分子生物学诊断技术的应用(四)

<正>7核酸序列分析技术核酸是生命的遗传物质,遗传信息存在于4种单核苷酸(A,G,C,T)按不同顺序连接而成的核酸分子中,迅速准确地解读决定生命性状的密码,测定基因组的核酸序列,对于识别病原,揭示疫病变化规律     

几种分子生物学技术在兽医领域中的应用

第三讲聚合酶链反应技术及其应用１概念聚合酶链反应（Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ,ＰＣＲ）用于扩增位于两段已知序列之间的ＤＮＡ区段。在由ＤＮＡ聚合酶催化的一系列反应中,使用了两段长度为１６～２４ｂｐ的寡核苷酸作为反应的引物（ｐｒｉｍｅ...     

分子生物学技术在感染性疾病诊断中的应用进展

近年来，随着分子生物学技术的发展，利用分子生物学技术诊断感染性疾病的病原日益受到瞩目，发展迅速。现从核苷酸、蛋白质和抗体三个方面论述分子生物学运用于诊断感染性疾病的研究进展。     

PCR技术在犬病毒病诊断上的应用

随着分子生物学的发展，PCR基因扩增技术已越来越多的应用于犬的病毒病、细菌病和寄生虫病的诊断和研究之中。聚合酶链反应(Polymerase chain reaction．PCR)技术是在从样品中提取病原DNA或RNA后，体外扩增某一特定病原的DNA或RNA序列的一种分子生物学方法。与常规病原诊断方法相比，PCR技术更特异，更快捷。目前PCR技术已广泛应用于犬病毒病诊断。     

分子生物学诊断技术的应用(一)

随着分子生物学技术的飞速发展,尤其是分子遗传学的进步,大大提高了动物病原的诊断水平。动物病原的实验室诊断技术已从常规的病原分离鉴定以及抗原和抗体的免疫学检测,进入到可对病原基因序列和结构直接进行测定的分子生物学水平,同时也促进了疫病快速诊断技术发展。近几年随着国家对市县级动物疫病防控设备投资逐年加大,疫病防控诊断平台建设不断加强,兽医技术人员希望普及动物分子生物学诊断技术。本刊特邀湖北省农业科学院畜牧兽医研究所杨峻研究员对分子生物学诊断技术在兽医学科领域的应用进行概述,为大家在实际应用时提供参考。主要内容包括核酸探针技术、单克隆抗体技术、核酸扩增、核酸电泳、免疫印迹技术、图谱分析、核酸序列分析、DNA芯片技术等。     

分子生物学诊断技术的应用(三)

<正>5免疫印迹技术免疫印迹又称Western blot,与DNA的South-ern印迹技术相对应,两种技术均把电泳分离的组分从凝胶转移到一种固相载体(通常为NC膜),然后用探针检测特异性组分。不同的是,Western blot所检测的是抗原类蛋白质成分,所用的探针是抗体,它与附着于固相载体的靶蛋白所呈现的抗原表位发生     

现代诊断技术在兽医学上的应用及其进展

1　免疫酶技术 (ＥＩＡ)ＥＩＡ是根据抗原 -抗体结合的特异性 ,以酶作标记物 ,酶对底物具高效催化作用的原理而设计 ,既可用于抗原的检查 ,也常用于血清抗体的检测。1 .1　酶联免疫吸附试验 (ＥＬＩＳＡ)ＥＬＩＳＡ是应用最广泛的免疫酶技术 ,包括间接法、夹心法、竞争法等。自ＶＯＬＬＥＲ和ＢＩＤＷＥＬＬ(1 975 )首先报道了应用间接ＥＬＩＳＡ方法检测病毒特异性抗体以来 ,ＥＬＩＳＡ方法已普遍应用于传染病的流行病学普查、抗体水平的评价以及疫苗质量的监控和标化等 ,迄今为止大多数动物病原体均已发展或报道了ＥＬＩＳＡ方法的研究与…     

核酸技术在禽病诊断中的应用

近年来 ,随着分子生物学发展 ,禽病诊断水平有了很大提高。禽病的实验室诊断技术已从常规的病毒分离鉴定以及抗原、抗体的免疫学检测 ,进入到可对病原微生物的基因序列和结构直接进行测定的分子生物学水平。核酸技术是分子生物学技术的一部分 ,它包括聚合酶链反应 ,核酸探针及限制性内切酶酶切片段分析和核酸序列测定。核酸技术的核心是根据病原体的遗传物质ＲＮＡ或ＤＮＡ进行鉴别定性 ,其目的是检测病原体 ,同时鉴定血清型、亚型或基因型 ,核酸序列分析定性的水平是其他方法不可比拟的。核酸技术具有高灵敏性、高特异性等优点 ,目前该技术…     

分子生物学技术在兽医上的应用

随着分子生物学的发展，分子生物学常见实验技术的应用日益广泛，其对畜牧兽医高层次的研究与发展以及临床疾病防治与诊断起着重要的作用。１限制性内切酶及其应用限制性内切酶ｒｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎｅｎ-ｄｏｎｕｃｌｅａｓｅ简称限制酶的发现和应用在基因工程和分子生物学的发展过程中起着举足轻重的作用。它和其它修饰酶是分子生物学家在ＤＮＡ操作过程中所使用的基本工具。由于这些酶的使用，使分子克隆方法不断创新，简化了分子克隆的操作，而且拓宽了它的研究领域。１．１限制性内切酶的发现及分析技术原理Ａｒｂｅｒ等１９６３根据…     

