单克隆抗体检测水稻白叶枯病菌的研究

用ELISA双夹心法,以单克隆抗体为第二抗体,对60份水稻白叶枯病的病种和病叶进行检测,2张病叶在7ml0.01molPBS(pH7.2)中的浸出液稀释至32倍表现明显阳性;病种稻壳与PBS的比例(W/V)>1:3时效果明显。被测的病种稻壳浸出液的光密度值大于健种稻壳浸出液光密度值1.2倍可定为阳性。该法灵敏度为1.9μg/50μl。     

玉米素核苷间接酶联免疫吸附测定法的建立

报道了一种利用兔抗ZR 抗血清和辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG 建立的ZR 固相抗原型(或称间接)酶联免疫吸附测定法;该法的线性测定范围是0.05～12.5ng;本文表明应用生物素抗生物素标记系统能大大改善本法的测定灵敏度.     

异戊烯基腺嘌呤核苷（iPA）的间接酶联免疫吸附测定法

以ｉＰＡ－ＢＳＡ为免疫抗原制备了兔抗血清,与其它ｉＰＡ类似物的交叉反应率均低于５％,抗体－抗原亲和常数为６．２６＊１０＾６Ｌ．ｍｏｌ＾－１。利用此抗体与生物素－亲和素标记系统建立了ｉＰＡ的间接酶联免疫吸附测定法,检测线性范围为０．８－１０００ｎｇ．ｍＬ＾－１。     

应用酶联免疫吸附试验检测牛肺疫血清抗体的研究

本文用普通ELISA和BA--ELISA检测牛肺疫血清抗体并与间接血凝试验和补体结合试验作比较,结果表明阳性检出率BA--ELISA(86.7%,13/15)>普通ELISA(80%,12/15)>间接血凝(53.3%,8/15)>补反试验(40%,6/15)。8种类症鉴别血清中6种呈现ELISA阴性。故认为ELISA是一种特异、敏感、快速、简便的血清学检测牛肺疫的方法,适于在现地检验时应用。     

水稻白叶枯病菌单克隆抗体酶联试剂盒的研制及其应用

利用全菌包被酶联免疫吸附试验间接法,建立了能准确快速灵敏测定不同类型的水稻白叶枯病菌的单抗酶联试剂盒。应用该试剂盒检测水稻白叶枯病病叶样品101份、病种样品10份及水稻白叶枯病病菌65个菌株,结果均为阳性,且重复性好,该试剂盒使用简便、灵敏度高、特异性强,有实用价值。     

白叶枯病抗性水稻广亲和恢复系的鉴定和筛选

【目的】为采用分子标记辅助选择利用野生稻抗性基因提供科学依据,并为选育超级杂交水稻提供目标亲本和选育新的恢复系提供亲本。【方法】以白叶枯病抗性水稻中野5112为供体亲本、广亲和恢复系桂649为受体亲本进行有性杂交,将在分离群体中筛选的35份优良目标品系进行田间接菌鉴定,并用与水稻抗白叶枯病基因Xa23紧密连锁的SSR标记引物RM206对中野5112、恢复系桂649及其35份优良杂交后代F4材料进行分子检测。【结果】从桂649×中野5112杂交后代的35个F4品系中,筛选出13个同时具有白叶枯病抗性和广亲和性潜力及其他优良农艺性状的品系,其中属偏粳型11个,属偏籼型的仅有两个;供体材料中野5112及其13份杂交后代材料携有Xa23的抗性等位点,受体材料桂649及其他22份杂交后代材料未携带Xa23的抗性等位点。田间接菌鉴定结果表明,在37个检测材料中,除中野5112外,对白叶枯病表现中抗以上的有18个品系,进一步证明这部分材料已携带有Xa23基因。将13份携有Xa23抗性等位点的材料与籼、粳稻品种及不育系配组,根据其F1代的育性表现,证明其中12个品系具有广亲和性。此外,与对照汕优63相比,初步鉴定出适合广西种植的具有超高产潜力的杂交稻组合3个,即龙特甫A×100-1-4、龙特甫A×08262-2-1和龙特甫A×08278-1-1。【结论】采用SSR标记引物与PCR检测方法进行Xa23基因分子标记检测是可行的,这为采用分子标记辅助选择利用野生稻抗性基因提供科学依据。筛选出的13份优良品系可用作选育超级杂交水稻的目标亲本或选育新恢复系的亲本。     

应用单克隆抗体鉴别水稻白叶枯病菌血清型的研究

从已建立的15株稳定分泌抗水稻白叶枯病原细菌的单抗杂交瘤细胞株中筛选出4株,用其抗体采用琼脂双扩散和酶联免疫吸附试验检测了作者从采集的病叶分离和从各地收集的水稻白叶枯病菌菌株63株,将其分为4个血清型,其结果与常规多抗血清划分的血清型一致.并运用免疫电泳和琼脂双扩散试验比较了各血清型之间的差异,其结果表明,单抗较多抗特异性强,在鉴别血清型方面较优越.     

