肌抑素基因研究进展

肌抑素（MSTN）是近年来发现的一个调控肌细胞生长发育的重要因子,它的发现对于畜牧业和医学领域都有重大意义。文中从MSTN基因的发现、表达规律、基因结构特点和定位以及对肌肉和脂肪组织的影响进行综述,阐明该基因的研究前景。     

猪肌生成抑制素基因成熟蛋白编码序列表达载体的构建及其转录水平的检测

构建猪肌生成抑制素(MSTN)成熟蛋白编码序列的克隆与表达载体，并对mRNA进行转录水平的检测，为获得较好的猪肌生成抑制素抗原、制备抗体打下良好的基础。猪MSTN基因的cDNA去除信号肽后，用PCR扩增的1．2kb目的片段与pMDl8-T载体连接，将克隆载体的质粒DNA与同样用BamH Ⅰ和Sal Ⅰ限制性内切酶酶解的表达载体pET28a( )质粒定向连接，对筛选出的阳性克隆用酶切及测序法鉴定。对猪MSTN基因成熟蛋白编码序列进行反转录，对mRNA Northern杂交进行转录水平的检测。结果，所得到的序列与所设计的序列完全一致，表明成功地进行了猪MSTN基因编码序列的克隆及筛选；目的片段定向插入，阅读框架正确；RT-PCR成功地反转录得到约1．2kb的目的DNA片段，Northern杂交后对mRNA印迹放射自显影，见到清晰的1．2kb特异带。     

鸡肌抑素基因的原核表达及蛋白纯化

利用实验室保存的重组质粒pMD18-MSTN重新构建原核表达质粒pET-32a-MSTN,将其转化到宿主茵大肠杆菌BL21上并进行诱导表达,再将所表达的融合蛋白进行纯化.结果表明:该基因在宿主菌中成功表达;目的蛋白被成功纯化,且纯度较高.     

肌抑素的研究进展

由于长期以来对优良肉品质的孜孜以求,人们发现了抑制肌原性细胞的增殖和分化,最终表现为肌肉组织和肌肉量减少的肌抑素。本文介绍了肌抑素基因的结构、不同动物肌抑素基因的差异、肌抑素基因表达、肌抑素在体内的分布以及不同时间的表达和肌抑素基因的生物学功能,并提出了其应用前景和可能研究的方向。     

猪肌肉生长抑制素基因的研究进展

肌肉生长抑制素(MSTN)是骨骼肌生长发育的负调控因子。其活性的丧失或降低，会引起动物肌肉的过度发育，表现为双肌征状。最早在小鼠中发现该基因，随后通过荧光原位杂交法将猪MSTN基因定位于15q2.3上，进而分析了MSTN以及其分子结构，比较。MSTN基因在不同物种间的同源性。     

猪肌生成抑制素成熟蛋白编码序列真核表达载体的构建

从猪肌生成抑制素(MSTN)cDNA序列中设计引物。以pMD18-T-MSTN质粒为模板，PCR扩增猪MSTN成熟蛋白编码序列，该片段全长1095bp。将所得片段与pMD18-T载体连接，构建重组质粒pMT—mpMSTN，将其转化到大肠杆菌DH5a中，成功地筛选到阳性克隆。双酶切重组质粒pMT—mpMSTN和真核表达载体pcDNA3．1，连接目的片段与载体pcDNA3．1，转化大肠杆菌DH5a，经酶切、PCR及测序分析，表明成功地构建了真核表达质粒pcDNA3．1-mpMSTN。     

乳蛋白基因的结构和功能

本文概述了乳蛋白基因及其ｍＲＮＡ的结构和功能的主要特征及实际应用情况。通过比较不同物种间的乳蛋白基因和ｃＲＮＡ,证实了它们的进化突变速率很高,但是其总体组织形式却是保守的。对乳蛋白基因的结构和功能的深入了解,及转基因技术的不断进步,使我们有可能从遗传上改变乳汁的成分。     

