公山羊β防御素124的表达谱分析及其在繁殖器官中的定位

旨在研究公山羊β防御素124(Goat beta-defensin 124,gDB 124)的表达谱及其蛋白在繁殖器官中的分布特点。采集1周龄、2~6月龄公羊各3只(体重相近)睾丸和附睾,以及18月龄公山羊睾丸、附睾头、附睾体、附睾尾、心、肝、脾、肺、肾和背最长肌组织。用qRT-PCR分析gDB124mRNA的表达情况;采用免疫荧光技术分析睾丸、附睾头、附睾体和附睾尾gDB 124分布特点。结果显示:除背最长肌中无表达外,gDB124mRNA在18月龄公山羊睾丸、附睾头、附睾体、附睾尾、心、肝、脾、肺和肾组织均有表达,且附睾头表达量极显著高于其他组织(P0.01);睾丸gDB124mRNA表达量6月龄时显著高于其他月龄;附睾头、附睾体和附睾尾gDB124mRNA表达量随月龄的增加呈上升趋势;1周龄公山羊睾丸和附睾gDB124mRNA表达量不存在显著差异,3、4、5、6、18月龄时附睾头gDB124mRNA表达量显著高于睾丸、附睾体和附睾尾(P0.05);免疫荧光定位技术分析显示:gDB 124在公山羊睾丸和附睾中均有分布,但主要是在附睾头上皮细胞中。根据荧光信号强度gDB 124的表达量顺序:附睾头附睾体附睾尾睾丸,该结果与qRT-PCR分析结果相一致。公山羊gDB124mRNA表达具有明显组织特异性和时间依赖性。     

雏鸡免疫器官中chMDA5的表达与定位

为研究鸡模式识别受体MDA5(chMDA5)在雏鸡免疫器官中的表达与定位,分别于1、7、14、21、28、31、35、42、45、49日龄时从50只健康海兰白蛋鸡中随机选取5只,采取法氏囊、胸腺及脾,应用实时荧光定量PCR、Western blot及间接免疫荧光技术检测雏鸡免疫器官中chMDA5的表达情况。结果发现,在各日龄雏鸡法氏囊、胸腺及脾内均检测到chMDA5转录;在法氏囊淋巴滤泡的皮质、胸腺小叶的皮质和髓质及脾的白髓和红髓部位均检测到chMDA5阳性细胞;法氏囊和胸腺组织中chMDA5蛋白的表达规律较为一致,即在1~7日龄呈上升趋势并在7日龄达到峰值,随后下调,在14~35日龄时呈波动变化,之后逐渐上调并趋于稳定;脾中chMDA5蛋白表达以14d左右为一个周期变化,随着日龄增大其表达量在总体上趋于上调。结果表明,chMDA5在雏鸡免疫器官中均有表达,且不同日龄之间的表达存在差异。本研究为进一步探究chMDA5与雏鸡免疫功能相关性提供了科学的试验依据。     

掌握山羊繁殖特点，提高山羊繁殖性能

养羊业在许多地区的畜牧业乃至农业生产中所占的比重越来越高。如何充分发挥山羊的生产性能，对于提高养羊业的经济效益有着举足轻重的作用。影响山羊生产性能的因素很多，繁殖性能无疑是其中非常重要的因素。合理利用山羊的繁殖特点，提高山羊的繁殖性能，对于降低生产成本，提高经济效益具有十分重要的意义。     

神经生长因子及其受体TrKA在山羊脊髓发育中的表达特点

运用免疫组织化学超敏 SP法对山羊胎儿脊髓发育中神经生长因子 (nerve growth factor,NGF)及其高亲和力受体 Tr KA的表达及其功能进行了系统的研究和探讨。结果显示 ,山羊胎儿脊髓灰质中存在 NGF及其受体 Tr KA,于 6周龄胚就可检测到 ,随胚龄增加 ,其表达范围及免疫反应着色程度逐渐增强。 NGF主要分布于腹角和背角的神经细胞 ,反应产物主要定位于胞质和突起 ;Tr KA的分布主要以腹角及胶状质为主 ,反应产物主要定位于胞核 ,后期胞质及突起也可见到阳性反应。在山羊胎儿脊髓白质中也可观察到 NGF及 Tr KA免疫阳性反应 ,其发育后期更为显著 ,阳性反应主要分布于神经胶质细胞核、神经纤维的轴索及雪旺氏细胞。结果提示 ,NGF不仅对交感和感觉神经元的发育起作用 ,而且还与腹角运动神经元的发育有关     

山羊常规繁殖技术及其应用

养羊业生产的主要任务,是在努力增加羊的数量的同时,积极提高羊的质量,以便生产更多、更好的羊产品来满足人民生活水平日益提高和社会主义市场经济不断发展的需要。要增加羊的数量,提高羊的品质,必须通过羊的繁殖才能实现,因此掌握好羊的繁殖技术,搞好羊的繁殖工作,是养羊业中不可忽视的重要环节。山羊的常规繁殖技术主要包括同期发情、人工授精等。     

