猪圆环病毒2型培养工艺研究

本文在猪圆环病毒2型转瓶培养工艺基础上,利用NBS生物反应器和无血清培养基进行PK15-B1细胞培养,增殖猪圆环病毒2型病毒液,探索简化PCV2病毒液生产工艺、降低生产成本的方法,为今后用生物反应器微载体系统生产PCV2病毒液提供了科学依据。     

猪圆环病毒2型灭活疫苗免疫试验

采用勃林格殷格翰动物保健公司生产的猪圆环病毒2型杆状病毒载体灭活疫苗,在光明农牧科技有限公司3个畜牧场分别进行免疫核心试验。结果显示,相比对照组,实验组猪成活率、日增重、整齐度等都有较大的改善,投入产出经济效益较好。     

猪圆环病毒2型的分离鉴定及优化培养

为研究圆环病毒病的流行情况及防治奠定基础,从湖北省某些大型养猪场采集临床上表现为断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)病死猪的淋巴结、脾等组织病料,进行病毒分离和鉴定。对分离病毒进行了间接免疫荧光鉴定、电子显微镜鉴定、核苷酸序列比对分析及动物感染试验;同时对病毒的培养条件进行优化,用RT-PCR检测感染细胞中的病毒核酸含量。结果表明,从猪病料中分离到1株猪圆环病毒2型(PCV2),命名为PCV2-WH。分离毒株经间接免疫荧光可检测到特异的PCV2荧光斑,电子显微镜下可观察到直径17 nm大小、圆形病毒粒子;利用一对圆环病毒2型ORF2基因引物进行了PCR扩增,将所得序列与GenBank收录的9株圆环病毒2型ORF2基因的核苷酸序列比对,同源性为98.2%～99.9%。非免疫猪接种出现明显的临床症状和病理变化。优化培养的结果显示,细胞与病毒同步接种培养24 h后,用300 mmol/L D-氨基葡萄糖于37℃作用30min后继续培养48 h的病毒滴度最高。本研究为进一步开展该病毒的致病性、疫苗免疫、诊断及分子生物学等研究奠定了基础。     

猪圆环病毒2型ORF2可溶性表达条件的优化

为探索猪圆环病毒2型(PCV2)ORF2基因在大肠杆菌中高效可溶性表达的条件,扩增ORF2基因构建重组表达质粒p ET30a-ORF2,转化入大肠杆菌BL21(DE3)感受态获得重组表达菌;通过改变菌体培养温度和时间、诱导温度和时间、溶解氧量、IPTG及CaCl_2浓度,实现目的蛋白高效可溶性表达。结果表明:重组表达质粒p ET30a-ORF2经酶切及测序证明构建正确,重组表达质粒在大肠杆菌BL21(DE3)中实现可溶性表达,其最佳表达条件为:在500 mL培养瓶中加入200 mL LB卡那霉素阳性培养基,菌体于37℃培养4 h后,分别加入IPTG及Ca Cl2至终浓度为0.6 mmol/L及0.06 mol/L,30℃诱导表达4 h;重组Cap蛋白的最高表达量占总蛋白的55.9%。说明优化后可实现猪圆环病毒Cap蛋白的可溶性表达,这为进一步研究该蛋白的结构及其生物学特性奠定了基础。     

圆环康 猪圆环病毒2型灭活疫苗

<正>猪圆环病毒病是由猪圆环病毒2型(PCV2)引起的严重危害养猪业发展的重要传染病。国内外研究证实:PCV2不仅能引起猪只的免疫抑制,而且在临床上还会导致断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)、猪皮炎肾病综合征(PDNS)、母猪繁殖障碍(RF)、仔猪先天性震颤(CT)、增生性坏死性肺炎(PNP)和肠炎等疾病的发生,同时也是诱发猪呼吸道综合征(PRDC)的原发病原之一。此外,PCV2还可与猪繁殖与呼吸道综合征病毒(PRRSV)、     

2型猪圆环病毒研究进展

猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)是一种基因组较小,但有较高进化速率的DNA病毒,其是影响养猪业经济发展的重要病原体。到目前为止,PCV2具有5种基因型-PCV2a到PCV2e,但对PCV2流行株的基因序列的检测发现,PCV2的基因型仍在持续的发展。自2012年以来,PCV2d基因型的圆环病毒在北美取代了以前主导的PCV2b基因型感染,同时在中国和韩国也有了类似的趋势。圆环病毒的新兴基因型,其毒力存在增强的可能性,基于PCV2a基因型制备的疫苗,是否对PCV2d基因型圆环病毒的感染具有保护作用,已引起各国学者的重视。本文通过对PCV2的生物学特性、抗体变异情况以及其基因进化情况进行综合的分析总结,从而为PCV2疫苗的开发与研制奠定理论基础。     

