“棘防E号”的安全性评价Ⅰ——急性毒性试验

90只小鼠随机分为9组，每组10只。除对照组外，其余8组分别以绵羊每日正常用药量的1．5^n等比级数递增剂量，一次给小鼠灌服“刺防E号”，连续观察14天，以测定“棘防E号”对小鼠口服的LD50。结果表明，当小鼠服用绵羊正常用药量的17倍时，不出现半数死亡，说明“棘防E号”对小白鼠的LD50大于绵羊正常用药量的10倍，是完全安全性的药物。     

“棘防A号”的安全性评价

90只小白鼠随机分为9组，每组10只，除对照组外，其余8组分别以绵羊每日正常用药量的1．5n等比级数递增剂量，一次给小白鼠灌服“棘防A号”，连续观察14d，以测定“棘防A号”对小白鼠口服的LD50。结果表明，当小白鼠用绵羊正常用药量的11倍时，不出现半数死亡，说明“棘防A号”对小白鼠的LD50大于绵羊正常用药量的10倍。是安全性的药物。     

"棘防E号"的安全性评价

90只小白鼠随机分为9组每组10只。除对照组外,其余8组分别以绵羊每日正常用药量的1．5^u等比级数递增剂量,一次给小白鼠灌服定量“棘防E号”,连续观察14天,以测定“棘防E号”对小白鼠口服的LD50。同时,按最大无作用剂量(101.25mg／BW、正常剂量(20．00mg／kg.BW、最大无作用剂量的1／30(3．375mg／kg．BW)给小白鼠饮用“棘防E号”,观察对小白鼠繁殖机能的影响。结果表明,当小白鼠服用绵羊正常用药量的17倍时,不出现半数死亡,说明“棘防E号”对小白鼠的LD50大于绵羊正常用药量的10倍,是完全安全性的药物;最大无作用剂量、正常剂量、最大无作用剂量的1／30对小白鼠怀孕率和胎儿畸形与对照组没有明显的区别。     

“棘防E号”对小鼠的急性毒性试验

对昆明种小鼠经口灌服“棘防E号”进行急性毒性试验，按简化机率单位法测得“棘防E号”对小鼠的LD50为2808mg／kg，LD50的95％的可信限为2015mg／kg-3905mg／kg，表明“棘防E号”为低毒物质。     

“棘防E号”诱发小白鼠骨髓细胞的微核效应

采用微核试验观察“棘防E号”对小鼠骨髓细胞遗传毒性作用和量效关系。结果表明,“棘防E号”剂量为1/2 LD50(1 404 mg/kg)、1/4LD50(702 mg/kg)、1/8 LD50(352 mg/kg)时微核率分别为(140.27±4.71)%、(64.04±3.07)%、(42.01±1.99)%。其中1/2 LD50(1 404mg/kg)剂量组的微核率是阴性对照组的3.2倍,说明“棘防E号”的剂量超过1/2 LD50以上时对小白鼠骨髓细胞有一定的致突变作用。     

“棘防E号”对小白鼠精子畸形率的影响

将"棘防E号"分别按每千克体重176(1/16 LD50),352(1/8 LD50),702(1/4 LD50)和1 404 mg(1/2 LD50)剂量给小鼠灌服,研究其对雄鼠精子的损害作用。结果表明:1/2 LD50组、1/4 LD50组的精子畸形率是阴性对照组(蒸馏水)的5.4倍和2.6倍,且各剂量之间和精子畸形率呈明显线性相关(r=0.9979)。说明当"棘防E号"的剂量达到每千克体重702 mg时,对小白鼠的精子具有明显的损害作用。     

“棘防E号”对小鼠的急性毒性试验

对昆明种小鼠经口灌服“棘防E号”进行急性毒性试验。按简化机率单位法测得“棘防E号”对小鼠的LD_(50)为2 808 mg/kg;LD_(50)的95％的可信限为2 015～3 905 mg/kg,表明“棘防E号”为低毒物质。     

英得尔种羊场放牧绵羊棘豆中毒预防效果初报

对放牧绵羊自然棘豆中毒羊群采用补饲、"轮牧法”和应用棘豆中毒预防药物"棘防A号”、"棘防B号”和"棘防E号”综合措施预防绵羊棘豆中毒,使羊群因棘豆中毒引起的死亡和淘汰羊明显减少,所产羔羊数及繁活数明显增加.     

