拟穴青蟹受精膜形成过程中线粒体的变化及功能

采用透射电子显微镜研究了拟穴青蟹受精膜形成过程中线粒体的变化及其功能。结果显示,大量线粒体首先高度密集于即将发生胞吐的皮质中;随着胞吐的发生,线粒体也随之快速分散到皮层反应部位,线粒体通过分裂、出芽等方式而迅速增多,内质中的线粒体大量向皮质迁移,参与皮层反应;当受精膜开始举起时,线粒体多聚集在新质膜下,参与新质膜的修复和形成;受精膜完全举起后,皮质中的线粒体迅速减少。线粒体在形态、数量及分布等方面的变化,能够反映受精膜形成不同阶段生理活动的旺盛程度以及需能情况,并从细胞水平阐释受精膜形成机制。     

皱纹盘鲍卵的形态与超显微结构↑（*）

本文用扫描电镜和透射电镜观察了皱纹盘鲍成熟未受精卵和受精卵的形态及超显微结构。皱纹盘鲍的成熟卵无卵极标志，卵质中含有线粒体、内质网和高尔基复合体等细胞器，未发现中心粒。皮层中有皮质小泡，受精后发生皮层反应。在鲍的受精卵中，线粒体、高尔基复合体和内质网的数量明显减少。在鲍的成熟卵和受精卵中，均观察到光滑内质网合成脂滴以及脂滴形成卵黄粒的现象     

锯缘青蟹卵膜变化与卵子附着研究

利用光镜和电镜观察了锯缘青蟹成熟卵及其受精后卵膜变化和卵子附着特征。锯缘青蟹成熟卵子卵膜有三层即外层、内层和质膜。卵子产出后,无论受精与否,外层和内层卵黄膜形成壳膜,与卵子附着有关。刚产出的卵子卵膜具有溶胶性和延展性,卵子与刚毛表面之间或卵子之间接触便粘在一起,由于刚毛摆动和卵子的重力作用,形成卵柄或卵索。卵子受精后,发生皮层反应形成受精膜。由壳膜和受精膜构成的孵化膜为初级卵膜,保护胚胎发育,直至     

中国对虾精子入卵过程的观察

利用光镜和电镜对中国对虾精子入卵过程进行了观察。结果表明，精子的核物质籍胞吐作用穿过卵黄膜到达卵膜，其余部分则留在卵黄膜外。只有在卵子激活前到达卵膜的精子才能参与受精作用，其余的精子将被卵子激活所形成的胶质层推离卵子。中国对虾精子激活过程，没有发现顶体丝的形成。精子的入卵开始于卵子的皮层反应后期，此时精卵的接触逐渐密切，首先接触部位的卵膜稍有突起，然后开始下陷，同时这一部位的卵膜变得粗糙不平，随后卵膜解体，精子由此进入卵子。中国对虾精子的入卵位置是随机的，有多精入卵的现象。     

秀丽白虾卵母细胞不同发育阶段线粒体的变化

采用透射电镜技术观察秀丽白虾(Exopalaemon modestus)卵巢不同发育阶段卵母细胞线粒体的变化及其与卵黄发生的关系，结果显示，随着卵母细胞的发育，线粒体经历了数目以及结构上的系列变化。卵黄发生早期，卵母细胞内的线粒体数量急剧增多，形态各异，有椭圆形、圆球形等，线粒体嵴稀少；随后，细胞质中出现较多近椭圆形的线粒体群，嵴丰富，外膜光滑。连续切片观察表明，该时期线粒体尚未明显参与卵黄颗粒的形成。卵黄发生中期，卵母细胞内的线粒体的结构出现两大类群：一类线粒体呈长杆状或椭圆形，体积小，嵴丰富，内部基质暗，外膜光滑，主要功能是为卵母细胞发育提供能量；另一类线粒体体积大，呈圆球型，嵴逐渐退化，内部基质呈现电子透明状，外膜出现大小不一的波浪状。后一类线粒体膜内陷，出现明显的类似细胞内吞作用，参与卵黄颗粒的形成。被吞饮物主要为有膜性泡，包括波浪状膜的高尔基体分泌泡、光滑外膜的内质网囊泡以及小型线粒体。与此同时，卵母细胞质膜形成众多胞饮小泡，外来物质逐渐进入卵母细胞，通过高尔基体的加工，以分泌泡相互融合形式参与卵黄颗粒的形成，内吞作用所累积的卵黄颗粒占主要部分，因此在该时期卵母细胞卵黄颗粒的形成以外源性为主。在卵子发育后期，皮层区域出现具典型结构的线粒体，当这些线粒体参与皮层颗粒形成后，卵子逐渐成熟，整个卵母细胞中很难见到线粒体。卵母细胞内卵黄颗粒进一步形成并相互融合，整个卵细胞几乎全为卵黄颗粒占据，未见明显线粒体。     

