旨在研究成纤维生长因子22（fibroblast growth factor 22,FGF22）及其受体2（fibroblast growth factor receptor 2,FGFR2）、硫酸乙酰肝素糖蛋白（heparan sulfate proteoglycans,HSPG）在庆阳黑山羊正常睾丸与隐睾中的分布与表达,探究其在山羊睾丸发育和隐睾形成中的作用。采用HE和特殊染色观察其组织学结构特征,进而以免疫组织化学及免疫荧光法结合形态计量学统计研究FGF22、FGFR2和HSPG在山羊正常睾丸及隐睾中的定位。结果表明,山羊隐睾较正常睾丸生精小管缩窄,腔内各级生精细胞排列紊乱,间质的胶原纤维和网状纤维增多,糖原类物质阳性反应较弱,FGF22在隐睾组织的Leydig、Sertoli细胞、管周肌样细胞及血管内皮细胞整体表达密度相较于正常睾丸显著减弱（P<0.05）。HSPG在正常睾丸表达显著强于隐睾（P<0.05）,间质组织变化尤其明显。FGFR2在隐睾组表达显著增高（P<0.05）,且以Sertoli细胞强阳性表达为主。庆阳黑山羊隐睾较正常睾丸发育异常,间质组织有纤维化趋势,糖原类物质含量减少;FGF22及HSPG表达降低应与隐睾局部环境温度变化密切相关;FGFR2在隐睾组表达增高提示其在发生隐睾时可能通过Sertoli细胞进行适应性调节。     

高原牦牛睾丸组织VEGF及其受体的增龄性分布特点

探索VEGF及其受体(VEGFR2)在不同年龄牦牛睾丸的分布特点。应用免疫组织化学SP法检测VEGF及其受体(VEGFR2)分布特征并通过IPP图像分析软件进行定量统计。免疫组织化学显示,不同年龄段牦牛睾丸中,VEGF表达于各级生精细胞以及Sertoli细胞和Leydig细胞,强表达于长形精子,小血管内皮细胞见强阳性表达,肌样细胞未见表达;其受体VEGFR2表达于各级生精细胞及Sertoli细胞,且Leydig细胞内强表达,小血管弱表达;牦牛幼龄期至性成熟期,睾丸中VEGF表达量呈明显上升趋势(P0.05),性成熟期达到最高水平,进入老龄期后表达量明显下降(P0.05);其受体VEGFR2表达量性成熟前期最高,进入老龄期下降不明显。因此,牦牛睾丸中VEGF及其受体随年龄增加存在差异性表达,幼龄期随增加明显,性成熟期趋于稳定,老龄后下降显著,提示其可能参与调节牦牛生后睾丸发育的各个阶段,且与高原牦牛睾丸血管发育,生精及其低氧适应具有一定的关系。     

性激素受体在子午岭黑山羊隐睾及正常睾丸中的分布比较

旨在研究性激素受体[雄激素受体（androgen receptor,AR）、雌激素受体（estrogen receptor,ER）]在子午岭黑山羊正常睾丸与隐睾组织中的分布与隐睾症的关系,应用免疫组织化学及免疫荧光技术方法结合形态计量学统计软件,比较了正常睾丸与隐睾的组织化学特点。特殊染色结果显示：与正常组相比,隐睾组间质组织疏松,管腔面积明显减小,糖原含量明显减少,胶原纤维及网状纤维含量增多。免疫组化及免疫荧光结果显示：1） AR在正常睾丸组Leydig细胞呈高密度强阳性表达,在各级生精细胞呈中等强度阳性表达,隐睾组中Leydig细胞及各级生精细胞表达明显减弱,且在精原细胞偶见表达;2） ER在正常睾丸Leydig细胞呈高密度强阳性表达,管周肌样细胞呈中等强度阳性表达,Sertoli细胞偶见表达,各级生精细胞无表达;3） ER在隐睾Leydig细胞、初级精母细胞、精原细胞和Sertoli细胞中均呈中等强度阳性表达;4）统计结果显示,隐睾组AR的平均光密度较正常组显著降低（P<0.05）,而ER的平均光密度则显著高于正常组（P<0.01）,且隐睾组AR与ER表达量比值基本接近1：1。子午岭黑山羊隐睾组织胶原纤维和网状纤维分布较正常睾丸多,生精小管基膜主要成分以中性糖蛋白为主,酸性糖蛋白含量明显降低影响精子的正常形成;隐睾组织精原细胞及Sertoli细胞ER与AR表达失常尤为明显,可为哺乳动物隐睾的相关研究提供一定参考。     

