东方百合试管成球和种球低温处理的研究

利用外源激素、蔗糖和低温处理,对东方百合品种索蚌进行组织培养,研究其茎尖分生组织分化、试管成球和种质保存。结果表明,鳞片诱导小子球的最适培养基为MS＋6-BA1.0mg／L＋NAA 0．2mg／L;茎尖诱导和分化的最适培养基为MS＋6-BA1．0mg／L＋NAA 0.5mg／L;试管成球的最适蔗糖浓度为75g/L。8周5℃低温处理对组培苗的生长有利;-1℃低温对百合种质保存有利。     

东方百合快繁培养基优化与脱毒技术研究

摘 要：【研究目的】为实现百合种球的国产化,繁育大量的优质种球,笔者以东方百合的西伯利亚和索邦品种为材料,研究东方百合茎尖诱导、继代增殖和生根的最佳培养基,并比较不同的组织培养方法的脱毒效果。【方法】设置不同的激素浓度梯度筛选东方百合茎尖诱导、继代增殖和生根的最佳培养基,并比较新鲜百合球茎尖培养、冷藏处理百合球的茎尖培养、鳞片培养、鳞片扦插苗茎尖培养和试管苗茎尖培养等5种组织培养方法的脱毒效果。【结果】试验结果表明,百合茎尖诱导的适宜培养基为MS + 2.0mg/L 6-BA + 0.1mg/L NAA,芽形成的适宜培养基为MS + 1.0mg/L 6-BA + 0.5 mg/L NAA,苗形成的适宜培养基为MS + 1.0mg/L 6-BA + 0.08mg/L NAA,生根的适宜培养基为1/2MS + 0.4mg/L NAA + 4%AC (Active Charcoal)。病毒检测表明试管苗茎尖培养的脱毒效果最好,但成活率较低;冷藏处理百合球的茎尖培养的脱毒效果也较好且成活率较高。【结论】筛选的东方百合各阶段的培养基配方能满足东方百合快速扩繁的技术要求,茎尖培养在东方百合依然是较好的脱毒方法。     

亳菊茎尖愈伤组织诱导与再生植株的研究

[目的]研究亳菊茎尖组织培养技术,为亳菊产业化生产提供科学依据。[方法]在不同的MS培养基中,考察不同浓度的6-BA、NAA对亳菊茎尖愈伤组织、丛生芽、再生植株诱导的影响。[结果]茎尖诱导愈伤组织的最佳培养基为MS＋1.00 mg/L6-BA＋0.30mg/L NAA,以MS＋0.50 mg/L6-BA＋0.10 mg/L NAA为芽的诱导培养基,芽诱导率达100%;最佳的生根培养基为1/2MS＋0.30 mg/L IBA。[结论]通过亳菊茎尖愈伤组织培养技术,可以达到快速繁殖的目的。     

台湾百合离体快繁技术初探

以台湾百合为实验材料,对其离体快繁技术做了初步探索。实验表明：诱导台湾百合分化愈伤组织的最适培养基为 MS +2,4-D(0.5mg/L)+NAA(0.1mg/L)+6-BA(2.5mg/L);诱导台湾百合分化不定芽的最适的培养基为 MS +NAA(0.1mg/L)+6-BA(1.5mg/L);促愈伤组织分化不定芽的最适培养基 MS +NAA(0.1mg/L)+6-BA(1.0mg/L);最适生根培养基为 MS +NAA(0.5mg/L) +6-BA(1.0mg/L);诱导子房分化的最适培养基为 MS +NAA(0.5mg/L)+6-BA(1.0mg/L)。     

白术茎尖的离体快繁研究

[目的]建立白术茎尖的离体快繁体系,筛选最佳培养基。[方法]以白术的茎尖为外植体,设置7种附加NAA、IBA、6-BA不同浓度配比的MS培养基进行茎尖诱导分化与增殖培养,设置5种附加不同浓度NAA的1／2MS培养基进行生根培养,将驯化后的试管苗置于草木灰与草炭土（1：2）的混合基质进行移栽试验。[结果]7种诱导分化与增殖培养基中,MS＋6-BA0．4mg／L＋NAA0．1mg／L的培养基有利于白术芽的萌发,芽成活率达100％;MS＋6．BA0．5mg／L＋NAA0．1mg／L的培养基有利于诱导丛生芽增殖。5种生根培养基中,以1／2MS＋NAA0．1mg／L＋活性炭0．5g／L诱导白术生根的效果最佳,生根率达66．7％。驯化后的试管苗在草木灰和草炭土的混合基质中培养,试管苗成活率高。[结论]该研究为白术实现工厂化育苗及药用次生代谢产物研究提供了试验依据。     

