应用尖孢镰刀菌培养滤液室内鉴定百合品种抗病性研究

采用百合尖抱镰刀菌培养滤液,首次在瓶内对百合组培苗8个品种进行镰刀菌枯萎病抗性鉴定,结果鉴定出高抗品种3个,中抗品种3个,中感品种2个,初步建立起百合品种镰刀菌枯萎病抗性窒内鉴定的方法.     

香石竹尖孢镰刀菌PCR检测

采用多重引物聚合酶链式反应(Multiplex-PCR)技术检测香石竹尖孢镰刀菌纯培养和香石竹样品,并用分离培养技术加以验证.结果表明,PCR能特异地检测出所有16个香石竹尖孢镰刀菌菌株,并证实了昆明地区的香石竹尖孢镰刀菌为2号生理小种.PCR与分离培养技术检测结果基本一致,但总体上PCR检测阳性率稍高于分离培养检测的发病率.PCR能检测出接种7 d后香石竹病原菌,而观察病症需20 d.该项技术具有更高的灵敏度,适用于香石竹种苗的检测和病害流行学研究.     

香石竹尖孢镰刀菌PCR检测

采用多重引物聚合酶链式反应(Mulljplex—PCR)技术检测香石竹尖孢镰刀菌纯培养和香石竹样品,并用分离培养技术加以验证。结果表明,PCR能特异地检测出所有16个香石竹尖孢镰刀菌菌株,并证实了昆明地区的香石竹尖孢镰刀菌为2号生理小种。PCR与分离培养技术检测结果基本一致,但总体上PCR检测阳性率稍高于分离培养检测的发病率。PC能检测出接种7d后香石竹病原菌,而观察病症需20d。该项技术具有更高的灵敏度,适用于香石竹种苗的检测和病害流行学研究。     

不同寄主尖孢镰刀菌培养滤液对黄瓜胚根萌发的影响

对不同寄主尖孢镰刀菌培养滤液对黄瓜胚根萌发进行了测定,结果表明,番茄(179,F-F.1.5-031017,番茄,福州福清)上分离的尖孢镰刀菌的发酵液处理的黄瓜种子的胚根重量最低,平均重量为85.00mg/10粒,黄瓜(120,F-H.6.5-030318-J4,黄瓜,漳州诏安)上分离的尖孢镰刀菌发酵液处理的黄瓜种子的胚根重量最高,平均为183.33mg/10粒。不同寄主发酵滤液对黄瓜胚根重量的影响大致可以分为3类:第一类为甜瓜(128,F-T.1.7-030514-03,甜瓜,福州永泰)、番茄(179,F-F.1.5-031017,福州福清)和班兜(107,F-B.1.1-030221,福州建新),第二类为西瓜(134,F-X.1.7-030320-03,西瓜,福州永泰)和网纹甜瓜(144,F-T2.1.1-030616-01,网纹甜瓜,福州义序),第三类为黄瓜(120,F-H.6.5-030318-J4,黄瓜,漳州诏安)。     

植物致病镰刀菌毒素滤液浸苗鉴定作物苗期抗病性

1986～1987年用病菌毒紊滤液浸苗法,测定西瓜、黄瓜等作物不同品种的苗期抗病性,用盆栽土壤接种作对照。两种试验方法结果基本一致。因此认为,利用病菌毒素滤液测定作物品种的苗期抗病性是可行的,在抗病品种的选育中,可应用于大量杂交后代的初筛工作。试验还看出农家品种一般较抗病。     

不同杀菌剂对尖孢镰刀菌的室内毒力测定

采用生长速率法研究8种杀菌剂对尖孢镰刀菌(Fusariumoxysporum)的毒力测定。结果表明,筛选出3种有明显抑菌作用的药剂苗菌敌、施保克、绿亨2号。其中施保克对尖孢镰刀菌的抑菌效果最好,EC50为0.25mg·L-1;绿亨2号次之,EC50为9.38mg·L-1。3种药剂的相关系数在0.879～0.987,药剂浓度与抑制作用呈正相关。     

尖孢镰刀菌毒素的初步研究

引起大豆根腐病的尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)的不同菌株产毒量不同，毒素具有较强的热稳定性。用两种方法提取毒素，结果表明用炭吸附法提取的毒素量多于乙酸乙酯萃取法。生物活性测定表明：该毒素对大豆胚根有明显的抑制作用，对大豆一出复叶期幼苗有致萎作用。尖孢镰刀菌毒素不仅对大豆种子萌发、胚根生长有抑制作用，对其它作物种子萌发、胚根生长也有抑制作用。     

8种杀菌剂对芝麻尖孢镰刀菌的室内毒力测定

[目的]筛选出防治芝麻枯萎病的有效化学药剂.[方法]采用菌丝生长速率法测定8种杀菌剂对芝麻尖孢镰刀菌的抑制作用.[结果]室内毒力测定结果表明,8种杀菌剂在试验浓度下对芝麻尖孢镰刀菌的生长均有一定的抑制作用.氟硅唑对病菌的抑制作用最强,EC50仅为0.232 mg/L;其次是吡唑醚菌酯,EC50为0.759 mg/L,此外多菌灵和苯醚甲环唑对芝麻尖孢镰刀菌也有很强的抑制作用.[结论]为药剂混配和防治芝麻枯萎病提供药剂筛选的理论依据.     

