桃多酚氧化酶的纯化及其特性

为延长桃果实货架寿命及提高贮藏保鲜技术,以5年生早花露桃果实为试材,对桃多酚氧化酶的纯化及其特性进行了研究,结果表明采用疏水柱层析,透析与PEG浓缩,纯化了早花露桃的多酚氧化酶.所得的酶液经薄层聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳,显示单一条带,等电点为3.0.经SDS-PAGE分析,它由2条主要多肽(相对分子质量(MW)分别为3.98×104,6.59×104)和2条含量较少的多肽(MW为6.67×104,6.76×104)所组成.纯化酶液的最高吸收峰在波长272.5nm处,300nm以上几乎无吸收.该酶对邻位二元酚有较高亲和力,几乎不能催化一元酚和三元酚的氧化.以儿茶酚为底物,其最适pH为7.0,最适反应温度20℃.在果实生长发育过程中,多酚氧化酶活性呈下降趋势,中期有一活性相对较小的峰,同时,多酚氧化酶疏水特性增强.     

桑尺蠖多酚氧化酶的纯化及其部分生物化学性质

经硫酸铵分级沉淀,Sephadex G-100凝胶过滤等步骤,使桑尺蠖Phthonandria atrineata （Butler）多酚氧化酶纯化,纯化倍数为6．28倍．该酶对焦性没食子酸、邻苯二酚和L-多巴的Km值分别为9．64mmol／L、6．82mmol／L和4．30mmol／L．这种多酚氧化酶在pH=7．0,37℃时活性最高．利用多种氧化酶抑制剂对该酶活性的抑制结果表明,所用抑制剂对其均有不同程度的抑制作用．此外,该酶对EDTA和金属离子比较敏感．     

桑尺蠖多酚氧化酶的纯化及其部分生物化学性质

经硫酸铵分级沉淀,Sephadex G-100凝胶过滤等步骤,使桑尺蠖Phthonandria atrineata(Butler)多酚氧化酶纯化,纯化倍数为6.28倍.该酶对焦性没食子酸、邻苯二酚和L-多巴的Km值分别为9.64 mmol/L、6.82 mmol/L和4.30 mmol/L.这种多酚氧化酶在pH=7.0,37℃时活性最高.利用多种氧化酶抑制剂对该酶活性的抑制结果表明,所用抑制剂对其均有不同程度的抑制作用.此外,该酶对EDTA和金属离子比较敏感.     

甘薯叶多酚氧化酶的分离纯化和部分性质研究

经硫酸铵分级沉淀、DEAE-Sepharose离子交换层析、Superdex-200凝胶过滤层析,从甘薯叶中得到多酚氧化酶(PPO)电泳纯制品.酶比活力为50 075.43 U/mg,纯化倍数为597.99,回收率为0.48%,相对分子质量约为6.44×104,最适pH值为6.5,最适温度为35℃,且在25～55℃内较稳定.有机溶剂甲醇、乙醇、异丙醇对多酚氧化酶均有一定抑制作用,其抑制作用由强到弱顺序为异丙醇、乙醇、甲醇.低浓度的抗坏血酸和亚硫酸钠对多酚氧化酶有强烈的抑制作用,柠檬酸次之,EDTA-2Na的抑制效果较弱.     

中华寿桃果肉多酚氧化酶的纯化研究

 研究了影响中华寿桃果肉褐变的关键酶——多酚氧化酶(PPO)的纯化。结果表明,采用30%硫酸铵盐析、Phenyl Toyopearl柱层析、90%硫酸铵再次盐析、Sephadex G-25、DEAE-Sepharose柱层析等5步分离,可得到电泳均一的PPO,其纯化倍数为110倍,产率为0.36%,分子量约为66.0kD。     

甘薯叶多酚氧化酶的分离纯化和部分性质研究

经硫酸铵分级沉淀、DEAE-Sepharose离子交换层析、Superdex-200凝胶过滤层析,从甘薯叶中得到多酚氧化酶(PPO)电泳纯制品.酶比活力为50 075.43 U/mg,纯化倍数为597.99,回收率为0.48%,相对分子质量约为6.44×104,最适pH值为6.5,最适温度为35℃,且在25~55℃内较稳定.有机溶剂甲醇、乙醇、异丙醇对多酚氧化酶均有一定抑制作用,其抑制作用由强到弱顺序为异丙醇、乙醇、甲醇.低浓度的抗坏血酸和亚硫酸钠对多酚氧化酶有强烈的抑制作用,柠檬酸次之,EDTA-2Na的抑制效果较弱.     