棘豆中毒预防初探

本研究采用从瘤胃瘘管每天给２５只山羊和１５只绵羊投服甘啼粉末,同时选用本课题组研制的７种理论上可预防棘豆中毒的药物以探索其对山羊和绵羊甘肃棘豆中毒的预防作用。而保以康,腐敏散,及棘防Ｄ号则无预防作用。     

"复方葛黄消炎液"刺激性及急性毒性试验

对“复方葛黄消炎液”进行了兔点眼刺激试验和小鼠急性毒性试验（口服试验和腹腔注射试验）,并计算其半数致死量（LD50）。结果表明该药无刺激性;7只小鼠（分2组）口服剂量从10mL／kg增加到15mL／kg,小鼠仍健康存活,表明该药安全无毒;通过50只小鼠（分5组）腹腔注射试验,其LD50为7．686g。     

清宫液2号急性毒性试验

为了测定清宫液2号的急性毒性,先经预试验确定最小致死量(Dn)和全致死量(Dm),根据结果将50只小鼠随机分为5组,每组10只(雌、雄各半),分别为清宫液2号每千克体重16500 mg、20000 mg、24000 mg和30000 mg剂量组和生理盐水每千克体重60 mL剂量组,采用改良寇氏法,腹腔注射给药后连续观察7 d,确定清宫液2号的急性毒性,并测定清宫液2号小鼠腹腔注射的LD50。结果表明,小鼠腹腔注射清宫液2号的LD50为(23248.77±692.60)mg/kg,该值大于5000 mg/kg,所以清宫液2号为实际无毒物质,对小鼠腹腔注射无急性毒性作用。     

青海省托勒牧场棘豆中毒调查与防制

对青海省托勒牧场近年来棘豆中毒情况进行了调查，马、鹿及羊均发生中毒，鹿中毒后鹿茸产量下降，鹿茸生长不分叉，母鹿繁殖障碍，应用生态系统控制工程和药物“棘防E号”预防棘号中毒取得了较好的效果。     

川楝素腹腔注射对小白鼠半数致死量(LD50)的测定

用寇氏(karber)法测定了川楝素腹腔注射对小鼠的半数致死量(LD50).取90只小鼠,雌雄各半,体重(25±2)g.以10%丙二醇生理盐水为溶媒,按序贯法测出川楝素腹腔注射小鼠100%致死率;将高剂量组与低剂量组的组间剂量比设定为1.2,染毒测定其LD50.结果川楝素腹腔注射对小鼠的LD50为13.84 mg/kg,95%可信限为12.46～15.37 mg/kg.     

细粒棘球绦虫六钩蚴静脉感染小鼠模型动物的建立

利用绵羊－犬源细粒棘球绦虫的六钩蚴尾静脉注射感染昆明小鼠10只，每只接种六钩蚴600枚。结果，在接种后62－83d内小鼠全部死亡，剖检死亡小鼠其荷囊量为2－40个。     

连翘提取物对对乙酰氨基酚诱导小鼠肝损伤的保护作用

试验旨在探究连翘提取物（FSE）预防性干预对对乙酰氨基酚（acetaminophen,APAP）诱导小鼠肝损伤的保护作用及其潜在作用机制。采用半仿生-生物酶法提取连翘有效成分,使用APAP构建小鼠肝损伤模型。随机将60只雌性昆明小鼠分入正常对照（NC）组、APAP肝损伤模型（LD）组、连翘提取物（FSE）对照组、连翘提取物高剂量（HFSE＋LD）组、连翘提取物中剂量（MFSE＋LD）组和连翘提取物低剂量（LFSE＋LD）组,每组10只。HFSE＋LD组、MFSE＋LD组、LFSE＋LD组分别按每天200、100、50 μg/g灌胃给予连翘提取物,NC组和LD组分别灌胃等量生理盐水,每天2次,连续给药6 d。预防性给药3 d后,腹腔注射APAP,每天1次。末次给药12 h后,试验小鼠眼球采血并快速取出肝脏,检测血清中丙氨酸氨基转移酶（ALT）和天门冬氨酸氨基转移酶（AST）活性,以评价肝损伤程度;检测肝脏匀浆液中还原型谷胱甘肽（GSH）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）和过氧化氢（H₂O₂）水平,以评价肝脏氧化应激程度;制作肝脏病理切片,经苏木精伊红（HE）染色后观察肝脏病理变化;采用探针药物法测定肝脏线粒体细胞色素P4502E1（CYP2E1）活性;采用实时荧光定量PCR检测肝脏线粒体CYP2E1 mRNA表达水平;采用Western blotting法检测肝脏CYP2E1蛋白表达情况。结果表明：与NC组相比,LD组小鼠血清中ALT、AST活性均显著增加（P<0.05）;肝脏SOD活性、GSH含量均显著降低（P<0.05）,MDA、H₂O₂含量,CYP2E1 mRNA及蛋白表达水平均显著升高（P<0.05）,成功构建小鼠肝损伤模型。200、100和50 μg/g的连翘提取物可显著降低肝损伤小鼠血清ALT和AST活性（P<0.05）,显著提高肝脏中SOD活性（P<0.05）;200、100 μg/g连翘提取物可显著提高肝脏中GSH水平（P<0.05）,显著降低肝脏中MDA、H₂O₂水平及CYP2E1的mRNA和蛋白表达量（P<0.05）。以上结果表明,连翘提取物可减轻APAP诱导的小鼠肝损伤程度且呈剂量依赖性,其潜在作用机制可能与所含活性物质的抗氧化作用以及对CYP2E1酶活性和表达的抑制有关。     