中华绒螯蟹卵黄发生期卵母细胞和卵泡细胞超微结构观察

通过透射电镜技术观察了中华绒螯蟹第二次卵巢发育过程中卵巢的超微结构变化.结果表明:(1)中华绒螯蟹第二次卵巢发育过程中卵黄发生期可分为初期和后期;(2)卵黄发生初期(雌蟹第一次排卵后的16 d内),卵黄生成以卵母细胞内源性合成为主,此时卵母细胞胞质中存在大量内质网囊泡、高尔基体和线粒体,这些细胞器参与胞内卵黄物质的合成.内源性合成后期,卵母细胞膜形态多样,呈现触手状、波浪状和断裂状,为外源合成期做准备.此期卵泡细胞还未向卵母细胞靠近,两类细胞间存在着由淋巴细胞吐出的絮状物;(3)卵黄发生后期,首先为卵泡细胞与卵母细胞的结合阶段(排卵后16～21 d),此后,卵泡细胞胞质中含有大量内质网囊泡、卵黄颗粒和脂滴,卵母细胞与卵泡细胞膜变为链珠状便于物质交换,卵母细胞的卵黄合成能力减少,转由卵泡细胞进行外源性物质吸收和卵黄物质合成(21～36 d);(4)卵黄发生结束后,双层卵膜形成,卵黄体和脂肪滴均匀分布在卵母细胞胞质中.     

中华绒螯蟹卵黄发生期卵母细胞和卵泡细胞超微结构观

通过透射电镜技术观察了中华绒螯蟹第二次卵巢发育过程中卵巢的超微结构变化。结果表明：（1）中华绒螯蟹第二次卵巢发育过程中卵黄发生期可分为初期和后期;（2）卵黄发生初期（雌蟹第一次排卵后的16 d内）,卵黄生成以卵母细胞内源性合成为主,此时卵母细胞胞质中存在大量内质网囊泡、高尔基体和线粒体,这些细胞器参与胞内卵黄物质的合成。内源性合成后期,卵母细胞膜形态多样,呈现触手状、波浪状和断裂状,为外源合成期做准备。此期卵泡细胞还未向卵母细胞靠近,两类细胞间存在着由淋巴细胞吐出的絮状物;（3）卵黄发生后期,首先为卵泡细胞与卵母细胞的结合阶段（排卵后16~21 d）,此后,卵泡细胞胞质中含有大量内质网囊泡、卵黄颗粒和脂滴,卵母细胞与卵泡细胞膜变为链珠状便于物质交换,卵母细胞的卵黄合成能力减少,转由卵泡细胞进行外源性物质吸收和卵黄物质合成（21~36 d）;（4）卵黄发生结束后,双层卵膜形成,卵黄体和脂肪滴均匀分布在卵母细胞胞质中。     

