黄芪总苷和三七总皂苷配伍对小鼠脑缺血再灌注脑组织能量障碍的影响

目的探讨黄芪总苷（AST）和三七总皂苷（PNS）对脑缺血再灌注小鼠能量代谢障碍的影响。方法C57BL/ 6 小鼠被随机分成假手术组、模型组、AST 组（110 mg/(kg·d),ig）,PNS 组（115 mg/(kg·d),ig）,AST+PNS 配伍组（AST 110 mg/(kg·d)+PNS 115 mg/(kg·d),ig）和依达拉奉组（8 mg/(kg·d),ip）,分别给药,连用4 d。在最后1 次给药1 h 后 制作脑缺血再灌注损伤模型,检测脑组织三磷酸腺苷（ATP）、二磷酸腺苷（ADP）、一磷酸腺苷（AMP）含量和Na+-K+- ATPase 酶活性。结果AST 和PNS 配伍对脑缺血再灌注后ATP、ADP 含量、总腺苷酸池（TAN）值和ATP 酶活性的降 低具有协同抑制作用,差异具有统计学意义（P<0.01）,对能荷（EC）值的减少具有相加的抑制作用（P<0.05）。结论 AST 和PNS 配伍可以明显改善脑缺血在灌注后能量代谢障碍, 其作用机制可能与AST 和PNS 能协同提高脑组织能 量的利用和生成,改善能荷、增强Na+-K+-ATPase 的活性有关。     

三七总皂苷对大鼠大脑缺血再灌注VEGF表达的影响

目的:观察三七总皂苷(PNS)对预处理大鼠大脑缺血再灌注后血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达的影响。方法:将48只SD大鼠随机平均分为假手术组、模型组、PNS组和尼莫地平对照组。预给大鼠PNS 7d后,制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型。观察各组大鼠神经功能评分及大脑TTC染色,从VEGF的角度检测免疫组化和mRNA水平表达情况。结果:PNS可以显著改善大鼠神经功能评分和降低脑梗死体积,并可增加VEGF蛋白表达和上调VEGF mRNA表达水平。结论:PNS能有效上调脑缺血再灌注损伤后VEGF mRNA浓度的表达,促进缺血区血管新生。     

二苯乙烯苷和三七总皂苷配伍对Aβ25-35致PC12细胞损伤影响的研究

目的 探讨二苯乙烯苷(TSG)和三七总皂苷(PNS)配伍对Aβ25-35诱导的PC12细胞损伤的影响。方法 PC12细胞采用Aβ25-35诱导建立阿尔茨海默病的损伤模型,被随机分成空白组、模型组、多奈哌齐组（10 μmol/L）、TSG（100 mmol/L）组、PNS组（50 mg/L）、TSG-PNS配伍组（TSG100 mmol/L+PNS50 mg/L)。取细胞上清液测各组的乙酰胆碱酯酶（AchE）及超氧化物歧化酶（SOD）活力、丙二醛（MDA）含量。结果 与模型组比较,TSG组、PNS组、TSG-PNS配伍组可降低AchE活力、MDA含量及提高SOD活力(P<0.05)。且TSG-PNS配伍组的效应比TSG或PNS单用组效应更好(P<0.01)。结论 TSG和PNS配伍对Aβ25-35诱导的PC12细胞损伤具有明显的保护作用,其作用机制可能与胆碱能系统及氧化应激有关。     

毛冬青总皂苷对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制研究

为研究毛冬青(Ilex pubescens Hook et Arn.)总皂苷对脑缺血再灌注损伤的保护作用,并初步探讨其保护作用机制,将试验大鼠随机分为假手术组、模型对照组、毛冬青总皂苷高、中、低剂量组及阳性药物对照组,运用大鼠大脑中动脉栓塞,制作脑缺血再灌注损伤模型,缺血10 min后,毛冬青总皂苷给药组及阳性药物组分别于舌下静脉给予高、中、低剂量的毛冬青总皂苷及阳性药物(香丹注射液),假手术组、模型组给予等体积的生理盐水.缺血60 min后再灌注,24 h后,每组取8只大鼠断头取脑,TTC染色,测定脑梗死体积;取血离心后,取血清,比色法测血清超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性及丙二醛(MDA)的含量;每组取2只大鼠运用病理组织形态学检验,观察毛冬青总皂苷对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织细胞损伤的影响.结果表明,毛冬青总皂苷不同剂量组与模型对照组相比,其脑梗死面积减小,病理变化较轻;血清SOD的活性显著升高;毛冬青总皂苷高剂量组与模型对照组相比较,其MDA含量显著降低.说明毛冬青总皂苷对脑缺血再灌注损伤具有一定的保护作用,其保护机制与毛冬青总皂苷抗氧化作用及增强氧自由基的清除有关.     