雏鸡免疫器官中chTLRLR4的表达与定位

为研究鸡Toll样受体4(chTLR4)在雏鸡免疫器官(法氏囊、胸腺、脾脏)中的表达与定位,将50只健康海兰白蛋鸡随机分成10组,每组5只,分别于1、7、14、21、28、31、35、42、45、49日龄时随机扑杀一组,取法氏囊、胸腺及脾脏,应用实时荧光定量PCR、Western blot及间接免疫荧光方法检测雏鸡免疫器官中chTLR4的表达情况。结果:1在各日龄雏鸡法氏囊、胸腺及脾脏内均检测到chTLR4转录及chTLR4蛋白的表达。2法氏囊淋巴滤泡的皮质和髓质内均可见免疫阳性细胞,尤其是在髓质部免疫阳性反应较强;胸腺小叶的皮质、髓质及脾脏的红髓和白髓细胞内均可观察到免疫阳性反应区。3法氏囊中chTLR4蛋白表达在1~42日龄均处于较高水平并存在小幅波动,42~49日龄表达量逐渐下降;各日龄雏鸡胸腺、脾脏中chTLR4蛋白表达趋势相似,1~14日龄表达量逐渐升高,14~35日龄呈波动变化,35~42日龄呈下降趋势。研究表明,在各日龄雏鸡免疫器官中均有chTLR4表达,且存在差异。研究结果为进一步探究chTLR4与雏鸡免疫功能相关性提供了依据。     

Ghrelin在驯鹿器官内的表达及定位检测

为了探索Ghrelin在驯鹿体内的表达及定位,采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)和免疫组织化学技术对其进行检测。Real-time PCR结果显示Ghrelin在所检测的17种器官中均有转录,在皱胃内的转录量最高,其次是胰、十二指肠、睾丸和食管,且转录量显著高于其他器官(P0.05);免疫组化结果揭示Ghrelin的免疫阳性细胞在食管和皱胃内主要分布于黏膜层、黏膜下层和肌层;在瘤胃、网胃、瓣胃的黏膜层、黏膜下层中也可见Ghrelin的免疫阳性细胞,但肌层中未见表达;在肠道主要位于十二指肠、空肠、回肠、结肠的黏膜层、黏膜下层和肌层,尤其在肠绒毛和黏膜下层分布较多;在肝、胰、甲状腺、垂体前叶、睾丸、肺、肾、脾器官内均有Ghrelin的免疫阳性细胞。Real-time PCR和免疫组化结果显示Ghrelin在所检测的器官内均有分布,且在食管和胃肠道内表达量及分布范围最为广泛,这表明Ghrelin对驯鹿的消化系统可能存在一定的调节作用。     

山羊的繁殖控制技术

繁殖力的高低直接影响山羊生产的水平和经济效益。山羊的繁殖效率受遗传和环境等诸因素的影响,近年来各国进行了大量研究,以提高山羊的繁殖效率。一、同期发情应用同期发情技术可使配种时间和产羔时间相对集中,以利于生产计划的安排,提高劳动效率,便于实行人工授精。     

山羊的繁殖技术

1山羊的饲养管理在放牧情况下,一只成年山羊每天吃青草7～10kg。每天放牧运动时间:冬春季为4～6h,夏秋季为7～9h。对于采精种羊,精料的补给非常重要,日粮中必须含有丰富的蛋白质、维生素、无机盐以及适量的微量元素等。日粮中各物质的比例为:玉米35%,豆粕34%,麦麸23%,8%为钙、磷、石粉、盐和添加剂等。每只羊每天饲喂0.75～1.5kg,早晚各一次,只要达到这样的下限指标,即能使采精种羊性机能旺盛,精液品质好,母羊受胎率高。对于肉用山羊而言,精料中的玉米为60%～65%,豆粕为10%～15%,麦麸为25%～27%,依次加入必需成分,饲喂量为每只每天150～300g…     

Oct4在山羊睾丸组织中的表达与定位

探讨不同时期山羊睾丸组织中干细胞的分布和特点,以45 d和75 d山羊胎儿及出生后4月龄山羊睾丸为试验材料,进行了HE染色和Oct4抗体的免疫组化染色。结果显示,在45 d山羊胎儿睾丸组织中睾丸实质细胞聚集呈团状,形成岛屿状组织结构;发育到75 d山羊胎儿睾丸组织中睾丸的间质与实质组织结构差异明显,睾丸生精小管已经形成,生精小管管腔闭锁;出生后4月龄山羊睾丸组织结构明显,生精小管形态特征清晰,但管腔仍处于闭锁状态;Oct4免疫组织化学显示在45 d山羊胎儿睾丸组织中Oct4阳性细胞呈岛屿状分布,多见于生精小管前期的组成细胞;对于75 d山羊胎儿睾丸组织Oct4阳性细胞呈环状分布于生精小管中,睾丸间质组成细胞中则较少;在出生后4月龄山羊睾丸中阳性细胞主要分布于睾丸组织生精小管基底膜,沿基底膜环状分布。试验证实了在早期山羊睾丸组织中Oct4主要表达在生精前体细胞。     