高原型藏绵羊附睾细胞外基质的组织化学研究

旨在探索高原型藏绵羊附睾细胞外基质相关蛋白的分布特征。应用Masson’s、Gomori’s、PAS和ABPAS(pH 2.5)染色组织化学方法观察7只健康成年高原型藏绵羊附睾的组织结构特点,进而用免疫组织化学SP法观察层粘连蛋白(LN)、IV型胶原蛋白(Col IV)和硫酸乙酰肝素蛋白多糖(HSPG)的分布特征。高原型成年藏绵羊附睾各部分管腔为柱状纤毛上皮,附睾尾间质胶原纤维和网状纤维较附睾头及附睾体明显增多。PAS反应显示附睾尾阳性强于附睾头和附睾体,AB-PAS反应显示附睾头和附睾尾的阳性强于附睾体。免疫组织化学结果显示,LN在组织中表达最强,HSPG次之,Col IV表达较弱,HSPG和LN的阳性表达差异不显著(P0.05)。高原型成年藏绵羊附睾尾间质胶原纤维和网状纤维的分布较附睾头和附睾体多,附睾各部分中PAS的反应强弱与附睾上皮分泌功能的变化密切相关,附睾尾输精管的分泌功能增强;Col IV参与基膜的物质转运;HSPG与血-附睾屏障构成相关;LN与基膜的形成及其附睾中细胞外基质相关蛋白(ECM)的合成和分泌有关。     

不同月龄山羊睾丸生精小管及固有层结构分析

试验旨在探究不同月龄山羊睾丸生精小管、固有层的结构及成分变化，及睾丸中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)蛋白的分布情况。选用1月龄和2月龄(幼龄)、12月龄(成年)山羊睾丸，利用特殊组织染色、免疫荧光、透射电镜并结合形态学计量统计分析，研究性成熟前后山羊睾丸生精小管、固有层细胞的结构成分及变化。结果显示：随着睾丸发育，生精小管管径增大，生精细胞种类、数量增多；支持细胞发育完善，体积增大，但轮廓不明显；睾丸间质细胞逐渐发育成熟，胶原纤维广泛分布于生精小管固有层基膜和睾丸间质中。免疫荧光染色观察可见：在1月龄、2月龄山羊睾丸中，α-SMA在管周肌样细胞、小动脉血管管周平滑肌细胞中表达阳性，在支持细胞、各级生精细胞、睾丸间质细胞中无表达；在12月龄山羊睾丸中，α-SMA在管周肌样细胞、小动脉血管管周平滑肌细胞中表达阳性，在支持细胞、各级生精细胞、睾丸间质细胞中无表达。本试验为深入研究睾丸的生理功能提供了基础形态学依据。     

TGF-β1及其受体在性成熟前后藏绵羊睾丸的表达比较

旨在比较研究转化生长因子-β1 (transforming growth factor-β1, TGF-β1)及其受体在性成熟前后藏绵羊睾丸组织的表达及分布特征,探索其对藏绵羊睾丸发育及生殖机能的调节作用。采用睾丸摘除手术收集1.0、1.5、2.0岁藏绵羊睾丸,应用免疫印迹、免疫组织化学SP法及IPP图像分析研究TGF-β1及其受体(transforming growth factor-βreceptor I, TGF-βR I)的表达及分布特征。结果表明:1)TGF-β1在藏绵羊睾丸组织中弱表达,性成熟前后差异不显著(P>0.05);1.5岁藏绵羊睾丸组织中TGF-βRⅠ表达均显著高于1.0及2.0岁(P<0.05)。2)各年龄组TGF-β1主要表达于睾丸间质细胞(Leydig)及小血管内皮细胞,1.5岁藏绵羊在各级生精细胞及支持细胞(Sertoli)亦有中等阳性表达,其他年龄组在生精上皮弱表达;TGF-βRⅠ在各年龄组生精上皮均有表达,1.0岁时在Leydig细胞无明显表达,1.5岁时强表达于圆形精子、Leydig细胞及淋巴管内皮细胞,2.0岁时在Leydig细胞及毛细淋巴管亦见阳性表达,但明显弱于1.5岁。3)各年龄组TGF-βRⅠ表达明显强于TGF-β1,TGF-β1表达组间差异不显著(P>0.05);TGF-βRⅠ在1.5岁时较1.0及2.0岁表达差异显著(P<0.05)。综上表明,高原地区藏绵羊睾丸组织TGF-β1和TGF-βRⅠ的阳性表达随着性成熟出现先上升后下降的变化趋势,提示性成熟前后TGF-β1及其受体通过调节Sertoli细胞在精子生成过程中发挥作用;各年龄段藏绵羊睾丸组织TGF-βRⅠ及TGF-β1阳性表达以Leydig细胞变化最为明显,为进一步分析TGF-β1/TGF-βRⅠ信号通路随着性成熟发育参与调节Leydig细胞生物合成提供研究基础。     

