银杏叶提取物对大鼠大脑皮质中凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达量的影响

为探讨银杏叶提取物（EGb）对去卵巢大鼠神经细胞的保护作用及其机制，采用免疫组织化学SP法检测了假手术大鼠、去卵巢大鼠和去卵巢后用EGb治疗大鼠的大脑皮质中凋亡相关蛋白Bcl～2和Bax的表达量。结果，与假手术大鼠相比，摘除双侧卵巢的大鼠大脑皮质中Bcl-2阳性细胞的数目和表达强度极显著下降（P〈0．01），Bax阳性细胞的数目和表达强度极显著增加（P〈0．01）；用EGb对摘除双侧卵巢的大鼠治疗后，其Bcl-2阳性细胞的表达强度极显著增加（P〈0．01），而Bax阳性细胞的数目极显著下降（P〈0．01），Bax阳性细胞的表达强度也显著下降（P〈0．05）。结果表明，摘除双侧卵巢后大鼠因缺乏内源性雌激素而导致大脑皮质中凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达量发生了改变，而EGb能通过上调Bcl-2和下调Bax蛋白的表达对神经细胞起保护作用。     

银杏叶提取物对急性肝衰竭大鼠肝脏Bcl-2及Bax表达的影响

为了观察银杏叶提取物(ginkgo biloba extract,GBE)对由硫代乙酰胺(TAA)所致肝损伤大鼠肝脏的作用及其对Bcl-2、Bax的影响,并探讨其作用机制,试验将大鼠分5组,其中GBE低、中、高剂量组(50,100,200 mg/kg)连续灌服GBE 30 d,1次/d,正常对照组和模型组分别给予等体积的生理盐水;模型组和GBE低、中、高剂量组在第28天用300 mg/kg的TAA腹腔注射,正常对照组腹腔注射等体积的生理盐水,连续3 d,于末次注射后24,48,72小时采血,用试剂盒检测血清中谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)的水平,并用RT-PCR和Western-blot方法检测各组肝脏Bcl-2、BaxmRNA和蛋白水平的表达情况。结果表明:与正常对照组相比,模型组血清中ALT、AST水平明显升高,在肝脏中Bcl-2 mRNA表达水平下调,Bcl-2蛋白水平在48小时时达到最低点,而Bax mRNA和蛋白水平均上调;与模型组相比,GBE组血清中ALT、AST水平明显降低,肝脏中Bcl-2 mRNA和蛋白水平均上调,Bax mRNA和蛋白水平均下调。     

银杏叶提取物对肉仔鸡脾脏淋巴细胞增殖及IL-2分泌影响的血清药理学研究

本试验旨在采用血清药理学方法研究银杏叶提取物(EGB)对肉仔鸡脾脏淋巴细胞增殖及分泌白介素-2(IL-2)的影响。试验采用基础日粮(对照)和基础日粮中分别添加0.009%金霉素及0.15%、0.20%、0.25%EGB的4种日粮饲喂肉仔鸡。21、42日龄时,采血并制备对照组、金霉素组和EGB含药血清,然后分别加入到体外培养的由伴刀豆球蛋白A(ConA)诱导的肉仔鸡脾脏淋巴细胞中,再分别用MTT法、ELISA法测定淋巴细胞增殖的变化和IL-2的分泌量。结果表明:EGB含药血清能显著促进由ConA诱导的肉仔鸡脾脏淋巴细胞增殖和IL-2分泌(P<0.05),而且EGB含药血清的作用效果好于金霉素组含药血清,表明EGB含药血清可促进由ConA诱导的肉仔鸡脾脏淋巴细胞增殖和分泌IL-2。     

雌激素对大鼠小脑中Bcl-2和Bax蛋白表达的影响

采用免疫组织化学超敏SP法检测摘除卵巢及用外源性17β-雌二醇治疗后SD大鼠小脑中Bcl-2和Bax蛋白表达的变化.结果显示,摘除双侧卵巢后,SD大鼠小脑皮质及深层核团中Bcl-2的表达有不同程度的降低,而Bax的表达出现不同程度的上升;给予外源性17β-雌二醇治疗后,2种蛋白的比例基本恢复正常.表明,雌激素能够下调小脑皮层及小脑深层核团中Bax蛋白的表达,上调Bcl-2蛋白的表达,对小脑神经元具有保护作用.     