山羊的繁殖管理

正大多数山羊的发情周期为18～21d。依据行为表现,尤其是爬跨行为,可以作出发情鉴定。配种前要对公、母种山羊进行繁殖性能的检查。可使用PGF2α或氯前列烯醇对母羊作同期发情处理。要及时对处于发情盛期的母羊进行人工授精操作。母羊在配种后约150d可出现分娩或产羔,工作人员应做好产后护理工作。1初情期与发情期大多数山羊的发情周期为18～21d,但温带地区的奶山羊和安哥拉山羊为季节性发情,随着白昼变短在秋季进入发     

FZD5在山羊妊娠早期的表达及激素调控

实验旨在研究雌性山羊早期妊娠和发情周期中 Frizzled-5(FZD5)蛋白在子宫中的表达,以及类固醇激素对 FZD5 的表达调控。选取发情周期、早期妊娠及雌激素(50 μg/mL)与孕酮(50 ng/mL)处理山羊的子宫组织,采用免疫组织化学染色、荧光定量 PCR和 Western blot检测 FZD5在山羊子宫中的表达规律。结果表明:FZD5 蛋白在山羊妊娠早期的子宫腔上皮和腺上皮中表达;FZD5 mRNA 和蛋白在胚胎与子宫的黏附前(D6)和黏附中(D16)表达较高,在黏附后(D19)和胎盘形成早期(D25)呈下降趋势;孕酮处理导致FZD5表达降低,表明山羊子宫中孕酮下调 FZD5的表达。研究提示FZD5可能在山羊胚胎着床过程中发挥作用。     

催产素受体在山羊颈中神经节的定位研究

为了研究山羊颈中神经节(middle cervical ganglion, MCG)的神经细胞内是否具备接受催产素(oxytocin, OT)调节的条件。取成年羊山颈中神经节,采用免疫组化SP法检测催产素受体(oxytocin receptor, OTR)在颈中神经节内各种结构上的分布特点,用Image-pro plus 6.0分析颈中神经节神经细胞和非神经细胞结构的催产素受体表达差异性。结果表明,颈中神经节内OTR免疫阳性产物分布广泛,神经细胞、过路神经纤维、血管内皮细胞、支持细胞和雪旺细胞均有不同程度的着色。OTR免疫阳性产物在神经细胞的胞质和细胞核核膜着色最深,为棕褐色,呈强阳性。大部分神经细胞胞质着色为黄褐色,呈中等阳性,这部分神经细胞胞质约占神经细胞总数的91%。血管内皮细胞、细胞膜,以及一小部分神经细胞胞质和少量神经纤维着色较浅,为淡黄色,呈弱阳性。大部分的过路神经纤维着色极浅或不着色,为阴性。图像分析表明神经细胞胞体的相对表达量与其他非神经细胞结构相比差异性极显著。OTR免疫阳性产物在山羊颈中神经节中广泛表达分布,且主要分布在颈中神经节交感节后神经细胞内。     

现代生物技术在山羊繁殖中的应用

讨论了几种有关山羊繁殖的生物技术进展，主要包括山羊的人工授精，胚胎克隆和胚胎移植，体外胚胎生产和转基因等。     

山羊 Notch1基因的表达及细胞定位

为了进一步了解Notch1蛋白,本研究用BLAST方法对不同动物Notch1基因的同源性及遗传进化情况进行了分析,通过PCR扩增获得Notch1基因,并构建了与GST标签融合表达的原核表达载体、与GFP标签融合表达的真核表达载体。将双酶切和测序鉴定的阳性克隆分别转化BL21感受态细胞和转染BHK21细胞进行原核和真核表达,并用Western blot和荧光显微镜鉴定。同时,与GFP标签对照确定其在细胞中的定位情况。结果显示,扩增的Notch1基因片段约780 bp,为Notch1基因的部分序列,Notch1在不同动物间的基因序列同源性为94%以上,遗传进化关系上分为3个分支。Western blot检测结果显示,构建的原核表达pGEX-KG-Notch1能够表达预期大小为56 kDa的融合蛋白;荧光显微镜检测显示Notch1与GFP的融合蛋白分布在整个细胞中,但主要集中于细胞核,而GFP空白对照仅分布于细胞质中,说明Notch1主要定位于细胞核中。本研究为进一步探索Notch1与KLP1的相互作用及其功能奠定了基础。     

甘肃省山羊尘肺及其病变特点

动物尘肺的资料国内尚缺。1988年以来,我们在对甘肃省主要畜禽尘肺的调查研究过程中,首次发现山羊尘肺。报道如下。材料与方法一、病理检查:71只山羊(2—7岁),来自安西县。当动物屠宰时对内脏器官进行眼观