Isolation and characterization of a novel 45 kDa calponin-like protein from anterior byssus retractor muscle of the mussel Mytilus galloprovincialis

SUMMARY: A calponin-like protein of 45 kDa was isolated from mussel anterior byssus retractor muscle (ABRM) and its inhibitory effects on actomyosin Mg²⁺-ATPase was demonstrated. The 2-D electrophoresis for ABRM myofibrils gave a spot of 45 kDa protein in addition to myofibrillar proteins such as myosin and actin. The 45 kDa protein, which was more basic and showed a slightly higher molecular weight than actin, was isolated by ion-exchange chromatography and subjected to chymotryptic digestion. N-terminal amino acid sequencing of polypeptide fragments produced gave two sequences, ASQKGMTSFGAVRHH and GMDRALISKMGSKYDSGL, both of which showed a high homology to those of vertebrate calponins and invertebrate calponin-related proteins. Furthermore, the 45 kDa protein strongly reacted with commercially available antibody raised against chicken smooth muscle calponin, demonstrating that the mussel ABRM 45 kDa protein is a new member of the calponin family. Then, actomyosin Mg²⁺-ATPase activity of ABRM was measured in the presence and absence of the 45 kDa protein. The 45 kDa protein clearly inhibited actomyosin Mg²⁺-ATPase activity in a dose-dependent manner as in the case of other vertebrate calponins. These results indicate that the 45 kDa calponin-like protein is involved in the thin filament-associated regulation of molluscan smooth muscle contraction, possibly of a unique contraction called catch.     

Cu2+、Zn2+、Co2+对雨生红球藻生长的影响

以单细胞雨生红球藻为试验材料,以MAV为培养基通过单因子试验和正交试验研究了Cu2 、Zn2 、Co2 3种微量元素离子对雨生红球藻生长的影响。单因子试验结果表明,Cu2 、Zn2 、Co2 最佳质量浓度分别为2.0×10-7、3.4×10-7、9.0×10-7mol/L。正交试验结果表明,Cu2 的最适质量浓度是2.0×10-8mol/L;Zn2 的最适质量浓度是3.4×10-7mol/L;Co2 的最适质量浓度是6.0×10-7mol/L.。在这3种重金属离子的正交试验中在所研究的浓度范围内Cu2 和Co2 存在着较显著交互作用。     

水体中钙和镁对凡纳滨对虾幼体成活率和生长的影响

在相同饲养条件下,Ca2 浓度为494 mg/L时,幼虾增重效果显著(P<0.05);Mg2 浓度为1 185mg/L的增重效果显著优于1 135 mg/L水平;Ca2 浓度为444和494 mg/L时,分别对提高M3育成P1和P10的成活效果具有极显著作用(P<0.01);Mg2 浓度为1 185 mg/L和Ca2 浓度为494 mg/L(R=2.40)的交互作用对提高M3育成P10的成活效果最佳(P<0.01);Ca2 浓度为444和494 mg/L时,其R值可适范围分别为2.67~2.78和2.30~2.50。Ca2 浓度是影响凡纳滨对虾增重和成活的主要因子,但对体长增长无显著影响(P>0.05),其可适范围为444~494 mg/L;Mg2 浓度对凡纳滨对虾的生长影响均不显著;Ca2 浓度和Mg2 浓度的交互作用极显著影响凡纳滨对虾M3育成P10的成活率。     

EDTA对鱼类EOG的影响及其在渔业养殖中使用剂量的探讨

观测5种浓度的EDTA对EOG的影响,研究EDTA对Cu~(2+)、Zn~(2+)、Hg~(2+)、Cd~(2+)、pb~(2+)、及cu~(2+)+Zn~(2+)中毒鱼的解毒效应,并探讨使用剂量、依据及其可能原理。结果表明:当EDTA与各种金属离子比例为1:1时,解毒效果最佳。     

表面活性剂与重金属对泥鳅的联合毒性研究

在实验室条件下,研究了阴离子表面活性剂(LAS)与重金属(Cu2 、Cd2 )对泥鳅的联合毒性。结果表明:LAS、Cd2 、Cu2 对泥鳅单独作用24 h、48 h、96 h的LC50分别为15.43、13.87、12.94 mg/L;23.75、20.86、19.46 mg/L和1.56、0.52、0.21 mg/L。LAS-Cd2 对泥鳅联合作用24 h、48 h、96 h的AI值分别为0.74、1.04、1.48;Cd2 -Cu2 对泥鳅联合作用24 h、48 h、96 h的AI分别为1.47、0.39、0.27;联合毒性效应均为毒性增强的协同作用。LAS-Cu2 对泥鳅联合作用24 h、48 h、96 h的AI分别为0.10、0.26、-0.25。24 h、48 h内表现为协同作用;96 h后表现为拮抗作用。     

