康宁木霉和白腐真菌原生质体融合子生物学特性的研究

为考察康宁木霉3.2774(Trichoderma.koningii 3.2774)和白腐真菌5.776(Phanerochaete chrysosporium 5.776)原生质体融合子生物学特性,采用同工酶聚丙烯凝胶电泳、插片培养、拮抗试验和生长曲线的测定,对康宁木霉和白腐真菌的融合子进行鉴定,结果表明:融合子酯酶同工酶电泳有不同于亲本的新酶带出现,融合子菌落与亲本之间存在拮抗,菌丝颜色不同,菌株生长速度慢于亲本菌株,这些生理生化性状上与亲本存在明显的差异,是一株融合双亲性状的新菌株。     

石蒜根际拮抗细菌HH1的筛选鉴定及其抑菌活性研究

[目的]以小麦赤霉病菌(Fusarium gramiuearum)为筛选靶标,分离石蒜根部土样中的拮抗细菌并研究其抑菌特性及机制。[方法]通过抑菌活性筛选拮抗菌株,根据菌落及细胞形态观察、生理生化试验结果和16S rRNA基因序列分析进行菌种鉴定,并对拮抗菌株产活性抗真菌成分的最佳培养基和培养条件进行优化。通过显微观察拮抗菌发酵上清液对病原菌生长的影响,对活性物质的热稳定性、酸碱稳定性及对蛋白酶K敏感性进行测定。[结果]共获得有稳定拮抗效果的菌株7株。以其中1株对小麦赤霉病菌具有较好拮抗作用的细菌HH1作为进一步研究的对象,鉴定其为短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)。抑菌试验发现菌株HH1能够分泌抑制小麦赤霉病菌孢子和菌丝生长的物质。沉淀菌株HH1发酵上清液中活性物质的最适硫酸铵饱和度为60%。优化了菌株HH1产活性抗真菌成分的培养基和培养条件。对活性物质热稳定性、酸碱稳定性及对蛋白酶K敏感性的测定结果显示:拮抗物质在p H中性和低于70℃的条件下较稳定,70℃以上的温度和蛋白酶K处理抗菌物质,其抑菌活性显著下降。[结论]初步推测菌株HH1所产拮抗物质可能是蛋白质类。     

姬菇258和金凤2-1杂交构建姬菇新菌株

以姬菇258和金凤2-1为亲本,单孢杂交,获得杂交菌株81株。通过定性出菇表明,其中44号、6号、115号和7号菌株子实体形态具有姬菇的典型特征。通过拮抗反应、ISSR分子标记及聚类分析表明,这4株姬菇新菌株与亲本之间存在遗传差异,证实了杂交姬菇新菌株的真实性;4株新菌株之间也各自保持着个体遗传上的独立和稳定,即构建创制出了4株杂交姬菇新菌株。     

新疆野生阿魏菇原生质体的再生与单核菌株交配型测定

【目的】利用原生质体单核化技术获得具有优良性状的阿魏菇(Pleurotus ferulae)新菌种,为新疆野生阿魏菇新品种的保育及产业化应用提供技术支撑。【方法】采用原生质体制备技术获得阿魏菇单核菌株并进行交配型测定。【结果】酶解3.5 h时,PL01、PL163与 PL176等3株野生阿魏菇亲本菌株的原生质体释放量最大,浓度最高达20.6×10⁵个/ mL,通过优化的原生质体单核化技术最终获得50个单核菌株,亲本菌株PL163、PL01、PL176原生质体单核化率分别为 25.68%、12.8%、10.8%,获得率较低。对其进行了交配型测定,每株亲本菌株得到2种交配型的单核菌株。其中,菌株PL01与PL163、 2种交配型获得比例均为1∶3,而PL1762种交配型获得比例为1∶4。每个亲本菌株与获得的单核菌株在菌丝长速、菌落形态方面均具有差异。以不同交配型的单核菌株PL01-P16、PL01-P49、PL163-7、PL163-24 、PL176-23、PL176-39作为杂交育种材料进行配对,获得12株性状优良的杂交菌株。拮抗反应表明,12株杂交菌株与亲本之间形成明显隆起的拮抗带,与亲本菌株显著不同。【结论】3株阿魏菇野生菌株在原生质体再生单核获得率、长速、形态等方面具有丰富的多样性,获得的杂交菌株为新疆阿魏菇新品种的保护奠定了基础,并为选育优良阿魏菇杂交品种提供了良好的种质材料。     

