脂多糖对断奶仔猪外周血免疫细胞和免疫器官中PPARγ mRNA表达水平的影响

研究脂多糖(Lipopolysaccharide, LPS)对断奶仔猪外周血白细胞、胸腺、脾脏和肠道淋巴结过氧化物酶体增殖物活化受体(PPARγ) mRNA表达水平的影响,探讨免疫应激是否影响免疫细胞和免疫器官PPARγ mRNA的表达.选取12头健康的(21±1)d断奶仔猪,分成2个处理,每个处理6个重复.试验组注射100μg/kg BW的LPS,对照组注射等量的生理盐水.于注射LPS后1.5和3h,采血分离血浆、白细胞;注射LPS后3h屠宰仔猪,取胸腺、脾脏和肠道淋巴结进行相关检测.结果表明:(1)LPS刺激后1.5和3h,肿瘤坏死因子TNF-α和皮质醇含量均急剧上升(P<0.001);LPS刺激后3h,胰岛素含量显著下降(P<0.001),胰高血糖素含量显著上升(P<0.001).此外,LPS刺激也导致血液生化指标发生了显著变化.这表明LPS刺激导致机体处于急性免疫应激状态.(2)LPS刺激导致外周血白细胞(P<0.001)、胸腺(P<0.05)和肠道淋巴结(P<0.05)的PPARγ mRNA表达量显著升高,表明免疫应激诱导了免疫细胞和免疫器官中PPARγ mRNA的表达.提示PPARγ可能参与仔猪免疫应激的调控,可能成为缓解免疫应激的一个新靶点.     

脂多糖刺激对仔猪下丘脑-垂体-肾上腺轴Toll样受体4信号通路关键基因表达的影响

本试验旨在研究脂多糖(LPS)刺激对仔猪下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴Toll样受体4(TLR4)信号通路关键基因表达的影响。选取12头断奶仔猪,分成2个组,每个组6个重复。试验组注射100μg/kg体重的LPS,对照组注射等量的生理盐水。注射LPS或生理盐水4 h后采血,测定血浆中与应激相关激素的含量;采血后屠宰仔猪,取下丘脑、垂体、肾上腺,测定TLR4信号通路关键基因的mRNA表达水平,包括TLR4、髓样分化因子88(My D88)、白细胞介素-1受体相关激酶1(IRAK1)、肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)和核转录因子-κB(NF-κB)mRNA表达水平。结果表明:与对照组相比,1)LPS刺激导致血浆肿瘤坏死因子-α、皮质醇和促肾上腺皮质激素含量显著上升(P<0.05)。2)LPS刺激导致TLR4信号通路关键基因TLR4在下丘脑、垂体、肾上腺中mRNA表达水平显著升高(P<0.05);My D88在垂体、肾上腺中mRNA表达水平显著升高(P<0.05),在下丘脑中mRNA表达水平有升高的趋势(P<0.10);IRAK1在垂体、肾上腺中mRNA表达水平有升高的趋势(P<0.10);TRAF6在下丘脑、垂体、肾上腺中mRNA表达水平显著升高(P<0.05);NF-κB在垂体中mRNA表达水平显著升高(P<0.05)。试验结果表明LPS刺激激活了HPA轴,诱导了HPA轴的TLR4信号通路关键基因的表达。     

