红假单胞菌属光合细菌的一种规模化培养方法

为了研究红假单胞菌属光合细菌的规模化培养方法,2015年1月5日至2016年4月26日,将淡水鱼配合饲料与自来水混合后放置在玻璃温室,于有机玻璃柱中腐烂、发酵培养,培养期间不添加其他物质,也不添加菌种种源。实验过程中,随着饲料的腐烂,容器内壁上逐渐出现了暗红色物质附着,并且附着面积逐渐扩散到整个内壁,然后水体也逐渐转变为暗红色。结果显示,饲料腐烂过程中,水体TN、TP和TOC最高可分别达近1 200 mg/L、700 mg/L和2 700 mg/L,随后水体TN、TP和TOC出现降低趋势。微生物高通量测序分析结果显示,当水体呈现暗红色时,附着态微生物样品和浮游态微生物样品均以红假单胞菌属为最大的优势属,红假单胞菌属在附着态样品和浮游态样品中的相对丰度分别达到73.19%和54.31%,即实现了浮游态和附着态红假单胞菌属光合细菌的高密度培养。推断本实验中红假单胞菌规模化培养方法的机理:首先,异养菌降解饲料原料为小分子物质,随后在适当的水温、光照等物理因素的影响下,其中高浓度的氮、磷、碳以及金属离子、维生素、微量元素等小分子物质满足了红假单胞菌的高密度生长需求而大量生长成为优势种类。这提供了一种利用水产配合饲料与水一起发酵进行红假单胞菌属光合细菌规模化培养的方法,可为其他降解大分子有机物的异养菌的规模化培养提供参考。     

渔用荚膜红假单胞菌商品保存技术

为优化渔用荚膜红假单胞菌(Rhodopseudomona capsulata)商品保存技术,首先对实验室选育保存的高效荚膜红假单胞菌(菌种NC01)进行菌种扩大培养,再采用正交试验方法,研究不同的保存温度、菌液pH值、包装桶规格、透光度、颜色对渔用荚膜红假单胞菌商品保存期的影响,并采用单因素试验方法,研究在菌液中添加保护剂后的保存效果。结果显示,在商品菌液中添加0.5g/L维生素C,调节菌液pH值7.0,采用5L透光度2 500lx的绿色塑料桶包装,在温度25℃下保存效果最好。应用最适宜保存技术保存渔用荚膜红假单胞菌商品两个月,菌液的有效活菌数≥2.76×109个/mL,比普通保存技术提高了67.27%,两者差异显著(P0.05),为渔用荚膜红假单胞菌商品的保存提供了一种全新、有效的保存技术。     

太空条件对荚膜红假单胞菌的生理指标及水质净化效果的影响

高活性水质净化的荚膜红假单胞菌的穿刺培养物和菌悬液搭载第18颗返回式卫星,并分别在培养基中添加诱变剂硫酸二乙酯。实验结果发现,搭载菌株的菌落形态发生变异,菌株的生长周期、生理学指标也发生了改变,通过对搭载荚膜红假单胞菌进行筛选获得2株水质净化能力较大幅度提高的优良突变菌株。通过性状稳定性研究,发现该菌株能较稳定地降低COD、氨氮值,提高溶解氧,从而达到净化水质效果。     

糊状光合细菌的生长培养与特征

糊状光合细菌制品所用菌中,经鉴定属球形红假单胞菌（Ｒｈｏｄｏｐｄｅｄｏｍｏｎａｓ ｓｐｈｅｒｏｉｄｅｓ）。在增殖培养后,浓缩成糊状光合细菌,再培养７－９ｄ后,吸收光谱值（ＯＤ）可达到１．９０８,其产品跟踪检测浓缩比可达到４０：１,水分含量小于９４％,生物量为１．２％￣２．０％,比活率为９５％￣２０３％。经２年贮藏,糊状光合细菌的复活性能及技术指标稳定,不影响使用价值。     

一株海南土著荚膜红细菌的培养特性

针对筛选到的一株海南土著的高活性荚膜红细菌(Rhodobacter capsulatus)菌株QH03,开展其最适培养条件研究。结果显示:其最适碳源为乙酸钠和酵母膏,最适氮源为氯化铵和硫酸铵,适宜光照强度为3000~8 000lx,最适温度为30~35℃,最适初始pH为7.0~7.5,最适盐度为10‰~30‰。     