东方百合“索邦”离体培养技术探索

[目的]研究东方百合＂索邦＂的离体培养技术。[方法]以东方百合＂索邦＂的鳞片为外植体,考察了不同激素浓度配比和鳞茎不同部位对不定芽诱导的影响。[结果]以MS＋2.0 mg/L 6-BA＋0.5 mg/L NAA培养基诱导出芽效果最好,其诱导率为60%。鳞茎不同部位诱导出芽的能力依次为中部〉外部〉内部,并将诱导出的不定芽转接到生根培养基（1/2MS＋0.1 mg/L 6-BA＋0.1 mg/L NAA＋0.2%活性炭）中,其生根率可达100%。[结论]东方百合＂索邦＂离体再生体系的建立对于减少我国对进口百合种球的依赖,扩大国产百合的生产有着重要的意义。     

龙吐珠组培快繁技术初探

[目的]探究龙吐珠最佳组织培养方案。[方法]以马鞭草科龙吐珠叶片、茎段、腋芽为外植体,进行组培快繁技术研究。[结果]最适宜外植体为茎段;最适宜消毒处理是消毒剂为0．1％升汞溶液,消毒时间为6min。产生侧芽的最佳培养基为1／2MS＋6-BA1．00mg／L＋NAA0．05ms／L＋IBA0．50mg／L,最适愈伤组织诱导及继代培养基为1／2MS＋6-BA2．00mg／L＋NAA0．10mg／L,平均诱导率为86．2％;最适分化培养基是1／2MS＋6-BA1．00mg／L＋NAA0．10mg／L＋KT 0．20mg／L,平均分化率为76．7％;不定芽的最适生根培养基是1／2MS＋N从0．01mg／L,其生根率为100％。[结论]该方案可为龙吐珠规模化生产提供技术支持。     

藻百年的组培快繁技术研究

[目的]研究藻百年（Exacum tetragonum）的离体培养和快速繁殖技术。[方法]利用藻百年的茎尖和茎段作为外植体进行组织培养和快速繁殖。[结果]结果表明,MS＋6-BA2mg/L＋NAA0.2 mg/L＋蔗糖30 g/L＋琼脂8 g/L为最适诱导培养基;MS＋6-BA1 mg/L＋NAA0.1 mg/L＋蔗糖30 g/L＋琼脂8 g/L为最适增殖培养基,1/2 MS＋NAA0.3 mg/L＋蔗糖30 g/L＋琼脂8 g/L为最适生根培养基。[结论]该研究可为其他龙胆科植物的组织培养与快速繁殖提供方法参考。     

山药茎尖脱毒试管苗分化培养基的筛选

[目的]筛选山药茎尖脱毒苗分化培养基配方。[方法]选用MS为基础培养基,6-BA、2,4-D、NAA为激素处理因素和不同激素浓度处理水平的3因素3水平的试验设计,进行了山药茎尖脱毒苗分化培养基的筛选研究。[结果]MS＋2.0mg/L6-BA＋1.0mg/L2,4-D＋3.0mg/LNAA为山药茎尖脱毒苗最佳分化培养基。[结论]该培养基能达到山药茎尖离体脱分化与分化之间的一种良好的平衡,是一种进行山药茎尖脱毒苗培养适宜的分化培养基。     

枇杷不同外植体组织培养比较

[目的]为缩短枇杷繁育周期及利用转基因技术培育枇杷新品种奠定基础。[方法]以“冠玉”枇杷的种子、茎尖、幼嫩茎段为外植体进行无菌苗研究。[结果]种子萌发率高,可达100％。茎尖在培养基MS＋6-BA1．2mg／L＋NAA0．6mg／L＋GA30．5mg／L上展叶最好。茎段在培养基MS＋6．BA1．5mg／L＋NAA0．3mg／L＋GA30．5mg／L上萌芽最好,萌芽率达68．9％,其次为MS＋6-BA1．2mg/L＋NAA0．4mg／L＋GA、0．5mg／L。茎段在培养基MS＋6-BA1．5mg／L＋NAA0．3mg／L＋GA30．5mg／L上诱导不定芽最好,其次为MS＋6．BA1．0mg／L＋NAA0．2mg／L＋GA30．2mg／L。初代无菌苗在培养基MS＋6-BA1．5mg／L＋NAA0．3mg／L上增殖最好。[结论]培养基成分的调配对外植体的萌发、增殖有很大影响,尤其是激素浓度。     