猪圆环病毒2型灭活疫苗免疫效果试验

正猪圆环病毒病(Porcine circovirus diseases,PCVDs)是由猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)引发的一种猪传染性疾病。一旦PCV2感染猪后具有免疫抑制特性,能够干扰其它疫苗的免疫效果~([1])。近几年我国猪场的PCV2感染     

猪圆环病毒2型灭活苗免疫试验

猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)由于常与其它病原混和感染,给养猪业造成巨大的经济损失。本试验用圆环病毒2型灭活苗免疫20日龄仔猪,观察免疫后猪体内抗体消长规律及其对猪只生长的影响。     

猪圆环病毒2型培养工艺比较研究

猪圆环病毒2型(PCV2)细胞内增殖滴度的提高是开发PCV2全病毒灭活苗的瓶颈问题.为克服该困难,探究高病毒滴度PCV-2规模化增殖工艺,采用PK-15细胞单层接毒、同步接毒与带毒传代3种增殖工艺对PCV2进行增殖,并应用细胞孵育剂D-氨基葡萄糖对各增殖工艺进行优化,最后通过间接免疫荧光试验对比分析不同的增殖工艺组病毒...     

猪圆环病毒2型灭活疫苗免疫效果试验

<正>猪圆环病毒病(Porcine Circovirus Diseases,PCVD)或称猪圆环病毒相关性疾病(PCVAD)是主要由猪圆环病毒2型(PCV2)引起的免疫抑制性疾病,临床表现为仔猪先天性震颤(CT)、断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)、猪皮炎肾病综合征(PDNS)、猪呼吸道病综合征(PRDC)、母猪繁殖障碍(RF)等[1]。猪圆环病毒2型(PCV-2)主要在机体的单核细胞、巨噬细胞等抗原递呈细胞中生长和复制。引起这类抗原递呈细胞的抗原递呈能力下降,导致机体的免疫机能受到抑制。使得畜体免疫功能受到损害,造成其他细菌或者病毒的并发和继发感染[2]。最近几年我国养猪业面     

猪圆环病毒2型研究进展

猪圆环病毒2型（PCV2）已成为家猪和野猪常见的一种病毒病,由其引起的疾病称为猪圆环病毒相关疾病（PCVAD）,自猪圆环病毒相关疾病（PCVAD）暴发以来,已成为近年来阻碍养猪业发展的重要传染病。为了进一步了解该病,以便更好地预防和控制该病,本文从病原学、流行病学、致病机理、临床症状、防控措施等方面进行了综述。     

猪圆环病毒2型研究进展

猪圆环病毒2型目前是生猪生产中较为常见的一种病毒,常见于感染家猪和野猪,由它引起的疾病称为猪圆环病毒相关疾病,自从猪圆环病毒相关疾病暴发以来,已经成为我国对养猪业影响巨大的重要传染病。为了进一步掌握这种传染病的发生,以便更好地预防和控制该病,本文主要从该病的病原学、流行病学、致病机理、临床症状、防控措施等方面进行了综述,为该病的综合防治提供一个基本依据。     

猪圆环病毒2型灭活疫苗免疫效果试验

本试验将10窝同期出生的共105头仔猪,随机分为试验组和对照组,试验组于14日龄、45日龄分别进行猪圆环病毒2型灭活疫苗免疫,对照组不免疫。通过临床跟踪观测和定期采血进行猪圆环病毒2型ELISA抗体和PCR病毒核酸检测。结果表明,临床免疫猪群成活率及生长指标明显好于不免疫猪群;试验组及对照组病毒核酸阳性检出率和抗体阳性率差异不显著,且可同时检出圆环病毒核酸及抗体。     

猪圆环病毒2型灭活疫苗免疫效果试验

为探究猪圆环病毒2型灭活疫苗(PCV2灭活苗)免疫效果及免疫方法,本试验将60窝长大母猪随机分为六组,分别为母猪免疫而仔猪不免疫、仔猪免疫一次、仔猪间隔14天免疫2次和母猪不免疫而仔猪不免疫、仔猪免疫一次、仔猪间隔14天免疫2次。结果发现,母猪免疫同时仔猪二次免疫PCV2灭活疫苗的猪只平均日增重最大、料重比最低、产生的经济效益最大,母猪与仔猪均不免疫的猪只平均日增重最小、料重比最高、猪只死亡数最多。结果表明:母猪产前免疫一次、仔猪间隔14天免疫二次对提高猪的生产性能效果最明显,仔猪不进行免疫对猪生产性能的负面影响最大。     