银杏叶提取物对肉鸡免疫性能的影响

为了探讨银杏叶提取物对肉鸡免疫性能的影响,试验将360只1日龄雏鸡随机分为4组,每组设3个重复,每个重复30只。对照组饲喂基础日粮,试验1～3组分别在基础日粮中添加0．15％、0．30％、0．45％银杏叶提取物,检测其对肉鸡免疫器官指数和血清中蛋白含量的影响。结果表明：银杏叶提取物能显著提高肉鸡胸腺指数和血清球蛋白的含量（P〈0．05）。说明在日粮中添加一定水平的银杏叶提取物对肉鸡免疫性能有促进作用。     

银杏叶提取物对肉鸡免疫功能的试验

试验采用单因子试验设计,选择360只1日龄健康AA肉仔鸡,全部为母雏。随机分成5个处理组,每个处理组设6个重复,每个重复12只鸡,饲喂42天。在肉鸡饲养的第21、28、42日龄,分别从每组中随机选取12只鸡(每个重复2只),测定其免疫器官相对重量,血清免疫球蛋白,外周血、脾脏淋巴细胞转化率。结果显示,适量添加银杏叶提取物能提高肉鸡的生长性能和免疫功能。     

固始鸡免疫器官内细胞凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的动态表达

应用免疫组织化学技术和Leica 显微图像处理系统,对细胞凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2在固始鸡免疫器官内的动态表达进行了研究。结果：Bax蛋白在不同发育阶段固始鸡免疫器官内均有表达,但表达量不同;Bax蛋白表达于固始鸡免疫器官内淋巴细胞细胞膜、细胞质和细胞核;Bax蛋白表达阳性细胞在固始鸡不同免疫器官内分布位置不同,呈散在或簇团状分布：脾脏内不同部位均有分布,主要在动脉周围淋巴鞘、红髓、淋巴小结边缘、边缘区,很少出现在淋巴小结内;胸腺内主要分布于胸腺小叶的皮质与髓质交界处,其次是胸腺小叶髓质,极少出现于皮质;法氏囊内阳性细胞主要分布于黏膜靠近上皮细胞的固有膜层内、淋巴滤泡间的区域,在淋巴滤泡边缘的少量淋巴细胞也有Bax蛋白表达,淋巴滤泡内极少有阳性细胞。Bcl-2蛋白在固始鸡免疫器官内的表达与Bax相似,但表达量与Bax相比较少。以上结果表明,细胞凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2参与了固始鸡免疫器官内淋巴细胞发育分化过程中的凋亡调控,对免疫器官的稳定发挥重要作用。     

银杏叶提取物对肉鸭前期生产性能的影响

选200只1日龄商品代樱桃谷肉鸭,根据体重相近、公母各半的原则分成4个组,分别为对照组和3个银杏叶提取物(EGB)处理组。每组50只,设5个重复,每个重复10只。对照组日粮中不添加EGB,处理1～3组日粮中EGB的添加量分别为200、400、800mg/kg。饲养到21日龄,40只被屠宰用于胴体测定(每组5只公、5只母)。结果表明,EGB显著提高了肉鸭的屠宰率、半净膛率、全净膛率(母鸭分别提高6.00%、6.60%、5.85%;公鸭分别提高4.89%、4.15%、3.38%)。对于母鸭,EGB极显著降低了肝脂(15.73%),显著提高了肝脏指数(10.08%)和皮脂率(8.02%);对于公鸭,各处理降低了腹脂率,分别为24.29%、38.57%和25.71%,但差异不显著。     

银杏叶提取物对发酵乳贮藏期理化和感官特性的影响

[目的]考察不同添加量银杏叶提取物对发酵乳贮藏期品质的影响。[方法]采用持水率、黏度、乳酸菌活菌数、抗氧化能力、感官评价方法测定不同添加量银杏叶提取物制备的发酵乳,并结合多元统计分析方法进行分析。[结果]银杏叶提取物对乳酸杆菌和链球菌的活力没有显著影响,为保证活菌数在1.0×107 CFU/g以上,建议该发酵乳最多冷藏9天。在酸奶中添加银杏叶提取物可提高其抗氧化特性。添加银杏叶提取物的酸奶样品与对照组在风味和口感方面存在差异,且添加量越大差异越明显。[结论]银杏叶提取物本身作为一种中成药,具有成为一种新的功能性酸奶成分的巨大潜力。     

饲喂银杏叶提取物加蝇蛆对鸡免疫性能及血清生化指标的影响

本试验研究了饲喂银杏叶提取物加蝇蛆对鸡部分血清生化指标和免疫性能的影响.选取240只1日龄的AA肉仔鸡随机分为6组,每组40只.对照组饲喂基础日粮,其余各组分别为在基础日粮中添加1％蝇蛆,0.1％、0.3％、0.6％银杏叶提取物以及0.1％银杏叶提取物加1％蝇蛆,饲喂至45日龄.结果显示:①与对照组相比,添加银杏叶提取物加蝇蛆可以降低血清尿素氮水平(P＜0.05),对谷草转氨酶指标无显著影响(P＞0.05),甘油三酯与总胆固醇含量有所降低;②饲喂银杏叶提取物加蝇蛆可提高血清蛋白含量,促进免疫器官的生长.表明饲喂银杏叶提取物加蝇蛆可降低鸡的血脂和尿素氮水平,促进免疫器官发育.     

