中国春小麦(6x)×苏联球茎大麦(4x)属间杂交的研究初报

本试验选用抗病性较强的球茎大麦(2n=28)为父本,以普通小麦(2n=42)为母本,进行属间杂交,授粉24小时后,在母本柱头上滴赤霉酸,促使幼胚生长,以中国春单体5B 为母本杂交,获得了少量结实的杂交种子;以中国春为母本的,则结合离体培养杂种幼胚,以获得属间杂种。杂种自花不育,而以中国春单体5B 与之回交,获得三株回交一代杂种(B相似文献   

甘蓝型油菜与青花菜种间杂种子房离体培养研究

利用子房离体培养的方法克服了甘蓝型油菜与青花菜杂种后代杂种胚的衰亡,并通过组织培养技术获得了杂交后代。试验结果表明：授粉后15d的子房离体培养效果最好,获得7粒饱满种籽,其中2粒发芽,发芽率为0.29;1/2MS+B5有机+IAA1.5mg/L+蔗糖50g/L为最佳的子房离体培养基,平均每个角果可得到杂种0.17粒,杂种发芽率可达66.7%;通过比较父母本和杂交后代性状,发现杂交后代的生物学性状偏向父本。     

冬小麦遗传再生体系及根癌农杆菌介导的转化研究

摘要:以冬小麦品种临优145的幼胚为外植体,消毒后用解剖刀挑取幼胚,盾片朝上接种于MS+2,4-D 2 mg/L+肌醇100 mg/L＋MES 400 mg/L＋CH 100 mg/L[7]＋40g/L麦芽糖＋8g/L琼脂的培养基中诱导愈伤组织, 每两周继代一次,将诱导出的淡黄色、颗粒状Ⅱ型胚性愈伤组织接种于分化培养基（MS+ZT 1 mg/L+IAA 1mg/L+ MES 400 mg/L＋CH 100 mg/L+麦芽糖40g/L+gelrite 2.6g/L,PH5.8）上培养2－3周,然后转接到再生培养基(1/10MS+NAA 0.5mg/L+KT 0.5mg/L+蔗糖30g/L+ gelrite 2.6g/L,PH5.8)中进行再生成苗。接种1229块幼胚,得到987块愈伤组织, Hyg抗性愈伤组织123块,抗性再生植株34株。在建立了再生体系的基础上,用根癌农杆菌介导法将GUS基因导入幼胚愈伤组织,抗性植株的PCR检测呈阳性。X－gluc染色表明, 少部分愈伤组织出现肉眼可见的蓝色晕斑,说明GUS基因已经在小麦幼胚愈伤组织中表达。     

樟子松无性系(GS1)胚性愈伤组织的初步诱导

本研究以樟子松无性系(GS1)为研究对象,探讨合子胚不同发育时期愈伤组织的诱导情况,探索不同培养基类型及不同激素配比对其愈伤组织诱导的影响,初步建立体胚发生技术体系,为樟子松(GS1)体胚发生技术建立和获得植株再生提供一定基础。本研究对樟子松无性系(GS1)合子胚不同发育时期进行观察并进行不同时期、不同激素体胚诱导。樟子松无性系(GS1)合子胚形态变化可划分为9个阶段,将这9个阶段的合子胚分别接种到不同培养基上进行诱导。结果显示,DCR培养基比MS和LM培养基更适合GS1愈伤组织的诱导和生长。第7阶段的合子胚在DCR+2,4-D 5.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L+6-BA 0.5 mg/L培养基上愈伤组织诱导率最高,在DCR+2,4-D 3.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L+6-BA 0.5 mg/L培养基上胚性愈伤组织诱导率最高。诱导过程会产生两种类型的愈伤组织,分别为白色透明状的愈伤组织和淡黄褐色愈伤组织。经显微观察有两种结构愈伤组织,一种是近球形的薄壁细胞结构,为非胚性愈伤组织;另一类是由胚性细胞和胚柄细胞组成的胚性细胞团。樟子松无性系(GS1)合子胚第7阶段的合...     