基于卤水的养殖用水中Ca2+/Mg2+对凡纳滨对虾生长及体内SOD和AKP的影响

淡水稀释取自盐场的卤水,调节Ca2 、Mg2 的质量浓度和比例,设置系列梯度,进行凡纳滨对虾的养殖试验,测定生长比速及超氧化物歧化酶(SOD)和碱性磷酸酶(AKP)的酶活性。试验表明,过高或过低的Ca2 质量浓度都会影响凡纳滨对虾的存活和生长,在Ca2 质量浓度为320 mg/L,Ca2 /Mg2 为1∶2.5时,其存活与生长最佳;同时SOD和AKP酶活性也最高。酶活性可以指示凡纳滨对虾的生长状况。     

Ca~(2+)对鱼类EOG的影响及其解毒作用的探讨

研究四种浓度Ca~(2+)溶液对罗非鱼嗅电图(electro-olfactogram,简称EOG)的影响,探讨Ca~(2+)对重金属中毒鱼的解毒效应,并讨论其可能机制。结果表明,①Ca~(2+)对罗非鱼EOG具双重效应;②Ca~(2+)能使重金属中毒鱼的EOG幅值增高,反映其具有一定的解毒作用,效果顺序为Hg~(2+)>Cu~(2+)>Zn~(2+)>Cd~(2+);③Ca~(2+)对Cu~(2+)+Zn~(2+)混合液也具一定解毒作用。     

Cd2+、Hg2+、Pb2+抑制罗非鱼EOG反应的研究

将不同浓度Ｃｄ２＋、Ｈｇ２＋、Ｐｂ２＋液分别灌注罗非鱼嗅觉器官,研究其对ＥＯＧ反应的影响。结果表明,这３种离子对ＥＯＧ反应均呈抑制效应,抑制作用的大小与金属离子的种类及浓度有关,Ｃｄ２＋、Ｈｇ２＋、Ｐｂ２＋有效ＩＣ５０分别为３３．９１、６７．７３、１９１．４４μｇ／Ｌ;毒性顺序为：Ｃｄ２＋＞Ｈｇ２＋＞Ｐｂ２＋。     

Cu2+、Zn2+和Cd2+对茂名海域文昌鱼酸、碱性磷酸酶的影响

试验结果表明,在Cu2+质量浓度为0.096 mg/L水体中生活的文昌鱼酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(ALP)均不受抑制作用,在Cu2+质量浓度为0.16、0.256、0.356 mg/L水体中生活的文昌鱼的ACP、ALP活性均显著受抑制(P＜0.05),随时间延长和质量浓度升高,抑制作用增强.在Zn2+质量浓度达到0.195 mg/L时,文昌鱼的ALP与对照组同期相比受抑制作用显著(P＜0.05),随质量浓度增加,受抑制作用增强;ACP在Zn2+质量浓度达到0.39 mg/L时,文昌鱼ACP第10 d影响不显著(P＞0.05),第20 d和30 d表现出显著(P＜0.05)抑制作用,超过这一质量浓度,受抑制作用增强.在Cd2+水体中生活的文昌鱼ALP在Cd2+质量浓度为0.4 mg/L时,抑制显著(P＜0.05),在此质量浓度水体中的文昌鱼ACP在第30 d测定时也表现为抑制显著(P＜0.05),随时间延长和质量浓度增加,文昌鱼ACP、ALP活性受抑制作用增强,在最高质量浓度为2.0 mg/L时,至中期已经死亡.     