雌激素对去卵巢大鼠大脑皮质和海马中Bcl-2和Bax蛋白表达的影响

利用免疫组织化学超敏SP法检测SD大鼠摘除卵巢及外源性17β-雌二醇治疗后大脑皮质和海马中Bcl-2和Bax蛋白表达的变化.结果显示,摘除双侧卵巢后,大鼠大脑皮质和海马中Bcl-2不同程度降低,而Bax的表达出现不同程度的上升,17β-雌二醇治疗后,2种蛋白的表达基本恢复正常.表明雌激素能够不同程度的上调大脑皮质和海马中Bcl-2蛋白的表达,下调Bax蛋白的表达,从而对大脑皮质及海马神经元具有保护作用.     

氟对体外培养绵羊成骨细胞Bcl-2和Bax基因表达的影响

目的:探讨氟对体外培养成骨细胞凋亡相关基因Bcl-2和Bax基因表达的影响。方法:采用酶完全消化法分离2～3月龄胎羊颅盖骨成骨细胞,加入不同浓度(0～10-3mol/L)NaF,作用24h后,提取细胞总RNA并反转录成cDNA,通过实时荧光定量PCR方法,检测成骨细胞Bcl-2和Bax基因表达的变化。结果:1.0×10-5mol/LNaF组Bcl-2基因表达水平较对照组高,其他组Bcl-2表达水平均比对照组低;各NaF浓度组Bax基因表达量均比对照组高,且5.0×10-4mol/L组最高;除1.0×10-5mol/LNaF组外,Bcl-2/Bax比值均比对照组低,且5.0×10-4mol/L组最低。结论:高浓度NaF可能增加成骨细胞线粒体膜的通透性,下调Bcl-2 mRNA表达,上调Bax mRNA的表达,可能启动了线粒体凋亡信号转导途径。     

17-β雌二醇对去卵巢大鼠垂体中Bcl-2和Bax表达的影响

为了探讨雌激素对垂体细胞发育和凋亡的影响,利用免疫组化SP法检测摘除卵巢及补充外源性17-β雌二醇后的不同时间大鼠垂体中Bcl-2和Bax表达的变化。结果显示：假去卵巢组（SHAM）Bcl-2和Bax的表达在不同给药时间无显著变化（P〉0.05）;同时间去卵巢（OVX）组与SHAM、去卵巢并注射17-β雌二醇组（OVX＋E2）相比,差异均显著（P〈0.05）;去卵巢给药后6周,OVX组垂体内Bcl-2的表达与之前相比有所增加,而Bax则减少,给药后8周,各组与6周后相比无显著差异（P〉0.05）;同组Bcl-2的表达随时间逐渐减少,4周后最少,Bax的表达则逐渐增加,4周后达到该组的峰值。结果表明,雌激素在垂体的结构维持和功能发挥中起一定的调节作用。     

脾虚模型小鼠肾脏中Bcl-2、Bax和Fas蛋白表达研究

目的:采用灌胃法诱导SD清洁级小鼠脾虚动物模型,造模完成后检测小鼠肾脏中Bcl-2、Fas和Bax蛋白表达的改变,并探讨其意义。方法:采用大承气汤诱导小鼠脾虚模型,H.E染色后光镜下观察肾脏局部形态,SP法检测Bcl-2、Fas和Bax蛋白在肾脏细胞中的表达。结果:脾虚组小鼠肾小球部位出现炎症,肾近曲小管和远曲小管部位出现凝固性坏死;肾脏细胞中Bax和Fas蛋白的表达率升高(P<0.05),Bcl-2表达降低(P<0.05)。结论:脾虚会引发肾脏发生病理变化,同时会使Bax和Fas蛋白的表达升高,Bcl-2蛋白的表达下降,增加了肾脏细胞发生凋亡的机率。     