红假单胞菌培养噬菌蛭弧菌的研究

为探索环保型的噬菌蛭弧菌宿主菌菌种,本文用红假单胞菌作为宿主菌进行了培养噬菌蛭弧菌的研究,系统地探索了pH值、缓冲系及温度等环境因子对培养效果的影响。实验表明用红假单胞菌培养噬菌蛭弧菌,其环境影响因子、出斑时间、出斑数量、培养收获浓度等方面均与大肠杆菌无差异,最佳培养条件为25℃～30℃、pH值7．0～8．0、PBS缓冲系、并添加一定量的钙、镁离子,光合细菌中红假单胞菌可完全取代污染菌大肠杆菌培养噬菌蛭弧菌,生产环保型的蛭弧菌制剂,并简化了生产程序。并建立了蛭弧菌的培养采收标准,同时初步提出了一种简易的蛭弧菌浓度的计算方法——裂解系数计算法。     

球形红假单胞菌对三角帆蚌养殖水体水质的影响

将红螺菌科的红假单胞菌应用于三角帆蚌养殖水体,测定水化学环境因子变化情况。结果表明,光合细菌可稳定养殖水体pH,去除氨氮、亚硝酸盐氮、总氮,降低COD,促进水体氮循环,改善养殖水体水质。按水体体积计算,红假单胞菌密度109/mL的菌液合理施用量为0.1%。     

固定化浓缩光合细菌对河蟹的促生长影响

根据昆山巴城地区以河蟹为主要养殖品种的特点,我们应用固定化浓缩光合细菌(PSB)对其进行了促生长试验。试验使用的菌种主要由红假单胞菌属的球形红假单胞菌和荚膜红假单胞菌组成,培养方法参照Weaver等(l975)的方法,扩大培养至菌体密度达5×l09个/毫升时收获,6000转/分离心,弃去上层清液,收获PSB浓缩菌体密度达5×l010个/毫升,作为试验用菌液。PSB的固定化采用吸附法,将离心后收集的l0倍浓度PSB浓缩液以硅藻土为吸附剂吸附在表面使其固定化。使用前将固定化浓缩PSB在营养液中活化24小时,使硅藻土内PSB的活性得到恢复和强化。试验分…     

粘稠性荚膜红假单胞菌对黄沙鳖稚鳖水质及生产性能的影响

通过对黄沙稚鳖养殖池进行pH值、DO、氨氮、亚硝酸盐和COD水质指标的测定和比较,探讨荚膜红假单胞菌对黄沙鳖稚鳖养殖池水质及生产性能的影响。结果表明：使用英膜红假单胞菌后,试验池与对照池相比较,水体中的溶氧量提高了31．17％,pH值平缓波动,显著降低水中氨氮含量,下降幅度达74．08％,加快了水中氨氮转化量,减少了氨氮的毒害作用,成活率提高了9．5％,重量增加了9．79kg,发病率降低30．33％,治愈率高达19．5％。     

蒙脱石对水相中沼泽红假单胞菌的吸附研究

通过测定吸附条件对吸附率及吸附菌量的影响,研究了蒙脱石对水相中沼泽红假单胞菌（Rhodopseudomonas palustris）的吸附特性。结果表明,当蒙脱石重量为0．5g时,吸附菌量和吸附百分率均达到较恒定的状态,且受到菌液起始浓度和体积的影响。不同pH条件下,蒙脱石对菌的吸附率随着pH值的升高而逐渐降低,当pH=9时,有效吸附率为72．67％。蒙脱石对菌的吸附率与离子强度成反比。不同温度条件下,蒙脱石对菌的吸附率呈现出先升高、后降低的趋势,温度30℃时吸附率最高,为86．55％。表明蒙脱石对水相中菌的吸附不仅依赖于生物体的化学属性和表面属性,也受到环境温度等条件的影响。     

粘稠性荚膜红假单胞菌对黄沙鳖稚鳖水质及生产性能的影响

探讨了荚膜红假单胞菌对黄沙鳖稚鳖水质及生产性能的影响.结果表明:使用荚膜红假单胞菌后,试验池与对照池相比较,水体中的溶氧量提高了31.17％,平缓pH值波动,显著降低水中氨氮含量,下降幅度达74.08％,加快了水中氨氮转化量,减少了氨氮的毒害作用.成活率提高了9.5％、重量增重了9.79 kg,其发病率比后者降低30....     