谷氨酸对脂多糖刺激断奶仔猪肠道能量代谢的影响

本试验旨在研究谷氨酸(Glu)对脂多糖(LPS)刺激断奶仔猪肠道能量代谢的影响。选择24头断奶仔猪分为4个组,分别为对照组、LPS组、LPS+1.0%Glu组和LPS+2.0%Glu组,每组6个重复,每个重复1头猪。于试验第28天,试验组猪注射100μg/kg BW LPS,对照组注射等量的生理盐水,4 h后屠宰,取肠道样品待测。结果表明:1)与对照组相比,LPS刺激导致断奶仔猪空肠三磷酸腺苷(ATP)、腺苷酸池(TAN)含量和能荷(EC)显著降低(P0.05),一磷酸腺苷(AMP)/ATP值显著升高(P0.05);与LPS组相比,LPS+2.0%Glu组显著提高了空肠ATP、二磷酸腺苷(ADP)和TAN含量(P0.05)。2)与对照组相比,LPS刺激导致断奶仔猪回肠柠檬酸合成酶和α-酮戊二酸脱氢酶系活性极显著降低(P0.01),空肠α-酮戊二酸脱氢酶系活性有降低趋势(P=0.092);与LPS组相比,除LPS+1.0%Glu组回肠柠檬酸合成酶活性显著降低(P0.05)外,Glu对空肠和回肠三羧酸循环关键酶活性无显著影响(P0.05)。3)与对照组相比,LPS刺激导致空肠过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α(PGC1α)及回肠沉默信号调控因子1(Sirt1)和PGC1α的mRNA表达量极显著降低(P0.01);与LPS组相比,LPS+2.0%Glu组有提高空肠PGC1α(P=0.067)和回肠Sirt1(P=0.053)mRNA表达量的趋势,LPS+1.0%Glu组有提高回肠Sirt1 mRNA表达量的趋势(P=0.070)。由此可见,Glu可以改善LPS刺激导致的肠道能量损耗状态。     

脂多糖刺激对断奶仔猪肌肉炎症和蛋白质降解相关基因表达的影响

本试验旨在研究脂多糖(LPS)刺激后不同时间断奶仔猪肌肉炎症和肌肉蛋白质降解相关基因表达的变化规律。选择42头(7.1±0.9)kg杜×长×大三元杂断奶仔猪,按注射LPS之前(0 h)和注射LPS后1、2、4、8、12、24 h随机分为7个处理,每个处理6头猪。预试14 d后,腹腔注射100μg/kg体重的LPS。按以上时间点将仔猪屠宰,取背最长肌样品待测。结果表明:背最长肌炎性细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6的mRNA表达量在注射LPS 1～2 h后达到峰值;Toll样受体4信号通路关键基因Toll样受体4(TLR4)、骨髓分化因子88(MyD88),核苷酸结合寡聚域信号通路关键基因核苷酸结合寡聚域2(NOD2)、受体互作蛋白激酶2(RIPK2)的mRNA表达量在注射LPS 2～4 h后达到峰值;肌肉蛋白质降解相关基因叉头转录因子-1(FOXO-1)、FOXO-4、肌肉环指蛋白1(MuRF1)、肌萎缩F-box(MAFbx)的mRNA表达量在注射LPS 12 h后达到峰值。可见,LPS刺激诱导肌肉释放大量炎性细胞因子,使TLR4和NOD炎症信号通路关键基因及肌肉蛋白质降解相关基因mRNA显著表达。     

脂多糖对仔猪下丘脑-垂体-肾上腺轴内应激基因和NOD信号通路关键基因表达的影响

本试验旨在研究免疫应激对仔猪下丘脑垂体肾上腺(HPA)轴应激基因和核苷酸结合寡聚化结构域(NOD)信号通路关键基因表达的影响。选取12头杜×长×大仔猪,分成2个处理,每个处理6个重复。试验组注射100μg/kg体重的脂多糖(LPS)建立免疫应激模型,对照组注射等量的生理盐水。于注射LPS或生理盐水4 h后屠宰,取下丘脑、垂体和肾上腺。应用实时荧光定量PCR技术测定HPA轴应激基因和NOD信号通路关键基因在HPA轴中的mRNA 表达水平。结果表明:LPS导致下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素、垂体黑素皮质激素肽和肾上腺类固醇合成急性调节蛋白mRNA 表达量显著升高(P0.05);LPS导致HPA轴中NOD信号通路关键基因NOD1、NOD2、受体互作蛋白2和肿瘤坏死因子-α mRNA 表达量显著升高(P0.05)。综上所述,LPS促进了HPA轴应激基因和NOD信号通路关键基因的表达。     

