中药补肾方联合恩替卡韦对乙肝患者肝纤维化、炎症反应及免疫功能的影响

目的 探讨中药补肾方联合恩替卡韦治疗对乙肝患者肝纤维化、炎症反应及免疫功能的临床观察。方法 将60例乙肝患者随机分为联合组和单药组,每组各30例,单药组给予恩替卡韦片口服治疗（0.5 mg/次,1次/日,连续治疗6个月）,联合组在此基础上给予中药补肾方口服治疗（1剂/日,早晚各服1次,连续治疗6个月）。对比两组患者治疗3、6个月时的中医临床证候积分、血清中肝纤维化指标、外周血中免疫细胞含量及血清中细胞因子含量情况。结果 治疗3、6个月后,两组患者中医临床证候积分均降低,联合组降低程度高于单药组,差异有统计学意义（P<0.05）;两组患者HA、LN、PC-Ⅲ、Ⅳ-C均降低,联合组降低程度高于单药组,差异有统计学意义（P<0.05）;两组患者外周血中CD3⁺、CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺均升高,联合组升高程度高于单药组,CD8⁺均降低,联合组降低程度高于单药组,差异有统计学意义（P<0.05）;两组患者血清IL-15、IL-16、TGF-β均降低,联合组降低程度高于单药组,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 中药补肾方联合恩替卡韦治疗能有效改善乙肝患者的临床证候,能够调节免疫应答、炎症反应,以及能延缓肝纤维化,值得临床作进一步推广。     

蜂胶类黄酮对糖尿病合并肺结核患者外周血WBC与T淋巴细胞亚群的影响

目的 探讨蜂胶类黄酮对糖尿病合并肺结核（diabetes mellitus complicated with pulmonary tuberculosis,DM-PTB）患者外周血中WBC与T淋巴细胞亚群的影响。方法 以DM-PTB患者120人为对象,利用随机数字表采用完全随机法分成A（蜂胶黄酮1 000 mg/d）、B（蜂胶黄酮2 000 mg/d）、C（条件对照）三组,每组40人,观察6个月,比较综合治疗前后白细胞计数（WBC）及分类（淋巴细胞L和中性粒细胞N）、T淋巴细胞亚群CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺数量及CD4⁺/CD8⁺比值的变化,并比较组内前后差异和组间差异。结果 三组7项观测指标自身前后配对差值（治疗后-治疗前）的均数比较Hotelling T²=515.359,P=0.000;治疗7项观测指标差别Wilks λ=0.017,P=0.000,其中多重比较结果为WBC的B组大于A与C组,L的B组> A组> C组,N的B组大于A与C组,CD3⁺的B 与A组大于C组,CD4⁺的B组>A组>C组,CD4⁺/CD8⁺比值多重比较结果为B 与A组大于C组。结论 蜂胶类黄酮能提高DM-PTB患者的细胞免疫水平。     

加味参附姜苓汤对围月经期咳嗽变异性哮喘患者血清IL-4、IFN-γ和IL-8表达的影响

目的 研究加味参附姜苓汤对围月经期咳嗽变异性哮喘患者血清炎性因子IL-4、IFN-γ和IL-8表达的影响,为其临床治疗提供科学的实证依据。方法 将围月经期咳嗽变异性哮喘患者80例,随机分为观察组（40例）和对照组（40例）。观察组患者采用加味参附姜苓汤进行治疗,对照组采用口服氨茶碱缓释片联合酮替芬片进行治疗,连续治疗3个月。分别采集治疗前、后各组患者的静脉血,经离心后,取血清,采用酶联免疫法检测血清IL-4、IFN-γ和IL-8表达水平。结果 经3个月治疗后,观察组总有效率为90%,显著优于对照组的72.5%（P<0.05）。与治疗前相比,观察组血清IL-4和IL-8表达显著降低（P<0.01）,IFN-γ水平显著上升（P<0.01）。与对照组相比,观察组血清IL-4、IL-8和IFN-γ表达水平差异具有统计学意义（P < 0.01,P < 0.05）。结论 加味参附姜苓汤对围月经期咳嗽变异性哮喘患者具有较好的治疗效果,其作用机制可能与其促进围月经期咳嗽变异性哮喘患者IFN-γ的表达和抑制IL-4和IL-8释放有关。     