Oct4在山羊睾丸组织中的表达与定位

探讨不同时期山羊睾丸组织中干细胞的分布和特点,以45 d和75 d山羊胎儿及出生后4月龄山羊睾丸为试验材料,进行了HE染色和Oct4抗体的免疫组化染色。结果显示,在45 d山羊胎儿睾丸组织中睾丸实质细胞聚集呈团状,形成岛屿状组织结构;发育到75 d山羊胎儿睾丸组织中睾丸的间质与实质组织结构差异明显,睾丸生精小管已经形成,生精小管管腔闭锁;出生后4月龄山羊睾丸组织结构明显,生精小管形态特征清晰,但管腔仍处于闭锁状态;Oct4免疫组织化学显示在45 d山羊胎儿睾丸组织中Oct4阳性细胞呈岛屿状分布,多见于生精小管前期的组成细胞;对于75 d山羊胎儿睾丸组织Oct4阳性细胞呈环状分布于生精小管中,睾丸间质组成细胞中则较少;在出生后4月龄山羊睾丸中阳性细胞主要分布于睾丸组织生精小管基底膜,沿基底膜环状分布。试验证实了在早期山羊睾丸组织中Oct4主要表达在生精前体细胞。     

中华鳖睾丸界膜的组织学特性

以中华鳖2个繁殖阶段的睾丸为研究对象,探究睾丸界膜细胞成分的变化,为中华鳖界膜的深入研究提供理论依据。分别在冬眠期(4月)以及繁殖期(9月)摘取健康成熟的野生中华鳖睾丸,使用HE染色、马松染色、甲苯胺蓝染色、免疫组化染色等方法观察不同阶段中华鳖睾丸组织及细胞成分变化情况,使用免疫组化对肌样成纤维细胞进行表达定位,对中华鳖睾丸生精小管及睾丸界膜变化进行统计分析。结果显示:繁殖期中华鳖睾丸生精小管面积显著大于冬眠期(P0.05),生精上皮厚度极显著大于冬眠期(P0.01);冬眠期中华鳖睾丸界膜面积显著大于繁殖期(P0.05),界膜厚度极显著大于繁殖期(P0.01)。冬眠期细胞间质内含有大量细胞,胶原纤维增多,而繁殖期中华鳖睾丸界膜细胞成分少,胶原纤维减少;冬眠期中华鳖睾丸的肌样成纤维细胞较繁殖期有着明显的多层弥散状结构,而繁殖期中华鳖睾丸肌样成纤维细胞的分层结构并不明显。提示:睾丸结构的改变可能与中华鳖不同繁殖阶段的生理功能相关,这也为研究界膜成分的变化对于生精障碍提供了一定的参考。     

牦牛和普通牛种间杂种公牛睾丸的组织学观测与研究

通过对牦牛和黄牛种间杂种公牛及未成年公牦掉睾丸的比较组织学观测，结果表明：杂种牛雄性不育的生殖隔离机制与生精小管及生精上皮细胞的发育状况、生精小管基膜的厚度、生精小管的间距、间质组织细胞的发育状况、间质组织与生精小管间形成大量组织液等因素有关。随种间杂交代数增加，睾丸组织的发育状况逐渐改善，精原细胞的死亡率相应降低，杂种3代（F3）已能完成减数分裂产生精子，并显示出精原细胞的死亡率的逐代减少与父本基因含量逐代增多有一定的相关性。     

雏鸵鸟睾丸的结构及睾丸内神经肽Y的表达

采用光镜和电镜技术,观察雏鸵鸟睾丸的显微和超微结构;采用免疫组织化学方法对NPY在睾丸内的表达进行研究,探明NPY在睾丸内的表达规律.光镜下可见,雏鸵鸟睾丸表面有一层由坚韧的结缔组织构成的白膜,它向睾丸实质内形成的结缔组织不发达,不形成睾丸纵隔和睾丸小隔;雏鸵鸟的曲精小管直径为85～90 μm,生精上皮由支持细胞和1～2层生精细胞构成,此时精原细胞已开始分裂增殖,可见明显的分裂相,初级精母细胞数量少,体积大.电镜下可见,精原细胞胞质内有少量线粒体、游离核糖体和内质网;初级精母细胞富含线粒体、游离核糖体、内质网和溶酶体;支持细胞与精原细胞之间界限清晰,胞质内含较多游离核糖体,其他细胞器不发达;间质细胞的胞核形状不规则,内含较多脂滴.免疫组化显示,NPY在曲精小管周围、睾丸小血管周围、精母细胞和睾丸间质内均有表达,在睾丸小血管周围和精母细胞内表达量较高,而在曲精小管周围和睾丸间质内表达量较低.     