枸杞多糖对双酚A暴露小鼠生精细胞Caspase-3、Bcl-2和Bax蛋白表达的影响

研究枸杞多糖(LBP)对双酚A(BPA)暴露小鼠睾丸生精细胞中Caspase-3、Bcl-2和Bax凋亡蛋白表达的影响.将50只成年雄性昆明小鼠随机分为A、B、C、D、E共5组,每组10只.除正常对照组(A组)注射等量橄榄油外,其余4组小鼠分别腹腔注射20 mg·kg 1的BPA,连续7d,建立生精损伤模型.同时C、D、E组小鼠分别灌服7d不同剂量的LBP(50、100、200 mg·kg-1),正常对照组(A组)和模型组(B组)小鼠灌服等量生理盐水.制备组织切片观察睾丸组织病理学变化,免疫组化法测定睾丸组织Caspase-3、Bax和Bcl-2凋亡蛋白的表达.结果显示,BPA可极显著增加睾丸生精细胞Caspase-3和Bax的阳性细胞数量(P＜0.01),降低Bcl-2的表达(P＜0.05).补充不同剂量LBP后,Caspase-3的阳性表达均极显著低于模型组(P＜0.01).200 mg·kg-1 LBP组生精细胞Bax的阳性细胞数量极显著低于模型组(P＜0.01);Bcl-2的表达随LBP剂量的增加而提高,其中200 mg·kg1LBP组阳性表达极显著高于模型组(P＜0.01),Bcl-2/Bax比值也随着LBP剂量的增加而上升.结果表明,枸杞多糖通过调节凋亡相关基因的表达,抑制生精细胞凋亡,从而缓解双酚A引起的雄性生殖损伤.     

圆弧青霉菌毒素—青霉酸对小鼠脾脏组织细胞凋亡和Bcl-2、Bax及Fas/FasL基因mRNA表达的影响

为探讨圆弧青霉菌毒素—青霉酸对小鼠脾脏组织的毒性作用,采用TUNEL法和RT-PCR对染毒后脾脏细胞凋亡和Bcl-2、Bax及Fas/FasL等凋亡相关基因mRNA表达的影响进行研究。结果表明,随着青霉酸染毒剂量的增加,脾脏组织中细胞凋亡数量逐渐增多。染青霉酸低剂量组脾脏组织中Bcl-2、Fas和FasL的表达增加,Bax表达下降,高剂量组和中剂量组中Bax、Fas和FasL表达增加,Bcl-2表达下降,说明青霉酸可能通过促使Bax、Fas/FasL表达增加和Bcl-2表达降低来诱导小鼠脾脏细胞的凋亡。     

牦牛Bcl-2、Bax基因克隆及其在生殖轴上的表达分析

试验旨在分析Bcl-2与Bax基因的序列特性,并分析其在母牦牛生殖轴上的表达特点,为探讨其在牦牛繁殖活动中的调控作用奠定基础。试验采集健康母牦牛与母黄牛下丘脑、垂体、卵巢、输卵管及子宫组织样品,通过RT-PCR扩增并克隆Bcl-2与Bax基因,并采用生物信息学软件进行序列分析;利用实时荧光定量PCR法检测Bcl-2与Bax基因在牦牛与黄牛不同组织中的表达差异。结果表明,牦牛Bcl-2编码区全长690 bp,编码229个氨基酸;与黄牛Bcl-2基因核苷酸序列同源性最高,为99.86%,其次是山羊、绵羊,同源性分别为98.41%、97.97%;系统进化树表明,牦牛与黄牛亲缘关系最近。牦牛Bax基因编码区全长579 bp,编码192个氨基酸,与黄牛、藏山羊和金堂黑山羊同源性较高,分别为99.83%、99.48%和99.48%,其次是绵羊、马、人,同源性分别为99.14%、95.34%、94.30%;系统进化树表明,牦牛与黄牛亲缘关系最近。Bcl-2和Bax蛋白不存在信号肽,均为酸性不稳定的疏水蛋白。Bcl-2与Bax基因在黄牛及牦牛下丘脑、垂体、卵巢、输卵管和子宫组织中均有表达,其中牦牛卵巢、子宫中Bcl-2基因表达量分别显著和极显著高于黄牛（P<0.05;P<0.01）;牦牛子宫、输卵管中Bax基因表达量显著高于黄牛（P<0.05）,牦牛卵巢中Bcl-2/Bax比值极显著高于黄牛（P<0.01）,子宫和垂体中显著高于黄牛（P<0.05）。表明Bcl-2与Bax在动物进化中非常保守且在繁殖活动中起重要作用,牦牛卵巢、子宫、输卵管和垂体中的高表达量可能与牦牛处于极端恶劣环境的细胞抗凋亡作用有关。