银屑平丸对BALB/c小鼠银屑病样模型血清中IL-17、IL-23表达的影响

目的 建造BALB/c小鼠背部银屑病样模型,探讨中成药银屑平丸治疗银屑病的可能作用机制。方法 选取48只BALB/c小鼠,随机分为空白组、模型对照组、雷公藤组、银屑平丸高、中、低剂量组,8只/组。给予除空白组外其余小鼠背部皮肤外涂咪喹莫特软膏连续8 d,1次/d,建立模型小鼠。末次给药后,观察小鼠背部皮肤进行皮损面积和严重程度指数（psoriasis area and serenty index,PASI）评分;检测血清中IL-17、IL-23水平;取背部皮肤组织进行组织病理比较。结果（1）银屑平丸各组和雷公藤组对银屑病样小鼠背部皮肤PASI评分比较无明显的差异（P>0.05）,而较模型对照组和空白组评分均有明显的差异（P<0.05）。（2）各组银屑病样小鼠外周血IL-17和IL-23含量明显高于空白组（P>0.05）。而银屑平丸各组和雷公藤组均与模型对照组外周血中含量有明显的差异（P<0.05）。（3）银屑平丸各组和雷公藤组对银屑病样小鼠背部皮肤组织病理变化较模型对照组和空白组有明显差异（P<0.05）。结论 银屑平丸改善银屑病模型小鼠的作用机制可能通过抑制IL-17、IL-23,起到减轻小鼠银屑病样皮损的发生、发展的作用。     

平喘汤治疗小儿非急性期哮喘的临床疗效研究

目的 研究平喘汤治疗小儿非急性期哮喘的疗效和作用机制。方法 纳入我院80例非急性期哮喘患儿作为研究对象,随机抽签分为两组,各40例,观察组在常规糖皮质激素干预基础上加用平喘汤治疗,对照组行糖皮质激素干预治疗。比较两组治疗效果及治疗前后肺泡痰液中白细胞介素-4（IL-4）、白细胞介素-10（IL-10）、肿瘤坏死因子（TNF-α）、内皮素1（ET-1）,分析患儿肺功能第1秒用力呼气量（FEV1）与免疫功能指标CD4⁺、CD8⁺T淋巴细胞、嗜酸性粒细肥（EOS）计数]表达的关系。结果 观察组治疗总有效率为97.5%,显著高于对照组82.5%,差异有统计学意义（P< 0.05）。观察组治疗后IL-4、TNF-α、ET-1、CD4⁺T淋巴细胞、EOS计数均显著低于治疗前和对照组治疗后,IL-10、CD8⁺T淋巴细胞显著高于治疗前和对照组治疗后,差异均有统计学意义（P< 0.05）。两组患者治疗前后24小时尿游离皮质醇（24 h-UFC）、骨密度（BMD）、体质量水平及呼吸道感染发生率比较,差异无统计学意义（P> 0.05）。经一元线性回归分析,CD4⁺T淋巴细胞和EOS计数与FEV1具有显著负相关性,CD8⁺T淋巴细胞计数与FEV1具有显著正相关性。结论 平喘汤干预治疗非急性期哮喘患儿较单纯糖皮质激素治疗疗效更为显著,能显著缓解咳嗽、咳痰、喘息等临床症状,改善肺功能,且安全性高,其增效机制可能与强化抗炎效果,增强免疫功能有关。     