4个梅花品种的胚培养及愈伤组织诱导研究

为保存和扩繁梅花种质资源,试验筛选4个梅花品种,取胚进行胚培养,旨在建立梅花胚培养的无菌体系。以梅花(Prunus mume Sieb. Et Zucc.)天然杂交的未成熟胚为外植体,初步探索‘淡寒红’、‘南京红须’、‘双碧垂枝’、‘粉瓣’等梅花品种的胚培养体系,并在此基础上,利用叶片建立了高效的愈伤组织诱导体系。结果表明：胚培养的最适培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.2 mg/L,叶片愈伤组织诱导培养基为MS+2,4-D 1.0 mg/L,最适的叶龄为幼叶时期。梅花的胚培养中,不同品种的萌发率具有一定差异,难易顺序是单瓣品种群＜垂枝品种群＜朱砂品种群。     

3个品种紫斑牡丹胚培养及幼苗生长的探究

为了探讨出适用于不同栽培环境的紫斑牡丹快繁体系,满足紫斑牡丹日益增长的市场化与商业化需求。本研究以3种不同栽培环境下的紫斑牡丹(Paeonia rockii)-‘雪莲’、‘蓝荷’和‘粉荷’的种子为试验材料,以正交试验的极差分析和方差分析研究在不同浓度激素配比下3个品种紫斑牡丹离体种胚萌发及生根状况,筛选出最佳激素配比的培养基。结果表明:(1)在胚培养的启动阶段,6-BA的最适浓度为0.5 mg/L,水解乳蛋白(LH)比水解酪蛋白(CH)更适合于离体胚的萌发,得出最适3种不同栽培环境紫斑牡丹启动培养的最佳激素配比组合的培养基为B5+0.5 mg/L 6-BA+0.5 g/L LH;(2)在无菌苗生根阶段,影响紫斑牡丹生根的各因素主次顺序为:AC>6-BA>IBA>IAA,各因素的优水平为:AC为0.5 g/L,6-BA为0.5 mg/L,IBA为2.0 mg/L,IAA为2.0 mg/L,适合于紫斑牡丹3个品种无菌苗生根的最佳外源激素浓度配比的培养基是1/2 MS+0.5 mg/L6-BA+2.0 mg/L IAA+2.0 mg/L IBA+0.5 g/L AC;(3)紫斑牡丹3个品种之间离体胚的萌发及生根均差异性不显著(p>0.05),但总体来看的表现情况为雪莲>蓝荷>粉荷,这可能与栽培环境有关。     

燕麦愈伤组织诱导和分化再生影响因素的研究

以燕麦3个品种(系)幼胚、幼穗为材料,通过组织培养方法,研究了基因型、培养基、外植体对愈伤组织诱导、继代和分化再生的影响。结果表明,对愈伤组织的诱导,基因型和培养基起重要作用,对幼胚作用极显著,对幼穗作用显著;外植体不同也影响愈伤组织形成,随培养基成分改变而变化,且幼穗较幼胚更易培养;2,4-D浓度影响愈伤组织生长和胚性愈伤组织形成,3 mg/L 2,4-D有利于愈伤生长,促进胚性愈伤形成;草莜一号幼穗愈伤组织有很强的继代能力,继代培养330 d仍具有46.58%的分化率,该材料在组织培养和基因工程研究中具有很大潜力。     

Dicamba和2,4-D处理对小麦与玉米杂交得胚率的影响

设置生长调节剂Dicamba和2,4-D不同浓度混合液共6种处理,研究Dicamba和2,4-D对5个小麦基因型与玉米杂交得胚率的影响。结果表明,生长调节剂处理间、小麦基因型间以及二者之间互作均显著影响小麦与玉米杂交得胚率。单独使用100mg/L2,4-D的得胚率最高(26.2%,极显著高于25mg/L2,4-D+75mg/L Dicamba处理的得胚率(19.9%)和50mg/L2,4-D+50mg/L Dicamba混合处理的得胚率(20.0%)。其余3种混合型生长调节剂处理间得胚率差异不显著。襄麦56平均得胚率最高,显著高于扬麦158、郑麦9023和组合0173,其次为裹麦25。同一小麦基因型不同生长调节剂处理的得胚率及同一生长调节剂处理不同小麦品种间得胚率均存在差异。     