拟穴青蟹Na+/H+ exchanger基因克隆及其在盐度胁迫下的表达分析

克隆了拟穴青蟹(Scylla paramamosain)Na~+/H~+-exchanger基因,其cDNA序列全长3 624 bp,开放阅读框(ORF)长2 886 bp,可编码961个氨基酸,预测蛋白质分子量和等电点分别为110.8 kDa和7.42,具有信号肽和典型的Na~+/H~+-exchanger蛋白结构域,含12个跨膜α螺旋。拟穴青蟹Na~+/H~+-exchanger的氨基酸序列与三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)的一致度最高,达到84.9%;该基因在卵巢中表达量最高,其次是精巢、鳃等;该基因在受精卵时期表达水平最高,大眼幼体时期次之。拟穴青蟹大眼幼体在低盐(盐度7和17)胁迫过程中,Na~+/H~+-exchanger基因在20 min表达水平最高,之后基本恢复到正常表达水平;在高盐(盐度37)胁迫(20 min～2 h)期间,该基因表达水平先下降再逐渐上升。Na~+/H~+-exchanger基因在拟穴青蟹大眼幼体阶段盐度适应中发挥着重要作用,且低盐显著诱导Na~+/H~+-exchanger基因的高表达,推测拟穴青蟹Na~+/H~+-exchanger基因在低盐环境下发挥重要的渗透调节功能。     

多刺裸腹溞孤雌溞的卵子发生

采用光镜和透射电镜技术观察多刺裸腹溞（Moina macrocopa）孤雌溞卵子的发生过程。根据卵母细胞细胞核的形态、卵黄的合成、积累情况及核物质的形态变化等观察结果,将卵子发生分为3个时期：卵原细胞期、卵母细胞期和成熟卵母细胞期。卵原细胞核大,胞质层薄,有少量线粒体分布,核物质浓缩为一团;卵母细胞发育的早期和中期细胞体积增大,细胞质层增厚,线粒体迅速增多,细胞核变圆,核物质分散成多块;后期卵母细胞胞质中开始出现大量卵黄颗粒和少量脂滴,细胞核边缘波浪化,线粒体空泡化,其中卵黄合成初期,核物质重新聚集在细胞核中央,在卵黄合成中期又分散开来;成熟卵母细胞质中充满卵黄颗粒,呈强嗜酸性,细胞核的形态呈不规则状,核物质分散。多刺裸腹溞生殖腺的外部形态随着生殖周期的变化而不同。在孤雌溞的整个生活史中生殖腺内卵子的发育经历了“同步一不同步一局部同步”的发育模式。发现1龄幼溞生殖腺中不存在卵原细胞,成龄溞的生殖腺有多个发育时期的生殖细胞并存。同时在亚显微水平上发现卵黄主要由线粒体演变而来,也通过吞饮作用吸收成熟的卵黄颗粒,内源与外源性共同作用形成卵黄。[中国水产科学,2006,13（4）：547—554]     

中国对虾卵子激活过程的形态学研究

报道了对中国对虾卵子激活反应的形态学研究。中国对虾卵子皮层中有由卵黄膜下陷形成的与卵表垂直的皮层囊,内有棒状结构称棒状周边体,其内物质为凝胶前体。对虾卵子的激活并不需要精子的发动,而是在卵子与海水接触后即开始进行。在卵子激活过程中,棒状周边体向外放出形成花冠状的凝胶层,然后从基部开始逐渐消失并向远端扩展,最后完全消失,同时卵子进行成熟分裂放出第一、第二极体,并举起受精膜,完成激活反应。还对中国对虾卵子激活的作用进行了讨论。     

中国东南沿海青蟹线粒体COI基因部分序列分析

对我国东南沿海5个地区的72个青蟹个体的线粒体细胞色素氧化酶亚基I (COI)部分序列序列进行了测定和分析。获得的72个细胞色素氧化酶亚基I (COI)序列可分为12个单倍型，与GenBank中已知的Scylla paramamosain COI序列的相似性达到98%以上，与其它3种 青蟹的差异为7.36%～15.54%。这些序列与S. paramamosain的遗传距离仅为0.00783，但是与S. serrata、S. olivacea和S. tranquebarica〗的遗传距离却分别达到0.11659、0.17812和0.08423。序列特征、遗传距离和系统进化等分析结果都表明本文研究的青蟹为S. paramamosain。结果提示，在进行青蟹属相关研究应当仔细鉴别采集样本的种类。     