中药复方提取物HNA-1对SIV慢性感染恒河猴胸腺输出及胸腺细胞发育的影响

目的 探讨中药复方提取物湘A-1号方（HNA-1,湖南省艾滋病防治小组推荐免费使用的两个中药复方之一的提取物）治疗HIV-1感染及艾滋病（Acquired Immune Deficiency Syndrome,AIDS）的疗效机制。方法 用8只已感染猴免疫缺陷病毒SIVmac239 16～21个月的中国恒河猴,治疗组采用2个月的HNA-1治疗;对照组给予等体积生理盐水灌胃。在预设时间点采集外周血提取DNA,采用定量PCR检测T细胞受体重排删除环（T cell receptor excision circles,TRECs）来评价胸腺输出功能;并用酶消化法分离胸腺细胞,利用流式细胞术检测胸腺内CD34⁺前体细胞、CD4⁺T细胞发育各阶段的比例改变。结果 与模型对照组比较,HNA-1治疗组胸腺细胞输出明显增加（P<0.05）;且胸腺内CD34⁺Lin^-细胞比例明显增加（P<0.05）,胸腺双阳性T细胞（Double positive,DP）Ⅱ阶段比例减少,而DPⅢ和DPⅣ阶段比例均增加。结论 HNA-1对艾滋病的疗效可能与其能显著增加胸腺输出有关;其作用机制可能涉及增加胸腺内前体细胞数量、以及促进胸腺细胞细胞从DPⅡ阶段发育至DP Ⅲ等。     

脾虚湿蕴型荨麻疹行自血疗法与梅花针联合治疗的效果观察

目的 观察脾虚湿蕴型荨麻疹行自血疗法与梅花针联合治疗的效果。方法 随机选取本院2016年1月至2017年10月收治的脾虚湿蕴型荨麻疹患者200例,随机数字表法分为3组,66例予以自血疗法治疗者为A组,66例予以梅花针治疗者为B组,68例予以梅花针联合自血疗法治疗者为C组,对比分析3组治疗前后荨麻疹活动评分、免疫功能与复发情况。结果 治疗后,C组荨麻疹活动度评分较A组、B组低,差异有统计学意义（P<0.05）;治疗后,C组辅助性T细胞（CD4⁺）、细胞毒性T细胞（CD8⁺）及CD4⁺/CD8⁺值优于A组、B组,差异有统计学意义（P<0.05）;C组复发率较A组、B组低,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 脾虚湿蕴型荨麻疹行自血疗法与梅花针联合治疗可有效降低荨麻疹活动度评分,改善免疫功能,并且减少复发率,值得推广。     

银莱汤对发热大鼠血清IL-1β、TNF-α、IL-6含量的影响

目的 研究银莱汤对发热大鼠体温和血清IL-1β、TNF-α、IL-6含量的影响。方法 90只SD大鼠连续测温3次,选取合格大鼠背部皮下注射20%干酵母混悬液10 mL/kg建立大鼠发热模型,随机平均分为正常组、模型组、阿司匹林组、银莱汤高剂量组、银莱汤中剂量组、银莱汤低剂量组共6组,每组8只大鼠。分别于造模前0.5 h和造模后5 h两次灌胃给药,造模后每小时测温一次,于末次给药后3 h取血,通过ELISA和RIA方法检测血清中炎性介质白介素-1β（IL-1β）、白介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）含量水平。结果 银莱汤各剂量组体温均低于模型组（P<0.01）,银莱汤各剂量组血清中IL-1β、TNF-α、IL-6含量均低于模型组（P<0.05）。结论 银莱汤对发热大鼠具有明显的退热效果,其作用机制可能与降低机体炎症反应,减少血清中IL-1β、TNF-α、IL-6的产生或加速降解相关。     

健脾温肾方治疗腹泻型肠易激综合征临床疗效及对血清T淋巴细胞亚群的影响

目的 观察健脾温肾方对腹泻型肠易激综合征的临床疗效及对血清T淋巴细胞亚群的影响。方法 将符合纳入标准的患者59例随机分为2组,其中对照组29例,治疗组30例,对照组给予匹维溴铵治疗,治疗组在对照组的基础上给予健脾温肾方治疗,2组患者疗程均为4周,并随访8周。分别观察2组治疗前后临床症状积分、大便Bristol评分、生活质量评分（IBS-QOL、SF-36）、血清T淋巴细胞亚群及随访的复发率。结果 对照组总有效率为89.7%,治疗组为93.3%,两组比较差异具有统计学意义（P<0.05）。两组治疗后Bristol评分明显降低（P<0.05）,治疗后组间比较,差异具有统计学意义（P<0.05）;IBS-QOL、SF-36评分明显升高（P<0.05）,治疗后组间比较,差异具有统计学意义（P<0.05）;CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺水平与治疗前比较均明显升高（P<0.05）,治疗后组间比较,差异具有统计学意义（P<0.05）;CD8⁺水平与治疗前比较均明显升高（P<0.05）,治疗后组间比较,差异具有统计学意义（P<0.05）。对照组随访复发率为34.5%,治疗组为10%,对照组复发率明显高于治疗组（P<0.05）。结论 健脾温肾方能显著缓解IBS-D患者临床症状及改善大便性质及生活质量,提高患者的免疫功能,复发率低,且无明显不良反应。     