猪脾脏结构和功能及其免疫关键基因研究进展

脾脏作为猪最大的次级淋巴器官,含有多种免疫活性细胞和免疫因子,是先天性免疫和适应性免疫重要的应答场所,具有广泛的免疫调控功能;同时可清除衰老、损伤红细胞及过滤病原体,并在造血和储藏血细胞方面具有重要作用。这些功能与脾脏的结构密切相关,其中红髓主要作为血液滤过器,执行造血、储血和清除异物的功能;白髓是免疫的主要区域,含有多种免疫细胞,可执行特异性免疫应答调控功能;而边缘区是连接两个区室的重要桥梁,使所有细胞和抗原都能通过其进入脾脏不同部位。不同的发育和免疫关键基因是实现脾脏功能的根本,发育基因的表达保证了其结构的完整,为脾脏执行各种功能提供空间。免疫关键基因的表达确保了免疫反应进行,其中不同模式识别受体基因的表达保证了先天性免疫的吞噬和识别应答,而各种免疫细胞分泌的多种细胞因子和免疫活性物质是获得性免疫反应的基础,实现机体清除和监控抗原的生理过程。随着脾脏研究的深入,对其各种免疫细胞和免疫功能有了新的认识。作者首先阐述了脾脏组织不同区域的生物学功能;然后结合机体免疫应答机制,论述脾脏先天性和特异性免疫功能以及所需免疫细胞和免疫因子的作用与关联;最后简单介绍了脾脏胚胎期和出生后期的组织发育和免疫相关基因,总结了猪脾脏先天性免疫中重要的模式识别受体及其基因家族,为研究猪脾脏先天性免疫功能提供参考。     

骨骼肌转导的基因DNA药物功能研究进展

基因DNA药物就是将裸露的质粒(naked plasmid)DNA作为一种药物导入机体内，并在细胞中调控蛋白质合成，分泌出细胞，作用于靶器官而达到预防和治疗的一种新型药物。实施基因DNA药物必须具备以下几个条件，即第一是目的性基因，例如病毒抗原基因、蛋白类激素、生长因子等；第二是基因转移系统的安全简便、高效、可控性；第二是有特定     

猪肌内脂肪沉积的营养调控及候选基因的研究进展

营养调控和基因调控方法相结合是改善猪肌内脂肪沉积的根本途径,已经发现多种不同的营养素(如能量蛋白水平、甜菜碱、矿物质、维生素、共轭亚油酸等)对猪肌内脂肪沉积有重要的调控作用,但目前影响猪肌内脂肪沉积的主效基因并未确定。本文主要综述了不同营养素对猪肌内脂肪沉积的调控作用以及主要的候选基因对猪肌内脂肪沉积作用的研究进展。     

东北马鹿肌肉生长抑制素基因序列的克隆、编码氨基酸序列及结构特征分析

以与东北马鹿物种最近的牛(Bos taurus cattle,序列号为AB076403)的肌肉生长抑制素(myostatin,MSTN)基因序列为模版,根据该基因保守序列进行引物设计,扩增产物连接入pMD18-T载体,克隆出3个外显子片段.根据5′-GU-AG-3′规则和同源基因比对拼接出带有部分5′、3′末端的cDNA,并采用生物信息学技术对编码氨基酸序列进行蛋白质同源性比较和二级、三级结构等分析.结果表明:所获序列全长为1 128 bp,编码375个氨基酸;具有较明显的螺旋、片层和无规卷曲等二级结构;有1个较明显的跨膜区和1个疏水区,并发现明显的信号肽和糖基化位点.三级结构同源建模预测结果显示与Human Activin A的相似性为42%.结果说明东北马鹿和其他哺乳类生物的肌肉生长抑制素基因之间关系密切,并同属于TGF-β家族.     

猪生成抑制素(MSTN) cDNA的克隆

从猪的肌生成抑制素(MSTN)编码序列中设计引物,以军牧一号猪肌细胞总RNA为模板,利用RT-PCR和嵌套PCR技术,扩增出MSTNcDNA片段.该片段全长1277bp,包含猪MSTN基因的全部编码序列.将所得片段与pMD18-T载体连接,转化到JM109大肠杆菌中,成功地筛选到阳性克隆,其质粒测序结果与文献报道的一致.经EcoRⅠ和PstⅠ酶解分析,cDNA片段与pMD18-T载体之间既有正向插入的克隆,也有反向插入的克隆,所得到的MSTNcDNA可用于原核和真核表达载体的构建.     