Development of the hypophysis of the arctic lamprey,Lampetra japonica

The hypophysis of early larval stages, from the moment of hatching on the 18th day after fertilization to the 101st day of larval life, of the arctic lamprey Lampetra japonica was studied with scanning and transmission electron microscopes. A solid cord of cells of the distal part of the nasopharyngeal duct represents the early adenohypophysis. On the 20th day after fertilization, several of the epithelial cells of this structure showed first indications of secretory activity with an extensive Golgi apparatus and small electron-dense secretory granules. On the 26th day, non-secretory, stellate (=supporting) cells and secretary cells can be distinguished. Already on the 39th day, two different parts can be distinguished in the adenohypophysis: the pars distalis with cells containing small dense granules, and the pars intermedia with cells containing larger granules of medium density. The number of granulated cells increases steadily; on the 101st day two pars distalis cell types can be distinguished. The neurohypophysis consists of a thin anterior and a thick posterior part. Already on the 20th day single nerve terminals in the ependymal layer of the diencephalic (=infundibular) floor contain dense elementary granules. The number of granule-containing terminals increases steadily; on the 101st day almost all terminals contain granules. The present observations suggest an early secretory function of the lamprey hypophysis.     

凡纳滨对虾卵子发生的超微结构

利用透射电镜研究凡纳滨对虾卵子发生过程中细胞内部结构的变化。结果显示,卵原细胞结构简单,代谢水平低,核孔稀少,通过核周池来完成核、质之间的物质交换。卵黄发生前晚期和卵黄发生初期的卵母细胞变化显著：核膜凹凸不平,核仁数量多,核孔密集,大量核仁外排物经核孔输送到卵质中;卵质中胞器极为丰富和发达,代谢活性极强。卵黄发生旺盛期是卵黄大量形成的阶段,卵质边缘还呈辐射状排列了一圈椭圆形皮质棒,细胞出现微吞饮活动并形成卵黄膜。卵黄发生晚期卵质中充满了粗大的卵黄粒和脂滴,胞器锐减。另外,探讨了卵细胞内部结构的变化和卯黄形成的关系以及皮质棒的来源与功能。     

Swelling of wolffish, Anarhichas lupus L., eggs and prevention of their adhesiveness

Wolffish, Anarhichas lupus L. has internal fertilization. The eggs are released into water before the beginning of cleavage and stick together in clutches. To develop methods for separating eggs for subsequent incubation, changes during egg swelling and egg shell hardening were observed. Uninseminated eggs did not swell in ovarian fluid, but a perivitelline space formed in sea water because of a partial cortical reaction. In inseminated eggs kept in ovarian fluid, a cortical reaction took place and swelling was caused by elevation of the yolk membrane. Shrinkage of the yolk and absorption of water were observed after inseminated eggs were placed in sea water. Eggs swelled in ovarian fluid diluted by less than 30% sea water showed abnormal cleavage during subsequent development. An effective method for preventing egg stickiness after fertilization was to distribute them in trays with stagnant sea water for at least 5-6 h. Milk was effective for loss of egg adhesiveness at 50% concentration, but some eggs cleaved abnormally and subsequent mortality was high. The influences of ovarian fluid and milk on initial egg development with respect to peculiarities of egg swelling are discussed.     

文蛤卵母细胞卵黄发生的超微结构

取不同发育阶段文蛤 (MeretrixmeretrixLinnaeus)活体解剖取出生殖腺 ,常规方法制成切片 ,以透射电镜(TEM )观察其卵母细胞的卵黄发生过程。结果表明 ,文蛤的卵母细胞卵黄发生期间 ,线粒体、内质网、高尔基复合体、溶酶体、微吞饮泡等细胞器均参与了卵黄粒的形成。卵黄合成早期的卵母细胞质膜伸出大量的微绒毛 ,并出现卵黄膜 ,胞质中有大量膜性小泡 ,溶酶体、线粒体、高尔基复合体和粗面内质网发达 ,卵黄前体物质逐渐增多。在卵黄合成中期 ,胞质内线粒体和内质网活动活跃 ,卵母细胞大量合成和积累卵黄物质 ,细胞质膜外凸 ,与外界进行物质交换。卵黄合成后期 ,卵质内贮存了大量的卵黄粒 ,细胞器不发达。此外 ,还对卵母细胞发育过程卵黄颗粒的细胞内、外原料来源进行了讨论     

中国海耳鲍成熟卵的超微结构

利用光学和电子显微镜对耳鲍排出体外成熟卵的形态及超微结构进行了观察。耳鲍成熟卵具有卵胶质膜、卵黄膜和细胞膜;卵质中含有线粒体、核糖体、内质网及高尔基体等细胞器;还含有高电子密度的分泌颗粒和吞饮小泡。皮层中含有皮质小泡,但未发现中心粒。耳鲍成熟卵没有明显的卵极标志,卵黄颗粒分布较均匀。     

注射中华绒螯蟹及锯缘青蟹促雄性腺提取物对中华绒螯蟹雌蟹雄性化的影响

该论文首次报道了经由促雄性腺提取物的注射而在蟹类中引起的性逆转现象。此前关于蟹类促雄性腺活性研究的报道极少，而且蟹类的雄性化均是由促雄性腺的移植所产生。本实验中将锯缘青蟹和中华绒螯蟹的促雄性腺提取物分别注射到刚刚完成性别分化的中华绒螯蟹雌性幼蟹体内，此时幼蟹处于4至5期，壳宽为5～8 mm。注射之后，幼蟹经过大约1～2次蜕皮，此时在注射锯缘青蟹以及中华绒螯蟹的促雄性腺提取物的两组实验幼蟹中均能观察到雄性化现象，而注射生理盐水的对照组实验幼蟹中未能观察到相同现象。由此本实验可以证明促雄性腺确实是蟹类的一种雄性激素，注射促雄性腺提取物能引起雌性幼蟹发生性逆转；同时根据锯缘青蟹和中华绒螯蟹的促雄性腺提取物均能引起中华绒螯蟹雌性幼蟹发生性逆转的现象推测，锯缘青蟹和中华绒螯蟹两种间可能存在促雄性腺的交叉活性；不仅如此，性逆转还能在极低的注射剂量下获得，相当于中华绒螯蟹0.14促雄性腺当量和锯缘青蟹0.06促雄性腺当量。     

Performance and immunological responses of rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) fed bioprocessed plant‐based proteins

Marine‐derived fish meal (FM) is a traditional component of commercial aquaculture feeds for many farmed fish species. Modern bioprocessing technologies have been developed to produce high‐protein plant‐based ingredients for aquafeeds to further reduce FM and other conventional animal protein sources. A 90‐day feeding trial using juvenile rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) (27.9 ± 1.4 g; mean ± SE) was completed to evaluate growth, feed efficiency, general health and immunological responses to diets containing experimental plant‐based protein sources and reduced FM. Trout were fed one of four dietary treatments: experimental bioprocessed soy protein concentrate (BSPC), commercially available enzymatically hydrolysed soy protein concentrate (CSPC), experimental bioprocessed barley protein concentrate (BBPC) and a FM control (FMC). At trial termination, there were no significant differences in relative growth (RG) or specific growth rate (SGR) between fish fed either FMC or BSPC (p > .05). Fish fed either CSPC or BBPC resulted in significantly lower RG and SGR than the FMC (p < .05). Significant respiratory burst analysis differences were observed among treatments at day 90 (p < .01), for fish fed either FMC or CSPC diets. This assessment of bioprocessed plant‐based protein ingredients facilitates the characterization and incorporation of bioprocessed soy and barley protein as the industry continues to evaluate FM replacements in rainbow trout feeds.