三七总皂苷预处理对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用及机制研究

目的 探讨三七总皂苷对大鼠肾缺血再灌注损伤（renal ischemia reperfusion injury,RIRI）的保护作用,并研究其对氧化应激及炎症级联反应的影响。方法 将40只雄性SD大鼠随机均分为假手术组,模型组,三七总皂苷低、中、高剂量[40、80、160 mg/（kg·d）]预处理组,分别予以相应干预,连用5 d。在最后1次给药1 h后采用切除右肾、夹闭左肾动脉45 min后再灌注3 h的方法建立RIRI模型。五组均于再灌注3 h后经腹主动脉采血5 mL,检测血清中尿素氮（BUN）、血肌酐（SCr）、丙二醛（MDA）含量及超氧化物歧化酶（SOD）活性;取肾组织常规切片和HE染色,光镜下观察肾组织病理学改变;免疫组化法检测细胞间黏附因子-1（ICAM-1）、核因子-κB p65（NF-κB p65）蛋白表达。结果 与假手术组比较,模型组的SCr、BUN、MDA含量明显增高,SOD活性降低,光镜下可见肾小管损伤明显,免疫组化显示ICAM-1、NF-κB p65蛋白表达明显增高,差异有统计学意义（P<0.01）;与模型组比较,三七总皂苷各剂量组的SCr、BUN、MDA水平明显降低,SOD活性增高,肾组织病理学改变明显减轻,ICAM-1、NF-κB p65表达显著降低,差异有统计学意义（P<0.01）;三七总皂苷中、高剂量组组间比较,各指标差异均无统计学意义（P>0.05）。结论 三七总皂苷可通过减轻氧化应激和炎性损伤,有效改善大鼠肾缺血再灌注损伤。     

基于大鼠脑缺血再灌注损伤模型建立芍药内酯苷的PK-PD模型

[目的]建立芍药内酯苷的药动学-药效学(PK-PD)模型。[方法]首先采用液质联用法测定大鼠脑缺血再灌注损伤模型给予辛芍组方后的不同时间点所得血浆样本中芍药内酯苷的药物浓度,获得药时曲线;同时采用试剂盒测定不同时间点所得血浆样本中的超氧化物歧化酶(SOD)和乳酸脱氢酶(LDH)含量,获得时效曲线。然后用Win Non Lin软件采用房室模型的分析方法对芍药内酯苷的药代动力学参数进行拟合,获得PK参数。在此基础之上,固定相关的药代动力学参数,对时效关系进行拟合,得到相关的PD参数,根据PD参数,建立辛芍组方中芍药内酯苷的PK-PD模型。[结果]当以SOD为药效指标时,可得辛芍组方中芍药内酯苷的PK-PD模型为E=21.04+(7.16×Ce)/(Ce+372.4);当以LDH为药效指标时,可得辛芍组方中代表成分芍药内酯苷的PK-PD模型为E=216.83-(37.31×Ce)/(Ce+0.04)。[结论]SOD和LDH的浓度与芍药内酯苷的浓度存在一定的相关性。芍药内酯苷可通过提高SOD、降低LDH发挥抗氧化作用来实现保护脑缺血再灌注损伤。     