虉草成熟胚组织培养再生体系的建立

本研究以2个不同品种的虉草(Phalaris arundinacea)成熟胚为外植体,种子在无菌的条件下用70%的乙醇处理12 min配合0.1%的Hg Cl2消毒5 min,蒸馏水冲洗后在无菌条件下挑出胚接种到不同激素配比的培养基上,得到再生植株。结果表明:通选7号和川草3号在诱导培养基N6+3.0 mg/L~4.0 mg/L 2,4-D上的愈伤组织形成率都达到70%;通选7号在N6培养基+0.5 mg/L 2,4-D+2.0 mg/L 6-BA上的分化效果最佳,达95.38%,川草3号在N6培养基+0.5 mg/L 2,4-D+4.0 mg/L 6-BA上有最高的分化率89.33%,均可得到再生植株。本研究可消除虉草种子稃及种皮对植株再生的影响,以期在大规模生产利用上创造可能。     

月季远缘杂交未成熟胚培养初探

为提高现代月季的抗逆性和多样性,建立月季远缘杂交未成熟胚培养体系,本研究以综合性状优良的现代月季品种‘犹太花环’‘メアリローズ’‘夏日芬芳’和古老月季品种‘月月粉’为母本,以抗逆性强的野生蔷薇黄刺玫(Rosa xanthina Lindl.)为父本进行远缘杂交,以杂交后的未成熟胚为材料进行胚挽救,分析不同消毒方法、胚龄、胚剥离方法以及培养方法对未成熟胚挽救效果的影响。结果表明,月季远缘杂交未成熟胚用0.1%氯化汞对胚珠进行消毒效果最好且不影响胚的萌发;胚挽救的最早胚龄为30 d,未成熟胚可以在添加1 g/L活性炭的培养基MS+GA_3 0.5 mg/L+NAA 0.05 mg/L+6-BA 1.0 mg/L上萌发,其萌发率与杂交组合相关,所有杂交组合中,‘犹太花环’×黄刺玫萌发率最好,可达46.7%;去除果皮有助于胚的萌发,去除全部果皮未成熟胚萌发率最高,可达46.7%;采用两步培养法能提高月季未成熟杂交胚成苗率。月季远缘杂交未成熟胚培养体系的建立,为培育性状优异、抗性突出月季新品种提供技术保障。     

红地球葡萄GLRaV-3的茎尖培养脱毒及RT-PCR检测

本文以带GLRaV-3病毒的红地球为试材,研究了6-BA、NAA、IBA、KT不同配组及茎尖大小对茎尖培养的影响,并利用RT-PCR技术对部分红地球组培苗进行了GLRaV-3病毒检测。研究结果表明：红地球葡萄茎尖培养脱毒最佳茎尖初始培养基为：1/2MS+6-BA 0.5 mg/L+KT 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L,最佳茎尖分化培养基为：B5+KT 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L;茎尖大小与成活率成正比,与脱毒率成反比;运用RT-PCR检测技术进行了脱毒后组培苗的检测,得到了GLRaV-3的特异片段为300 bp,获得了28株脱毒苗,平均脱毒率为43%。     

In vitro tetraploid induction via colchicine treatment from diploid somatic embryos in grapevine (Vitis vinifera L.)

A protocol for in vitro induction of tetraploids via colchicine-treated somatic embryos from immature zygotic embryos of diploid grapevine (Vitis vinifera L.) is reported. Embryogenic callus was initiated from immature zygotic embryos cultured on Nitsch and Nitsch (NN) medium supplemented with 1.0 mg/l 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D). The callus was transferred to NN medium containing 1.0 mg/l α-naphthalene acetic acid (NAA) and 0.5 mg/l benzyladenine (BA) to establish somatic embryogenesis. The vigorously growing globular embryos were selected and treated by 0, 10 or 20 mg/l colchicine for 1, 2 or 3 days, and then immediately transferred to NN medium supplemented with 0.03 mg/l NAA and 0.5 mg/l BA, for somatic embryo conversion and plant regeneration. The number of surviving embryos and regenerated plantlets following colchicine treatment decreased with increasing colchicine concentration and treatment time. Among 29 randomly investigated plantlets regenerated from colchicine-treated somatic embryos, five solid tetraploids (2n = 4× = 76) were identified by chromosome counting analysis; all others were diploid (2n = 2× = 38). Ploidy level of plant regenerated was also determined from leaves using flow cytometry. No chimeras with both 2C and 4C nuclei was produced from colchicine-treated somatic embryos. Significant differences in leaf stomata parameters were observed between diploid and induced tetraploid plantlets.     