L-精氨酸对脂多糖刺激的断奶仔猪肠道损伤的缓解作用

研究L-精氨酸(Arg)对脂多糖(LPS)刺激的断奶仔猪小肠黏膜蛋白质、DNA、RNA含量、二糖酶活性和血浆D-木糖含量的影响,旨在探讨L-Arg是否可以缓解LPS刺激所导致的肠道损伤.选取24头健康的(21±1)d断奶仔猪,分成4个处理,每个处理6个重复.采用单因子设计(1)基础日粮(非应激对照组);(2)基础日粮 LPS(应激对照组);(3)基础日粮 LPS 0.5%Arg(0.5%Arg组);(4)基础日粮 LPS 1.0%Arg(1.0%Arg组).在第16天,给应激对照组、0.5%和1.0%Arg组注射100 μg/kg BW的LPS,非应激对照组注射等量的生理盐水.注射LPS 2 h后,按1 mL/kg BW的剂量分别给仔猪灌服D-木糖溶液,注射LPS 3 h后,采血,分离血浆待测;注射LPS后48 h屠宰仔猪,刮取小肠黏膜待测.结果表明(1)和非应激对照组相比,应激对照组的十二指肠黏膜蛋白质含量,空肠、回肠黏膜DNA含量,空肠黏膜蔗糖酶活性,回肠黏膜乳糖酶、蔗糖酶、麦芽糖酶活性,血浆D-木糖含量均显著降低(P＜0.05),这表明LPS刺激导致断奶仔猪肠道损伤;(2)0.5%Arg组十二指肠黏膜蛋白质含量,空肠黏膜DNA含量,回肠黏膜乳糖酶、蔗糖酶、麦芽糖酶活性,血浆D-木糖含量以及1.0%Arg组空肠DNA含量,空肠黏膜蔗糖酶活性,回肠黏膜乳糖酶、蔗糖酶、麦芽糖酶活性,血浆D-木糖含量均高于应激对照组,且与非应激对照组无显著差异(P＞0.05).这表明L-Arg在一定程度上缓解了LPS刺激所造成的肠道损伤.     

L-精氨酸对脂多糖刺激断奶仔猪肠黏膜免疫屏障的影响

本试验旨在研究L-精氨酸(L-Arg)对脂多糖(LPS)刺激仔猪肠黏膜免疫的影响。选用24头21日龄断奶仔猪,随机分为4个处理,即对照组(基础日粮)、LPS组(基础日粮+LPS)、0.5%Arg组(基础日粮添加0.5%Arg+LPS)、1.0%Arg组(基础日粮添加1.0%Arg+LPS)。结果表明:LPS刺激损伤小肠黏膜结构;Arg则有效阻止LPS应激导致的肠道损伤,维持肠黏膜结构的完整性;LPS刺激显著增加仔猪小肠肥大细胞数(P<0.01);1.0%Arg则减少肥大细胞数(P<0.05);LPS刺激降低回肠IgA分泌细胞、CD4+、CD8+阳性细胞数(P<0.05),而0.5%Arg则增加IgA分泌细胞、CD4+、CD8+阳性细胞数(P<0.05)。这表明LPS刺激可导致仔猪小肠黏膜结构受损,免疫屏障功能降低,而日粮添加精氨酸可有效阻止LPS对肠黏膜屏障的损伤,促进及改善肠黏膜结构及免疫屏障功能。     

