甘蓝与菜心种间F_1小孢子发育及花药培养观察

用蕾期授粉和杂种胚培养方法,获得碘甘蓝与菜心的种间杂种杂种Ｆ１代小孢子发育在花粉母细胞二分体或四分体时期出现异常,成熟小孢子碘反应阴性,形态上出现异常在培养条件下,少数Ｆ１花药形成愈伤组织,其中大部分愈伤组织产生根,但只有极少数愈伤组织能分化出芽并最终形成花粉苗花粉植株小孢子发育正常,具有自交不亲和特性,但蕾期授粉有一定育性,表明花粉植株已经过染色体自然加倍     

甘蓝与菜心种间F1小孢子发育及花药培养观察

用蕾期授粉和杂种胚培养方法，获得碘甘蓝与菜心的种间杂种杂种Ｆ１代小孢子发育在花粉母细胞二分体或四分体时期出现异常，成熟小孢子碘反应阴性，形态上出现异常在培养条件下，少数Ｆ１花药形成愈伤组织，其中大部分愈伤组织产生根，但只有极少数愈伤组织能分化出芽并最终形成花粉苗花粉植株小孢子发育正常，具有自交不亲和特性，但蕾期授粉有一定育性，表明花粉植株已经过染色体自然加倍     

中东杨(Populus berolinensis Dippel.)小孢子的发生

中东杨又名柏林杨,是苦杨(Populus lauribolia)与钻天杨(Populus Pyramidalis)的杂交种。在欧亚均有栽培,是黑龙江省广泛栽培的树种之一,也是花粉植株诱导的好材料。中东杨花药离体培养前细胞学检查时,发现有些小孢子发育异常。为此,我们仔细观察了中东杨花粉母细咆的减数分裂,发现确有异常现象。中东杨小孢子的多核及多核仁现象比较多,产生原因未见报导。我们通过观察认为,小孢子产生多核主要是由于     

草莓花药培养再生植株的细胞起源

以草莓品种丰香为材料，取花粉发育处于单核期的花药进行培养。培养初期花粉细胞和花药其它组织的细胞学变化连续观察结果表明，尽管培养初期少数花粉启动分裂，但分裂几次后均趋向解体。本研究的花药再生植株均起源于花丝断裂处的体细胞。采用染色体计数和DNA组分测定2种方法对43个再生株系进行了倍性鉴定，结果显示，其中39个株系为八倍体（2n=8x=56），4个株系为十六倍体（2n=16x=112），未获得与花粉染色体倍性相同的植株。     

萝卜离体小孢子培养中的胚胎发生及发育途径

[目的]观察萝卜离体小孢子培养中的胚胎发生及发育途径。[方法]以中国萝卜品种山东花叶心里美为试材,研究其离体小孢子培养中的细胞核分裂特征及发育途径。[结果]离体小孢子培养过程中出现2种细胞核分裂特征的差异：①进行配子体发育的不均等分裂,即分裂形成2个大小不等的营养核和生殖核,该类小孢子形态与正常发育中双核期的小孢子相同;②进行孢子体发育的均等分裂,即形成2个大小相等的营养核。对小孢子发育进一步进行观察发现,均等分裂的细胞继续发育形成四细胞结构、多细胞团、球形胚、心形胚、鱼雷形胚及子叶形胚。[结论]该研究结果为萝卜游离小孢子培养技术提供细胞学依据。     

萝卜离体小孢子培养中的胚胎发生及发育途径（英文）

[目的]观察萝卜离体小孢子培养中的胚胎发生及发育途径。[方法]以中国萝卜品种山东花叶心里美为试材,研究其离体小孢子培养中的细胞核分裂特征及发育途径。[结果]离体小孢子培养过程中出现2种细胞核分裂特征的差异：①进行配子体发育的不均等分裂,即分裂形成2个大小不等的营养核和生殖核,该类小孢子形态与正常发育中双核期的小孢子相同;②进行孢子体发育的均等分裂,即形成2个大小相等的营养核。对小孢子发育进一步进行观察发现,均等分裂的细胞继续发育形成4细胞结构、多细胞团、球形胚、心形胚、鱼雷形胚及子叶形胚。[结论]该研究结果为萝卜游离小孢子培养技术提供细胞学依据。     

石刁柏(Asparagus officinalis)花药培养与染色体倍性的观察

1988～1989年进行了石刁柏花药离体培养的研究工作,用MS为基本培养基,我们认为花药呈黄绿色,多为花粉的单核靠边期,这时培养较易诱导愈伤组织。6BA是愈伤组织分化成绿点或绿芽再生成小植株的主要因素。愈伤组织由绿芽染色体的观察,其倍数表现不一致,其中有单倍体、二倍体和多倍体等,这为单倍体的选择提供了一些有价值的材料。     