中西医结合治疗对帕金森患者生活质量的影响及临床疗效观察

目的 观察健脾温肾方对腹泻型肠易激综合征的临床疗效及对血清T淋巴细胞亚群的影响。方法 将符合纳入标准的患者59例随机分为2组,其中对照组29例,治疗组30例,对照组给予匹维溴铵治疗,治疗组在对照组的基础上给予健脾温肾方治疗,2组患者疗程均为4周,并随访8周。分别观察2组治疗前后临床症状积分、大便Bristol评分、生活质量评分（IBS-QOL、SF-36）、血清T淋巴细胞亚群及随访的复发率。结果 对照组总有效率为89.7%,治疗组为93.3%,两组比较差异具有统计学意义（P<0.05）。两组治疗后Bristol评分明显降低（P<0.05）,治疗后组间比较,差异具有统计学意义（P<0.05）;IBS-QOL、SF-36评分明显升高（P<0.05）,治疗后组间比较,差异具有统计学意义（P<0.05）;CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺水平与治疗前比较均明显升高（P<0.05）,治疗后组间比较,差异具有统计学意义（P<0.05）;CD8⁺水平与治疗前比较均明显升高（P<0.05）,治疗后组间比较,差异具有统计学意义（P<0.05）。对照组随访复发率为34.5%,治疗组为10%,对照组复发率明显高于治疗组（P<0.05）。结论 健脾温肾方能显著缓解IBS-D患者临床症状及改善大便性质及生活质量,提高患者的免疫功能,复发率低,且无明显不良反应。     

鼻息肉患者T淋巴细胞的活化状态及其细胞因子的分泌

目的分析T淋巴细胞膜表面标志的表达及其细胞因子的分泌,了解人鼻息肉T淋巴细胞的活化状态及Th1/Th2反应的特点。方法采用流式细胞术检测45例鼻息肉患者鼻息肉组织、外周血中T细胞膜表面标志CD3、CD69的表达和Th1代表性细胞因子IFN-γ、Th2代表性细胞因子IL-4的分泌水平,并与正常人下鼻甲黏膜及外周血的相应指标进行比较。结果（1）患者鼻息肉组织及外周血T细胞均表达CD69分子,在鼻息肉组织局部CD69分子的表达更高（P〈0.01）。而在正常人下鼻甲黏膜中几乎未见CD3^＋CD69^＋细胞。（2）鼻息肉组织及患者外周血T细胞中均检测到IL-4、IFN-γ的表达,而在正常人下鼻甲黏膜中几乎未见CD3^＋IL-4^＋和CD3^＋IFN-γ^＋细胞。与正常人相比,患者外周血中IL-4、IFN-γ的含量均升高（P〈0.01）;与同一患者外周血相比,鼻息肉组织中IL-4的含量增高（P〈0.01）而IFN-γ的含量降低（P〈0.01）。结论鼻息肉组织中的T细胞高度表达CD69分子,处于免疫活化状态,产生Th1/Th2混合模式的细胞因子,与外周血相比Th细胞因子分泌优势发生改变,可能与鼻息肉＂微环境＂形成及黏膜免疫系统有关。     