马齿苋组织培养的优化

用野生马齿苋的种子得到无菌苗。以无菌苗的下胚轴和子叶为外植体,在18个不同浓度6_BA,2,4-D,NAA和KT组合的MS培养基上进行愈伤组织诱导、不定芽分化和增殖及生根的培养。得到诱导马齿苋愈伤组织的最佳条件是:初代培养基:MS 3%蔗糖 6_BA 1 mg/L 2,4_D 1 mg/L;丛生芽增殖培养基:MS 3%蔗糖 KT 3 mg/L NAA 0.5 mg/L;生根培养基:MS 3%蔗糖。     

大蒜花梗组织培养再生植株

取生殖期大蒜花梗,在N_6+2,4-D 2mg/L+KT 1mg/L培养基上暗培养30天后,得到微黄色愈伤组织。将愈伤组织转到N_6+2,4-D 0.5mg/L+KT 0.5mg/L培养基上继代二次,然后于N_6+BA 5mg/L+KT 1mg/L+IAA 0.01mg/L,MS(1/2大量元素)+BA 5mg/L+KT 1mg/L+IAA 0.01mg/L和MS+BA 5mg/L+KT 1mg+IAA 0.01mg/L培养基上光照培养。3周后愈伤组织上出现绿色丛生芽,将小芽转到MS(1/2大量元素)+NAA 0.01mg/L培养基上,一周后发生白色根并形成完整植株。2,4-D和KT对大蒜花梗愈伤组织发生是必要的,高浓度的细胞分裂素和低浓度的生长素有利于芽分化,高浓度NH_4~+有利于根分化,低浓度NH_4~+有利于芽分化。愈伤组织低温处理对芽的分化是必要的。另外,对花梗愈伤组织发生进行了细胞学观察。     

NAA或潮霉素对小麦成熟胚愈伤组织分化的影响

以5个栽培小麦品种诱导而来的成熟胚愈伤组织为外植体,研究了在分化培养基中加入NAA对小麦成熟胚愈伤组织分化的效果以及潮霉素浓度对不同阶段成熟胚愈伤组织分化的影响。研究结果表明,在对照的分化培养基中(含5mg/L激动素)加入0.1mg/L萘乙酸(NAA,1-naphthlcetic acid)形成的分化培养基,可显著提高4个供试小麦基因型的成熟胚愈伤组织的分化率,提高幅度达到12%～32%。不同的潮霉素浓度在"花培1号"愈伤组织的诱导阶段进行抗性筛选的结果表明,即使是在潮霉素浓度达到250mg/L时,仍有24%左右的愈伤组织存活率,这些存活的愈伤组织仍可能分化形成绿点甚至分化成苗,说明在"花培1号"愈伤组织的诱导阶段进行潮霉素抗性筛选是不适合的。5个不同小麦品种分化阶段进行潮霉素筛选具有明显的效果,但不同品种之间存在一定差异,其中:宁麦13的适宜潮霉素浓度为20mg/L,花培1号和扬麦158的适宜潮霉素浓度约为30mg/L,宁麦9和宁麦16的适宜潮霉素浓度在30～40mg/L左右。因此,我们认为,在分化阶段进行潮霉素抗性筛选是理想的筛选时期,在分化培养基中添加20～40mg/L浓度的潮霉素即可完全抑制小麦成熟胚愈伤组织的分化。本研究结果将有助于改进和完善普通小麦成熟胚遗传转化体系。     

章丘大葱子叶再生体系建立及再生株倍性鉴定

以章丘大葱子叶为材料,研究了不同激素配比对愈伤组织诱导和继代、芽分化、芽点的伸长及根诱导的影响,并对获得的再生植株进行了鉴定。结果表明,诱导章丘大葱子叶产生愈伤组织、愈伤组织的继代培养、愈伤组织芽分化、芽点的伸长及诱导生根的最佳培养基及激素配比分别为：MS+2,4-D 2.0mg/L+KT 0.5mg/L、MS＋2,4-D 2.5mg/L＋KT 0.5mg/L、MS+2,4-D 0+KT 1.0mg/L、MS+KT 0.5mg/L和MS基本培养基;试管苗经驯化移栽后,共有22株成活,成活率为92%,对成活的再生植株进行形态学、叶片气孔及根尖染色体鉴定表明,共有3株发生变异,其中2株为外部形态上的变异,而另一株为染色体的加倍变异。     