Cu2+、Zn2+、Co2+、Ni2+、Li+对西藏拟溞的急性与联合毒性效应

分别将Cu~2+,Zn~2+ Co~'+,Ni~2+和Li~+按照等对数间距法设置浓度梯度,测定其对西藏拟溞(Daphniopsis tibetanaSars)的急性毒性,根据各单种金属的48 h EC_50值,按毒性1:1等距离设置浓度梯度测定这些金属离子对西藏拟溞的联合毒性.结果表明,西藏拟溞对这5种金属离子表现出了较高的耐受性,其毒性由强到弱依次为铜、锌、钻、镍、锂,其24 h EC_50分别为12.75 mg/L,18.32 mg/L,83.26 mg/L,196.97 mg/L,386.34 mg/L;48 h EC_50分别为3.27 mg/L,4.96 mg/L,27.49 mg/L,66.09 mg/L和325.42 mg/L.联合毒性实验中,Cu+Zn,Co+Ni,Co+Li,Ni+Li,Co+Ni+Li,Cu+Zn+Li和Cu+Zn+Co+Ni+Li对西藏拟溞的毒性效应为拮抗作用,而Cu+Zn+Li,Cu+Zn+Ni和Cu+Zn+Co+Ni对西藏拟溞表现出先拮抗作用后协同作用的毒性效应.西藏拟搔对金属离子有较高的耐受性,特别是对含有锂的金属离子组合往往表现为拮抗作用的特征,这很可能是西藏拟搔在西藏高锂盐湖中可高密度存活和快速生长的适应性机制.本研究旨在了解西藏拟溞对金属离子的耐受性,探讨其作为金属离子测试生物的可行性,并为大规模培养中培养液条件优化提供理论依据.     

补充CO2对光生物反应器培养新月菱形藻的影响

为了优化光生物反应器培养微藻的条件,研究了在充空气的基础补充CO2对光生物反应器培养新月菱形藻(Nitzschiaceae closterium)生长和光合作用的影响.实验表明,补充CO2(含1 000μL/L CO2的空气)促进新月菱形藻的生长,藻细胞密度和生物量显著高于对照组(CO2含量350μL/L)(P＜0.05).补充CO2也能够提高藻细胞叶绿素a和类胡萝卜素的含量(P＜0.05),但是对叶绿素b没有显著影响(P＞0.05).补充CO2能够显著提高指数生长期的最大光合速率(Pm)、光合作用效率(α)和光合作用饱和光强(Ik)(P＜0.05).结果表明,CO2是光生物反应器培养微藻的限制因子之一,补充CO2能够提高微藻的生物量.     

LAS与Cu2+单一及复合污染对泥鳅肝脏SOD、CAT活性的影响

采用暴露试验法研究了十二烷基苯磺酸钠（LAS）与Cu^2＋单一及复合污染对泥鳅肝脏超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）活性的影响。试验结果表明,单一LAS处理96h后,SOD活性变化不显著,CAT在LAS为20．0mg／L时被显著诱导（P〈0．05）;单一的Cu^2＋处理96h后,泥鳅肝脏SOD、CAT活性受到显著影响（P〈0．05）,随着质量浓度的增加,表现为先诱导后抑制;LAS、Cu^2＋复合处理条件下,LAS为10．0mg／L时,CAT、SOD活性分别在Cu^2＋质量浓度为0．05、0．10mg／L时达到最低值,LAS为20．0mg／L时,CAT、SOD活性有所回升,但其活性仍低于对照组,且差异均达到显著水平（P〈0．01）。通过比较,发现泥鳅肝脏CAT活性变化更能反映出污染物对泥鳅的毒性作用。     

Mn~(2+)对四尾栅藻生长及Ca~(2+)、Mg~(2+)吸收的影响

通过实验室模拟培养的方法,采用6个不同Mn2+浓度(0、10、100、1000、10000、30000nmol/L)的培养处理,对四尾栅藻(Scenedesmus quadricauda)的生物量、叶绿素a含量、培养基中Ca2+、Mg2+离子的含量分别进行了测定。结果表明,不同Mn2+浓度对各指标均有显著影响,其中对叶绿素a含量的影响达极显著(P<0.01);低Mn2+浓度(0~1000nmol/L)促进四尾栅藻细胞生长和叶绿素a的合成,而高浓度Mn2+(30000nmol/L以上)抑制四尾栅藻细胞生长,导致生物量下降;叶绿素a含量显著降低(P<0.05);四尾栅藻细胞吸收的Ca2+、Mg2+与其生物量成正比。在所设置的浓度范围内,Mn2+并未表现出与Ca2+、Mg2+之间明显的拮抗作用。     

铜污染对扇贝内脏团抗氧化酶活性的影响

在实验室条件下,将栉孔扇贝置于不同质量浓度的Cu2+溶液中10 d,测定其内脏团过氧化氢酶(CAT),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)和超氧化物歧化酶(SOD)的活性.试验结果表明,随着Cu2+质量浓度的提高,CAT、SOD、GSH-PX的活性表现为"抑制-诱导-抑制"的规律,但整体仍是抑制的特性.扇贝内脏团组织CAT、GSH-PX、SOD对铜的早期污染均具指示作用,其中最为灵敏的指标是CAT,其次是SOD和GSH-PX .     

