奶牛超排前卵巢状态对超排效果的影响

本试验初步研究了超排前卵巢状态对超排效果的影响。据直肠检查结果将供体奶牛分为两组 :1组供体卵巢上只有黄体存在 ;2组供体卵巢上不仅有黄体存在还有卵泡存在。经超排处理后 ,1组中 2头供体无发情表现 ;2组中 6头供体无发情表现。 2组供体的不发情率 2 7 3 %显著高于 1组的 6 3 %(P <0 0 5)。两组供体在平均获胚数和平均获可用胚数无显著差异 (P >0 0 5)。     

优势卵泡对供体牛超排效果的影响

利用超声波活体采卵仪,去除具有优势卵泡的荷斯坦母牛卵巢上的优势卵泡,诱发新的卵泡波进行超排处理,并进行了:(1)与发情后9d处在黄体期的母牛进行的超排效果比较;(2)与利用CIDR、孕酮、雌二醇诱发新的卵泡波进行的超排效果比较;与具有优势卵泡但没有去除而进行的超排效果进行比较,从而探讨优势卵泡对奶牛超排效果的影响。结果表明,去除优势卵泡组与CIDR组以及自然发情组的超排结果,3组间头均获卵、受精卵数、可用胚胎数差异均不显著(p>0.05)。带有优势卵泡组超排结果与其他三组相比,头均获卵、受精卵数、可用胚胎数差异极显著(p<0.01),可见超排处理时优势卵泡的存在对超排效果的影响极大。     

促卵泡素在奶牛超排效果上的对比试验

奶牛是单胎动物,超数排卵是有效进行奶牛胚胎移植所必需的技术环节,也是胚胎移植中最难控制的一个环节。一般来说平均每个供体牛可提供5-6个可用胚胎。虽然一头供体牛有时可提供20枚甚至更多的受精卵,但很多时候会得不到l枚可移植的胚胎。影响超排效果的因素主要有两方面,一方面是个体差异导致不同的超排反应;另一方面,不同厂家生产的促卵泡素（FSH）制剂成份比例不同,也是影响胚胎质量和数量的重要因素。目前国产的FSH制品均不是提纯品,而且含有两种活性成分,即FSH／LH。其比例常因厂家和批号不同而有较大的变化。在2005年4月至7月间,我们分别对中国科学院动物研究所生产的促卵泡素（每瓶10mg,售价350元）和从加拿大进口的促卵泡素（每瓶400mg,售价800元）进行超排效果对比试验。就其超排效果进行比较,以寻求较为适用的FSH制品。     

输精部位对奶牛超排效果的影响

对奶牛超排时输精部位进行了研究。结果发现,在其它实验条件相同的情况下,在子宫角部位输精的供体牛的超排效果好于在子宫体部位输精的供体牛,其可用胚数(7±6.353)极显著高于子宫体部位输精的(4.182±1.870)(P<0.01),且无精卵数和停滞卵数(0.222±0.183和0.222±0.183)都分别极显著低于子宫体部位输精的(1.091±0.848和0.909±0.468)(P<0.01)。这说明超排时在子宫角部位进行输精能够提高超排效果。     

影响适龄奶牛超排效果因素分析

胚胎移植技术（Embryo Transfer）已进入商业化阶段，超数排卵（Multiple Ovulation）是胚胎移植的—个关键技术环节。利用外源激素对母畜进行超排，可增加排卵数，获得较多的胚胎。可大大提高优良母畜的繁殖效率。虽然超排技术已得到广泛应用，但不同的奶牛品种、不同的药物、不同的季节、不同的处理方案、不同的营养和饲养管理、不同的个体都是影响超排效果的因素。试验在河南科迪集团生物工程股份有限公司进行，分析影响超数排卵效果的主要因素，以求得较好的处理方案。现报道如下。     

进口、国产促卵泡素超排效果比较

胚胎移植是提高母畜繁殖力的有效方法 ,同时也是进行育种工作的有效手段 ,在畜牧生产中发挥着重要作用 ,并且正向胚胎工程延伸 ,向产业化方向迈进。在胚胎移植过程中 ,供体母畜的超数排卵是不可缺少、且较难控制的一个重要环节 ,效果往往不稳定。其效果除受个体差异、环境条件、饲养水平等影响外 ,激素的种类和剂量也是影响胚胎质量及数量的重要因素。促卵泡素 (FSH)由于药效均衡、超排效果较稳定而被广泛应用。本试验分别采用进口和国产FSH对奶牛进行超排处理 ,就其效果进行比较 ,以寻求较为适用的FSH制品。1　材料与方法1.1　供体奶牛…     