Regeneration of Pea (Pisum sativum L.) Plantlets by in vitro Culture of Immature Embryos

Plant regeneration was achieved from immature embryo-derived, calli of Pisum sativum. Embryo axes were separated from cotyledons and cultured on different media containing BAP and NAA until plantlet regeneration. Rooting of the plantlets was obtained on MS medium supplemented with 2 mg/1 IBA. Frequency of regeneration was shown to be under the influence of the genotype. Histological preparations showed de novo origin of the shoots via organogenesis. Out of 2C regenerated plantlets, 11 were diploids (2n = 14) arid 9 aneusomatic (chromosomal mosaics) with chromosome numbers ranging from 12 to 16.     

直接诱导不定芽的矮牵牛再生体系的建立

以矮牵牛的叶片作为外植体,研究了不同浓度的激素配比对叶片直接诱导不定芽、诱导愈伤组织分化不定芽及生根的影响。得到了最适的直接诱导不定芽培养基的激素配6-BA1.5mg/L+IBA0.5mg/L、诱导愈伤组织分化不定芽的培养基的激素配比6-BA1.5 mg/L+NAA0.3~0.5 mg/L及生根培养基IBA0.03~0.05 mg/L。并在时间上,从芽的长势、芽的生根情况进行比较,结果表明：直接诱导的不定芽比诱导愈伤组织分化的不定芽所需的时间短、长势好、生根快。     

影响细毛山药离体快繁和再生因素的研究

利用植物组织培养技术建立细毛山药茎尖培养和离体再生体系,探索影响山药组培的因素.结果表明:6-BA 2.0mg/L+ NAA 0.5 mg/L能很好的诱导出愈伤组织;将诱导出的愈伤组织接种在KT 2.5 mg/L+ NAA 0.02 mg/L和KT2.0mg/L NAA 0.03 mg/L上都可分化出4～5个芽,且接种在KT 2.0 mg/L+ NAA 0.03 mg/L上分化出的芽可直接长成健壮的植株.KT 1.5 mg/L+ NAA 0.02 mg/L培养基对腋芽有较好的增殖效果,增值系数可达到3.8.将芽接种到KT2.0mg/L+ IAA 0.2 mg/L培养基上可健壮成长,也可作为继代培养基.     

Intergeneric hybridization between Brassica species and Crambe abyssinica

A protocol for high frequency callus induction and plant regeneration from sunflower (Helianthus annuus L.) anthers is described. Different variables using Murashige & Skoog (MS) basal medium supplemented with 2.0 mg/l α-naphthaleneacetic acid (NAA) and 1.0 mg/l N₆-benzyladenine (BA) were tested for their ability to enhance the frequency of anther callusing and subsequent embryogenesis. Of these, agar concentration, sucrose concentration, carbohydrate source had significant effect on callusing, while differences due to incubation under dark vs light conditions, cold pretreatment of capitula for 1 to 6 days prior to anther inoculation and genotype on callusing were non-significant. However, all these factors exerted highly significant influence on embryogenesis when calli from the various media were transferred to medium supplemented with 0.1 mg/l NAA and 0.5 mg/l BA. With the procedure developed, callusing as high as 100% and embryo formation at a frequency of 44% was achieved. Although complete embryos were formed the frequency of their conversion to whole plantlets was low (14.3%). Hence, the embryogenic pathway was bypassed to obtain multiple shoots by transferring embryogenic calli with developing embryos to MS medium supplemented with 0.5 mg/l BA. Elongated shoots rooted on half-strength MS medium supplemented with 0.5 mg/l NAA. Cytological analysis of embryogenic callus and somatic embryos revealed haploids at a frequency of 30% while that of rooted plants showed haploid regenerants at a frequency of 8.3%. Nevertheless, the frequency of putative haploid plants could be enhanced through mass multiplication using nodal explants of the regenerants. This revised version was published online in August 2006 with corrections to the Cover Date.