蒙古黄芪黄芪甲苷与金属元素含量的关系分析

【目的】分析蒙古黄芪黄芪甲苷含量与植物、土壤中金属元素含量的相关性,以及土壤-植物系统中金属元素间的关系,为蒙古黄芪的种植与品质提升提供参考。【方法】选择7个蒙古黄芪种植区,取蒙古黄芪种植区土壤,采用高效液相色谱 蒸发光散射检测法(HPLC-ELSD)检测其中的黄芪甲苷含量,通过电感耦合等离子体质谱（ICP MS）技术检测黄芪与土壤中的金属元素含量,分析不同产地蒙古黄芪中黄芪甲苷含量与金属元素的相关性。【结果】7个蒙古黄芪种植区中,黄芪甲苷含量以内蒙赤峰元宝山下坎村种植区最高,内蒙古固阳县下湿壕种植区最低。蒙古黄芪根中各金属元素含量从高到低依次为 K＞Mg＞Fe＞Al＞Ca＞Cr＞Mn＞Zn＞Cu＞As＞Pb＞Cd,其中Cr元素在黄芪中大量富集;土壤中金属元素含量从高到低依次为Al＞K＞Fe＞Mg＞Ca＞As＞Mn＞Pb＞Cr＞Zn＞Cu,7个种植区As元素含量均严重超标,4个种植区Pb元素含量也出现超标。蒙古黄芪根中的金属元素含量间、土壤中的金属元素含量间及根中与土壤中的金属元素含量间相关性均较好。其中蒙古黄芪植株中的Ca、Pb、As元素含量与土壤中的Ca、Pb、As元素含量呈显著负相关（P<0.05）,植株中的K、Zn元素含量与土壤中的K、Zn元素含量呈显著正相关（P<0.05）;蒙古黄芪根中的黄芪甲苷含量与其根中的Mg、Cu、Cd含量及土壤中的Ca元素含量呈显著正相关(P<0.05）。【结论】蒙古黄芪及其栽培土壤中的金属元素间存在一定相关性,二者金属元素间的协同或拮抗作用共同调节黄芪甲苷的积累。     

黄芪多糖对脑缺血再灌注大鼠脑组织Caspase-3表达及形态学的影响

为了探讨黄芪多糖(Astragalus polysaccharide,APS)对大鼠脑缺血再灌注损伤脑组织Caspase-3表达及形态学的影响.选取SPF级Wistar大鼠72只,随机分为假手术组、模型对照组、阳性药物对照组、黄芪高剂量组、黄芪中剂量组、黄芪低剂量组,每组12只;采用改良线栓法建立大鼠脑缺血再灌注模型,各药物组分别给予相应药物15d,后处死检测,HE染色观察各组大鼠脑组织形态学变化,免疫组化法检测各组大鼠脑组织中Caspase-3蛋白的表达水平.结果表明:假手术组大鼠Caspase-3表达较弱,模型组较假手术组明显增多(P0.01);与模型组比较,其余各组大鼠的Caspase-3表达均有显著减少(P0.05),以黄芪多糖高剂量组大鼠尤为明显.形态学试验结果表明模型组大鼠可见神经元大片消失,间质疏松,残余细胞胞核固缩、染色质凝聚,其余各组神经元细胞发生凋亡的程度较模型组轻,以黄芪高剂量组效果明显.说明黄芪多糖能显著抑制脑缺血再灌注损伤后的神经细胞凋亡,其作用可能是通过降低Caspase-3的表达实现的,且作用效果呈剂量依赖性.     

猪苓菌发酵三七生产总皂苷的工艺研究

为优化猪苓菌发酵三七的培养基和发酵条件,以提高总皂苷得率,试验以猪苓为发酵菌种、三七为发酵培养基中的添加物,以发酵液中总皂苷含量为指标,通过单因素和正交试验对培养基和发酵条件进行优化研究.结果表明:猪苓菌发酵生产三七总皂苷的最佳培养基配方为可溶性淀粉3 g/100mL,蛋白胨0.2 g/l00mL,磷酸二氢钾0.3 g/100mL,硫酸镁0.1 g/100mL;最佳发酵条件为接种量10％,中药添加量5g/100mL,温度25℃,初始pH 7,发酵8d.采用优化后工艺总皂苷得率为7.233％.     