奶牛高效重复超排的试验研究

本研究应用诱发卵泡波的方法,对387头供体牛进行了超数排卵和重复超数排卵的试验,找出了效果稳定的连续超排方法。诱发卵泡波的超排方法(“牛欢” EB P4):在供体牛发情周期的任意一天(发情当天除外),于供体牛阴道放入“牛欢”,同时肌肉注射2mgEB和100mgP4,在放入“牛欢”的第4天开始连续4d用递减法肌肉注射FSH(放入“牛欢”当天为第0d),第6.5￣7d撤除阴道栓,即开始注射FSH的第60￣72h撤栓(FSH开始注射48h后肌肉注射PGF2α);诱发卵泡波的重复超排方法:在前一次超排冲卵后的第9￣12d、14d、44d,给供体牛重新放入牛欢,同时肌肉注射2mgEB 100mgP4,其后的程序同诱发卵泡波的超排方法,开始新一轮的超排,两次超排放栓的间隔时间为25d、30d、60d;利用诱发卵泡波的方法对供体牛进行超数排卵,筛选超排效果良好的供体牛,使一头供体牛年生产可用胚胎的数量在60枚以上,是奶牛高效超排的一种有效方法。     

奶牛超排激素的种类及其效果

超排需用富含FSH或具有类似于FSH活性的促性腺激素处理。而且促性腺激素的效力时间要足以使被刺激的卵泡卵母细胞继续生长、正常受精和胚胎发育。已有几种促性腺激素用于提高肉牛和奶牛的排卵率,或者配合孕酮或PGF_2α以调整发情周期。超排的排卵数一般为15个左右,但是获得的胚胎不到10个,其中可以移植的约为6个。PMSG已用于超排,但是被处理的牛有大量卵泡不能排卵,因为PMSG的半衰期较长。用抗PMSG血清可以降低采集胚胎时存在的大卵泡数量,但是并不能因此而稳定地提高可移植胚胎的数量。FSH的半衰期较短,分几次处理可获得较高排卵率,卵巢上的卵泡虽不太多,但可用的胚胎较多。还可用其他激素如绝经妇女促性腺激素(hMG),但是排卵结果不稳定。用孕酮处理,可调整性周期,可以于性周期中的任何时候进行超排处理,而有利于超排反应。不过效果一般不如于性周期中期用PGF_2α处理的。目前超排处理的重要问题之一是排卵反应很不一致,而且相当高比例的被处理母牛不能提供可用的胚胎。     

不同月龄荷斯坦奶牛对超排效果的影响

用青年牛进行超排可以加快遗传进展，缩短世代间隔。试验对不同月龄的青年奶牛和成年奶牛的超排效果进行了比较，分别为7～9．9月龄、10～12．9月龄、13～15月龄和成年奶牛。183头奶牛中有170头奶牛超排有反应，且不同月龄的奶牛在超排成功率上没有显著差异，但随着超排奶牛月龄的增加．超排成功率有升高的趋势。170头奶牛中有1468枚胚胎冲出，其中920枚胚胎可用（62．7%）。7～9．9月龄的奶牛的平均获胚数为5．4枚，可用胚为2．8枚，显著低于其它组别（P〈0．05）。大于10月龄的青年奶牛各组间的超排效果没有显著差别（P〉0．05），平均获胚数为8．9枚，平均可用胚为5．6枚。不同月龄对未受精卵率的影响不大，但是小于10月龄的青年奶牛的变性胚率要显著高于其它组别的奶牛（P〈0．05）。这些结果表明，大于10月龄以上的奶牛可以成功地进行超排，但是小于10月龄的奶牛不能应用于胚胎的商业化生产中。     

超排兔卵巢卵泡腔充血的研究

兔超数排卵情况下，卵巢上卵泡有卵泡腔充血现象。本实验在光镜和电镜下，对这些充血卵泡进行组织学观察。结果表明卵泡腔充血发生在排卵前后一段时间的各直径级卵泡上；卵泡腔充血主要是由于卵泡颗粒层变薄，血管突破基膜，血细胞流人卵泡腔；卵泡腔充血似乎还与卵泡血管内压增高有直接关系。大的充血卵泡均出现黄体化现象。     

