新疆紫草愈伤组织诱导及植株再生研究

以新疆紫草根、下胚轴、子叶、真叶为外植体,MS附加各种激素进行愈伤组织诱导及其分化、植株再生研究。研究结果表明:①根、胚轴、子叶、真叶的平均出愈率差异不大,但出愈速度差异明显;子叶出愈快,愈伤生长量最大;不定芽分化率依次为下胚轴>根>真叶>子叶。②诱导脱分化的效应KT优于6-BA;降低2,4-D浓度有利于愈伤组织的增殖。激素与外植体有互作效应。③真叶在MS NAA0.5 mg/L KT0.4 mg/L的培养基上能直接形成丛生芽。④不定芽在MS IAA0.5 mg/L KT1.0 mg/L培养基中生根率为83.3%;由此建立了新疆紫草再生体系。⑤不同外植体均可诱导出红色愈伤,颜色深浅依次为真叶>子叶>胚轴>根,且激素可以调控不同外植体愈伤红色的程度;同时红色愈伤能分化产生红色不定根。利用进一步优化的体系可进行快繁并提取愈伤组织中的紫草素。     

培养基及温度对新疆紫草毛状根生长的影响

[目的]研究新疆紫草毛状根理化因子对其生长的影响.[方法]采用固体培养法研究培养基、接种量及温度对新疆紫草毛状根生长的影响.[结果](1)毛状根在不同培养基中的相对生长率及增殖倍数均表现接种量0.1 g较大.BS5固体培养基的相对生长率及增殖倍数达最高,分别为1 790;和18.90倍.(2)毛状根在B5培养基中培养33 d时鲜重达峰值,毛状根的继代时间不宜超过33 d.(3)26℃条件下毛状根的干重达最高,是接种量的19.2倍.高温处理毛状根的时间越长其受抑制程度越大.[结论]培养基、温度及接种量对毛状根的生长均有影响.研究为采用固体培养法长期保存新疆紫草毛状根提供了理论依据.     

影响新疆紫草毛状根生长的因子研究

[目的]研究毛状根生长过程中的影响因子,为新疆紫草毛状根生产紫草素及其衍生物提供技术支持.[方法]采用SH液体培养法,分别考察硝酸钾、酸水解酪蛋白、磷酸二氢铵对毛状根生长的影响.[结果]硝酸钾浓度为3.0 g/L时增殖倍数达6.32倍;在硝酸钾为3.0 g/L、磷酸二氢铵为0.3 g/L时毛状根增殖倍数达10.37倍;当酸水解酪蛋白为0.5 g/L、硝酸钾为3.0 g/L、磷酸二氢铵0.3 g/L三者配合使用时,毛状根增殖倍数平均达12.62倍;培养液pH随着培养时间的延长呈下降趋势,但对毛状根生长没有显著影响;生长末期pH下降幅度为0.41 ～1.85;起始pH高时,末期pH降低的幅度大,起始pH低时末期降低的幅度小.起始pH偏酸有利于毛状根生长;在pH5.8、培养容积为250 mL时,毛状根增殖倍数达15.47倍.[结论]硝酸钾是影响新疆紫草毛状根生长增殖的必要条件,酸水解酪蛋白、硝酸钾、磷酸二氢铵有互作效应.     

新疆紫草毛状根提取物的抑菌活性研究

为了研究新疆紫草毛状根的抑菌活性与新疆紫草根的抑菌活性是否相似,以甜瓜叶斑病、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、棉花枯萎病菌和棉花黄萎病菌5种菌为供试菌,采用滤纸片法和菌丝生长速率法,对新疆紫草毛状根紫草素粗提物及多糖进行抑菌活性研究。结果表明:乙醇提取物对3种细菌均具有抑制作用,其中对金黄色葡萄球菌的抑菌作用最强。丙酮提取物仅对甜瓜叶斑病菌有抑制作用,其抑制作用较乙醇提取物高26.5%。乙酸乙酯和石油醚提取物对3种细菌均无抑制作用;4种溶剂提取物对2种真菌均有抑制作用,且对棉花黄萎病菌的抑制率均高于枯萎病菌;乙醇提取物对金黄色葡萄球菌、丙酮提取物对甜瓜叶斑病菌的MIC均为0.1 mg/mL,乙醇提取物对大肠杆菌的MIC为6.25 mg/mL;毛状根多糖对2种真菌均具有抑制作用,且对棉花黄萎病的抑制作用较棉花枯萎病高26.14%,而对3种细菌均无抑制作用。     

新疆紫草毛状根提取物的抗氧化活性研究

[目的]研究新疆紫草毛状根提取物的抗氧化活性.[方法]采用平行提取法提取紫草色素(LEP),测定了LEP对DPPH·体系、Fenton体系、亚油酸脂质过氧化体系和还原体系的抗氧化作用.[结果]新疆紫草毛状根四种不同溶剂提取物在DPPH·体系、Fenton体系、亚油酸脂质过氧化体系和还原体系中均具有较强的清除作用.新疆紫草毛状根粗多糖也具有抗氧化活性.[结论]新疆紫草毛状根提取物具有抗氧化作用,可作为原料进行开发利用.毛状根的抗氧化活性属国内首次报道.     