γ-氨基丁酸对断奶仔猪养分代谢的影响

研究探讨γ-氨基丁酸(GABA)对断奶仔猪糖、脂肪和蛋白质代谢的影响.选取48头25日龄体质量相近的(杜×长×大)三元断奶仔猪,随机分成对照组及试验1、2和3组,共4组,分别饲喂添加0、30、60和90 mg/kg GABA的饲粮.结果表明:试验2组和试验3组的血清葡萄糖(Glu)质量浓度显著高于对照组(18.9％和21.7％),但3个试验组差异不显著;3个试验组和对照组的血清尿素氮(BUN)组间差异不显著;试验2组的血清肌酐(Cr)显著低于对照组;试验1组的血清总胆固醇(TCH)质量浓度显著低于对照组(39.0％);试验3组的三酰甘油(TG)显著高于对照组、试验1组和试验2组,但后三者差异不显著;3个试验组的血清低密度脂蛋白(LDL)质量浓度均显著低于对照组,但3个试验组的血清LDL质量浓度组间差异不显著;试验1组的血清高密度脂蛋白(HDL)质量浓度显著高于对照组(23.8％),但3个试验组的血清HDL质量浓度组间差异不显著.综上所述,试验2组和试验3组的血清Glu质量浓度显著提高;GABA对BUN和Cr无明显影响,但可显著降低血清LDL;试验1组的血清HDL质量浓度显著提高.     

谷氨酰胺对脂多糖诱导的断奶仔猪氧化应激的影响

本试验以大肠杆菌型脂多糖(LPS)建立氧化应激模型,探讨了谷氨酰胺(GLN)对断奶仔猪氧化应激的影响。选用24头28日龄的健康三元(杜×长×大)断奶仔猪,随机分成3组,每组8个重复,每个重复1头猪。对照组和应激组饲喂基础饲粮,GLN组饲粮在基础饲粮中添加1%GLN,试验期为30 d。在试验第22、25、28和30天,应激组和GLN组仔猪分别按每千克体重腹腔注射100μg LPS,对照组仔猪腹腔注射相同剂量的灭菌生理盐水,第30天进行前腔静脉采血并屠宰采取所需肠道样品,检测氧化应激相关指标。结果显示:1)LPS攻毒前各组血清抗氧化能力指标均无显著差异(P0.05)。LPS攻毒后,应激组血清丙二醛(MDA)含量显著高于对照组(P0.05);GLN组血清MDA含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性显著低于应激组和对照组(P0.05)。2)LPS攻毒后,在十二指肠黏膜中,GLN组过氧化氢酶(CAT)和锌铜超氧化物歧化酶(Cu Zu SOD)基因相对表达量显著高于应激组(P0.05)。在空肠黏膜中,GLN组CAT、锰超氧化物歧化酶(Mn SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶1(GPX1)和谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)基因相对表达量显著高于对照组和应激组(P0.05),对照组GPX4基因相对表达量显著高于应激组(P0.05)。在回肠黏膜中,GLN组和应激组CAT基因相对表达量显著低于对照组(P0.05),GPX4基因相对表达量显著高于对照组(P0.05);GLN组Mn SOD基因相对表达量显著高于对照组和应激组(P0.05),Cu Zn SOD基因相对表达量显著高于对照组(P0.05)。结果表明,GLN在一定程度上可以缓解断奶仔猪因LPS引起的氧化应激,以期为实际生产中减少氧化应激提供一定的理论基础。     

脂多糖应激对断奶仔猪肠黏膜免疫屏障的影响

选用12头(21±1)d断奶仔猪,随机分为2个处理,研究脂多糖(LPS)刺激对肠黏膜免疫屏障功能的影响。禁食12h后,LPS组仔猪腹膜注射100μg/kgBW LPS,对照组注射等量的生理盐水。48h后,屠宰仔猪,打开腹腔,取小肠组织样品,测定小肠上皮间淋巴细胞、杯状细胞、肥大细胞数、肠集合淋巴结增殖、凋亡细胞数。结果表明:LPS刺激显著降低十二指肠、回肠上皮间淋巴细胞数(P<0.01),极显著增加小肠各段肥大细胞数(P<0.01);LPS刺激显著增加回肠集合淋巴结凋亡细胞数(P<0.05),但对增殖细胞数没有影响(P>0.05);LPS刺激可增加仔猪小肠杯状细胞数,但两处理组间差异不显著(P>0.05)。这些结果显示,LPS应激可导致肠黏膜免疫屏障功能改变,进而加重机体出现急性感染症状。     