抗热应激措施对奶牛超排效果的影响试验

为了解决热应激降低奶牛繁殖力和引起超排效果差的实际问题，我们于2007年7月份和8月份进行了抗热应激措施对奶牛超排效果的影响试验，现报告如下。     

运用兽用B超仪检查奶牛卵泡、黄体和诊断卵巢疾病的体会

本文通过使用便携式兽用B超仪（荷兰PIEMEDICAL公司生产．型号50STRINGAVET）对奶牛不同发情阶段的卵泡、黄体和卵巢疾病进行了实时超声和动态跟踪，更深入地了解了卵巢的生理和病理变化过程。     

B超检查奶牛同期发情和超数排卵期卵巢发育研究

采用AMI-900型兽用B超,观察了20头成年奶牛同期发情和超数排卵期的卵巢发育。卵巢直径在同期发情期的第2d增大到最大值,第3d恢复后缓慢增长,在第6d再次达到最大。卵巢在超数排卵期的增长速度快,第3d达到最大。其形态也由起初的多形态到最后的长圆形或类圆形。卵泡在同期发情期增长速度平稳,第5d达到最大。卵泡在超数排卵期增长速度加快,卵泡壁也在此期变薄,由4mm下降到2mm。冲胚中卵巢纵横径在63±3.2mm,52±2.3mm时的可用胚胎率最高,为76.3％,而卵巢纵横径在72±3.4mm,58±4.1mm时的黄体数和冲胚数都为最多,分别为14.5±3.2个,10.4±2.5个。因此B超技术检查奶牛同期发情和超数排卵期的卵巢发育是可行的。     

GnRH类似物(LHRH-A3)注射方案对奶牛超排效果的影响

本实验对奶牛超排时LHRH-A3注射方案分别进行了研究。结果发现在其它实验条件相同的情况下,两次输精同时都注射LHRH-A3的供体(第1次注射50μg,第2次注射25μg)的平均无精卵数(0±0)显著低于只在第1次输精同时注射LHRH-A3的(剂量为50μg)(0.222±0.183)(P<0.05),其平均黄体数、平均获胚数、平均获可用胚数都稍高,但差异不显著。这说明采用两次输精同时都注射LHRH-A3的方案可以提高奶牛的超排效果。     

荷斯坦青年母牛超排前卵巢状况对超排效果的影响

对1035头荷斯坦青年母牛的超排效果进行了分析统计。将超排前卵巢状况有记录的669头供体,分成7组;检查卵巢但没有记录的366头供体作为对照。对比7组之间超排效果,‘L+’组的超排效果最好,与其他组比较,差异显著(P0.05)。除‘L+’组外,在其他各组中,胚胎有效率的差异不显著(P0.05)。因此,在选择供体母牛用作超排时,特别是用性控精液配种的供体母牛,可以选用一侧卵巢有黄体,另一侧卵巢有活性的供体母牛。从而进一步提高有效胚胎率和降低成本。     

绒毛膜促性腺激素,促黄体素和促排3号对奶牛卵泡囊肿治疗效果…

本试验应用不同投药途径的绒毛膜促性腺激素，促黄体素和促排３号等地１５０例患有卵泡囊肿的奶扣进行了疗效试验。取得了较好的结果。静注ＨＣＧ５０００单位的治愈率为９４％，比肌注ＨＣＧ５０００－１００００单位的治愈率５０％高４４％；静注ＬＨ２００单位的治愈率为９０％比肌注ＬＨ２００单位的治愈率５０％同４０％；卵泡囊肿侧的阴唇粘膜注射ＬＲＨ－Ａ３１０００μｇ。     

不同超排方法对中国美利奴羊超排效果试验

用３２只中国美利奴成年母羊（５～６岁）分５组进行不同超排药物的超排试验，凭借腹腔内窥镜观察卵巢的反应，并借助其进行手术取卵。经观察：ＦＳＨ各组超排效果好于ＰＭＳＧ组，超排有效率也高于ＰＭＳＧ组（Ｐ＜０．０１）；使用ＦＳＨ各组的超排效果不尽相同，其中Ｃ组ＦＳＨ（７．５ｍｇ）＋ＬＨ，Ｄ组ＦＳＨ（１１．５ｍｇ）＋ＬＨ和Ａ组ＦＳＨ（７．５ｍｇ）＋ＬＲＨ－Ａ３组的可用胚比单用ＦＳＨ的Ｂ组高，未排卵泡数则显著低于Ｂ组（Ｐ＜０．０１）；在Ａ、Ｃ、Ｄ三个处理组中，Ｃ、Ｄ两组的可用胚数高于Ａ组（Ｐ＜０．０１）。试验结果表明，用ＦＳＨ＋ＬＨ处理的Ｃ、Ｄ两组超排效果较好，且组间无明显差异（Ｐ＞０．０５）。