黄芪多糖和黄芪甲苷诱导RIMVECs分泌IFN-γ的研究

【目的】探明黄芪甲苷和黄芪多糖能否诱导RIMVECs分泌IFN-γ,为黄芪及有效成分的临床应用提供理论和参考依据。【方法】以体外培养的RIMVECs为模型,用ELISA法检测不同浓度的黄芪甲苷和黄芪多糖在不同时间诱导RIMVECs分泌IFN-γ的表达量。【结果】25μg/mL和50μg/mL黄芪甲苷能诱导RIMVECs表达IFN-γ,且随着时间延长表达逐渐升高,24h时达到峰值,具有明显的富集效应;25μg/mL和50μg/mL黄芪多糖也能诱导RIMVECs表达IFN-γ,随着时间延长RIMVECs细胞上清液中IFN-γ表达量逐渐增多,25μg/mL组IFN-γ表达量24h达到峰值;50μg/mL组IFN-γ表达量12h达到峰值,随后表达量降低。【结论】结果提示,黄芪甲苷和黄芪多糖的免疫调节作用可能是通过诱导RIMVECs分泌IFN-γ来实现,为黄芪的临床应用提供了试验依据。     

三七总皂苷的乙醇超声法提取工艺及急性毒性研究

[目的]优化三七总皂苷的乙醇超声法提取工艺。[方法]选取乙醇浓度、料液比、提取温度3个因素进行正交试验,优化三七总皂苷的乙醇超声法提取工艺,并研究提取产品的急性毒性。[结果]各因素对三七总皂苷提取率的影响由大到小依次为:提取温度>乙醇浓度>料液比,最佳提取工艺为:12倍液的50%乙醇浸泡三七粉末12h后,40℃下超声提取50min后过滤,滤渣再次提取,合并滤液;滤液经减压干燥、除杂、浓缩后得精制三七总皂苷粉末,其最大耐受剂量(MTD)大于20.0g/kg体重,属无毒级。[结论]与传统方法相比,乙醇超声波法提取三七总皂苷节省溶剂,降低能耗,提高效率,所得产品为无毒产品。     

聚乙二醇/硫酸铵双液相萃取法提取三七总皂苷的研究

[目的]采用聚乙二醇/硫酸铵双液相体系对三七总皂苷提取方法进行研究。[方法]通过单因素试验考察了聚乙二醇分子量、聚乙二醇浓度、硫酸铵浓度和pH值对三七总皂苷相比、分配系数和回收率的影响。[结果]最佳萃取工艺条件为：聚乙二醇分子量6000,聚乙二醇质量分数24%,硫酸铵质量分数9%,pH值4.5。在此最优条件下,三七总皂苷平均回收率为88.50%,平均分配系数为4.04。[结论]该方法操作简便,成本低,耗时少,分离效果好。     

三七茎基总皂苷的回流提取工艺研究

[目的]确定三七茎基总皂苷含量测定方法,优化其回流提取工艺。[方法]采用香草醛-高氯酸法测定三七茎基总皂苷含量的方法,并以总皂苷含量为指标,优选回流法提取三七茎基总皂苷的工艺条件。[结果]在0.008 3～0.049 6 mg/ml浓度范围内,人参皂苷Rg1浓度与吸光度的线性关系良好(R=0.999 4),平均回收率为99.3%(n=4),RSD为3.4%。最佳提取工艺条件为:料液比1∶10(g/ml)、乙醇浓度60%,浸泡时间12 h,提取3次,每次2 h。[结论]该含量测定方法简便、准确、重现性好;提取工艺经济、合理,值得进一步推广。     

三七果实红色素的初步鉴定及其含量与果实总皂苷含量的正相关性(英文)

[目的]该研究旨在鉴定三七果实的红色素,并探索果实色素含量与其总皂苷含量的相关性。[方法]三七果实的红色素用特征颜色反应和紫外可见光谱初步鉴定,三七果实的色素和总皂苷含量用分光光度法检测。[结果]三七果实的红色源于花色苷和或其花色素。果实花色苷和总皂苷的含量均随果实红色调的减弱而下降。不同红色调果实的花色苷含量差异达到极显著水平,但总皂苷含量仅达到显著水平。[结论]三七果实的红色素属于花色苷,果实花色苷含量与总皂苷含量间达到极显著正相关。     