甘草花药培养中愈伤组织诱导和芽再生植株

用甘草单核靠边期花药离体培养,在多种培养基上诱导出傅愈伤组织。高浓度蔗糖有利于雄核发育,愈伤组织染色体数8,证明其为单倍体。经转代培养后分化出芽、再生植株。     

甘草花药培养中愈伤组织诱导和芽再生植株

用甘草单核靠边期花药离体培养，在多种培养基上诱导出傅愈伤组织。高浓度蔗糖有利于雄核发育，愈伤组织染色体数８，证明其为单倍体。经转代培养后分化出芽，再生植株。     

低温预处理对刺梨花药培养小孢子发育的影响

为明确低温预处理对刺梨花药离体培养过程中小孢子发育及愈伤组织诱导率的影响,进行低温预处理试验,结果表明:离体培养条件下,刺梨雄核存在3条发育途径,即A-V途径、A-G途径和B途径,以A途径为主;随着培养时间的增加,小孢子逐渐退化,低温预处理3d可在一定程度上延缓刺梨小孢子退化,提早雄核发育,并增加参与雄核发育小孢子数量,提高花药愈伤组织诱导率。     

大白菜游离小孢子培养中胚胎发生及发育途径

[目的]观察大白菜离体小孢子培养中的胚胎发生及发育途径.[方法]以大白菜F1代杂交种为试材,采用光学显微镜观察游离小孢子胚胎发生和发育途径.[结果]细胞热激后膨大是胚状体诱导的关键因素.大白菜小孢子诱导成胚有3种途径,小孢子均等分裂途径、小孢子不均等分裂途径和小孢子直接萌发出胚途径.均等分裂途径是在连续的均等分裂以后形成原胚,原胚继续分裂形成球形胚、心形胚、鱼雷形胚和子叶形胚.不均等分裂途径形成的两个细胞中较大的细胞继续分裂最终形成有极性的胚状体.[结论]该研究结果为大白菜小孢子的高频率诱导提供细胞学依据.     

红花槐花药培养最适取材时期及选蕾标准

【目的】确定红花槐花药离体培养的最适宜取样时期及其相应的花器官形态特征判断标准。【方法】采用小孢子染色压片观察、花器官形态特征观测和花药离体培养试验,研究红花槐花药小孢子发育阶段,探讨小孢子发育阶段与花器官形态特征及花药愈伤组织诱导率的关系。【结果】1)小孢子发育过程可分为四分体、单核及二细胞花粉3个时期,这3个时期之间具有明显的细胞学特征差异,其中单核时期又分为单核早中期和单核靠边期。2)小孢子单核时期(单核早中期及单核靠边期)花药适宜离体培养,其中单核靠边期愈伤组织诱导率高达(77.05±1.56)%,为红花槐花药离体培养的最佳时期。3)在单核靠边期,花蕾纵径介于10.01～12.20 mm、花冠与花萼的长度比>1/4～≤2/5。同时,小花花萼上部为红色,白色花冠从花萼中露出且顶部开始变为粉红色,花序大而松散,小花间距离较大。【结论】红花槐花药离体培养最适取材时期为小孢子单核靠边期,并可通过小孢子与花器官形态特征的对应关系进行取材。     

洋桔梗小孢子培养初步研究

[目的]探索预处理和培养基类型对小孢子离体培养的影响。[方法]以洋桔梗为材料进行小孢子培养,研究预处理和培养基类型对小孢子离体培养的影响,并筛选胚性愈伤组织适宜诱导培养基、不定芽植株培养基以及最佳生根培养基。[结果]利用4℃低温预处理24 h有利于小孢子愈伤组织的形成。愈伤组织适宜诱导培养基为:MS+3 mg/L KT+2.5 mg/L 2,4-D;不定芽植株培养基为MS+1 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA;最佳生根培养基为:MS+0.2 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA+1.5 mg/L IBA+0.3 g/L活性炭。经过染色体倍性鉴定,显示小孢子培养后染色体数目减半。[结论]该方法研究了预处理和培养基类型对小孢子离体培养的影响,为洋桔梗游离小孢子培养体系的建立以及单倍体育种奠定基础。     

小麦(Triticum aestivum L.)游离小孢子发育及花粉胚发生的初步研究

本文研究了小麦(Triticum aestivum L.)游离小孢子启动、多细胞花粉和愈伤组织形成、以及胚状体发生的过程。结果发现:1.小麦游离小孢子第一次有丝分裂的方式与小孢子发育时期有关;2.游离小孢子不等分裂后营养细胞的再分裂过程与小孢子均等分裂非常相似,两者的命运也非常相似;3.小麦游离小孢子能够形成胚状体,其主要是由三细胞原胚或“胚性多细胞团”发育而成。     

预处理对水稻小孢子诱导愈伤组织产量和绿苗分化的影响

为了提高水稻小孢子离体培养中愈伤组织诱导和再生效率,以4份水稻为材料,研究了温度、渗透压(甘露醇)和化学(秋水仙碱)等预处理离体花药和小孢子对愈伤产量和绿苗分化的影响。结果表明:水稻离体花药分别于60 g/L甘露醇和10 mg/L秋水仙碱中预处理3 d均能明显提高小孢子愈伤组织产量及绿苗产量;游离小孢子于32℃热击预处理2 d也能提高小孢子愈伤组织产量和绿苗产量。     