香菇9608与一株野生香菇单双杂交及优良杂交菌株筛选

[目的]通过杂交选育出菇早、产量高、菇形好、硬度大的香菇优良菌株。[方法]以香菇9608和野生香菇菌株FP作为杂交亲本,经单孢分离获取9608不同核相的单核菌株,与野生香菇菌株进行单双杂交,获得杂交菌株,对其进行常规栽培,测定农艺性状,筛选优良菌株。[结果](1)27株杂交菌株的菌丝生长速率、菌落长势及生长指数差异显著(P0.05),仅1株生长指数大于2个亲本,有10株生长指数处于2个亲本之间;(2)有24株杂交菌株正常出菇,其子实体形成时间及温度差异较大,19株杂交菌株的子实体形成时间比双亲短,其子实体形成温度均高于2个亲本,其中8株于60 d内形成子实体;(3)不同菌株的产量差异显著,有16株子实体产量超过双亲;(4)成菇数量、单菇质量及菇形差异较大,其中D97FP的成菇数量最多,D106FP和D81FP单菇质量优于亲本,D111FP的菌盖厚度最大,D170FP菌盖直径最大,D21FP的菌柄最短,D178FP菌柄直径最小;(5)不同菌株的菌盖硬度差异显著,18株杂交菌株中,有17株菌盖硬度大于亲本;(6)D100FP和D97FP的选择指数较大,并且与亲本均有拮抗现象。[结论]本研究采用的育种方法有效,筛选优良菌株的手段具有一定的合理性,筛选出的优良菌株(D100FP和D97FP)具备出菇早、产量高、硬度大等诸多优点,可为香菇生产及菌种选育提供良好的材料。     

大丽轮枝菌拮抗细菌8-52菌株的筛选与鉴定

为筛选对棉花黄萎病病原菌大丽轮枝菌(Verticillium dahliae)具有拮抗作用的芽孢细菌,采用改良的琼脂平板扩散法,通过初筛从各地的土样中分离到83株拮抗细菌菌株,对其中的69株进行了复筛,得到一株具有较强的抑菌活性的拮抗细菌8-52菌株。对该菌株进行了形态特征的观察、生理生化试验和16S rDNA的序列分析。将该菌株的形态特征和生理生化特性鉴定的结果与相应种、属模式菌的性状相对照,认为菌株8-52与芽孢杆菌(Bacillus)的相应性状很相近。根据16S rDNA序列相似性分析,此菌株与Bacillus velezensis标准菌株AB245422的16S rDNA序列相似度达99.78%,因此鉴定拮抗菌株8-52为Bacillus velezensis。     

拮抗木霉菌株T32的紫外线诱变改良

采用紫外线诱变处理与含药(百菌清)培养基驯化相结合的方法,对拮抗木霉菌株T32进行改良,获得了4株在百菌清杀菌剂2 000 mg/L浓度水平下仍能较好生长的抗性菌株,并通过测定其生长速率、产孢量、敏感性、拮抗作用以及遗传稳定性等指标,筛选出了性状优良的抗性菌株T32-5-10m。试验结果表明,经诱变的木霉菌株T32-5-10m与亲本木霉菌株T32相比较,其抗药性提高了20倍,生长速率和产孢能力均高于亲本菌株,连续转接10代,其抗药性十分稳定,且对供试3种土传病原真菌的抑制率达87.56%～89.11%。     

卵孢小奥德蘑菌株的拮抗及ISSR遗传分析

鉴定卵孢小奥德蘑菌株的亲缘关系，以期为卵孢小奥德蘑菌株新品种选育、优质种源筛选提供依据。引进国内不同地区的卵孢小奥德蘑菌株15个，通过拮抗试验和ISSR分子标记对15个菌株进行鉴定和遗传多样性分析。结果表明：供试菌株之间的拮抗反应有一定差异，其中有44组产生拮抗反应，61组没有产生拮抗反应；ISSR分子标记分析结果表明，供试菌株在相似性72%水平上，聚为7大类群；结合拮抗反应和ISSR分析，15个卵孢小奥德蘑菌株具有较的遗传差异和遗传多样性，其中菌株2、3亲缘关系较近且聚成一类，菌株1、6、14均单独聚成一类，与其他菌株有较大差异，可作为育种的备选亲本菌株。     