光合细菌浓缩技术研究

通过本技术研发的糊状光合细菌产品是采用紫色非硫光合细菌中的球型红假单胞菌为菌种，经平板分离选育后，进行液体种子培养。一般当菌体pH达到9．00，OD值（680nm）1．6—2．0时，进行移种。接种量在15％以上，进行光合细菌增殖培养。培养周期一般5天，OD值在1.5—1．6左右即可收获。将液体光合细菌菌液种加0．5％左右的絮凝剂。     

沼泽红假单胞菌对波吉卵囊藻常温保存效果的影响

波吉卵囊藻（Oocystis borgei）是亚热带对虾高位池养殖水体常见的优势种,对于稳定池塘生态结构,保持良好水体环境具有重要的意义.研究常温下波吉卵囊藻的保存效果有利于波吉卵囊藻的简易保存和虾类养殖的直接投入使用,以便推动水产养殖行业的微藻生态调控.在25℃、30℃和35℃下研究了不同沼泽红假单胞菌（Rhodopseudomonas palustris）浓度对波吉卵囊藻保存效果的影响.结果显示,在25℃、30℃和35℃下波吉卵囊藻保存的成活率、叶绿素a（Chl-a）质量浓度,以及恢复培养后的比增长率和ρ（Chl-a）与沼泽红假单胞菌添加浓度呈正相关,1.94×10^6个·mL-为最佳浓度;25℃为最适保存温度,但是在30℃下保存后恢复生长时发现比增长率要比25℃下保存的高（0.432）.因此,25℃下添加沼泽红假单胞菌浓度为1.94×10^6个·mL^-1时波吉卵囊藻的保存效果最佳,成活率达到87.5％,p（Chl-a）为31.14 μg·L^-1,经恢复培养后比增长率为0.424,p（Chl-a）为55.94 μg·L^-1.     

高活性光合细菌的分离培养及应用

本文分别从海滩污泥，高产虾池底泥和养虾消化道分离得到红螺菌光合细菌。经紫外线诱变和试验优选出高产、高活、耐药的菌株４株，分别为英腹红假单胞菌，沼泽红假单胞菌，胶质红假单胞菌和嗜酸红假单胞菌，作为生产用菌种。单因子试验表明，ＮＨ４－Ｎ去除率达５２％以上。经简易培养的生产菌液，在１９９３年对虾育苗生产中，变态率达７９．８％，成活率达７５％，在对虾养殖中，提高溶解氧２．０８ｍｇ／Ｌ以上，明显改善水环境，     

沼泽红假单胞菌对罗非鱼养殖水质及生长的影响

为探讨不同浓度的沼泽红假单胞菌(有效活菌数≥5×109个/mL)对罗非鱼养殖水质及生长的影响,采用单因子试验方法,试验共设4个处理,其中1#、2#、3#为试验组,依次在水体中投放3种不同浓度的沼泽红假单胞菌(4mg/L、6mg/L和8mg/L),每隔10d泼洒一次;4#为空白对照组。试验养殖180d,分6次测定水体pH值、溶氧量、化学需氧量(COD)和总无机氮(TIN)含量,试验结束起捕计算罗非鱼的产量、均末重、成活率以及饵料系数作为生产性能的评判指标。试验结果表明,试验组投放沼泽红假单胞菌能稳定水体pH值,提高溶氧量,有效抑制水体化学需氧量(COD)和总无机氮(TIN)等有毒物质的产生,试验组的平均单位产量、均末重和成活率均显著高于对照组4#(P<0.05),而饵料系数显著低于对照组4#(P<0.05)。多重比较来看,投放浓度为6mg/L组效果最好,单位面积产量最高。说明在水体中投放沼泽红假单胞菌,有效地改善养殖水体的水质状况,提高饵料转化率,促进鱼生长,增强抗病力,可在罗非鱼养殖区域大面积示范推广应用。     