ET-1/eNOS表达差异在牦牛隐睾发生中的作用分析

旨在比较内皮素-1(endothelin-1, ET-1)及内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase, eNOS)在牦牛正常睾丸与隐睾组织中的分布,分析其表达差异在牦牛隐睾发生中的作用。本研究采集健康和病理性成年(4岁)雄性牦牛睾丸共20对,分为3组：正常组(10对)、单侧下降组(6对)及隐睾组(4对),应用H.E染色、Masson’s三色染色、Gomori’s染色结合形态计量学统计软件比较正常睾丸与隐睾的组织化学特点;通过免疫组织化学方法、免疫组织荧光技术及实时荧光定量PCR (quantitative real-time PCR, qPCR)检测ET-1和eNOS在正常睾丸与隐睾中的表达量并比较组间差异。结果表明：与正常组相比较,牦牛单侧下降组间质面积/管腔面积之比无显著性差异(P>0.05);隐睾组管腔面积明显减小,胶原纤维和网状纤维含量增多。免疫组化和免疫荧光结果显示,ET-1表达于间质细胞、各级生精细胞,隐睾组上皮未见明显表达,主要表达于间质细胞,正常组ET-1的平均光密度与单侧下降组差异显著(P<0.05),与隐睾组...     

不同月龄高原型藏绵羊睾丸组织中蛋白基因产物9.5和神经肽Y的分布比较

旨在比较蛋白基因产物9.5(PGP9.5)和神经肽Y(NPY)在不同发育时期藏绵羊睾丸的组织分布特征,探索其对藏绵羊睾丸发育及生殖机能调节的相关作用。采用睾丸摘除手术收集0.5、2、5、8、12及18月龄藏绵羊睾丸,应用免疫组织化学SP法及IPP图像分析技术研究PGP9.5和NPY的分布特征。PGP9.5和NPY在0.5月龄藏绵羊睾丸组织表达量较低,生殖母细胞中基本无表达,但2月龄时,PGP9.5表达量增加极显著(P0.01),且同年龄段PGP9.5表达量均极显著高于NPY(P0.01),至18月龄时,PGP9.5和NPY表达量明显升高,且与0.5月龄相比差异极显著(P0.01),二者在12月龄及以后初级精母细胞中表达均为阴性。PGP9.5在Sertoli细胞阳性信号随睾丸发育随年龄增加逐渐降低,至18月龄时基本无表达,其在各年龄段Leydig细胞及其周围血管壁呈阳性表达。NPY在Leydig细胞的阳性信号较弱,2月龄及以后各发育阶段睾丸Sertoli细胞中均为阳性表达,在血管壁的表达亦随年龄增加而增强。高原缺氧环境中,不同月龄高原型藏绵羊睾丸组织中PGP9.5和NPY的表达差异与Sertoli细胞发育及精子发生调控关系密切;PGP9.5在Leydig细胞强阳性,表明其与激素合成分泌相关,NPY表达随着月龄而增强,有利于加强睾丸血管舒缩以适应对低氧的调节,或在局部血液循环与Sertoli细胞之间物质传递发挥作用。     

疏肝益阳胶囊对炔雌醚诱导大鼠生精紊乱和氧化应激的缓解作用

笔者拟探讨疏肝益阳胶囊(SGYY)对炔雌醚(QES)诱导大鼠生精紊乱和氧化应激的缓解作用及机制。将20只8周龄雄性SD大鼠随机分为4组,适应饲养1周后,进行药物灌胃处理,对照组:0.1mL生理盐水+0.1mL橄榄油;SGYY组:100 mg·kg-1 SGYY;QES组:0.1 mg·kg-1 QES;QES+SGYY组:0.1 mg·kg-1 QES+100mg·kg-1 SGYY。QES溶于橄榄油;SGYY溶于生理盐水;每天1次,连续2周。处理结束后,取睾丸、附睾、精囊腺和前列腺称重、测量长径与短径,并制备睾丸组织切片,通过HE染色,观察睾丸生精小管组织结构、生精细胞比例的变化;通过免疫组织化学方法检测睾丸生精细胞PCNA表达,Tunel法检测细胞凋亡;分离血浆,检测睾酮含量变化。取睾丸匀浆检测抗氧化酶活性。结果显示,QES处理后大鼠生殖器官的质量显著下降,附睾的精子数量显著减少;生精小管的面积、直径、生精上皮的高度和生精细胞数量均显著减少。而且,生精细胞的PCNA表达和血浆睾酮含量明显下降,Tunel阳性细胞数明显增加。睾丸SOD、GSH-Px和T-AOC活性显著下降,MDA含量显著升高。SGYY增加生殖器官质量、精子数量、睾丸睾酮含量、增殖的生精细胞数量和抗氧化酶活性,降低了MDA含量和Tunel的表达。结果表明,SGYY通过改善抗氧化功能、抑制氧化应激及促进睾酮分泌等途径增加了生精细胞数量并提高睾丸的生精功能。