理化条件对新疆紫草毛状根培养及紫草素含量的影响

以发根农杆菌诱导的新疆紫草毛状根为试验材料,采用二阶段培养法,分别考察了NH4NO3、培养基、转速、温度、蔗糖对毛状根生长的影响及培养方式、酸水解酪蛋白对毛状根生产的影响。结果表明:毛状根在MS无铵液体培养基中生长速度较MS快了近1倍,第15天时毛状根的生长量达峰值,增殖8倍;在SH无铵培养基、转速为(120±5)r/min、温度为(25±1)℃时毛状根增殖倍数最大,为9.34倍。蔗糖质量浓度对毛状根的生长增殖影响不大;液体培养方式的紫草素及其衍生物含量(1.05%)远远高于固体培养(0.33%),是后者的3倍;添加0.5g/L的酸水解酪蛋白的其紫草素及衍生物含量为1.29%,较对照(1.17%)增加了10.3%。本研究为今后利用新疆紫草毛状根规模化生产提供了理论依据。     

小麦根愈伤组织诱导再生植株

以６个人工合成小麦品系和对照品种“中国”春种子根为外植体,分别接种在含２,４－Ｄ,２,４,６ｎｍｇ／Ｌ的ＭＳ培养基上,于２０℃和２５℃连续照明条件下进行培养。各种处理和培养条件下,都诱导出愈伤组织。在培养温度２０℃,２,４－Ｄ４ｎｍｇ／Ｌ的ＭＳ培养基中,供试品系再生率显著高于其它培养条件下的再生率,结果表明：此处理是诱导根愈伤组织分化再生植株的最适培养基和培养温度。     

新疆白鲜愈伤组织生长动态研究

[目的]研究了新疆白鲜愈伤组织诱导及其生长动态,为从中提取药物活性成分奠定基础,同时是解决资源贫乏的一条新途径。[方法]以幼叶、真叶、下胚轴为外植体,研究不同培养基、激素配比、碳源对新疆白鲜出愈率的影响以及愈伤组织生长动态变化。[结果]幼叶在激素浓度为6-BA 2.0 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L的MS和B5培养基出愈率分别为83.0%和93.3%,且在低盐B5培养基上诱导率较高;不同外植体幼导率为子叶>下胚轴>真叶,子叶的诱导较快,诱导率较高;蔗糖作为碳源时效果较好,诱导率为100%;愈伤组织生长的倍增曲线揭示继代培养时,第5~17天为快速增长期,且在暗处生长较好,继代周期20 d较为合适;不同激素浓度对愈伤组织的质量亦有较大的影响。[结论]y1y、2激素组合诱导出的愈伤组织虽较致密,但在体胚发生中均未达到理想效果,也未能进一步分化。将其转入含有激动素KT 3.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L的MS培养基中,发现愈伤组织在光下变黄绿色,生长也较紧凑,可诱导出胚状体。     

茶树根愈伤组织及发状根诱导的研究

为了获得茶树发状根，生产茶叶中的有用物质，以大田茶树的根为材料，在离体培养下对其诱导发状根．结果表明，从茶树根愈伤组织中诱导出的发状根具有生长快、无向地性、密生白色根毛和较强的分枝能力．发状根分枝，存在直接分枝和在发状根上出现瘤状突起后在其附近发生侧根2种类型．发状根及其愈伤组织轮换在不同组分的培养基上继代培养，对发状根的分化与增殖有明显的促进作用．根外植体在本研究的所有培养基上都诱导出了愈伤组织，不同品种的根外植体愈伤组织诱导率存在明显差异．     

杏离体根愈伤组织诱导及起源的研究

以杏离体根段为试材,研究了创伤、培养基对愈伤组织发生的影响及愈伤组织发生过程。结果表明,以离体云皮根段为外植体,ＭＳ为基本培养基,诱导愈伤组织较为适宜。愈伤组织是多起源的,但主要源于形成层。残存的韧皮部也可以脱分化形成愈伤组织,此外,还存在愈伤组织源于木质部的情况。     

西番莲愈伤组织诱导研究

以紫果西番莲的花蕾为材料,进行组织培养愈伤组织诱导的研究．结果表明：直接剥取子房可快速有效诱导愈伤组织产生,在MS＋2,4-D2．0＋KT2．0培养基中,愈伤细织诱导率为90％,在MS＋2,4-D0．5中培养,愈伤组织增殖倍数为8．98。     

植物激素对朱砂根愈伤组织生长的影响

采用单因素试验和正交试验的方法,研究了2,4-D、6-BA、NAA、KT等激素及其不同浓度组合对朱砂根愈伤组织生长和增殖的影响。结果表明:2,4-D对朱砂根愈伤组织生长的影响最大,KT的影响次之;在培养基MS+2,4-D 0.5mg/L中朱砂根愈伤组织的增殖系数最高,在正交试验筛选出的最佳培养基MS+2,4-D 0.1 mg/L+NAA 0.1 mg/L+KT 0.01mg/L中的次之。     

美洲矾根愈伤组织诱导及其快繁技术体系研究

以矾根(Heuchera micrantha)植株不同器官为外植体材料,MS培养基为基本培养基,探索了矾根组织培养与快繁技术体系。结果表明,选取幼芽作为外植体时快繁效率最高,最适芽诱导培养基配方为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,采用4/5MS+0.2 mg/LNAA的生根培养方案较为适宜。     

连香树愈伤组织诱导研究

[目的]为珍稀濒危树种连香树寻求组培快繁方法。[方法]以1/4MS、1/2MS、MS添加不同浓度的NAA、KT、GA3为培养基,以连香树当年生带芽茎段为外植体进行愈伤组织诱导。[结果]以4月份采集的带芽茎段作为外植体愈伤组织诱导效果相对较好;在1/4MS+NAA 1.0 mg/L+KT 0.2 mg/L+GA31.00 mg/L培养基中愈伤组织诱导效果相对较好,但总体而言愈伤组织诱导率较低。[结论]连香树愈伤组织诱导具有可行性,需进一步研究。     

西番莲愈伤组织诱导研究

以紫果西番莲的花蕾为材料,进行组织培养愈伤组织诱导的研究.结果表明:直接剥取子房可快速有效诱导愈伤组织产生,在MS+2,4-D 2.0+KT 2.0培养基中,愈伤组织诱导率为90%,在MS+2,4-D 0.5中培养,愈伤组织增殖倍数为8.98.     

抗生素对新疆棉花愈伤组织诱导和生长的影响

通过抗生素对新疆３个棉花品种愈伤组织形成和生长影响的试验,结果表明头孢霉素和羧苄青霉素对其都有影响,其中羧苄青霉素的抑制作用较强,头孢霉素作为抑制农杆菌的抗生素较为适宜。     

抗生素对薰衣草愈伤组织诱导和生长的影响

研究了卡那霉素（Kanamycin）和头孢霉素（Cefotaxime）对法国孟士德薰衣草（Lavandula angustifolia,cv．Munstead）愈伤组织诱导和生长的影响。结果表明：在以卡那霉素为抗性选择标记时,叶盘的选择压力为10mg／L,愈伤组织的选择压力为20mg／L;在以头孢噻肟钠为抑菌剂用于薰衣草叶盘遗传转化实验时,其浓度为200mg／L时即可有效抑制农杆菌的生长,同时又不会对薰衣草愈伤组织产生明显的伤害作用。     

细辛愈伤组织诱导条件的研究

[目的]筛选北细辛、汉城细辛愈伤组织诱导的适宜条件。[方法]选用北细辛、汉城细辛不同的外植体,在不同的培养基上加入不同浓度配比的外源激素进行诱导。[结果]北细辛、汉城细辛的根茎为最佳外植体。北细辛最适培养基为MS＋0.60 mg/L6-BA＋0.15 mg/LNAA,汉城细辛最适培养基为MS＋0.60 mg/L6-BA＋0.10 mg/LNAA。[结论]该研究为再生植株诱导、规模化生产、新品种的培育和推广提供理论依据。     

黄芩愈伤组织诱导条件的优化

本试验以黄芩的子叶、真叶和下胚轴为外植体在不同激素组合的MS培养基上诱导愈伤组织。结果表明：①诱导黄芩愈伤组织的最好外植体为真叶；②在不同配方培养基中，诱导愈伤组织的最适培养基配方为MS 2，4-D(0．5mg／L) 6-BA(1mg／L) NAA(0．5mg／L)。     

茄子愈伤组织诱导条件的初探

本文研究了3种不同诱导条件对茄子愈伤组织诱导的影响，结果表明：光照强度1000lx与9000lx对茄子愈伤组织诱导率无影响，但1000lx的光照强度下诱导所需时间长，且愈伤组织块致密，不易褐变。以茄子不同部位茎段作为外植体，结果是茎基部的茎段诱导率明显高于近芽部的诱导率。供试的几种苗龄中，55d苗龄的幼苗茎段的诱导率最高，而30d苗龄茎段的诱导率最低。