光合细菌菌剂在提高板蓝根品质中的应用研究

为比较光合细菌菌剂与沼泽红假单胞菌(Rhodopseudomonas palustris)的生理生态特性,分析了不同初始菌量的菌剂PG和菌株PSB-1对实验水体氨氮(

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几种金属离子对沼泽红假单胞菌2-8生长和亚硝酸盐消除的影响

在培养基中添加一定浓度金属离子,研究了不同浓度铜离子（Cu2＋）、镁离子（Mg2＋）、锌离子（Zn2＋）、铁离子（Fe3＋）和锰离子（Mn2＋）对沼泽红假单胞菌（Rhodopseudom onas palustris）2-8株生长和亚硝酸盐消除能力的影响。结果发现,1×10-7mol.L-1Cu2＋刺激菌株生长和亚硝酸盐消除,1×10-4mol.L-1Cu2＋抑制生长和亚硝酸盐消除,1×10-6mol.L-1和1×10-5mol.L-1的Cu2＋抑制生长,但刺激亚硝酸盐消除;1×10-4mol.L-1Mg2＋刺激菌株生长和亚硝酸盐消除;不同浓度Zn2＋对菌体生长影响不显著,但浓度为1×10-6mol.L-1和1×10-7mol.L-1时刺激亚硝酸盐消除,浓度大于1×10-6mol.L-1时抑制亚硝酸盐消除;Fe3＋促进生长,浓度越高生长越好,对菌株亚硝酸盐消除的影响则刚好相反;不同浓度Mn2＋均抑制菌株生长,1×10-6～1×10-3mol.L-1Mn2＋抑制亚硝酸盐消除。受测定的5个金属离子中除1×10-4mol.L-1Cu2＋对菌株亚硝酸盐消除能力的抑制较强外,其他离子的抑制会随时间推移逐渐消失。     

光照、氧气、pH和盐度对沼泽红假单胞菌2-8菌株生长和亚硝酸盐消除的影响

以1株具有亚硝酸盐消除能力的沼泽红假单胞菌（Rhodopseudomonas palustris）2-8菌株（简称2-8菌株）为材料,研究了不同光照和氧组合、pH、盐度对菌株生长和亚硝酸盐消除能力的影响。结果发现,光照厌氧条件最利于2-8菌株的生长,该条件下菌株亚硝酸盐消除能力最强,25h消除率达（91.33±1.27）%;菌株在pH7.0时生长和亚硝酸盐消除能力最强,25h亚硝酸盐消除率达到（95.58±4.34）%,在pH9.0以上和5.0以下时基本不生长;菌株在w（NaCl）为0和0.4%的培养基中生长和亚硝酸盐消除能力最强,在w（NaCl）为0.8%～2.0%的培养基中,生长和亚硝酸盐消除能力随w（NaCl）增高而减弱。测定的4个环境因子主要通过影响菌株的生长来影响其对亚硝酸盐的消除能力。     

五种中草药对河蟹腐败假单胞菌的抑菌作用

分别采用钢环法和试管法研制了大黄、乌梅、五倍子等五种中草药对河蟹腐败假单胞菌的抑菌和杀菌效果。结果表明，乌梅对该菌有一定的抑制作用，五种中草药在供试浓度范围内对该菌均均杀灭作用。     

海洋光合细菌的分离培养研究

光合细菌是一大类具有光合色素,能在厌氧光照条件下进行光合作用的原核生物的总称。由于光合细菌对鱼类具有明显的促生长作用,还有防治鱼虾疾病、净化养殖水质等多方面的功能近年来普遍受到水产科研部门的重视。我们从1989年开始对这类光合细菌进行了分离、培养,特别在分离、培养适用于海水养殖池的光合细菌菌株方面进行了较多的培养试验,并在实验室扩大培养中取得成功,1989—1990两年应用于生产性养虾池的试验研究均取得明显的效果。本文就海洋光合细菌的分离、培养试验报告如下: