木霉几丁质酶及其对植物病原真菌的拮抗作用

 木霉(Trichoderma spp.)作为重要的植病生防因子(biocontrol agents)一直受到普遍关注。木霉菌株产生的包括几丁质酶在内的细胞壁降解酶,在木霉重寄生中起重要作用。本文论述木霉几丁质酶的种类、诱导产生、理化特性及其对植物病原真菌的拮抗作用,并对木霉几丁质酶及其基因的生防应用进行讨论。     

真菌源几丁质酶在植物抗真菌病害中的应用

几丁质酶可以降解大多数真菌细胞壁,阻止或中断真菌在植物体内的侵染、定殖和扩展,在抗真菌病害的研究方面受到广泛关注。本文综述了真菌源几丁质酶的特性,对真菌的抑制作用机制,转几丁质酶基因植株的抗性评价,产几丁质酶菌株和相关制剂在生物防治方面的应用,并对其在生产上的发展前景进行了展望。     

木霉几丁质酶对烟草赤星病菌的作用

以指形管培养法分别测定几丁质酶粗酶液和纯化的几丁质酶混合液(2种几丁质酶)对烟草赤星病菌孢子萌发的抑制作用。结果表明,较高浓度(25 2U)几丁质酶粗酶液在48h内强烈抑制孢子萌发和芽管伸长,或致芽管畸形和细胞壁破裂;几丁质酶混合液对赤星病菌的孢子萌发也表现出明显的抑制作用,但在相同或相近酶活性条件下,纯化的几丁质酶混合液(9 4U)和粗酶液(12 6U)对赤星病菌孢子萌发的抑制率(处理24h时)分别为46%和84 3%,前者明显低于后者。采用孢子液悬滴法接种烟苗(K 326)叶片测定木霉几丁质酶对赤星病菌致病性的影响。结果表明,几丁质酶粗酶液浓度越高,对孢子萌发抑制时间越长,抑制率越高;其浓度为4 9、9 8、19 5U/ml的抑制率7d时分别为36 8%、56 2%和57 6%。     

植物几丁质酶在抗真菌病害基因工程中的应用

植物几丁质酶因能水解真菌细胞壁的主要成分几丁质 ,在抗植物真菌病害反应中发挥了重要的作用。本文对植物几丁质酶的特性、分类、基因的诱导表达及其基因在抗真菌病害基因工程中的应用等进行了阐述 ,指出植物几丁质酶在抗真菌病害基因工程中的巨大应用前景     

作物根际和叶围中产几丁质酶微生物的分布及其抑制真菌作用

从几十种作物的根际和叶围分离获得３５０株微生物，其中细菌和放线菌分别为２００株和１５０株，对所有这些分离物进行了抑制真菌试验和几丁质酶活性测定。在抑菌试验中，以棉花枯萎病菌、棉花黄萎病菌、黄瓜枯萎病菌，及西瓜枯萎病菌作为供试病原菌，有９６个分离物对其中的一种或一种以上的病原菌有抑制作用，其中１８个分离物对这４种病原菌都具有强烈的抑制作用，在几丁质酶活性方面１０％的细菌和４０％的放线菌都能不同程度地     

重寄生真菌盾壳霉产生几丁质酶的条件优化

本试验采用摇瓶培养的方法研究了盾壳霉产生胞外几丁质酶的条件。结果表明：培养液组分、通气状况、表面活性剂和草酸等因子对盾壳霉产生几丁质酶均有影响。改良的马铃薯蔗糖培养液（mPSB）较合成培养基SMCS更适宜作为几丁质酶产生的基础培养基,其几丁质酶产量达到616.8U/L;以mPSB为基础培养基,供试的9种碳源和7种氮源中5g/L葡萄糖和1g/L硝酸钾可使几丁质酶的产量分别达到756U/L和672U/L,较适宜几丁质酶的产生;生长曲线试验显示20℃培养15d几丁质酶产量达到高峰。另外,两种供试表面活性剂对几丁质酶的产生均有抑制作用;一定浓度的草酸溶液（0.1-3g/L）有助于盾壳霉几丁质酶的产生。     

一株产几丁质酶、抑真菌的侧孢芽孢杆菌

从524株芽孢杆菌中筛选出一株几丁质酶活力高的侧孢芽孢杆菌1.864菌株。研究表明该菌对小麦赤霉菌等6种病原真菌具有明显的抑制作用。通过几丁质酶抑制剂以及酶活力变化对抑制真菌活性的相关研究,初步认为该菌株的抑菌物质为几丁质酶。生物测定表明1.864的几丁质酶粗酶对蚊幼具有较高的活性,同时对Bt制剂杀虫活性具有明显的增效作用。     

作物根际和叶围中产几丁质酶微生物的分布及其抑制真菌作用

从几十种作物的根际和叶围分离获得３５０株微生物，其中细菌和放线菌分别为２００株和１５０株。对所有这些分离物进行了抑制真菌试验和几丁质酶活性测定。在抑菌试验中，以棉花枯萎病菌、棉花黄萎病菌、黄瓜枯萎病菌，及西瓜枯萎病菌作为供试病原菌，有９６个分离物对其中的一种或一种以上的病原菌有抑制作用，其中１８个分离物对这４种病原菌都具有强烈的抑制作用。在几丁质酶活性方面，１０％的细菌和４０％的放线菌都能不同程度地产生几丁质酶。有些菌株几丁质酶活性强，抑菌作用也明显，有些菌株几丁质酶活性弱，抑菌作用弱或无作用，少数菌株几丁质酶活性强，但却无抑菌作用。用几丁质酶液处理病原菌孢子，其萌发率和芽管长度比对照显著降低     

哈茨木霉Th-30几丁质酶的生产条件及对灰霉病菌的拮抗作用

病菌生长的抑制率为67.61%～71.31%,对灰霉病菌孢子产生及萌发的抑制率分别为80.95%和81.35%,对病菌孢子致病性的抑制率为65.22%～70.51%.     

一种蚜虫持久性传病的长豇豆黄化型病毒

 1983年6月,在南京郊区的长豇豆上采到1株表现植株矮缩症状的C-7病毒分离物。接种试验证明,它不能摩擦接种传病,但可以由豆蚜(Aphis craccivora)、棉蚜(A.gossypii)和桃蚜(Myzus persicae)以持久性方式传病。寄主范围测定的结果表明:分离物可以侵染长豇豆、豇豆、蚕豆、大豆、菜豆、豌豆、赤豆、利马豆、苜蓿、红三叶、地三叶、绛三叶、葫芦巴,紫云英和苕子等15种豆科植物和曼陀罗1种茄科植物。这些植物大都出现植株矮化,叶片扭曲,卷缩或僵缩,不能开花结实等症状。豆蚜的传病性状中,获毒饲育的最短传病时间为3小时,接毒饲育最短传病时间为10分钟,循回期是24小时左右。但是,传病率最高的获毒饲育时间是2~3天,接毒饲育时间在1天以上。接种1头蚜虫就具有传病能力,5头蚜虫能达到100%的传病率。蚜虫可以终身传毒,蜕皮不影响其传毒力,但传毒有间歇性。根据它的基本性状,病毒C-7分离物是一种豆科植物的黄化型病毒,可能是属于大麦黄矮病毒组(Luteovirus Group)的成员。     

眉豆疫病的病原鉴定及药剂防治

广州地区近年出现眉豆疫病,其病原菌经形态,培养性状等方面研究,鉴定为Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ ｖｉｇｎａｅ Ｐｕｒｓｓ。人工接种除为害眉豆外,不可侵染长豇豆,赤豆,赤小豆及绿豆等。但无伤或刺伤法接种均不能侵染黄瓜瓜条,甜和苹果果实以及马铃薯块茎。试验结果表明,眉豆是豇豆疫病的新寄主,甲霜灵及杀毒矾Ｍ８防治效果比较显著。     

5406细胞分裂素混合剂对杨树溃疡病抑制作用的研究

 Streptomyces jingyanesis 5406细胞分裂素混合剂能明显地降低小美旱杨树溃疡病(Dothiorella gregariaSacc)的发病率.用100倍稀释液浸泡24小时处理,发病率为未处理的对照组的12.5%.用不同浓度的混合剂分别处理杨树溃疡病原菌和杨树枝条表明,这种混合剂能对杨树溃疡病菌有一定的抑制生长的作用:而且能明显地促进杨树干部愈杀组织形成的作用。试验还证明,在愈伤组织形成和发展过程中,过氧化物酶(PRO)活性始终处于较低水平.     

环境因素对芸苔链格孢生长发育的影响

研究结果表明,芸苔链格孢(Alternaria brassicae)在0—35℃下均可萌发,最适温度15—20℃。菌丝在0—30℃下均能生长,最适温度20—25℃;孢子及菌丝的致死温度为50℃,10分钟。该菌对湿度要求较严格,相对湿度在90％以上时孢子才能萌发,最适相对湿度为98％;病菌在相对湿度达93％时可以侵染,98％以上最适。脱落后孢子曝露在室内(相对湿度约63％)经1小时萌发率下降32.4％,4小时下降80％。耐旱能力较差。一般情况下紫外光能促进该菌产孢,但是对某些菌系的促进作用不明显。过长的紫外光照射对该菌产孢不利,照射160分钟孢子萌发率下降近80％。麦芽糖、蔗糖为该菌的最佳碳源;硝态氮、有机氮是该菌的良好氮源。pH值为4—6时有利于分生孢子萌发,强酸、强碱对分生孢子萌发有抑制作用。     

小麦多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白对几种病原真菌抑制作用的研究

 本文以单子叶植物小麦(Triticum aestivum L.)的黄化苗为材料,用小麦品种SW89-2589的多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(PGIP)作用4种病原真菌,发现小麦PGIP对几种病原真菌分泌的内切多聚半乳糖醛酸酶(endo-PG)有抑制作用,4种病原真菌endo-PG被抑制程度的大小关系依次为Pyriaclaria oryzae、Sclerotinia sclerotiorium、Fusarium graminearum、Exserohilum turcicum;小麦PGIP对4种病原真菌生长有抑制作用,并且能引起小麦禾谷镰刀菌和玉米大斑病菌生长异常。     

几株真菌代谢产物的杀虫效果试验简报

本试验选用真菌拟青霉、镰刀菌等属的１５个菌株的代谢产物，对小莱蛾、菜青虫进行室内防效试验。结果发现，环链拟青霉１８０＾＃、蝉拟青霉２０＾＃、砖红镰刀１２７＾＃、嗜蚧镰刀１２３＾＃对小菜蛾的较好的防效，致死率在２７．９－９３．１％之间；粉拟青霉２５＾＃、１６２＾＃，环链拟青霉１８０＾＃，砖红镰刀１２７＾＃，雪腐镰刀孺孢变种１７６＾＃对菜青虫的防效在３８．３－８９．１％之间。     

繁殖松材线虫最佳真菌筛选试验

 据全国第一届线虫病害研讨会报道,目前国内外培养繁殖松材线虫线虫Bursaphelenchus xylophilus常用的真菌是灰葡萄孢Botrytis cinerea。作者在1988年至1991年开展对松材线虫致病性、松材线虫对药剂毒性反应的研究过程中,急需繁殖大量松材线虫供试验使用,因此开始了本试验。     

麻黄和细辛挥发油的抗真菌作用

从植物中寻找杀菌抑菌活性物质是开发无公害新农药的一条有效途径。近年来,作者从药用植物中筛选出一批对植物病原真菌有较强抑制作用的挥发油,并对麻黄油和细辛油的抑菌活性作了较细致的研究。     

枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis(Cohen))B-903菌株抗菌物质对植物病原真菌的抑制作用

 作者从郑州苹果园中分离到枯草芽孢杆菌的一株强拮抗菌株。研究认为该菌株产生的抗菌物质对镰刀菌等12种病原真菌具有抑制作用,抑菌谱广,其抑菌机理主要是融解细菌壁,造成原生质泄漏,同时也使孢子和菌丝畸形。田间小区试验证明,以B-903培养滤液浸种可有效防治棉炭疽病等棉苗病害,并促进棉苗生长发育;果园喷雾防治苹果轮纹病和叶斑病的效果相当或优于化学药剂。     

根际微生物对蔬菜苗期立枯丝核菌的生物防治作用

立枯丝核菌Rhizoctonia solani是一种严重为害农作物的土传病原菌。它在上海地区引起蔬菜,尤其茄果类蔬菜苗期的严重死亡,一般死亡率为15％—20％,严重者达70％以上。近十多年来,国内外学者相继开展该菌的生物防治研究工作。并已筛选到对该菌有生物防治作用的拮抗微生物,诸如:Bacillus subtilis、Trichoderma harzianum、Laetisaria arvalis等。作者初步研究了土壤中根际微生物对蔬菜苗期立枯丝核菌的生物防治作用。