两种抑制剂对肥城桃(Prunus persica)多酚氧化酶抑制类型的研究

本文用丙酮和硫酸铵沉淀的方法将肥城桃(Feicheng peach)多酚氧化酶部分纯化，纯化倍数为5．11倍。研究了二乙基二硫代氨基甲酸钠和硫脲对该酶活性的抑制类型。结果表明这两种抑制剂均属非竞争性抑制类型。     

桃果实多酚氧化酶性质的研究

对大久保和绿化3号桃果实的多酚氧化酶(PPO)的性质进行了初步研究,分别就酚类物质、PPO 的底物专一性、pH 值与底物浓度对 PPO 活力的影响进行探讨。结果表明,两个桃品种的多酚氧化酶均有几个最适 pH 值;大久保的 PPO 最适天然底物为咖啡酸,绿化3号则是儿茶酚;对底物动力学研究表明,大久保在 pH 5.6,17.5℃条件下 Km=39.65mmol·L~(-1),Vm=3.86 OD·min~(-1),绿化3号在 pH5.02,17.5℃条件下 Km=16.6mmol·L~(-1),Vm=1.64 OD·min~(-1),说明对底物儿茶酚的亲和力大久保弱于绿化3号。     

草菇多酚氧化酶及过氧化物酶特性的研究

草菇多酚氧化酶（ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｏｘｉｄａｓｅ）与过氧化物酶（ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ）的最适ｐＨ分别为６０～６８、６７～７４,最适温度分别为３０～３２℃、２５～２８℃在最适条件下,前者的活性远高于后者,当ｐＨ８６及温度４３℃或４８℃处理１ｍｉｎ,二者活力显著降低;但是,先在３５～３８℃保温１ｈ再测定,发现二者的最适温度分别达４０～４１℃、５２～５３℃,升温至８０℃１０ｓ,过氧化物酶仍表现活性Ｏ２对多酚氧化酶活性影响极大,而对过氧化物酶活性影响较小金属离子Ｍｎ２＋、Ｚｎ２＋、Ｍｇ２＋对二者均有强烈激活作用,Ｃａ２＋对二者的作用都很弱,Ｆｅ２＋、Ｃｕ２＋对前者作用明显强于后者二者的反应进程及酶浓度与反应速度的关系,表现出较大的差异     

满江红多胺氧化酶的抽提与初步纯化

报告了满江红（Azollaimbricata）多胶氧化酶抽提条件与初步纯化的研究结果．以0．1mol／L磷酸缓冲液为介质抽提该酶时的最适pH约为6．5,添加0．10－0．15mol／LNaCl和2％－4％（质量体积比）PVP可改善抽提效果．用硫酸铵沉淀法、PEG－6000沉淀法和丙酮沉淀法分别对酶抽提液进行初步纯化,发现丙酮沉淀法纯化效果最优,用1．2倍（体积比）冷丙酮（－15℃）沉淀时可提纯该酶8．92倍,产率达74．6％．     

培养料对黑木耳生育及多酚氧化酶活性的影响

以稻草和玉米芯为培养料,分别按比例加木屑栽培黑木耳(Auricularia auricula),结果表明,用稻草栽培黑木耳,产量随木屑比例增加有提高趋势,其木屑比例大小明显影响木耳的生育和多酚氧化梅的活性;用玉米芯栽培木耳,加木屑与否,其产量无显著差异,同时对木耳生育和多酚氧化酶活性影响也不明显。     

猪凝血酶的分离纯化及部分性质研究

经等电点沉淀,DEAE离子交换纤维素柱层析和Sephadex G-100 分子筛层析从猪血浆中纯化得到猪凝血酶,酶比活力为2 000 U/m g,纯化倍数为100,酶活力回收为56% ,酶反应的最适pH 和温度分别为7.0 和37℃,SephadexG-100层析测得酶分子量为36 000。猪凝血酶的稳定性较差,40℃保温27 h, 酶活力下降84% 。高浓度的盐对酶稳定性有较大的影响,在2 m ol/LNaCl下放置3 h,酶活力下降50% 。     

甘蓝型油菜黄籽与黑籽种皮多酚及PPO的比较

比较了相同遗传背景下的甘蓝型黄籽和黑籽油菜在种子形成过程中的多酚含量和多酚氧化酶（PPO）活性的动态变化,对种皮中的多酚氧化酶进行了同工酶分析。结果表明,黑籽的多酚含量和PPO活性明显高于黄籽。3对材料的6个样品均有4条相同酶带,其中黄籽均有5条谱带,黑籽比黄籽多1－3条谱带,且有1条Rf值为0.41的特异酶带。     