脂多糖刺激对断奶仔猪空肠形态结构、炎症反应和程序性坏死信号通路相关基因表达的影响

本试验旨在研究脂多糖(LPS)刺激对断奶仔猪空肠形态结构、炎症反应和程序性坏死信号通路相关基因表达的影响。选取12头平均体重为(7.07±0.57) kg的28日龄杜×长×大三元断奶仔猪,随机分为2组,分别为对照组和LPS刺激组,每组6头。预饲9 d后,LPS组腹腔注射100μg/kg BW的LPS,对照组注射等量的生理盐水。LPS注射4 h后将所有仔猪麻醉屠宰,取空肠样品待测。结果表明：与对照组相比,LPS刺激后仔猪空肠绒毛严重萎缩,并大量脱落,绒毛高度和隐窝深度显著降低(P<0.05);空肠黏膜RNA/DNA显著下降(P<0.05),蛋白质含量和蛋白质/DNA有显著下降趋势(P=0.054、P=0.095);空肠炎性细胞因子环氧合酶2(COX2)、热休克蛋白70(HSP70)和白细胞介素-6(IL-6)的mRNA相对表达量显著或极显著升高(P<0.05或P<0.01);程序性坏死信号通路相关基因受体相互作用蛋白激酶1(RIP1)和受体相互作用蛋白激酶3(RIP3)的mRNA相对表达量显著或极显著升高(P<0.05或P<0.01)。由此可见,LPS...     

甘氨酸对脂多糖应激断奶仔猪肠黏膜屏障的调控作用

本试验旨在研究日粮中添加甘氨酸（Gly）对脂多糖（LPS）应激断奶仔猪肠黏膜屏障损伤的保护作用。选用24头21日龄断奶仔猪,随机分为4组,即对照组（基础日粮）、LPS组（基础日粮+LPS）、1.0%Gly组（基础日粮+1.0%Gly+LPS）、2.0%Gly组（基础日粮+2.0%Gly+LPS）。预饲期7 d,正试期28 d,在试验第28天,LPS组、1.0%Gly组和2.0%Gly组仔猪腹腔注射LPS(100μg/kg BW),对照组注射无菌生理盐水。注射4 h后,仔猪屠宰,取脾脏、肝脏、肠系膜淋巴结及空肠、回肠样品待测。结果表明：(1)各处理组的平均日增重、平均日采食量及耗料增重比无显著差异。(2)与对照组相比,LPS应激升高了回肠丙二醛（MDA）水平（P<0.05）,降低空肠、回肠谷胱甘肽（GSH）水平（P<0.05）;与LPS组相比,日粮中添加Gly降低回肠MDA水平、升高GSH水平（P<0.05）。(3)与对照组相比,LPS应激增加肝脏移位细菌数（P<0.05）;与LPS组相比,日粮中添加Gly降低肝脏移位细菌数（P<0.05）。(4)与对照组相...     

复合植物精油对脂多糖刺激断奶仔猪肠道形态结构和抗氧化能力的影响

为研究复合植物精油(OCT)对脂多糖(LPS)刺激断奶仔猪肠道结构和抗氧化能力的影响,本试验选取28日龄左右健康的杜×长×大三元杂交仔猪24头,按照体重相近原则随机分为3个处理组:对照组、LPS组和OCT组。对照组和LPS组仔猪饲喂基础日粮,OCT组仔猪饲喂基础日粮+50 mg/kg OCT。试验期21 d。于试验第21天,LPS组和OCT组仔猪注射LPS(100μg/(kg·BW)),对照组仔猪注射等量生理盐水。LPS或生理盐水注射后3 h采血;6 h后,屠宰全部仔猪取肠道样品测定有关指标。结果表明,与对照组相比,LPS组仔猪空肠绒毛高度/隐窝深度有降低趋势(P>0.05),回肠绒毛高度及绒毛高度/隐窝深度显著降低(P<0.05);血浆过氧化氢酶(CAT)活性、血浆和空肠超氧化物歧化酶(SOD)活性显著降低(P<0.05),空肠诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性、血浆和回肠H_2O_2含量显著上升(P<0.05)。与LPS组相比,OCT组仔猪空肠绒毛高度、空肠绒毛高度/隐窝深度和回肠绒毛高度显著提高(P<0.05),回肠绒毛高度/隐窝深度有提高趋势(P>0.05);血浆CAT、空肠SOD活性显著提高(P<0.05),血浆和回肠H_2O_2含量显著下降(P<0.05)。以上结果表明,日粮中添加50 mg/kg OCT可以在一定程度上缓解由LPS刺激引起的仔猪氧化应激,改善仔猪肠道结构。     