湖州雪藕的茎尖离体培养技术研究

[目的]为莲藕种藕的快速繁殖提供参考。[方法]以湖州主栽莲藕品种"迟来早"的地下茎尖为外植体,考察不同消毒时间和消毒方式(0.1%HgCl2、1.0%NaClO+0.1%HgCl2)对外植体的消毒效果,并研究取材时间和培养基中6-BA、NAA浓度对外植体分化的影响。[结果]HgCl2和NaClO联合对外植体消毒效果最好;最佳诱芽培养基为MS+1.0 mg/L6-BA+0.2 mg/L NAA;莲藕地下茎处于冬季休眠期时取材最佳,外植体分化率最高;将再生芽接种到培养基MS+1.0 mg/L6-BA上进行增殖,然后挑选生长良好的芽苗接种到生根培养基MS+0.1 mg/L6-BA+1.0 mg/LIBA+0.2%AC上可正常生根。[结论]该研究确定了莲藕品种"迟来早"地下茎尖的最佳离体培养条件。     

生姜芽的组培快繁

[目的]寻找生姜芽组培快繁的最佳方案。[方法]以MS为基础培养基,设计生姜芽组培快繁的两条途径,选择生姜芽组培快繁的最佳培养基配方。[结果]结果表明,茎尖→芽最适培养基为:改良MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L;茎尖→愈伤组织→芽,茎尖诱导愈伤组织的最适培养基为:改良MS+2,4-D 2.0 mg/L+KT 1.0 mg/L,愈伤组织诱导芽分化的最适培养基为:改良MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L。采用超净工作台上用75.0%酒精30 s+10.0%NaClO 15 min+0.1%HgCl210 min+50 ug/L青霉素与台外消毒相结合对外植体进行表面消毒,去污效果最佳。[结论]对愈伤组织进行切割并继代培养后再诱导芽分化,可获得较大的增殖倍数。     

红掌组培快繁技术优化研究

[目的]对红掌组培快繁技术体系进行优化。[方法]以红掌红粉佳人品种为材料,通过设置不同的基本培养基和激素配比,研究红掌的不定芽诱导、增殖和生根等情况,以筛选出最佳的培养配方和方法。[结果]最佳愈伤组织诱导和不定芽分化培养基为MS+6-BA1.0 mg/L+2,4-D 0.1 mg/L+NAA 0.1 mg/L,其愈伤组织诱导率为73.3%,不定芽分化率为90.9%;在增殖培养基MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L上诱导出的芽数量与大小最适宜;生根培养以1/2MS+NAA 0.2 mg/L+活性炭1.0 g/L培养基表现最好;移栽基质以珍珠岩+草炭土(1∶1)混合栽培基质成活率最高,达95.6%。[结论]为红掌种苗的工厂化生产提供了参考。     

海南钻喙兰原球茎的形态建成和快速繁殖

[目的]为海南钻喙兰的组培快繁提供依据。[方法]以钻喙兰种子作外植体,研究了不同诱导培养基、增殖培养基、生根培养基在钻喙兰组培快繁中的效果。[结果]诱导类原球茎体以MS附加6-BA1.0 mg/L+NAA0.1 mg/L的激素配比较好,分化时间短。增殖培养基为MS+6-BA0~3.0 mg/L+NAA0~0.2 mg/L,以MS+6-BA3.0 mg/L+NAA0.1 mg/L效果最好,平均增殖系数为3~8,把生长健壮并具有2~3片真叶的单个小芽,转接到生根培养基1/2 MS+NAA1.0 mg/L上,经60 d培养,即可获得生长健壮的完整植株。钻喙兰试管苗的移栽基质以粗椰糠∶河沙=1∶1的比例混合较好,湿度80%~90%,移栽成活率达90%以上。[结论]海南钻喙兰种子在温度(25±2)℃,光照强度1 500~2 000lx,光照时间12 h/d的条件下,最适诱导培养基为MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.1 mg/L;最适增殖培养基为MS+6-BA3.0 mg/L+NAA0.1 mg/L,生根培养基为1/2 MS+NAA1.0 mg/L。     

芦荟快繁体系建立的研究

[目的]为大规模快速生产芦荟组培苗提供理论和实践依据。[方法]以3个芦荟品种的茎尖分生组织为外植体,用含不同浓度6-BA和NAA的增殖培养基和含不同浓度NAA的生根培养基进行组织培养,研究不同培养基对芦荟组织发育的影响。[结果]在诱导芦荟侧芽分化的过程中,增殖培养基成分为MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L时,诱导效果比较理想,平均诱导出3.6个芽;在诱导生根的过程中,生根培养基成分为MS+NAA 0.2~0.3 mg/L时,生根率较高,平均生根数为7.8~8.2条,根较长且都为正常根。[结论]芦荟组织培养和快繁的培养基最佳配方为:增殖培养基MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L、生根培养基MS+NAA 0.2~0.3 mg/L。     