水稻白叶枯病菌分离用培养基的研究

以改良的 Watanabe(1963b)培养基为基础,对稻白叶枯菌在平板培养条件下的营养需求进一步试验,提出了新的稻白叶枯菌培养基。其成分为蔗糖10g、谷氨酸钠5g、蛋氨酸0.1g、磷酸二氢钾1g、氯化铵1g、氯化镁1g、EDTA 螯合的亚铁离子1ppm、琼脂17g 及水1L,pH6.4～6.7。培养基中加入0.5%胰蛋白胨,可以大大促进此菌的生长,而对许多稻种杂菌(包括 Erwinia herbicola)的促进相对不大。再加入0.2%蛋白胨后与其他各类培养基比较,本研究提出的培养基具有回收率高、菌落出现早等优点,适于稻白叶枯菌的分离。     

反复通过寄主对水稻白叶枯病菌致病力和生化性状的影响

把致病力强弱不同的四株水稻白叶枯病菌反复接种在两个抗性不同的水稻品种上,测定比较了反复接种12代后的菌种和原始冻干菌株的致病力与若干生化性状。致病力弱的菌株经反复接种后致病能力增强,致病力强的菌株经反复接种后,致病力逐渐减弱;病菌的胞外粘多糖量和蛋白酶活性的变化趋势与致病力的变异相一致,但菌的生长速度和胞外纤维素酶活性的变异无明显规律。本文还讨论了寄主抗性的遗传背景对病菌变异的影响。     

水稻白叶枯病菌的胞外酶与毒力关系的初步研究

研究了水稻白叶枯病菌60个菌株所产生的胞外蛋白酶、纤维素酶(Cx)和果胶酶的活力及其产生胞外粘多糖的能力。从总体看,蛋白酶活力与菌株毒力成正相关,而纤维素酶活力与菌株毒力相关不显著。但来自华南地区的一些菌株的毒力与纤维素酶活力显著相关,而与蛋白酶没有显著的相关性。蛋白酶和纤维素酶的产生都受培养基中氮源成分的影响。尚未发现果胶酶活力及粘多糖产生能力与毒力有任何关系。     

水稻不同抗白叶枯病基因抗谱鉴定及在杂种F1代的表达

测定了１２个水稻抗白叶枯病基因对中国白叶枯病菌７个致病型１０个菌株的抗性反应，结果表明，Ｘａ－４，ｘａ－７，ｘａ－１３和Ｘａ－２１等５个抗病基因在苗期，分蘖期和孕穗期对病菌侵染均表现为广谱抗病反应，进一步将３个带显性广谱抗病基因的材料ＩＲＢＢ４（Ｘａ－４），ＩＲＢＢ７（Ｘａ－７）和ＩＲＢＢ２１（Ｘａ－２１）与６个常规感病品种和５个常用不育系及相应的保持系配合，对其Ｆ１代杂种用病菌学病型ＩＩ和Ⅳ的Ｋ     

福建柑桔溃疡病菌分化的初步研究

以日本(XC25和 XC29)和南京(XC31)菌株作对照,对从福建柑桔主要栽培品种上分离的28个柑桔溃疡病菌株进行培养性状,形态、生理生化、血清学,噬菌体敏感性和致病性的比较研究。试验初步表明,福建的柑桔溃疡病菌属于毒力较强的 A 致病型,且具有一定的分化。试验还表明,柑桔品种的抗病性变化较大。有感病、中抗和抗病等各种类型。在研究溃疡病菌菌系分化时,应选择中抗品种作为鉴别品种,采用无伤痍接种法较好。     

甘蓝黑腐病菌细菌学研究

对１１个地区的甘蓝黑腐病菌菌株的细菌学研究表明，在３６℃下，均不能在肉汁胨培养液中生长，而能在胰蛋白胨营养液中生长。     

水稻白叶枯病菌致病基因的研究进展

笔者综述了分子植物病理学科组对水稻白叶枯病菌致病基因的研究结果和进展，介绍了病菌致病基因研究中分子遗传学分析方法，报道了病菌毒性基因、无毒基因和受寄主诱导基因的特征和功能，阐述了致病基因对致病性、致病生化因子可能的调控关系，讨论了该领域的研究现状和前景。