白灵菇杂交育种研究

为选育出一种适宜于当地栽培的白灵菇高产品种,本研究以白灵菇1号菌株和2号菌株为亲本,通过单孢杂交育种技术选育出白灵菇P3号杂交新菌株。白灵菇P3号杂交新菌株经过与两亲本的拮抗试验、品比试验鉴别,具有产量高、抗性强的性状,平均生物学效率达57.44%。     

姬菇杂交菌株的出菇产量及商品性研究

通过对40株姬菇杂交菌株与2个亲本菌株进行栽培出菇试验,考察其出菇产量和商品性状.结果表明:40个杂交菌株与亲本J2-1的平均单产比较,其中有29个杂交菌株的平均单产高于亲本,13个杂交菌株(506、36、16、66、58、670、238、444、185、296、258、191和203)的差异达到显著水平,9个杂交菌株(58、670、238、444、185、296、258、191和203)的差异呈极显著水平;对具有典型姬菇特征的7个杂交菌株(36、41、68、71、258、432、608)与2个亲本菌株进行菇体商品性比较表明,4个菌株(608、36、258、432)是商品性较好的杂交菌株,其中杂交菌株432综合商品性状表现最佳.     

伊犁蒿的研究及应用

伊犁蒿是1984年从新疆天山北坡低山荒漠草场上蒿类植物群体中根据株型、株高等外部形态特征两次混合选择选出三个优系,再经品比、生产试验、原种繁殖等驯化选育而成的野生栽培种,生产推广面积2.6万ha。     

平菇数量性状遗传基础研究

选用８个平菇品种及其配制的２４个自交菌株，研究了２１个数量性状的遗传变异特性。结果表明，平菇自交后代与其亲本性状的均值有明显差异。因性状和品种不同，由遗传变异引起的性状分离多少亦不同。根据各品种及其自交后代品种内和品种间变异的分析，将性状初步归为３类，产量性状，菌丝生长速度，出菇期和菌柄长度等重要经济性状表现了特有的遗传变异特性。     

四个平菇品种比较试验

为了筛选出适宜宁夏地区栽培的平菇品种,采用生料发酵法,利用日光温室袋栽技术,对4个供试品种菌丝生长情况、农艺性状、出菇能力及生物学效率等进行了比较研究。结果表明:印第安纳综合性状优良,菌丝长势强,子实体肉厚,菌盖颜色为灰黑色,短柄,生物学效率高,较受市场欢迎,可以在当地进行推广。     

一株絮凝剂产生菌TS-1的分离与鉴定

[目的]筛选鉴定出高絮凝活性的微生物絮凝剂产生菌。[方法]通过培养基培养分离纯化出高絮凝活性的菌株并通过培养特征观察和生理生化特征测定鉴定筛选出的菌株。[结果]通过用稀释涂布平板法和平板划线法从土壤中分离、纯化和初筛后,从供试土样中共分离到14株具有絮凝性能的细菌,经复筛后得到5株絮凝活性较高（絮凝率〉70%）的絮凝剂产生菌,其中1株经多次传代培养后絮凝活性仍很稳定（絮凝率始终〉90%）,其标记为TS-1。TS-1菌为具有荚膜的革兰氏阳性杆菌,并且菌体内无类脂物质如聚β-羟基丁酸。TS-1为解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）,故将该菌定名为Bacillus TS-1。[结论]该试验筛选出的菌株可用于淀粉工业废水的絮凝处理和生化处理。     