几种化学物质对西施舌幼虫附着和变态的诱导技术

采用添加不同化学诱导物的方法，研究了肾上腺素（EPI）、氨基丁酸(GABA)、L-多巴（L-DOPA）、Ca²⁺对西施舌眼点幼虫附着和变态的诱导作用，确定了化学诱导物 最佳诱导浓度。结果表明,EPI对西施舌附着和变态的诱导效果最为显著，当EPI浓度为10^-4 mol·L^-1时，附着率及变态率分别为88.3％及92.8％，同时成活率也高达98.14％；GABA亦有较好的诱导效果，当GABA浓度为10^-5 mol·L^-1，附着率及变态率分别为86.9％及87.6％；L-DOPA能诱导西施舌眼点幼虫变态，当L-DOPA浓度为10^-6 mol·L^-1时，变态率达73.3％，附着率达84.9%. Ca²⁺最适宜浓度为20 mmol·L^-1时，附着率、变态率及成活率分别为86.1％、42.8％和87.4％。以上4种化合物最适宜浓度诱导作用时，西施舌幼虫的附着率和变态率均显著高于对照组。实验还对Ca²⁺在西施舌大规模人工育苗中的诱导作用进行探讨。     

水产品气调保鲜技术研究进展

主要介绍了气调包装(Modified atmosphere packaging,MAP)保鲜技术在水产品中的应用及其研究现状.MAP技术能够通过抑制微生物的生长等机制延长水产品货架期.MAP混合气体中的CO2为抑菌的关键成份,O2也是重要成份.MAP水产品的品质和货架期取决于包装气体的成份及比例、储藏温度、原料种类及原料初始品质、混合气体的体积与包装物料的质量比(V/W)和包装材料等因素,其中储藏温度是关键因素.MAP水产品的腐败主要是一种或几种特定腐败菌(Specific Spoilage Organisms,SSOs)导致的;耐CO2的发光杆菌属(Photobacterium phosphoreum)为MAP鳕的特定腐败菌;嗜冷乳酸菌是多种MAP水产品的特定腐败菌.同样条件下,MAP水产品的品质和安全性优于真空包装和空气包装.     

铜离子对铜绿微囊藻的急性毒性效应

以BG11为基础培养基研究了实验室条件下重金属Cu^2＋在不同质量浓度下对铜绿微囊藻的急性毒性效应。试验结果表明,Cu^2＋对藻类的抑制效应随Cu^2＋质量浓度的增加而增加：质量浓度为0．3～1．2mg／L的Cu2^＋对铜绿微囊藻生长的抑制作用不显著,且48h后出现藻细胞密度反弹现象,杀藻效果不理想。质量浓度为1．5mg／L的Cu^2＋对铜绿微囊藻细胞产生很强的毒性,可有效抑制铜绿微囊藻的生长,96h时杀藻率高达97．4％,Chll_a含量抑制率达87．7％,光合放氧量明显降低,抑制率达83．3％,呼吸耗氧量明显增强。不同质量浓度Cu^2＋可影响铜绿微囊藻的生长及生理活动,1．5mg／L的Cu^2＋是抑制铜绿微囊藻生长的最有效质量浓度。     

镉污染对肠浒苔毒性作用研究

以肠浒苔中Chl_a含量、SOD活性、POD活性、CAT活性及可溶性蛋白含量等为指标,研究分析了不同浓度Cd2 对肠浒苔的胁迫作用。结果表明,较低浓度Cd2 对肠浒苔5项指标参数值均较对照组有一定的提高,随着Cd2 浓度的增加,5项指标参数值均下降,其中,浓度>10μmol/L时,CAT、POD活性逐渐下降;>15μmol/L时,Chl_a含量、SOD活性、可溶性蛋白含量下降。高浓度的Cd2 对肠浒苔具有明显的胁迫作用。