尖孢镰刀菌基因组SSR位点分析

为明确尖孢镰刀菌基因组中SSR位点的分布特点,本研究利用生物信息软件SSRIT对7条已公布的尖孢镰刀菌染色体基因组序列中的SSR位点进行了搜索,并用Excel软件对其进行统计分析。结果表明:基因组中7条染色体共有860个SSR位点,平均每条染色体出现122个SSR位点,大约每44.2kb出现一个长度不小于18bp的SSR位点。其中四、五核苷酸重复为主要重复类型,占全部SSR的比例分别为23.84%和32.56%;435种重复基元的分布情况存在差异,基元为ACAA/TTGT出现次数最多,为33次,其次为CAAA/TTTG,出现32次。说明尖孢镰刀菌基因组中含有丰富的SSR位点,为Genomic-SSR标记在尖孢镰刀菌鉴别中的应用奠定了理论基础。     

山东省番茄尖孢镰刀菌的分离及鉴定

本研究以山东省单县番茄枯萎病及临淄、寿光、胶州、即墨、海阳、莱阳等地区的番茄颈腐、根腐病发病植株为主要试验材料,对病原菌进行分离、纯化及培养,并利用分子检测技术对供试菌株进行生理小种鉴定。结果显示,山东单县番茄枯萎病的致病菌为番茄枯萎病菌生理小种1,其他地区番茄颈腐、根腐病致病菌为番茄枯萎病菌生理小种3。     

新疆西瓜枯萎病菌营养体亲和性的初步研究

选用１５个采自新疆不同地区的西瓜枯萎病菌株,在含ＫＣｌＯ３培养基上诱导出抗氯酸盐的不能利用硝酸盐营养体突变株（ｎｉｔｍｕｔａｎｔ）,在不同氮源培养基上划分出ｎｉｔ１,ｎｉｔ２,ｎｉｔ８,ｎｉｔＭ和ｎｉｔＸ５种突变类型,其中ｎｉｔ１出现频率最高。将各菌株的ｎｉｔ突变株和测试菌株的ｎｉｔＭ或ｎｉｔ８配对,结果１５个菌株分为６个不同的营养体亲和群（ＶＣＧｓ）,其中１号小种的菌株划为ＶＣＧ１亲和群,０号小种划为ＶＣＧ２,２株非致病菌株分别为ＶＣＧ３和ＶＣＧ４,２株只出现ｎｉｔＸ突变类型的菌株分别为ＶＣＧ５和ＶＣＧ６。表明营养体亲和群与生理小种存在一致关系,营养体亲和性可以作为西瓜枯萎病菌生理小种鉴定和病原菌种群遗传结构研究的有效手段之一。     

广西香蕉枯萎病菌生理小种鉴定及分布

[目的]明确广西香蕉种植区香蕉枯萎病菌生理小种的类型及分布范围,为发展其抗病育种技术及制定有针对性的综合防控措施打下基础.[方法]从广西香蕉主产区采集38份具典型香蕉枯萎病发病症状的病害样本,采用常规组织分离法分离病原菌,根据分离菌株的形态特征和特异引物PCR扩增结果确定香蕉枯萎病菌的生理小种类型.[结果]从38份病害样本中分离出35株尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum),经鉴定,有34株为尖孢镰刀菌古巴专化型(F.oxysporum f.sp.cubense),病菌检出率为89.47%,其中,9株为1号生理小种,25株为4号生理小种,检出率分别为26.47%和73.53%;4号生理小种均为热带4号生理小种.1号生理小种在广西香蕉种植区均有分布,4号生理小种主要分布于广西中东部和南部的香蕉种植区.[结论]热带4号生理小种为广西香蕉枯萎病菌的优势种群,在抗病育种中应以热带4号生理小种为靶标菌,且优先选择广西西部和北部的香蕉适生区作为新的香蕉种植地.     