肌肉生长抑制素的研究进展及应用现状

肌肉生长抑制素基因是限制肌肉超常发育的负调控基因,缺失或突变会导致双肌现象的产生。本文重点探讨了肌肉生长抑制素的分子作用机理,论述了该基因的发现、遗传效应、同源性、组织特异性、定位和结构等方面的研究现状及临床应用。     

牛肌肉生成抑制素基因功能区的克隆与原核表达

根据GenBank中牛肌肉生成抑制素（MSTN）基因序列设计了1对引物，在引物两端分别加EcoRⅠ和XhoⅠ识别位点。利用RT—PCR技术扩增出了牛MSTN功能区序列。分别构建克隆和原核表达载体，酶切、PCR鉴定及测序分析表明，该基因功能区序列的克隆载体和原核表达载体已成功构建。筛选阳性菌，经IPTG诱导，牛MSTN基因功能区在大肠埃希氏菌中成功表达。     

昆虫抗菌肽的分子结构、作用机理及其在抗肿瘤细胞方面的应用

昆虫抗菌肽(Antibacterial peptide)是指昆虫在诱导的情况下，体内某些细胞的特定基因编码产生的一类小分子多肽。本文主要就昆虫抗菌肽的分子结构、作用机理及其在抗肿瘤细胞方面的研究进展情况作一综述。     

穿心莲的药理作用及其在兽医临床上的应用进展

综述了穿心莲的药理作用及其在兽医临床上的应用进展。大量研究表明：穿心莲具有抗菌、抗炎、抗病毒、抗肿瘤、解热、增强免疫等作用，被誉为“中药抗菌素”的穿心莲在兽医临床上具有广阔的发展前景。     

山羊MSTN基因打靶载体的构建与鉴定

根据绵羊、猪、小鼠和牛的肌肉生长抑制素(MSTN)基因序列设计引物,通过PCR方法扩增了山羊MSTN基因的5'同源臂和3'同源臂,其长度分别为5.2 kb、1.1 kb。在ploxPneo载体的neo基因上游和下游分别插入上述2个同源臂,经PCR、限制性内切酶鉴定及DNA序列测定,证实该载体的2条同源臂包含山羊MSTN基因的相应外显子及其邻近的部分内含子,从而成功构建了山羊ploxP-MSTN打靶载体。     

蒙古牛MSTN基因多态性研究

针对牛肌肉生长抑制素基因编码区设计引物,以PCR扩增及测序的方法,检测了新疆巴音布鲁克自治区的18头蒙古牛样本.结果显示:蒙古牛肌肉生长抑制素基因编码区含1 128个碱基对,通过比对,在所检蒙古牛样本中,存在1个核苷酸多态位点,含有2种核苷酸类型(C 55.6%和T 44.4%);在该位点上,欧洲牛(T)、瘤牛(C)和牦牛(C)均为单型.说明了蒙古牛与欧洲牛、瘤牛和/或牦牛三者间存在一定的基因交流,但根据本研究无法确定蒙古牛是与瘤牛,还是与牦牛发生基因交流.     

Effects of active immunization against myostatin on carcass quality and expression of the myostatin gene in pigs

The study was conducted to investigate the effects of active immunization against myostatin on the titer of myostatin antibody, carcass evaluation, activity of creatine kinase and the expression of the myostatin gene in pigs. Eighteen pigs were allotted into three groups (six pigs per group), and pigs in treatment 1, 2 and 3 were immunized with physiological saline, 1 mg or 4 mg myostatin per pig, respectively. Six pigs were killed by electrical stunning followed by exsanguination at BW of 100 kg. The results indicated that the titer of myostatin antibody was increased in treated groups compared to the control group on day 42 ( P  < 0.01) and d 84 ( P  < 0.01). The carcass lean percentage was significantly increased in the treatment groups compared to the control group ( P  < 0.01), and intramuscular fat was significantly decreased in the 4 mg group compared to the control group ( P  < 0.05). The muscle creatine kinase activity of pigs treated with 1 mg and 4 mg myostatin was lower than the control group. The immunization of myostatin signofocantly decreased the myostatin gene expression levels in muscle. It was concluded that optimal active immunization against myostatin could increase the content of myostatin antibody, suppress the activity of creatine kinase and the expression of myostatin gene, and therefore improve the carcass lean percentage for pigs.