影响苜蓿花药愈伤组织诱导因素的研究

为提高苜蓿花药培养效率,以小孢子发育处于单核靠边期的苜蓿花药为材料,研究了培养方法、花药接种密度以及谷氨酰胺对苜蓿花药愈伤组织诱导的影响。结果表明,采用50 mL三角瓶为培养容器,苜蓿花药采用固液双层培养,愈伤组织的诱导率最高,为33.11%;花药愈伤组织诱导率以接种密度为每50 mL三角瓶接种45枚时最高,为28.44%;培养基中附加谷氨酰胺或水解酪蛋白有利于苜蓿花药愈伤组织的诱导,其中谷氨酰胺浓度为700 mg/L时效果较佳。     

小白菜小孢子发育与花器官形态相关性

通过DAPI染色观察不同大小的小白菜花蕾内小孢子发育外部形态结构特征及细胞学特征变化,以确定花粉发育时期,找出小孢子发育时期和花外部形态结构相关性,为花药或小孢子培养提供细胞学证据。研究结果表明：小白菜小孢子发育经过二分体时期、四分体时期、单核靠边期、单核居中期、2-胞花粉和3-胞花粉时期,各时期特征明显;且各发育时期与花蕾及花药外部形态密切相关,其中单核靠边期时花蕾纵径为 2.68~3.80 mm,横径为1.91~2.19 mm,花药纵径为 1.76~2.39 mm,横径为 0.64~0.82 mm,花药颜色为浅黄绿色,此时期适合花药、小孢子培养;因此可根据小白菜花蕾形态、大小和小孢子发育时期的相关性,确定花药、小孢子培养最佳时期的选蕾标准。     

刺梨花药愈伤组织起源与倍性检测

以刺梨花药为材料,采用组织学方法对花药愈伤组织起源进行了研究,并对花药不同部位产生的愈伤组织以及培养在不同糖源及不同生长调节剂组合培养基中形成的愈伤组织进行了细胞学观察,研究不同处理对花药愈伤组织倍性的影响.结果表明,刺梨小孢子脱分化的启动时间比药壁组织晚1周左右；贴近药壁组织的小孢子较易形成愈伤组织；花药壁四周或腹缝线处形成的淡黄色疏松颗粒状愈伤组织大多为小孢子愈伤组织,单倍体愈伤组织率高达80％；培养基中添加7％的蔗糖或0.5 mg/L NAA+ 2.0 mg/L6- BA最有利于小孢子愈伤组织的形成.     

不同基因型亚麻花粉小孢子离体培养研究

[目的]研究不同基因型亚麻花粉小孢子离体培养,建立亚麻花粉小孢子离体培养再生体系,以期加快亚麻单倍体育种进程。[方法]以5种不同基因型亚麻的花粉小孢子为外植体,研究不同基因型亚麻愈伤组织诱导率、绿苗的分化率的差异,筛选适宜亚麻花粉小孢子培养基。[结果]不同基因型的亚麻花粉愈伤组织的诱导率、绿苗分化率差异显著,9601和9605愈伤组织的诱导率较高,分别为30.8%和28.6%;9601组合的花粉绿苗分化频率最高为14.5%。其次为9718和9712,分化率分别为11.5%和8.0%;筛选出亚麻花粉小孢子适宜的愈伤组织诱导培养基HF1、绿苗分化培养基HF2。[结论]初步建立了亚麻花粉小孢子离体培养再生体系,为亚麻单倍体育种、突变体筛选、转基因等研究奠定了基础。     

湖北海棠小孢子发育时期与花器形态的相关性

【目的】观察湖北海棠小孢子不同发育时期的花器外部形态及细胞学特征,找出小孢子发育时期与花器外部形态的相关性,为花药或小孢子培养提供细胞学依据。【方法】采摘湖北海棠同一植株固定枝条上大小不同的花蕾作为试验材料,其中一部分取出花药用4′,6-二脒基-2-苯基吲哚（DAPI）荧光染液染色后压片,用于观察小孢子不同发育时期的细胞学特征变化,另一部分用于观测花蕾和花药的大小及颜色,并建立小孢子发育时期与花蕾外部形态特征的关系。【结果】湖北海棠小孢子发育经历四分体时期、单核早中期、单核靠边期和二胞花粉时期,最终发育为成熟花粉,各时期特征明显。小孢子各发育时期与花蕾大小和花药颜色密切相关,当花蕾纵径为1.45～3.43 mm、花药颜色为深红色时,小孢子处于四分体时期;当花蕾纵径为4.46～6.29 mm、花药为红色时,小孢子绝大多数处于单核早中期;当花蕾纵径在7.14～9.86 mm、花药为粉红色时,小孢子大多进入单核靠边期;当花蕾纵径为10.11～12.19 mm、花药颜色逐渐转变为粉黄色时,小孢子大部分处于二胞花粉时期。【结论】花蕾大小及花药颜色可作为判断小孢子发育时期的依据,据此可便捷地找到适宜时期的小孢子。