桃红四物汤对大鼠创伤性股骨头缺血坏死模型外周血中EPCs表达影响

目的 通过检测桃红四物汤对创伤性股骨头缺血坏死模型外周血中血管内皮祖细胞（endothelial progenitor cells,EPCs）表达的影响,探讨桃红四物汤治疗创伤性股骨头缺血坏死的具体作用机制。方法 将60只实验大鼠适应性喂养1周后随机分为两组,正常对照组15只,造模组45只,造模组按照圆韧带离断结合剥离切除术造模,造模4周后,两组各随机抽取5只,对比检测造模是否成功,再将造模组随机分成4组,即桃红四物汤低、中、高剂量组及模型组,每组10只,桃红四物汤低、中、高剂量分别灌服4、8、16 g/kg桃红四物汤汤剂,余下二组灌服等容量的生理盐水,药物干预8周后对股骨头大体形态观察、组织形态学观察、空骨陷窝率检测,并用流式细胞仪检测大鼠外周血中EPCs（CD34+、CD133+）水平。结果 桃红四物汤三组灌胃8周后空骨陷窝率明显低于模型组,高于正常对照组,差异有统计学意义（P<0.05）;桃红四物汤三组灌胃8周后外周血中EPCs（CD34+、CD133+）表达量明显高于模型组,低于正常对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 桃红四物汤能明显促进创伤性股骨头坏死大鼠模型外周血中EPCs（CD34+、CD133+）的表达,进一步从微观上及分子水平说明其对创伤性股骨头坏死有防治作用。     

重组人白介素-10对兔皮肤移植排斥反应及外周血T细胞亚群的影响

目的 观察重组人白介素-10（rhIL-10）对白兔皮肤移植排斥反应及外周血T细胞亚群的影响.方法 36只白兔随机等分为供体组和受体组,再将18只受体白兔随机分为rhIL-10组（5、10μg·kg-1·d-1）、环孢素（CsA）阳性对照组（5、10 mg· kg-1·d-1）、rhIL-10＋ CsA联合组（5μg·kg-1·d-1 hIL-10＋5 mg·kg-1·d-1 CsA）、生理盐水阴性对照组（1 mL/d）.在移植前1d至术后8d连续肌注药物,观察各组皮片移植排斥反应情况及外周血CD4＋和CD8＋细胞数、CD4/CD8细胞比值.结果 rhIL-10组排斥反应发生时间比阴性对照组延长（P＜0.05）,而rhIL-10＋ CsA组排斥反应发生时间比低剂量rhIL-10及CsA组延长（P＜0.05）.在发生急性排斥反应时,CD4＋细胞数及CD4/CD8细胞比值升高,在皮片坏死时达到峰值.结论 rhIL-10可抑制白兔皮肤移植排斥反应,CD4/CD8细胞比值有助于监测排斥反应发生.     

Effects of Bupleurum extract on blood metabolism,antioxidant status and immune function in heat-stressed dairy cows

This experiment was conducted to evaluate the effects of Bupleurum extract(BE) on blood metabolites, antioxidant status, and immune function in dairy cows under heat stress. Forty lactating Holstein cows were randomly assigned to 1 of 4 treatments. The treatments consisted of 0, 0.25, 0.5, and 1.0 g of BE kg–1 dry matter. Supplementation with BE decreased(P0.05) blood urea nitrogen(BUN) contents and increased blood total protein(TP) and albumin(ALB) levels compared with control cows, but it had no effects(P0.05) on blood glucose(GLU), nonesterified fatty acid(NEFA), total triglyceride(TG), low-density lipoprotein cholesterol(LDL-C), and high density lipoprotein cholesterol(HDL-C). Compared with control cows, cows fed BE had higher(P0.05) superoxide dismutase(SOD) and glutathione peroxidase(GSH-Px) activity. However, supplementation with BE had no effect(P0.05) on total antioxidant capacity(T-AOC) or malondialdehyde(MDA) levels. The immunoglobulin(Ig) A and G contents increased(P0.05) in cows fed 0.25 or 0.5 g of BE kg–1. Interleukin(IL)-2 and IL-4 levels were higher(P0.05) in cows fed 0.5 and 1.0 g of BE kg–1, and IL-6 was significantly elevated(P0.05) in cows fed 0.5 g of BE kg–1. There were no treatment effects(P0.05) on the CD4+ and CD8+ T lymphocyte ratios, CD4+/CD8+ ratio, or tumor necrosis factor-α(TNF-α) level among the groups. These findings suggest that BE supplementation may improve protein metabolism, in addition to enhancing antioxidant activity and immune function in heat-stressed dairy cows.     