致动物脑膜炎粪肠球菌人工感染小鼠脑部模型的建立

为了构建粪肠球菌人工感染小鼠脑部损伤模型,以清洁级昆明小鼠为实验动物,将实验室保存的致羔羊脑膜炎粪肠球菌进行复苏,用寇氏法测定小鼠半数致死量(LD50),并以LD50剂量、1/2 LD50的剂量、2/3 LD50剂量感染小鼠,观察临床症状,选择2、4、8、12、24、36、48、60、72、84 h共10个时间点,无菌取其脑部、内脏组织进行细菌的分离鉴定,并观察病理组织学变化。结果显示,粪肠球菌的LD50为7.59×10^8CFU;感染小鼠后,其致死率1/2 LD50剂量组为3.7%,小于2/3 LD50剂量组的13.0%;1/2 LD50剂量组脑组织开始出现病理变化是在感染后12 h,晚于2/3 LD50剂量组(6 h),病理变化与后者相比较轻。结果表明,选择以2/3 LD50剂量为小鼠感染模型的最佳剂量。该动物模型的建立为进一步研究粪肠球菌感染小鼠导致脑炎奠定了基础。     

紫丁香苷对LPS/D-GalN诱导的急性肝损伤的保护作用研究

旨在探究紫丁香苷(syringin, SY)对脂多糖(LPS)联合D-半乳糖胺盐酸盐(D-GalN)、(LPS/D-GalN)诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用及其潜在机制。将40只昆明鼠随机分为4组，分别为正常对照组(NC)、LPS/D-GalN模型(LD)组、SY低剂量(LSY+LD)组、SY高剂量(HSY+LD)组，每组10只。LSY+LD组、HSY+LD组采用腹腔注射方式给予SY(25、50 mg/kg),NC组和LD组分别腹腔注射等量的生理盐水，连续3 d,在第3天预防性给药1 h后，腹腔注射LPS/D-GalN建立急性药物肝损伤模型。造模6 h后，试验小鼠眼静脉取血，处死小鼠；检测小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)的活性；检测肝匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽还原酶(GSH)、过氧化氢酶(CAT)的水平，观察肝脏氧化应激的水平；制作肝组织切片，采用苏木精伊红(HE)观察肝脏的组织变化；利用免疫组化观察激活的核转录因子p65(NF-κBp65)入核状态；ELISA法检肝匀浆IL-6、IL-1β、TNF-α炎性因子的水平。结果表明：与NC组相比...     

白头翁提取物的安全性试验

本项目以昆明种小鼠为受试对象,以白头翁提取物的急性毒性试验和亚急性毒性试验结果做为评价依据,判定白头翁提取物的安全性。预试验选取50只小鼠,分成五组,每组10只,经口给药后测得白头翁提取物0%致死量(LD0)及100%致死量(LD100),以此计算等比级数r为1.35,急性毒性实验1～9组分别为20.00 g、27.00 g、36.45 g、49.21 g、66.43 g、89.68 g、121.07 g、163.44g、220.65 g。将100只小鼠随机分为1个对照组和9个给药组,每组10只。对照组给予等容量的生理盐水,一次性灌胃后观察各实验组及对照组各项毒理指标,根据各组小鼠死亡数,按改进寇氏法计算LD₅₀。结果白头翁提取物对小鼠LD₅₀为175.5 g/kg;亚急性毒性试验中,取小鼠80只,随机分为4组,每组20只,1、2、3组为白头翁提取物的高、中、低剂量组,分别以LD₅₀的1/4、1/10和1/25剂量灌胃,4组为对照组,每日定时灌胃等量蒸馏水。各组连续灌胃14 d,停药后再持续观察14 d。亚急性毒性试验结...     

N-氨甲酰谷氨酸对小鼠骨髓细胞微核影响的试验研究

在预试验基础上,选用50只ICR小鼠随机分为5组,每组10只。N-氨甲酰谷氨酸混悬液经口服灌药的剂量分别为1/2 LD50(每千克体重2500 mg)作为高剂量组经口灌服染毒,中剂量组、低剂量组灌服剂量分别为1/4 LD50(每千克体重1 250 mg)、1/8 LD50(每千克体重625 mg),另设环磷酰胺阳性对照组与无菌水阴性对照组。按常规方法进行小鼠骨髓微核试验,采用30 h两次给药法,于第2次给药后6 h取材、制片,在油镜下观察微核,计算微核率。试验结果表明:N-氨甲酰谷氨酸对小鼠骨髓细胞的微核率无显著影响,表明N-氨甲酰谷氨酸无遗传毒性。     

喹胺醇对小白鼠精子致畸性试验

用昆明小白鼠为靶动物，进行了小鼠精子畸形试验，研究以喹胺醇的致畸作用。选择成年健康雄性昆明种小鼠30只（体重28－32g），随机分成6组。喹胺醇分为450mg/kg(1/20LD50），750mg/kg(1/12LD50），1000mg/kg(1/9LD50）和1500mg/kg(1/6LD50）4个剂量组，用2％吐温－80配成混悬液灌胃，阴性对照组2％吐温－80灌胃，阳性对照组用环磷酰胺（40mg/kg）腹腔注射，连续5d。结果表明，喹胺醇对小白鼠精子无致畸作用。