中药有效成分丹参酮IIA、三七总苷与阿司匹林抗结直肠癌机制的研究现状及展望

结直肠癌是消化系统最常见的恶性肿瘤之一,并且其发病率呈逐渐升高的趋势。大量研究发现阿司匹林具有降低结直肠癌发生率的可能,而最新研究发现在具有活血化瘀的中药丹参及三七的提取物丹参酮ⅡA及三七总苷也发现了同样的疗效,因此本文就阿司匹林、丹参酮ⅡA及三七总苷抗结直肠癌的机制研究作一综述,以期为其下阶段研究和开发提供参考。     

利用大孔树脂吸附法分离纯化三七总皂苷的工艺研究

研究了大孔树脂吸附法分离纯化三七总皂苷的工艺,利用3种不同类型的树脂对三七总皂苷的静态吸附．洗脱性能的效果进行了试验,确定选用洗脱率高达89．5％的D101型树脂。再根据选用的D101型树脂对洗脱溶媒的选择、吸附容量的确定、洗脱溶媒的用量等纯化工艺条件参数进行了研究和验证试验,最后确定了最佳工艺条件。     

HPLC测定补阳还五汤总苷中黄芪甲苷和芍药苷的含量

目的建立高效液相色谱法测定补阳还五汤总苷中黄芪甲苷和芍药苷的含量。方法色谱柱为Kromasil C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),黄芪甲苷测定:蒸发光散射检测器,流动相为甲醇∶水=80∶20(v/v);漂移管温度60℃;气体流量1.5 L/min;输出压力0.5 MPa;柱温30℃。芍药苷测定:流动相为甲醇∶水=23∶77(v/v);流速为1 mL/min,检测波长:218 nm,柱温:30℃。结果黄芪甲苷在0.57～9.10μg时,Y=1.506 3X+2.409 6,r=0.999 4;芍药苷在0.48~7.70μg时,Y=598.91X-2.334 6,r=0.999 9;其线性关系良好,平均加样回收率分别为99.62%和101.1%,RSD为2.6%和1.7%(n=6)。结论本法快速、简便、准确、灵敏度高,适用于黄芪甲苷及芍药苷的含量测定,并为其总苷物质制备工艺研究提供质量标准依据。     

不同剂量配伍的三黄泻心汤总蒽醌含量比较研究

建立紫外分光光度法测定不同剂量配伍的泻心汤中总蒽醌的含量。以大黄素为对照品,用浓度为1%的醋酸镁甲醇溶液作为显色剂,在512 nm波长处测定吸光度,计算不同剂量配伍的泻心汤总蒽醌的含量,最后比较其差异。结果表明,不同剂量配伍的泻心汤总蒽醌含量有差异,这可能与配伍后不同剂量的黄芩与黄连对大黄总蒽醌溶出率的影响有关,该方法可作为不同剂量配伍的中药方剂质量控制方法,为今后综合开发和利用不同剂量配伍的中药方剂提供参考依据。     

针刺大椎、人中、百会穴对脑缺血再灌注损伤大鼠脑线粒体超微结构的影响

目的 观察针刺大椎、人中、百会穴对脑缺血再灌注后大鼠脑线粒体超微结构的影响,探讨针刺对脑缺血再灌注损伤的部分作用机制。方法 40只大鼠随机挑选10只为假手术组,其余30只大鼠造模后随机分为模型组、针刺对照点组、针刺穴位组3组,每组10只。大鼠造模成功后,模型组、假手术组只捆绑不针刺,针刺穴位组针刺大椎、人中、百会三穴,针刺对照点组针刺针刺穴位左侧旁开0.3 cm处,每12小时针刺1次,6次治疗后处死大鼠,取缺血海马组织电镜下观察线粒体超微结构。结果 治疗后,除假手术组外其余各组大鼠神经功能缺损评分均下降（P<0.05）;与模型组比较,针刺穴位组和针刺对照点组均下降更明显（P<0.05）。电镜观察结果显示,假手术组线粒体结构正常;模型组线粒体肿胀明显,嵴断裂,空泡结构明显;针刺对照点组线粒体肿胀,可见嵴断裂,少量空泡结构;针刺穴位组线粒体稍肿胀,嵴断裂及空泡化不明显。结论 针刺能减轻脑缺血再灌注损伤,其机制可能与改变缺血再灌注局灶的线粒体超微结构损伤有关。