瓜类枯萎病菌专化型研究简介

介绍了国内外葫芦科瓜类上镰刀菌枯萎病菌各专化型的致病性，着重介绍了冬瓜专化型。并指出在我国，当前对葫芦科瓜类专化型的研究中，ＡｒｍｓｔｒｏｎｇＧ．Ｍ＆ＡｒｍｓｔｒｏｎｇＪ．Ｋ．１９７５年提出的５点注意仍然值得重视，特别是“适当的寄主年龄”。最后对采用瓜类专化型表达了作者的意见。     

抗枯萎病香蕉种质筛选

枯萎病Fusarium oxysporum f.sp．cubense（FOC）近年成为华南地区香蕉产业的最大威胁．为了筛选抗病种质，于2002～2004年期间分别在广州番禺区对15个引进品系和1个主栽品种进行了抗性评估和筛选．根据评估结果，供试品系可归为3类：抗病——FHIA-02，FHIA-03，ev．Rose，FHIA-23，GCTCV-119，FHIA-2l；中抗——CRBP39，TMBx5295-1，FHIA-18，SH-3640，SH3436-9；感病——Williams，FHIA-17，Gros Michel和巴西蕉．Williams和GCTCV-119均为高型香蕉（Giant Cavendish）的选系，前者被作为FOC感病的参考品种，但在第二茬18株中发现2株变矮（1．8m对2．5m）未发病．     

棉花枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.Vasinfectum)突变体的诱发与鉴定

通过对32个棉花枯萎病菌菌株进行的突变体诱发与鉴定实践及技术方法探索，进一步验证了可以采用KClO3培养基来诱发突变体，并利用各突变体对不同N源的利用能力差异而采用MM，MH，MA，MO2培养基对各突变体类型进行鉴定。实验结果显示绝大多数菌株（93．7％）在KClO3培养基上能诱发出突变体，但多数（85％）突变体类型不全，且不同菌株诱得突变体的难易不同，个别菌株很难诱发到突变体。各突变体的诱发率高低依次为nit1〉nit3〉nit8〉nitM，与国内外相关报道结果基本一致。     

香蕉 - 尖孢镰刀菌互作机理及抗病育种研究进展

由土壤真菌 Fusarium oxysporum f. sp. cubense（Foc）引起的香蕉镰刀菌枯萎病是全世界范围内严重威胁香蕉生产的毁灭性病害。目前已发现 Foc 的 4 个生理小种。20 世纪 70 年代,Foc 1 号生理小种造成我国华南地区的龙牙蕉和粉蕉种植园大面积发病;90 年代中后期,在广东省的香牙蕉种植园发现 Foc 4 号生理小种,并且迅速向其他香蕉产区蔓延。目前,国内各香蕉主产区均有报道发生 Foc 4 号生理小种引起的香蕉枯萎病,该病已成为制约我国香蕉生产的最主要因素。对香蕉枯萎病菌侵染过程以及香蕉枯萎病致病机理、抗性机制、抗病品种选育、抗性种质筛选及抗病性鉴定、防治等多个领域取得的研究进展进行了概述,并对今后研究方向进行了展望,主要包括：（1）在继续研究已有抗病品种对 Foc TR4 抗性的同时,要进一步深入研究 Cavendish 对Foc 1 号生理小种的抗性;（2）利用已经建立的香蕉 CRISPR/Cas9 基因编辑技术体系,获得香蕉枯萎病抗病品种,并进一步应用寄主植物诱导的基因沉默技术（HIGS）获得更加持久稳定的抗病性;（3）将已经建立的香蕉试管苗离体水培系统应用于香蕉-Foc 互作研究。     

苦瓜枯萎病菌滤液鉴定苗期抗病性的初步探讨

用苦瓜枯萎病菌滤液苗来测定苦瓜不同品种的苗期抗性,所得结果与常规人工苗期接种鉴定所得结果基本一致因此,采用病菌滤液来测定苦驻苗期对枯萎病抗性的方法是可行的。     

尖孢镰刀菌西瓜专化型遗传转化体系的优化

以尖镰孢霉西瓜专化型[Fusarium oxysporum Schlechtendahl ex Fries f.sp.niveum(E.F.Smith)Snyder et Hansen]为试材,以农杆菌[Agrobacterium tumefaciens(Smith & Townsend)Conn=Rhizobium radiobacter(Beijerincket van Delden)Yonng et al]的T-DNA为介导,将抗潮霉素基因插入西瓜枯萎病菌基因组中,对遗传转化体系进行优化,并对5个突变体菌株和野生型镰刀菌的最适生长温度和培养基进行筛选.结果发现,乙酰丁香酮(AS)浓度为300～400μmol/L,农杆菌OD660为0.1～0.2,野生型镰刀菌分生孢子浓度为(0.1～5.0)×106个/mL时,转化效率最高,约为500个转化子/106个分生孢子;F3181、F3280、F2192、F2195、F3179突变菌株的最适生长温度为25～28℃.     

几种杀菌剂对甜瓜枯萎病菌的室内毒力测定

采用生长速率法和抑菌圈法测定了9种杀菌剂对甜瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.melonis)的毒力。抑菌圈法测定结果表明多菌灵和咯菌腈对甜瓜枯萎病菌的毒力最高,其3d的EC50分别为783.7905mg·L-1和975.2145mg·L-1;生长速率法测定结果表明:多菌灵和多菌灵-五氯硝基苯对病原菌的抑制率最高,7d的EC50分别为2.4757mg·L-1和3.3570mg·L-1。