贮藏荔枝果皮多酚氧化酶及过氧化物酶与褐变的研究

以“淮枝”的材料,着重研究了分析了荔枝（ＬｉｃｈｉｃｈｉｎｅｎｓｉｓＳｏｍ）贮藏过程中果皮多酚氧化酶及过氧化物酶的活性及其同工酶谱的变化,结果发现,荔枝果皮多酚氧化酶（ＰＰ）和过氧化物酶（ＰＯＤ）均具有游离态和结合态两种形式,它们在果皮褐变过程中活性的变化规律有所差别,随着果皮的褐变,ＰＰＯ和ＰＯＤ均有新的同工酶带出现,新酶带与酶活性的变化和果皮褐变程度有关。     

YIELD AND FRUIT QUALITY OF ALMOND,PEACH AND PLUM UNDER REGULATED DEFICIT IRRIGATION

• Regulated deficit irrigation was assessed in almond, peach and plum over 3 years.• Fruit-growth slowdown stages are appropriate periods to apply deficit irrigation.• Peach yields were unaffected under a regulated deficit irrigation of 75% ET_C.• Regulated deficit irrigation of 50% ET_C maintained yields of almond and plum.• Fruit quality improved under regulated deficit irrigation.The effects of regulated deficit irrigation (RDI) on the performance of almond cv. Tuono, peach cv. JH-Hall and plum cv. Stanley were assessed on the Saiss Plain (NW, Morocco) over three consecutive growing seasons (2011–2013). Irrigation treatments consisted of a control, irrigation applied to fully satisfy crop water requirements (100% ET_C), and two RDI treatments, irrigation applied to 75% ET_C (RDI-75) and 50% ET_C (RDI-50). These three treatments were applied during fruit-growth slowdown periods corresponding to Stages II and III in almond and Stage II in peach and plum. Yield and fruit quality traits were determined. The effect of RDI differed between species. Yield and fruit size were reduced significantly only in peach under RDI-50. Fruit quality improved in this species in the first year of the experiment, with an increase of sugar/acid ratio and polyphenol content. Plum quality also improved but the effects were significant only in the second and third years. Similar results were recorded in almond kernel, but their epidermal grooves were deeper under RDI-50, and this may have affected their commercial value. It is concluded that water can be saved during the fruit-growth slowdown period by up to 25% in peach and 50% in almond and plum with improvements in fruit quality without affecting total yield.     

樟树叶片抑菌化合物的分离纯化及其部分特性研究

以碱提取、酸沉淀的方法从樟树叶片中分离得到一种棕黑色粉末，该提取物主要为有色化合物Ａ和Ｂ的混合物，化合物Ａ的含量成倍高于化合物Ｂ；经ｓｉｌｉｃａｇｅｌ、Ａｌ＿２Ｏ＿３及ｓｅｐｈａｄｅｘＧ－２５柱层析分离纯化等步骤，得到纯化的红棕色化合物Ａ，经ＰＡＧＥ、ＰＬＣ及ＴＬＣ检测均为单一谱带或单一斑点；该化合物熔点为２８０．２９℃，λ＿（ｍａｘ）￣（ＫＯＨ）为２１３ｎｍ，Ｅ１ｃｍ１％为３４２．５，肩峰为２５７ｎｍ，ｐＩ为３．７，对大肠杆菌、金黄葡萄球菌、巨大芽孢杆菌、枯草杆菌及毛霉有较强的抑菌活性。     

嗜水气单胞菌胞外蛋白酶ECPase54的纯化及特性分析

嗜水气单胞菌（Ａｈ）Ｊ－１株的液体培养物上清在５６℃或与乙二胺四乙酸（ＥＤＴＡ）或丝氨酸蛋白酶抑制剂苯甲基磺酰氟（ＰＭＳＦ）作用，其胞外蛋白酶（ＥＣＰａｓｅ）的活力有不同程度的下降，将酪蛋白掺入丙烯酰胺聚合后，加Ａｈ－Ｊ－１上清作ＳＤＳ－ＰＡＧＥ３７℃原位消化，染色，显示上清中存在至少５种分子量不同的蛋白酶，ＡｈＪ－１株的培养上清经硫酸铵沉淀，ＤＥＡＥ－纤维素离子交换层析和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２０