弱光下PGPR对重瓣百合开花期光合特性及生长的影响

以荷兰重瓣百合‘Carolina’为材料,利用盆栽试验,研究弱光下单接种根际促生细菌鞘氨醇杆菌属(SN-2)、不动杆菌属(BG和XG)和黄金杆菌属(F)及4种混合菌液接种对植株的光合指标及生长发育的影响。结果表明：在70%遮荫条件下,接种不同菌株对‘Carolina’开花前后的光合特性及生长的促进效应存在一定差异性;与对照相比,接种XG、SN-2和HH明显提高了植株的最大净光合速率(P_max)、光饱和点(LSP)和表观量子效率(ϕ),其中接种HH对‘Carolina’产生的影响要大于单接种XG和SN-2,说明不同菌种之间可能存在交互效应,而接种F和BG对‘Carolina’植株的促生效果不明显,这可能与光照强度有关。此外,接种XG、SN-2和HH显著提高了‘Carolina’叶片叶绿素相对含量和株高,HH对株高的促进作用较为明显,且HH和SN-2使‘Carolina’整体开花时间比对照提前了3~7 d,XG次之。     

水稻空间诱变突变品系主要农艺经济性状及稻瘟病抗性变异

对籼稻品种特籼占13经返回式卫星搭载空间诱变的21个高代(SP10)突变品系的主要农艺经济性状以及稻瘟病抗性表现进行考察．结果表明：参试的各突变品系大部分主要农艺经济性状均表现明显的变异,既有正向也有负向变异;不同突变品系对稻瘟病的抗性表现差异很大,同一突变品系对不同致病菌株的抗性表现差异也较大,表明空间诱变对稻瘟病抗性变异作用明显但较为复杂．从参试突变品系中可选出在株高、熟期、产量、外观品质和抗性等性状同时得到明显改良的新品种和新种质．     

中华鳖穿孔病的病原研究

对陕西省西安、咸阳和宝鸡等地区养殖的鳖穿孔病病原菌进行了分离鉴定,在分离出的６种菌株中,经过人工感染试验,其中９４０１,９４０２,９４０３和９４０５菌株对健康幼鳖表现出较强的致病力,出现与自然病鳖相同症状;对小白鼠感染试验,４种菌株均能致死。由此说明这４种菌株为穿孔病的病原菌。对菌体形态特征、培养特性和生理生化反应的鉴定,证明致病菌为嗜水气单胞菌（ＡｅｒｏｍｏｎａｓｈｙｄｒｏｐｈｉｌａＳｔａｎｉｅｒ）和普通变形杆菌（ＰｒｏｔｅｕｓｖｕｌｇａｒｉｓＨａｕｓｅｒ）。     

新疆伊犁野生樱桃李表型多样性的聚类分析及优良品系的形态特征

对人工仿生栽培的野生樱桃李,按农艺性状、抗逆性状及经济性状多样性,初步筛选了41个优良单株;又对这41个优良单株从果色、可溶性固形物含量、单果平均质量大小、核果比、总酸、单株平均产量6个性状进行了聚类分析,经过综合评比,最后选出4个形态特征优良的品系和11个储备良种的种质资源。     

云南马铃薯细菌性软腐病原菌的分离鉴定

 从云南省马铃薯产区取样,用厌气技术分离纯化了42个软腐欧文氏杆菌菌株。根据品种差异代表性地选出20个菌株进行主要细菌学性状鉴定,并在此基础上进行分类。结果表明:13个菌株（占65%）是Erwinia carotovora var. carotovora,3个菌株（15%）是Erwinia chrysanthemi,其它4个菌株根据其生理生化特性划归为中间型,介于Erwinia carotovora var. carotovora和Erwinia chrysanthemi之间。     

一株絮凝剂产生菌TS-1的分离与鉴定

[目的]筛选鉴定出高絮凝活性的微生物絮凝剂产生菌。[方法]通过培养基培养分离纯化出高絮凝活性的菌株并通过培养特征观察和生理生化特征测定鉴定筛选出的菌株。[结果]通过用稀释涂布平板法和平板划线法从土壤中分离、纯化和初筛后,从供试土样中共分离到14株具有絮凝性能的细菌,经复筛后得到5株絮凝活性较高（絮凝率〉70%）的絮凝剂产生菌,其中1株经多次传代培养后絮凝活性仍很稳定（絮凝率始终〉90%）,其标记为TS-1。TS-1菌为具有荚膜的革兰氏阳性杆菌,并且菌体内无类脂物质如聚β-羟基丁酸。TS-1为解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）,故将该菌定名为Bacillus TS-1。[结论]该试验筛选出的菌株可用于淀粉工业废水的絮凝处理和生化处理。