猫须草组织培养研究

[目的]研究猫须草离体培养的最佳激素配比和最佳培养基。[方法]以猫须草幼嫩茎段为外植体,以MS为基本培养基,比较不同浓度和不同种类的生长激素对茎段腋芽萌发、愈伤组织增殖及丛生芽生根的影响。[结果]6-BA可促进腋芽萌发,分化丛生芽。随着6-BA浓度的增加,萌发腋芽的数量反而减少,当6-BA的浓度大于2.5 mg/L时,茎段便不再长出腋芽,而是在其顶端出现愈伤组织。在一定浓度范围内,随着2,4-D浓度的增加,愈伤组织的生长就越旺盛,当2,4-D浓度为2.0 mg/L时,愈伤组织增殖效果最好。NAA浓度为1.0 mg/L时诱导茎段生根效果最好,生根率达到100%。[结论]适宜的诱导培养基为MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.1mg/L,适宜继代增殖培养基为MS+2,4-D2.0 mg/L,茎段生根的适宜培养基为MS+NAA1.0 mg/L。     

钩藤组培技术体系研究

[目的]寻找快速获得整齐一致钩藤苗的方法。[方法]以钩藤当年生枝条和带芽茎段为外植体进行组织培养试验。[结果]最佳芽诱导培养基为MS＋6-BA0.2 mg/L＋NAA0.1 mg/L＋IBA0.2 mg/L,最佳增殖培养基为MS＋6-BA2.0 mg/L＋NAA0.2 mg/L,最佳生根培养基为1/2MS＋NAA2.0 mg/L＋活性炭0.03%。[结论]该研究可为钩藤的产业化生产提供理论与技术支撑。     

蓬莪术的离体快繁研究

[目的]探索蓬莪术的离体快繁技术。[方法]以蓬莪术嫩叶、块茎和根为外植体,接种在以MS为基本培养基,外加不同浓度激素组合的培养基上进行愈伤组织诱导、增殖和分化培养;以幼芽为外植体,进行幼芽的增殖、生根培养和移栽等。[结果]诱导蓬莪术叶、块茎和根的愈伤组织形成的最适培养基为MS＋2,4-D1.0 mg/L＋6-BA0.5～1.0 mg/L＋NAA0.3 mg/L,其中蓬莪术叶诱导率最高,达96%;愈伤组织增殖和分化培养还有待进一步研究。幼芽最适增殖培养基为MS＋6-BA3.0 mg/L＋NAA0.1 mg/L＋KT1.0 mg/L,其增殖倍数达3.5以上;而生根培养基以1/2 MS＋NAA1.0 mg/L＋6-BA0.5 mg/L为最佳,生根率达100%,其移栽成活率达85%以上。[结论]该研究结果为蓬莪术的快速繁殖及工厂化生产奠定了基础。     

棣棠花组织培养与快速繁殖技术研究

[目的]提高棣棠花育苗繁殖速度。[方法]以棣棠花嫩茎为外植体,进行组织培养与快速繁殖研究。[结果]在MS＋2．0mg／L 6-BA＋0．2mg／L NAA培养基中,簇生芽分化数最多,质量最好,分化率这100％;在MS＋1．0mg／L 6-BA＋0．5mg／L KT＋0．1mg/L NAA培养基中,增殖倍数最高,为11．87;在1／2MS＋0．1mg／L NAA培养基中生根效果最好,每个嫩茎基部有3～5条根;炼苗成功后移栽成活率达96％。[结论]诱导簇生芽的最佳培养基为NS＋2．0mg／L 6-BA＋0．2mg／L NAA,继代培养的最佳培养基为MS＋1．0mg／L 6-BA＋0．5mg/L KT＋0．1mg／L NAA,再生苗在1／2 MS＋0．1mg／LNAA的培养基上生根效果较好。     

椒样薄荷脱毒苗的规模化生产研究

[目的]更新伊犁地区的椒样薄荷品种,对伊犁地区椒样薄荷进行提纯及复壮。[方法]采用组培技术对椒样薄荷品种进行茎尖脱毒、离体快繁及大规模生产。以椒样5号为材料,研究大规模生产下椒样薄荷茎尖分化、增殖、生根的最适激素浓度。[结果]可使用白砂糖和琼脂条代替蔗糖、琼脂,降低经济成本;大规模生产时,最适椒样薄荷增殖培养基为1/2 MS+0.5 mg/L 6-BA+0.01 mg/L NAA,最适生根培养基为1/2 MS+0.10 mg/L NAA。[结论]大规模组培不同阶段所使用基本培养基不同,激素组合也不同,大规模生产时以经济节约为主;利用茎尖快繁技术可快速更新换代椒样薄荷品种。