家禽传染病的现代分子生物学诊断技术

对于集约化养禽业，在疫病的诊断上要体现“准”和“快”。家禽传染病的常规诊断方法虽然具有许多优点，但其费时、敏感性低、繁琐、漏诊、误诊的缺点也同样明显。随着分子生物技术的不断应用和发展，现代分子生物学技术如核酸杂交技术、聚合酶链式反应（PCR）技术、限制性片段长度多态性分析（RFLP）、核苷酸序列分析和基因芯片等，将在禽病的准确、快速诊断中扮演重要角色。     

PRRS分子生物学诊断技术的研究进展

猪生殖与呼吸系统综合征（PRRS）是由PRRSV导致的以母猪繁殖障碍和仔猪严重的呼吸道症状及高死亡率为特征的猪病毒性传染病。持续感染是PRRSV的一大特征,为了防制PRRS和优良种畜的推广,兽医学者不断努力研制各种分子生物学方法诊断检测技术。该文就核酸探针杂交、反转录聚合酶链式反应以及重组蛋白分子诊断技术等在该病的研究应用方面予以综述。     

猪圆环病毒的分子生物学研究进展

圆环病毒(circovirus)是近几年引起广泛重视的新的病毒,它可以感染植物、动物和人。猪圆环病毒(porcinecircovirus)主要引起猪的一种多系统功能障碍性疾病,临床上以新生仔猪先天性震颤(congenital tremors CT)和断奶仔猪多系统衰竭综合征(postweaning multisystemicwasting syndrome PMWS)为表现形式,由于圆环病毒的感染,破坏了机体的免疫系统,临床上常呈并发或继发感染猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratorysyndrome PRRS)、细小病毒(porcine parvovirus PP)、猪流感(swine influenza virus SIV)、猪瘟(hog cholera HC)、伪     

猪细小病毒分子生物学、诊断及核酸探针的研究进展

自1966年M ayr和M ahnel发现和证实猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)存在及其致病性以来,国内外学者对其进行了广泛深入的研究,其主要症状是引起怀孕母猪流产、死胎、胎儿木乃伊化等,该病在世界范围内广泛分布,给养猪业造成了全球性的巨大的经济损失。在我国经产母猪及种公猪感染阳性率高达90%以上[1]。PPV的早期研究主要集中于病原学、理化性质和防制等方面,20世纪80年代以来,各国的研究者逐渐加强了关于PPV分子结构和基因组成等方面研究。迄今为止,基本研究清楚了PPV基因组的一级结构、转录图谱和翻译图谱。目前,国内外已经分离…     

禽流感基因诊断技术研究进展

禽流感是由流感病毒引起的一种人和动物的高度传染性疾病,不但造成养禽业的巨大经济损失,还对人类公共卫生安全存在威胁。因此,快速、准确的基因诊断技术对于禽流感的防控显得非常重要。近年来,主要有RT—PCR技术、荧光定量RT—PCR技术、核酸依赖扩增技术（NASBA）以及基因芯片等基因诊断技术。文章就这些方法的基本原理、检测优点以及应用现状进行综述,以期为有效控制禽流感的发生与流行提供有力技术支撑。     

分子生物学技术在动物营养学上的应用及其发展前景(下)

(接上期 )　　2.2植酸酶的基因工程 　　植酸酶的研究已有近 40年的历史，植酸酶作为一种单胃动物的饲料添加剂，其饲喂效果已在世界范围内得到广泛的确证，随着饲料工业的发展和分子生物学的兴起，从 90年代开始的植酸酶的分子生物学研究，已成为世界性的研究热点之一。目前国内外研究的主要思路集中在通过基因工程这一手段解决饲用植酸酶的两个主要问题：一个是植酸酶在天然材料中表达水平太低，这造成植酸酶难以大量生产及生产成本过高的问题，通过基因工程技术，利用生物反应器则有望成百上千倍地提高它的表达量；另一个问题是天然植酸…     

分子生物学技术在种猪选育中的应用

前　　言生物技术是二十世纪末人类科技史中最令人瞩目的高新技术 ,为人类解决疾病防治、人口膨胀、食物短缺、环境污染等一系列问题带来了希望。生物技术基础上发展起来的分子生物学技术在农业动植物的遗传改良、新品种选育等方面已得到越来越多的实践和应用 ,为作物的增产、品质改良、动物生产性能的提高等提供了新的方法和途径。本文拟就分子生物学技术在种猪选育中的应用 ,从分子生物学技术的概念、猪分子生物学研究进展、在种猪选育中的实现途径、应用优点、应用实例等方面作一概述。分子生物学技术的概念Ｗａｔｓｏｎ和Ｃｒｉｃｋ(1 9…     

重组酶聚合酶扩增技术在疾病快速检测中的研究进展

重组酶聚合酶扩增技术(RPA)是近年来开发的核酸扩增技术,在保证灵敏、特异的同时,操作简单、耗时短,能够在常温下10~20分钟内对靶DNA进行扩增,对实验设备、资源的要求低,适用于兽医、食品安全、生物防御、农业等领域的快速诊断。本文介绍了该技术的原理及目前在病毒、细菌、寄生虫等病原检测方面的应用,展望了其现场检测方面的应用前景。