活血化瘀利水方对大鼠急性软组织损伤模型血清IL-6、组胺影响的实验研究

目的 通过利用活血化瘀利水方对急性软组织损伤大鼠血清IL-6、组胺影响的实验研究,探讨活血化瘀利水方对急性软组织损伤修复的机制。方法 将60只大鼠随机分为6组,即正常组、模型组、伤科跌打片组、活血化瘀利水低、中、高剂量组,除正常组外,余5组通过打击法造成急性软组织损伤模型,连续给药7 d后测定大鼠血清IL-6、组胺含量。结果 活血化瘀利水方组能够明显抑制急性软组织损伤大鼠血清IL-6、组胺的表达,与模型组比较有统计学意义（P<0.05）,且其抑制作用与药物剂量相关,高剂量组抑制效果优于阳性药物组。结论 活血化瘀利水方对损伤局部炎症反应具有抑制作用,从而发挥对急性软组织损伤动物模型的治疗作用。     

猪IL-15与PRRS病毒GP5基因核酸疫苗免疫效力

通过分子克隆技术构建了表达猪白细胞介素(IL)-15及猪繁殖呼吸综合症(PRRSV)病毒GP5基因重组核酸疫苗。以小鼠为试验模型,利用猪IL-15作为分子佐剂并检测其对表达PRRS病毒GP5基因核酸疫苗的免疫增强作用。结果表明,猪IL-15与GP5试验组小鼠抗体水平和T淋巴细胞亚群数量均高于PBS对照组及GP5基因单独免疫组,表明猪IL-15对核酸疫苗可有效增强PRRS病毒GP5基因的免疫效果,证实了其佐剂效应。     

CD58及雌酮对妊娠早期山羊EML分泌IL—2及IL—4的影响

将妊娠17d山羊子宫内膜淋巴细胞(EML)放入含不同剂量PHA-P,CD58和雌酮的介质中进行体外培养,并分别用生物学方法和双抗体夹心ELISA法测定培养上清液中IL-2和IL-4的水平。结果表明,CD58和雌酮处理组EML分泌的IL-2水平低,与细胞对照组差异不显著,并显著低于PHA-P处理组。3个浓度CD58处理组IL-4分泌水平高达5.40～6.36ng/mL,高浓度雌酮处理组IL-4分泌量也达到4.77ng/mL,与细胞对照组差异均极显著,而且CD58能以剂量依赖方式促进EML对IL-4的分泌。     

竹黄颗粒介导IL-22/miR-330调控角质形成细胞增殖的机制研究

目的 研究竹黄颗粒干预IL-22/miR-330调控角质形成细胞增殖的分子机制。方法 IL-22处理HaCaT和HKCs细胞,应用QPCR技术检测细胞中miR-330的表达变化;之后慢病毒感染HaCaT和HKCs细胞,实现miR-330的过表达和干扰,通过CCK8和BrdU技术检测细胞增殖情况;采用CCK8、Western blot、QPCR、ELISA实验分别检测不同浓度竹黄颗粒处理HaCaT、HKCs后细胞增殖能力,IL-22蛋白表达水平,miR-330表达水平及细胞分泌IL-22含量的变化。结果 IL-22处理后的HaCaT和HKCs细胞中miR-330的表达水平显著下调（P<0.01）,而细胞增殖能力显著提升（P<0.01）;过表达miR-330后HaCaT和HKCs细胞增殖能力显著下降（P<0.05）,干扰miR-330后HaCaT和HKCs细胞增殖能力显著上升（P<0.05）;竹黄颗粒处理HaCaT、HKCs后,细胞增殖能力下降（P<0.01）,IL-22蛋白表达水平显著下降（P<0.01）,miR-330表达水平显著上升（P<0.01）,细胞分泌IL-22含量显著下降（P<0.01）。结论 竹黄颗粒可以通过抑制IL-22的表达,促进miR-330的表达,从而抑制角质形成细胞增殖。     

猪白细胞介素-2基因的克隆与表达

根据GenBank上发表的猪白细胞介素-2（Interleukin．2,IL-2）基因序列,设计1对引物。采用RT-PCR技术,以ConA刺激的猪外周血淋巴细胞为材料,从总RNA中扩增出484bp的特异性片段,将其克隆入pGEM-Teasy载体。序列测定表明;扩增片段为猪IL-2基因,该基因与GenBank上发表的猪IL-2基因的核苷酸序列同源性达99．8％。将其定向克隆至原核表达载体pET32a,构建了表达重组猪IL-2的基因工程菌株,经IPTG诱导表达和层析纯化,获得了纯化的重组猪IL-2蛋白。