猪圆环病毒2型疫苗效果对比试验

近年来,猪群圆环病毒感染率呈逐年上升的态势,引发的并发症造成生产效率低、病死率高,是制约我国养猪业健康有序地发展的一大问题。本实验在樟树吴城农牧场(猪圆环病毒病阳性猪场),选用90头杜×长×大三元杂交,体重相近,日龄相近的仔猪,分组接种猪圆环病毒2型疫苗,其中A组接种勃林格殷格翰动物保健(美国)有限公司生产的猪圆环病毒2型杆状病毒载体灭活疫苗,B组接种上海海利生物药品有限公司,生产的圆毕净即猪圆环病毒2型灭活疫苗(LG株),C组作为空白对照组。试验期为200d。本研究的目的、意义:通过本实验的研究,为养猪生产使用圆环商品苗提供参考,对今后圆环病的防治提供参考。     

猪圆环病毒2型ZJ/C株增殖条件的优化

为了在PK15细胞上获得更高滴度的猪圆环病毒2型(PCV2)ZJ/C株,本实验优化了细胞接种密度、接毒方法、接毒量与收获时间和冻融次数等条件。结果表明接种密度在2.5×10~5个/m L,同步接毒加D-氨基葡萄糖处理,接毒量为2%,接毒后90h收获,-20℃冻融2次,PCV2-ZJ/C株增殖效果最好。该结果为猪圆环病毒2型灭活疫苗(ZJ/C株)的生产提供了依据。     

猪圆环病毒2型灭活疫苗免疫佐剂的比较试验

以猪圆环病毒2型(PCV2)遗传标记毒株为毒种,经细胞培养传代,优化了病毒增殖条件,获得较高滴度的病毒培养物用于PCV2灭活疫苗的研制。为了比较不同免疫佐剂的效果,本试验对国产矿物质白油和铝胶两种佐剂以及赛比克公司提供的MONTANIDETMISA206、ISA15VG、IMS1315VG3种佐剂配制的灭活疫苗进行了猪体免疫试验。通过临床观察、血清抗体效价测定,确认ISA15VG佐剂配制的疫苗在增强免疫效果方面优于其它佐剂。按5种佐剂免疫效果排序为ISA15VG、IMS1315VG、铝胶、ISA206、国产白油。ISA15VG佐剂属于水包油剂型,可刺激接种动物产生快速免疫应答反应,抗体产生效价高、持续时间长,有可能成为新型PCV2灭活疫苗佐剂的候选。     

猪圆环病毒2型悬浮培养工艺的研究进展

猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type2,PCV2)流行广泛,能损害免疫系统,多继发其他病原的混合感染,影响养猪业的健康发展。疫苗能有效防治PCV2,减少病毒对猪群的损害。对目前国内外市场上PCV2疫苗的制备工艺及其优缺点进行对比分析,发现利用悬浮培养工艺培养PK-15细胞来增殖PCV2,在PCV2疫苗的制备上具有广阔的市场前景。     

猪圆环病毒2型最新研究进展

猪圆环病毒2型（Porcinecircovirustype2,PCV2）是近年发现的主要引起猪免疫抑制性疾病的病毒。与猪群中发生的许多新传染病密切相关,主要引起断奶仔猪多系统衰竭综合征（Postweaning multisystemic wasting syndrome,PMws）等疾病。临床上以断奶仔猪呼吸急促或困难,腹泻,贫血,明显的淋巴结病变、间质性肺炎和进行性消瘦为主要特征。     

猪圆环病毒2型疫苗研究进展

猪圆环病毒2型(PCV2)感染后会导致断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)等"猪圆环病毒相关疾病"(PCVADs),给全球养猪业造成了巨大的经济损失。疫苗免疫是防控该病的有效手段,近年来市场上推出了PCV2灭活疫苗、嵌合疫苗和亚单位疫苗。PCV2变异较快,主要临床流行毒株从PCV2b逐渐演变为PCV2d,现有商业化疫苗免疫效果需进一步研究证实。论文就近年来国内外PCV2传统疫苗、新型基因工程疫苗、PCV2疫苗与其他疫苗联合免疫的研究进展进行综述,旨在为猪圆环病毒相关疾病的防控及疫苗的开发与利用提供参考。