α-酮戊二酸对脂多糖多次刺激后断奶仔猪生长性能、血液生化指标和内脏器官指数的影响

试验选取24头体质量为(6.79±0.32)kg的断奶仔猪(杜洛克×长白×大约克)随机分成4个处理组,每个处理设6个重复(猪),2×2因子设计。在试验的第10、13、15天对应激组的猪腹腔注射100μg/kg LPS,非应激组注射等量的生理盐水。结果显示:(1)日粮添加1%AKG对非应激期仔猪生长性能无显著性影响(P>0.05);(2)日粮添加1%AKG可以缓解LPS多次刺激引起断奶仔猪的平均日增重的下降(P<0.05);(3)LPS多次刺激下,日粮中添加1%AKG降低了猪血液中总蛋白(P<0.05)和球蛋白的含量(P<0.01),提高了白蛋白/球蛋白(P<0.01);(4)LPS多次刺激导致猪脾脏器官指数显著增加(P<0.05)。结果表明,1%AKG在一定程度上能缓解LPS多次刺激导致的生长抑制和应激反应。     

柴术抗激颗粒对脂多糖免疫应激断奶仔猪血清抗氧化和生化指标的影响

为了探讨柴术抗激颗粒(CZKJKL)对脂多糖(LPS)免疫应激早期断奶仔猪血清抗氧化指标和生化指标的影响,选用28±2日龄断奶的杜x长x大三元杂交猪48头,随机分为4个处理组,分别为I组(空白对照组)、Ⅱ组(CZKJKL组)、Ⅲ组(LPS组)、Ⅳ组(LPS+CZKJKL组)。结果显示,饲料中添加柴术抗激颗粒可使断奶应激仔猪和LPS免疫应激仔猪的血清抗氧化指标和生化指标均发生显著改变。说明柴术抗激颗粒可通过增强机体的抗氧化能力、改善机体新陈代谢而缓解断奶应激和LPS免疫应激对早期断奶仔猪造成的伤害。     

脂多糖刺激后不同时间点断奶仔猪肠道中凋亡和自噬信号通路的动态变化

本试验旨在研究脂多糖（LPS）刺激后不同时间点断奶仔猪空肠中凋亡和自噬相关基因表达的变化。选取42头21日龄、体重（7.09±0.90） kg的杜×长×大断奶仔猪,按照注射LPS后时间点的不同随机分成7个处理,每个处理6个重复,每个重复1头猪。预试14 d后,仔猪腹膜注射100μg/kg BW的LPS,分别在注射前（0 h）和注射后1、2、4、8、12、24 h屠宰仔猪,取空肠样品,检测凋亡和自噬相关基因的表达。结果表明：与注射前相比,LPS刺激后,Fas配体（Fasl）的mRNA相对表达量在12和24 h均显著升高（P <0.05）; B淋巴细胞瘤XL蛋白（Bcl-xl）的mRNA相对表达量在2 h显著下降（P <0.05）;半胱天冬蛋白酶3(Caspase 3)的mRNA相对表达量在2 h显著升高（P<0.05）;Bcl-2相关X蛋白（Bax）的mRNA相对表达量在12 h极显著升高（P<0.01）;哺乳动物雷帕毒素靶蛋白（mTOR）的mRNA相对表达量在1和2 h显著下降（P<0.05）;关键调控因子自噬微管相关蛋白1轻链3(LC3)和Unc-51激...